检索结果-内蒙古大学图书馆

中国糖料 2018年第3期40卷 13-16页

作者：梁艳琼吴伟怀黄兴习金根李锐郑金龙贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室/农业部儋州热带作物科学观测实验站海南儋州571737

为了探讨解淀粉芽孢杆菌TWC2诱导甘蔗抗病性机理,开发有效的生防制剂,采用比色法测定了解淀粉芽孢杆菌TWC2诱导甘蔗叶片后对叶片中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)5种防... 详细信息

为了探讨解淀粉芽孢杆菌TWC2诱导甘蔗抗病性机理,开发有效的生防制剂,采用比色法测定了解淀粉芽孢杆菌TWC2诱导甘蔗叶片后对叶片中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)5种防御酶活性及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,解淀粉芽孢杆菌TWC2处理后的甘蔗叶片CAT、POD、SOD、PAL、PPO比未处理的显著提高;MDA含量比未处理的显著降低;且经10倍稀释液处理的甘蔗叶片中防御酶活性最高,诱导植株抗病性效果最佳。喷施TWC2稀释液可促使甘蔗抗病相关酶活性升高,诱导甘蔗植株产生系统抗性。诱导抗性可能是TWC2防治甘蔗病害的重要机制之一。

关键词：甘蔗解淀粉芽孢杆菌诱导抗病性防御酶

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橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶基因CgATPase 01的敲除及表型分析

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热带作物学报 2017年第5期38卷 903-909页

作者：刘先宝李博勋孙懂懂时涛黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101

为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因Cg ATPase01的功能,本研究利用Splitmarker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的Cg ATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进... 详细信息

为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因Cg ATPase01的功能,本研究利用Splitmarker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的Cg ATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进行分析。结果表明:通过Split-marker方法获得了敲除突变体△Cg ATPase01,表型分析发现该突变体与野生菌株间存在明显差异,病菌气生菌丝的颜色发生了改变,生长速率降低,产孢量下降,对橡胶树叶片的致病性减弱,推测该基因可能在橡胶树胶孢炭疽菌的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用。本研究结果为进一步研究胶孢炭疽菌P型ATP酶基因功能和病原菌的致病机理奠定了基础。

关键词：胶孢炭疽 P型ATP酶基因敲除表型分析

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咖啡驼孢锈菌PCR分子检测体系的建立

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热带作物学报 2017年第9期38卷 1677-1681页

作者：汪涵吴伟怀李乐梁艳琼郑金龙习金根李锐黄兴贺春萍易克贤海南大学热带农林学院海南海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南海口571101 海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

由专性寄生菌咖啡驼孢锈菌(Hemileia vastatrix)引起的咖啡叶锈病是影响咖啡产量的最主要真菌病害。为建立对咖啡驼孢锈菌具有高特异性、高灵敏度、易操作的分子检测方法,本研究通过对咖啡驼孢锈菌DNA核糖体转录间隔区ITS1~ITS4序列与... 详细信息

由专性寄生菌咖啡驼孢锈菌(Hemileia vastatrix)引起的咖啡叶锈病是影响咖啡产量的最主要真菌病害。为建立对咖啡驼孢锈菌具有高特异性、高灵敏度、易操作的分子检测方法,本研究通过对咖啡驼孢锈菌DNA核糖体转录间隔区ITS1~ITS4序列与其近源序列作多重比较分析,获得其特异性区域,并于特异性区域设计了1对引物Hv-ITS-F/R。利用该特异引物,通过对咖啡驼孢锈菌、咖啡褐斑病菌、咖啡锈菌重寄生菌、咖啡炭疽菌以及不同属其它真菌基因组DNA进行PCR扩增。结果表明:此引物对仅能从咖啡驼孢锈菌基因组DNA中扩增出396 bp的特异条带,对其它相似或相近的病原真菌则无扩增条带。灵敏度试验结果表明,在DNA水平上检测浓度可达10 pg/μL。进一步通过田间健康与疑似发病植株的检测,结果呈现出很好的应用前景。由此表明,该引物对能有效地用于咖啡组织中驼孢锈菌的检测。

关键词：咖啡咖啡驼孢锈菌 PCR 分子检测

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槟榔黄化病病原及检测方法研究进展

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热带农业科学 2017年第2期37卷 67-72页

作者：车海彦曹学仁罗大全中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101

黄化病是一种严重威胁槟榔生产种植的毁灭性传染性病害,目前主要在印度和我国槟榔主产区发生。本文从非生物与生物因素两方面对槟榔黄化病病原认识过程及检测方法进行详细的综述。

关键词：槟榔黄化病病原检测方法

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甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法的建立

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热带作物学报 2017年第12期38卷 2334-2339页

作者：汪涵吴伟怀杨旭光杨先锋李锐郑金龙黄兴梁艳琼贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 海南大学热带农林学院海南海口570228 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室农业部儋州热带作物科学观测实验站海南儋州571737 宁夏出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心宁夏银川750000

为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比对分析,并于该序列多态性丰富区域设计了2对引物PM2F/R、PM3F/... 详细信息

为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比对分析,并于该序列多态性丰富区域设计了2对引物PM2F/R、PM3F/R。通过对同寄主不同病原菌、以及不同属的锈菌DNA进行PCR检测以验证引物的特异性。结果表明,在优化的单一PCR反应体系与程序条件下,2对引物均仅能从甘蔗黑顶柄锈菌中扩增出约474 bp和363 bp的特异条带,而从其它真菌DNA中均扩增不出任何条带。进一步将引物PM2F/R作为第一轮扩增引物、PM3F/R作为第二轮扩增引物进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达0.001 ng/μL,较常规PCR提高100倍。由此表明,依据本研究所设计的2对引物而建立的快速、灵敏、准确的甘蔗黑顶柄锈菌的检测技术,对病原菌的早期诊断、快速检测及病害流行学研究具有重要意义。

关键词：甘蔗褐锈病黑顶柄锈菌巢式PCR分子检测

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海南省冬季蔬菜病毒病发生情况调查

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热带农业科学 2017年第1期37卷 71-74页

作者：车海彦曹学仁刘培培罗大全中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101

病毒病是海南冬季蔬菜生产上的一类重要病害,发生为害日趋严重。通过对海南17个市县88个乡镇冬季蔬菜病毒病发生情况调查,同时采用ELISA或PCR方法对田间采集的1 385份样本进行病毒检测,结果表明:病毒病发生严重程度依次为黄瓜>辣椒&... 详细信息

病毒病是海南冬季蔬菜生产上的一类重要病害,发生为害日趋严重。通过对海南17个市县88个乡镇冬季蔬菜病毒病发生情况调查,同时采用ELISA或PCR方法对田间采集的1 385份样本进行病毒检测,结果表明:病毒病发生严重程度依次为黄瓜>辣椒>小白菜>南瓜>樱桃番茄>菜豆>豇豆。150份黄瓜样本中,CMV、CGMMV和TMV检出率分别为63.3%、22.67%和21.33%;180份南瓜样本中,CMV、TMV和CGMMV检出率分别为53.89%、5%和1.12%;220份辣椒样本中,CMV、TMV和TSWV检出率分别为49.1%、41.4%和1.53%;170份樱桃番茄样本中,TMV、CMV、BBWV和粉虱传双生病毒检出率分别为40%、34.7%、1.18%和3.53%;350份小白菜样本中,Tu MV和CMV检出率分别为49.1%和20.9%;130份菜豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为30%和12.3%;195份豇豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为9.2%和2.6%。CMV可以侵染已检测的4个科的所有蔬菜种类,检出率在9.23%~63.33%。已检测的所有蔬菜种类中,均存在2种或2种以上病毒的混合侵染,混合侵染率在0.56%~26.36%。

关键词：海南冬季蔬菜病毒种类侵染率

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复合微生物肥料对香蕉根结线虫病的田间防治及促生作用研究

复合微生物肥料对香蕉根结线虫病的田间防治及促生作用研究

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绿色生态可持续发展与植物保护——中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨学术年会

作者：汪军符红文周游杨腊英郭立佳梁昌聪刘磊黄俊生中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室

近年来作物根结线虫发生日益严重,同时诱发枯萎病等多重土传病害。针对根结线虫等土传病害的危害特点,本课题组创建生防菌高效评价方法,提高筛选效率,选育出具有协同颉颃作用的专利菌株拟青霉和芽孢杆菌,研制出复合微生物肥料CMF并获批... 详细信息

近年来作物根结线虫发生日益严重,同时诱发枯萎病等多重土传病害。针对根结线虫等土传病害的危害特点,本课题组创建生防菌高效评价方法,提高筛选效率,选育出具有协同颉颃作用的专利菌株拟青霉和芽孢杆菌,研制出复合微生物肥料CMF并获批正式登记证。为探讨复合微生物肥料CMF对香蕉根结线虫的田间防治效果,将CMF、基质和化学肥料施入各处理小区,分析CMF防控香蕉根结线虫病及促生作用。结果表明,①施用15kg/亩CMF的处理,病情指数显著降低,防治效果达86.47%;与空白对照、基质和化学肥料处理相比病情指数分别降低62.12%、47.34%、57.92%。②与对照相比,施用CMF后香蕉地上部鲜重增加12.34%,地下部鲜重显著增加14.82%。③施用CMF显著减少土壤中根结线虫二龄幼虫的密度和根系中卵的数量。④CMF处理后根际土壤呼吸速率增幅显著,达23.34%。⑤CMF处理后生防菌芽孢杆菌和拟青霉能有效定殖到根际土壤,定殖量与土壤中的线虫密度呈互相关关系。综上所述,施用含有高效生防菌的复合微生物肥料CMF能有效防治根结线虫病,为其推广应用提供了理论依据。

关键词：复合微生物肥料香蕉根结线虫病田间防控防治效果促生作用

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咖啡驼孢锈菌EST-SSR分子标记筛选与评价

咖啡驼孢锈菌EST-SSR分子标记筛选与评价

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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：吴伟怀黄兴李锐郑金龙梁艳琼习金根贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口 571101

基于前期从咖啡叶锈病菌冬孢子与附着胞9 234条转录组数据中搜查到1 292个1-6碱基SSR.利用软件primer5.0软件随机设计了58对引物进行PCR扩增,经由8％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析所选取SSR引物PCR扩增产物的有效性.结果从58对引物... 详细信息

基于前期从咖啡叶锈病菌冬孢子与附着胞9 234条转录组数据中搜查到1 292个1-6碱基SSR.利用软件primer5.0软件随机设计了58对引物进行PCR扩增,经由8％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析所选取SSR引物PCR扩增产物的有效性.结果从58对引物中筛选出46对能有效扩增出条带的引物,占所开发引物的79.3％.利用采自我国云南咖啡上的46份DNA样本对所筛选出的46对引物的扩增多态性进行分析.结果表明,46对引物共扩增出116条带,其中扩增出条带数为1、2、3、4、5、7的引物对依次为11、16、10、6、2以及1对,依次占扩增引物的23.9％、34.8％、21.7％、13％、4.3％、2.17％.最后利用46对经验证的EST-SSR引物对46个咖啡锈菌菌株的亲缘关系分析获得了理想的研究结果.

关键词：咖啡锈菌 EST-SSR 遗传多样性

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甘蔗赤腐病菌基因组SSR信息分析

甘蔗赤腐病菌基因组SSR信息分析

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2017年全国热带作物学术年会

作者：吴伟怀李锐郑金龙黄兴易克贤梁艳琼习金根贺春萍中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

由镰孢炭疽菌Colletotrichum falcatum Went引起的甘蔗赤腐病是我国甘蔗种植区中普遍发生的真菌病害之一。本研究利用改进的MISA(MIcroS Atellite)(http//:***/misa)分析软件,并按照二、三、四、五和六核苷酸的最少重复次数分别为10次、... 详细信息

由镰孢炭疽菌Colletotrichum falcatum Went引起的甘蔗赤腐病是我国甘蔗种植区中普遍发生的真菌病害之一。本研究利用改进的MISA(MIcroS Atellite)(http//:***/misa)分析软件,并按照二、三、四、五和六核苷酸的最少重复次数分别为10次、7次、6次、6次、以及6次的SSR筛查标准,对甘蔗赤腐病菌全基因组序列进行SSR鉴定。结果共搜查到4839个2～6碱基SSR,出现频率最高的为二碱基重复基元类型,其次为三碱基重复基元类型,分别为2368与1949个,其出现频率分别为48.93%与40.27%。AG/CT为二核苷酸中优势重复类型,占其总数的57.94%;而AAG/CTT与AGC/CTG则为三核苷酸中优势重复类型,二者分别占三核苷酸SSR总数的19.65%与16.88%。此结果对于后续研究甘蔗赤腐病菌群体变异、多样性等研究提供了分子标记。

关键词：甘蔗赤腐病镰孢炭疽菌 SSR

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剑麻类Bsr-d1基因的鉴定与表达分析

剑麻类Bsr-d1基因的鉴定与表达分析

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中国植物病理学会第十三届青年学术研讨会

作者：黄兴梁艳琼习金根郑金龙贺春萍吴伟怀李锐易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海口 571101

Bsr-d1在水稻中编码C2H2(锌指蛋白类)转录因子，该基因启动子的一个关键碱基变异可减弱H2O2降解从而提高水稻对稻瘟菌的免疫反应及抗病性.这一水稻稻瘟病广谱抗病机制的发现为其他作物新型抗病机理的研究提供了重要借鉴.本研究以水稻Bsr... 详细信息

Bsr-d1在水稻中编码C2H2(锌指蛋白类)转录因子，该基因启动子的一个关键碱基变异可减弱H2O2降解从而提高水稻对稻瘟菌的免疫反应及抗病性.这一水稻稻瘟病广谱抗病机制的发现为其他作物新型抗病机理的研究提供了重要借鉴.本研究以水稻Bsr-d1基因为检索序列，对已公布的剑麻转录组进行blast检索后获得1条同源的剑麻基因序列.将该序列在NCBI数据库中比对后，发现其包含完整的编码序列，并将其命名为AsBsr-d1-like1.该基因开放读码框具有528个碱基，编码176个氨基酸，具有2个C2H2保守功能域.系统进化分析表明该基因与芦笋ZAT6-like基因亲缘关系较近.对斑马纹病病原菌烟草疫霉入侵前后的剑麻叶片进行转录组测序，结果发现该基因在病原入侵后表达水平显著上调.荧光定量PCR检测结果也显示该基因在病原入侵后上调，与转录组测序结果一致.此外，转录组测序结果中还发现多条超氧化物歧化酶(POD)基因显著上调，表明AsBsr-d1-like1基因的上调可能与POD基因的上调存在一定关系.剑麻类Bsr-d1基因的发现表明剑麻中可能存在类似于水稻Bsr-d1介导的广谱抗病机制，上述结果将为剑麻斑马纹病抗病性研究提供新的方向.

关键词：剑麻类Bsr-d1基因表达

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