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2019年全国热带作物学术年会

作者：贺春萍李锐谢立梁艳琼吴伟怀郑金龙易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南大学林学院

根病是橡胶树的一类重要病害,是由多种不同真菌为害胶树根系而引起的一类传染性土传病害,是限制我国橡胶单产提高的重要生物因子。该病可引起胶树根颈腐烂,植株枯死,使胶农受损巨大。一直以来,国内主要采取挖沟隔离、十三吗啉灌根等措... 详细信息

根病是橡胶树的一类重要病害,是由多种不同真菌为害胶树根系而引起的一类传染性土传病害,是限制我国橡胶单产提高的重要生物因子。该病可引起胶树根颈腐烂,植株枯死,使胶农受损巨大。一直以来,国内主要采取挖沟隔离、十三吗啉灌根等措施来防治橡胶树根病,但因劳动力成本高、十三吗啉昂贵等原因难以实现大面积推广应用。为了筛选出防治橡胶树根病的高效环保低成本药剂,作者将前期筛选出的抑菌效果最佳的两种杀菌剂原药按不同比例混配对橡胶树主要根病病原菌进行室内毒力测试和田间药效试验。结果表明,杀菌剂原药X对橡胶红根病菌、褐根病菌的EC值分别为0.034mg/L和0.0569mg/L,杀菌剂原药Y对橡胶红根病菌、褐根病菌的EC值分别为0.4414mg/L和0.0929mg/L;当杀菌剂X与杀菌剂Y的质量比为20:5混配时（复配剂暂定名"根康"）,对橡胶红根病菌、褐根病菌的共毒系数（CTC）分别达130.7和123.3,具有明显的增效作用。田间药效表明,在橡胶树根病区,使用25%"根康"乳油30～40mL/株灌根防治,4次药后60d防效高达78.67～90.80,同剂量条件下其防效与对照药剂（十三吗啉）相当,但农药使用量较十三吗啉减少了65%;通过近5年田间防效跟踪和定点观测,其防效稳定。25%"根康"乳油对橡胶树根病具有较好的防治效果,具有广阔的应用前景。

关键词：橡胶树根病红根病菌褐根病菌毒力测定田间防效

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柱花草炭疽菌拮抗芽孢杆菌的筛选及抑菌物质的研究

柱花草炭疽菌拮抗芽孢杆菌的筛选及抑菌物质的研究

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中国植物保护学会2019年学术年会

作者：贺春萍付晓云梁艳琼吴伟怀李锐郑金龙习金根黄兴易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室南京农业大学植物保护学院

炭疽病(Collectotrichun gloeosporioides)是柱花草上的世界性主要病害,病害发生不仅会影响柱花草的产量,还会降低其营养价值。筛选具有拮抗作用的微生物并明确其抑菌物质,可为柱花草炭疽病的生物防治提供新策略。本研究采用平皿分离培... 详细信息

炭疽病(Collectotrichun gloeosporioides)是柱花草上的世界性主要病害,病害发生不仅会影响柱花草的产量,还会降低其营养价值。筛选具有拮抗作用的微生物并明确其抑菌物质,可为柱花草炭疽病的生物防治提供新策略。本研究采用平皿分离培养法从柱花草(Stylosanthes spp.)的茎、叶中分离产芽孢细菌,采用对峙培养法对其进行初筛和复筛,并对其中杀菌效果较好的B800、gt2和B621菌株的抑菌物质和生物学性能进行了分析。结果表明,经初筛、复筛后得到B621、B800和gt2菌株对***的生长具有较强的拮抗作用,抑菌圈直径分别为24.9mm、20.6mm、19.9mm,同时3个菌株对橡胶树炭疽病菌、芒果炭疽病菌、西瓜枯萎病菌等常见植物病原真菌的抑菌活性也较强,其抑菌率均在70%左右;3株菌株均具产生蛋白酶、纤维素酶、铁载体和生物膜形成能力;设计常见合成脂肽类物质及合成脂肽类物质关键酶的基因,通过PCR扩增,确定菌株含有合成芬荠素、鞭毛蛋白及抗菌孢子等物质的Hag、Ipa-14、tasA和fenB基因。筛选获得的芽孢杆菌B621、B800和gt2菌株对防治柱花草炭疽病具有潜在的生防应用价值。

关键词：柱花草炭疽病芽孢杆菌抑菌物质生物学性能脂肽类物质

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生防菌Czk1挥发性物质的抑菌活性及其组分分析

生防菌Czk1挥发性物质的抑菌活性及其组分分析

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中国植物保护学会2019年学术年会

作者：梁艳琼唐文董文敏翟纯鑫吴伟怀李锐习金根谭施北郑金龙黄兴陆英贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室南京农业大学植物保护学院

利用双皿对扣法和菌丝生长速率法评定不同营养条件下Czk1挥发性物质的作用活性强弱,筛选产抑菌挥发物质的最优培养基。通过双皿对扣法测定Czk1挥发性物质对橡胶树五种根病菌（红根病菌Ganoderma pseudoferreum、褐根病菌Phellinus noxiu... 详细信息

利用双皿对扣法和菌丝生长速率法评定不同营养条件下Czk1挥发性物质的作用活性强弱,筛选产抑菌挥发物质的最优培养基。通过双皿对扣法测定Czk1挥发性物质对橡胶树五种根病菌（红根病菌Ganoderma pseudoferreum、褐根病菌Phellinus noxius、白根病菌Rigidoprus lignosus、紫根病菌Helicobasidium compactum、臭根病菌Sphaerostilbe repens）和橡胶树炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporiodes）的抑菌活性。利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法（HS-SPME-GC-MS）鉴定Czk1的挥发性物质组分。结果发现,Czk1菌株产抑菌挥发物的最优培养基为LB培养基。其挥发性物质对6种参试病原菌均表现出良好的抑制作用,在细菌浓度为10～5CFU/mL时,抑制率均达到50%以上,在浓度为10～8 CFU/mL时,抑制率高达90%以上;Czk1挥发性物质可影响橡胶树紫根病菌、褐根病菌、臭根病菌和炭疽病菌色素的产生,导致部分病菌菌丝畸形;其对橡胶树炭疽病菌孢子萌发抑制率高达71.30%;其在土壤中对橡胶树红根病菌及褐根病菌仍具有较好的抑菌效果,抑制率分别为63.37%和54.57%。利用HS-SPME-GC-MS对挥发性物质组分进行分析,共分离鉴定获得包括碳氢化合物、酸类、胺类、醇类、酚类、酯类、吡嗪类、醛类、酮类等33种挥发性物质。Czk1所产挥发性物质可作为生防资源应用于橡胶树病害防治上,这些天然的、非化学合成气体物质的开发和利用将是一种新防治策略。

关键词：枯草芽孢杆菌橡胶树病菌挥发性物质抑菌活性

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橡胶炭疽病菌生防菌分离鉴定及生防作用研究

橡胶炭疽病菌生防菌分离鉴定及生防作用研究

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：翟纯鑫梁艳琼谭施北吴伟怀习金根李锐郑金龙黄兴陆英贺春萍易克贤南京农业大学植物保护学院中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

橡胶树炭疽病是橡胶树上重要的叶部病害之一,主要由胶孢炭疽菌(Colltootrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)侵染造成的。化学药剂防治是防治橡胶炭疽病最有效的方法之一。长期使用化学药剂,易导致病原菌产... 详细信息

橡胶树炭疽病是橡胶树上重要的叶部病害之一,主要由胶孢炭疽菌(Colltootrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)侵染造成的。化学药剂防治是防治橡胶炭疽病最有效的方法之一。长期使用化学药剂,易导致病原菌产生抗药性,污染环境及造成农药残留等问题,因此亟待寻求一种更持久、更安全的防治措施。生物防治尤其是高效生防菌的筛选利用已成为近年来植物病害防治研究的热点,被认为是比较安全和有效的防控措施。采用平板对峙培养法、抑菌圈法和菌丝生长速率法综合筛选出对橡胶树炭疽病具有生防作用的菌株,结果表明:从假花生、柱花草及不间作的根际土壤中筛选获得56株生防菌。从假花生根际土壤筛选到15株生防菌,其中Jhs1-10、Jhs1-14、Jhs2-7等6株生防菌抑制效果较好。从柱花草根际土壤筛选到17株生防菌,其中Zhc1-1、Zhc1-9等13株生防菌抑制效果较好,抑菌率均达到75%以上。从不间作土壤筛选到24株生防菌,其中BJZ1-2、BJZ1-3等19株生防菌抑制效果较好,抑菌圈直径达到20.360±0.123mm以上。通过形态学观察、16SrDNA序列以及gyrB基因进行分类鉴定,生防菌大部分属于芽孢杆菌属的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefacins)、枯草芽孢杆菌(***)、短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)和地衣芽孢杆菌(***)。通过平板对峙培养发现这些生防菌对西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、橡胶红根病菌(Garnoderma pseudoferreum)、橡胶褐根病菌(Phellinus noxius)、柱花草炭疽病菌(***)等病原菌均有不同程度的抑制。

关键词：橡胶炭疽病菌生防菌分离鉴定生防作用

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不同生防菌分离鉴定及其促生效果研究

不同生防菌分离鉴定及其促生效果研究

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中国植物保护学会2019年学术年会

作者：翟纯鑫梁艳琼谭施北吴伟怀习金根李锐郑金龙黄兴陆英贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室南京农业大学植物保护学院

复合微生物肥料是指由两种或两种以上互不拮抗的有效微生物或有特殊功能的单一微生物（固氮、溶磷、解钾类微生物）与一些营养物质加工复合而成的微生物制品。因具有改良土壤、增强土壤肥力、增加作物产量和改善品质、提高植株的抗逆性... 详细信息

复合微生物肥料是指由两种或两种以上互不拮抗的有效微生物或有特殊功能的单一微生物（固氮、溶磷、解钾类微生物）与一些营养物质加工复合而成的微生物制品。因具有改良土壤、增强土壤肥力、增加作物产量和改善品质、提高植株的抗逆性和抗病虫害能力、环境友好、绿色安全、对微生态环境起保护作用等特点越来越受到人们的关注和认可。本试验从剑麻土壤中筛选到20株固氮菌和18株解磷细菌,利用凯氏定氮法和锑钼抗比色法测定其固氮活性及解磷活性。结果发现,NCT102菌株固氮活性最高,其固氮活性为258.55nmoL CH/（mL·h）,解磷活性最佳为PMT36菌株,溶磷率为389μg/mL。通过16S rDNA序列以及gyrB基因进行分类鉴定,NCT102菌株为屈挠杆菌属（flexibacter sp.）,PMT36为不动杆菌属（Acinetobacter）。由橡胶木质部分离筛选到一株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） Czk1,通过平板对峙法发现其对西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）、橡胶红根病菌（Ganoderma pseudoferreum）、橡胶褐根病菌（Phellinus noxius）、柱花草炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、芦笋茎枯病菌[Phomopsis aspasagi（Sacc.） Bubak]等病原菌均有良好的抑制作用。将NCT102、PMT36和Czk1菌株两两交叉划线,他们三者并无拮抗作用。将三株菌株组合成不同混合菌液,测定这些菌液对白菜及黄瓜种子促生作用,三者混合处理的种子发芽势及发芽指数最高,且白菜种子的芽长和根长与其他处理达到了显著性的差异。三者混合菌液对低浓度的尿素,过磷酸钙以及氯化钾具有一定的耐受性。该结果可为下一步研制复合微生物肥料提供科学依据。

关键词：固氮菌解磷菌生防菌促生作用

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橡胶树红根病菌LAMP检测方法的建立

橡胶树红根病菌LAMP检测方法的建立

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：贺春萍董文敏吴伟怀梁艳琼谢立李锐易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室南京农业大学植物保护学院海南大学植物保护学院

为了建立一种快速、高效、准确检测橡胶树红根病菌的技术。本研究以SYBR Green I为指示剂,建立了橡胶树红根病菌即橡胶灵芝菌(Ganoderma pesudoferreum)的环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法。根据橡胶树红根病菌特异的线粒体转录... 详细信息

为了建立一种快速、高效、准确检测橡胶树红根病菌的技术。本研究以SYBR Green I为指示剂,建立了橡胶树红根病菌即橡胶灵芝菌(Ganoderma pesudoferreum)的环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法。根据橡胶树红根病菌特异的线粒体转录间隔区序列设计了4条引物(两条内引物、两条外引物)进行LAMP扩增。对LAMP反应条件和体系进行优化,并进行特异性和灵敏度验证。研究确定最佳反应体系(25μL中模板100ng/μL,外引物F3/B3各为0.2μmol/L,内引物FIP/BIP各为1.2μmol/L,dNTPs为1.4mmol/L,Mg为4mmol/L,甜菜碱为0.8mol/L,Bst DNA polymerase为8U/μL,)和反应条件(最佳反应温度64℃,反应1h)。特异性检测结果显示,橡胶树红根病病菌LAMP产物均呈阳性(绿色),而其他病原菌组织LAMP产物均为阴性(橙色)。灵敏度验证结果显示,该体系的DNA的最低检测限为1×10ng/μL,是普通PCR的10倍。

关键词：橡胶树红根病灵芝菌环介导等温扩增检测

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枯草芽孢杆菌Czk1与杀菌剂协同防治橡胶根病

枯草芽孢杆菌Czk1与杀菌剂协同防治橡胶根病

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：谢立董文敏梁艳琼翟纯鑫吴伟怀李锐贺春萍易克贤海南大学林学院南京农业大学植物保护学院中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

根病是橡胶树上三大毁灭性病害之一,防治十分困难。该病害是限制我国橡胶产量提高的关键生物因子。本研究以枯草芽孢杆菌Czk1为生防菌,测定7种杀菌剂对橡胶红根病菌和褐根病菌的室内毒力,筛选毒力最强且能与Czk1具很好相容性的化学杀菌... 详细信息

根病是橡胶树上三大毁灭性病害之一,防治十分困难。该病害是限制我国橡胶产量提高的关键生物因子。本研究以枯草芽孢杆菌Czk1为生防菌,测定7种杀菌剂对橡胶红根病菌和褐根病菌的室内毒力,筛选毒力最强且能与Czk1具很好相容性的化学杀菌剂;将筛选获得的杀菌剂与Czk1进行复配,探讨复配剂对橡胶红根病菌和褐根病菌的室内毒力效果,旨在构建由生防菌与化学药剂组成的菌-药复剂,为田间防治提供理论基础。实验结果表明:’根康’可以在较低的浓度下抑制红根病菌和褐根病菌的生长,也能与Czk1很好的相容。将’根康’(EC=0.05μg/mL)和生防菌Czk1 (EC=1×10μg/mL)混配,当V (Czk1):V (根康)=7:3时,对褐根病菌抑制的增效作用最高,增效比为1.09;将’根康’(EC=0.5μg/mL)和Czk1(EC=6×10μg/mL)混配,当V(Czk1):V(根康)=7:3时,对红根病菌抑制的增效作用也最高,增效比为1.03。菌药复配剂防效显著优于单剂’根康’和生防菌Czk1的防效,且’根康’使用量只有单剂使用量的1/3,表明二者复配有明显的增效作用,且大大降低了化学药剂的使用量。分别在5d、10d、15d观测发现,菌药复配剂的抑菌效果持续保持。

关键词：橡胶红根病橡胶褐根病枯草芽孢杆菌菌药复配协同防治

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枯草芽孢杆菌Czk1与杀菌剂协同防治橡胶炭疽病

枯草芽孢杆菌Czk1与杀菌剂协同防治橡胶炭疽病

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中国植物保护学会2019年学术年会

由胶孢炭疽菌（Colletortrichum gloeosporioides）和尖孢炭疽菌（Colletortrichum acutatum）引起的炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害。目前该病害防治主要以化学防治为主,但易引起抗药性及环境污染问题,而单一的生物防治又缺乏防... 详细信息

由胶孢炭疽菌（Colletortrichum gloeosporioides）和尖孢炭疽菌（Colletortrichum acutatum）引起的炭疽病是橡胶树上一种重要的叶部病害。目前该病害防治主要以化学防治为主,但易引起抗药性及环境污染问题,而单一的生物防治又缺乏防治效果的稳定性和长久性。探讨化学和生物协同防治橡胶炭疽病害成为新的防治策略措施。本研究以橡胶胶孢炭疽菌RC178为靶标菌,分别测定杀菌剂咪鲜胺、"根康"对RC178的室内毒力及其与生防菌Czk1的相容性,并将以各自EC值为基础进行混配,测定菌药复配剂对RC178的防治效果。结果表明:"根康"和咪鲜胺都可以在较低的浓度下抑制炭疽菌RC178的生长,也能与Czk1很好的相容。分别将"根康"(EC=0.5μg/mL)、咪鲜胺(EC=0.1μg/mL)与生防菌Czk1 (EC=4.7×10～9CFU/mL)混配,当V （Czk1）:V （根康）=7:3时,对RC178抑制的增效作用最高,增效比为1.03。当V （Czk1）:V （咪鲜胺）=8:2时,对RC178抑制的增效作用最高,增效比为1.06。菌药复配剂防效显著优于单剂"根康"、咪鲜胺和生防菌Czk1的防效,且"根康"和咪鲜胺的使用量均不足单剂使用量的1/3,表明二者复配有明显的增效作用,且大大降低了化学药剂的使用量。将杀菌剂与Czk1进行复配,探讨复配剂对橡胶炭疽病菌的室内毒力效果,旨在构建由生防菌与化学药剂组成的菌-药复剂,为下一步盆栽和田间防治提供理论依据。

关键词：橡胶炭疽病枯草芽孢杆菌菌药复配协同防治

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咖啡驼孢锈菌ITS序列特征及系统发育关系

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热带作物学报 2018年第11期39卷 2250-2258页

作者：吴伟怀刘宝慧李乐黄兴梁艳琼郑金龙汪全伟李锐贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095 中国热带农业科学院科技信息研究所海南海口571101

为了了解咖啡驼孢锈菌ITS序列特征及系统发育关系,本研究对来自中国咖啡栽培区的咖啡驼孢锈菌ITS序列进行了克隆。将克隆序列与来自不同咖啡种植区的咖啡驼孢锈菌菌株序列多样性进行了比较,并于NCBI数据库中下载其他锈菌菌株ITS序列进... 详细信息

为了了解咖啡驼孢锈菌ITS序列特征及系统发育关系,本研究对来自中国咖啡栽培区的咖啡驼孢锈菌ITS序列进行了克隆。将克隆序列与来自不同咖啡种植区的咖啡驼孢锈菌菌株序列多样性进行了比较,并于NCBI数据库中下载其他锈菌菌株ITS序列进行系统发育关系研究。结果表明,来自中国咖啡栽培区的咖啡驼孢锈菌ITS序列全长950 bp。其中ITS1长为224 bp,GC含量介于30.36%～31.25%之间;5.8S长为153 bp, GC含量为37.25%;ITS2长483～485 bp,GC含量介于24.12%～25.05%。来自不同咖啡种植区咖啡驼孢锈菌ITS核苷酸序列多态性虽然存在一定差异,但是其多样性十分低且不存在明显的区域分化。在系统发育关系方面,咖啡驼孢锈菌与其他锈菌ITS序列差异明显,能独立聚类成一个分支。

关键词：咖啡驼孢锈菌 ITS序列系统发育

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槟榔黄化病“该防”还是“该治”

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中国热带农业 2018年第5期 46-48页

作者：车海彦曹学仁禤哲罗大全中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101

槟榔是海南省第二大特色经济作物,黄化病已成为海南省槟榔生产中最大的限制因素,但对黄化病"该防"还是"该治"一直存在争议,造成传染性的黄化病仍在海南不断发生蔓延。本文对如何正确识别传染性的槟榔黄化病、防控... 详细信息

槟榔是海南省第二大特色经济作物,黄化病已成为海南省槟榔生产中最大的限制因素,但对黄化病"该防"还是"该治"一直存在争议,造成传染性的黄化病仍在海南不断发生蔓延。本文对如何正确识别传染性的槟榔黄化病、防控过程中存在的问题及正确的防控方法进行阐述和分析,以期为更好的控制海南槟榔黄化病提供理论和技术指导。

关键词：槟榔黄化病防控手段

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