检索结果-内蒙古大学图书馆

香蕉枯萎病菌4号生理小种农杆菌介导遗传转化体系的建立及T-DNA插入突变体的筛选

南方农业学报 2013年第12期44卷 1985-1991页

作者：毛超戴青冬汪军刘一贤杨腊英郭立佳黄俊生海南大学农学院海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海口571101

【目的】通过农杆菌介导的遗传转化（ATMT）方法，建立香蕉枯萎病4号生理小种的高效转化体系，构建病原菌的突变体库并进行筛选，为已突变基因提供分子标记，在分子水平上对香蕉枯萎病菌的功能基因进行深入研究。【方法】通过单因子变... 详细信息

【目的】通过农杆菌介导的遗传转化（ATMT）方法，建立香蕉枯萎病4号生理小种的高效转化体系，构建病原菌的突变体库并进行筛选，为已突变基因提供分子标记，在分子水平上对香蕉枯萎病菌的功能基因进行深入研究。【方法】通过单因子变量（试验材料、真菌孢子浓度、农杆菌预诱导终浓度、IM诱导培养基pH、共培养介质、共培养时AS浓度、共培养温度）试验，研究影响农杆菌介导的遗传转化效率的关键因素，并通过形态观察与致病性试验筛选突变体。【结果】得到的最佳转化条件为：农杆菌预诱导浓度OD600=0.8，病原菌孢子浓度106 CFU/mL，转化受体材料为分生孢子，共培养培养基pH 5.4，共培养温度25 ℃，共培养培养基中AS浓度200 μmol/L，共培养介质为硝酸纤维素膜。通过条件优化，转化效率可达到800-900个转化子/106个孢子。【结论】通过农杆菌介导的遗传转化成功将GFP基因转入病原菌中并表达，构建了病原菌的T-DNA插入突变体库，并通过筛选得到多个表型和致病性发生变化的突变体，为香蕉枯萎病菌基因组功能注释的研究奠定了基础。

关键词：香蕉枯萎病菌4号生理小种 B2菌株农杆菌转化 GFP基因

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木薯根腐病棕榈疫霉病菌的分子检测

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热带作物学报 2013年第7期34卷 1314-1318页

作者：李超萍刘先宝时涛蔡吉苗郭涵黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101

由棕榈疫霉引起的根腐病是木薯生产中的重要病害之一。通过比对分析棕榈疫霉与其它疫霉菌ITS序列差异,设计1对特异引物PF1/PR1。结果表明:在优化的反应体系和扩增条件下,利用该引物可从棕榈疫霉菌基因组DNA中特异扩增到1条约540 bp片段... 详细信息

由棕榈疫霉引起的根腐病是木薯生产中的重要病害之一。通过比对分析棕榈疫霉与其它疫霉菌ITS序列差异,设计1对特异引物PF1/PR1。结果表明:在优化的反应体系和扩增条件下,利用该引物可从棕榈疫霉菌基因组DNA中特异扩增到1条约540 bp片段,序列测定验证了其准确性,检测灵敏度达到pg级。该对引物可有效用于植物组织和土壤中木薯根腐病棕榈疫霉病菌的特异性检测。此结果将对木薯根腐病的早期快速准确诊断和检测具有重要意义。

关键词：木薯根腐病棕榈疫霉特别引物分子检测

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甘蔗赤腐病菌生物学特性研究

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热带作物学报 2013年第5期34卷 967-972页

作者：梁艳琼雷照鸣贺春萍郑肖兰李锐吴伟怀中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院试验场海南儋州571737

对采集的甘蔗赤腐病典型病叶进行了病原菌的分离与鉴定,进而对该病菌进行了致病性及基础生物学特性测试。结果表明:甘蔗赤腐病由Colletotrichum falcatum引起;生物学特性结果表明,该菌在燕麦片和Richards培养基生长最好;菌丝体生长最适... 详细信息

对采集的甘蔗赤腐病典型病叶进行了病原菌的分离与鉴定,进而对该病菌进行了致病性及基础生物学特性测试。结果表明:甘蔗赤腐病由Colletotrichum falcatum引起;生物学特性结果表明,该菌在燕麦片和Richards培养基生长最好;菌丝体生长最适温度为25～30℃;适宜pH 6～8;而光照条件对病原菌的生长影响并不明显;该菌分生孢子的致死温度为60℃,10 min。本研究为甘蔗赤腐病的合理预测和科学防治提供了理论依据。

关键词：甘蔗赤腐病生物学特性致病性

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绿色木霉H6对香蕉枯萎病的诱导抗性作用

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广东农业科学 2013年第7期40卷 83-85页

作者：辛鑫刘磊潘江禹黄俊生海南大学农学院海南海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室/海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海南海口571101 海南大学环境与植物保护学院海南海口570228

以不同方式对香蕉组培苗进行生防菌绿色木霉和香蕉枯萎病病原菌的灌根接种,通过分析香蕉苗组织内的过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)等防御酶酶活的变化趋势,研究该植株... 详细信息

以不同方式对香蕉组培苗进行生防菌绿色木霉和香蕉枯萎病病原菌的灌根接种,通过分析香蕉苗组织内的过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)等防御酶酶活的变化趋势,研究该植株抗病性的强度和产生抗性时间的趋势。结果表明,先接种木霉菌后接种病原菌时,SOD、PAL、CAT、POD、PPO酶活性均明显提高,可以增强香蕉植株的抗病能力。

关键词：绿色木霉香蕉枯萎病防御酶酶活性抗性诱导

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丽草蛉幼虫人工饲料的研究

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热带作物学报 2013年第3期34卷 547-550页

作者：李志飞陈泽坦严珍岳建军海南大学环境与植物保护学院海南海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南儋州571737 海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南儋州571737 农业部热带农林有害生物入侵与控制重点开放实验室海南儋州571737

分别以全脂蝇蛆粉、脱脂蝇蛆粉、猪肝粉、酵母粉作为主成分,再另外添加牛肉粉、鸡蛋黄、蜂蜜等成分探索丽草蛉幼虫的人工饲料配方。从2龄开始饲养,以1～2龄新菠萝灰粉蚧饲养丽草蛉作为对照,对丽草蛉生长阶段的各项发育指标进行观测与比... 详细信息

分别以全脂蝇蛆粉、脱脂蝇蛆粉、猪肝粉、酵母粉作为主成分,再另外添加牛肉粉、鸡蛋黄、蜂蜜等成分探索丽草蛉幼虫的人工饲料配方。从2龄开始饲养,以1～2龄新菠萝灰粉蚧饲养丽草蛉作为对照,对丽草蛉生长阶段的各项发育指标进行观测与比较。结果表明:4种配方均能使丽草蛉完成1个世代,其中以脱脂蝇蛆粉作为饲料主成分饲养丽草蛉效果最佳,幼虫发育历期为9～14 d,幼虫存活率达到76.7%,羽化率达到66.7%。选取脱脂蝇蛆粉、猪肝粉、牛肉粉、蜂蜜、鸡蛋黄作为配方的主要成分,通过均匀设计法与SAS软件岭嵴分析得出其最佳配比为:脱脂蝇蛆粉6.0 g、牛肉粉4.0 g、猪肝粉1.6 g、蛋黄1.6 g、蜂蜜1.3 g。

关键词：丽草蛉幼虫人工饲料均匀设计岭嵴分析

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副珠蜡蚧阔柄跳小蜂对寄主发育阶段的选择性

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中国生物防治学报 2013年第3期29卷 344-348页

作者：张方平韩冬银朱俊洪黄武仁牛黎明符悦冠中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室/海南省热带作物病虫害生物防治工程技术研究中心儋州571737 海南大学环境与植物保护学院海口570228

研究了副珠蜡蚧阔柄跳小蜂Metaphycus parasaissetiae Zhang and Huang在室内温度为25℃条件下对寄主橡副珠蜡蚧parasaissetia nigra Nietner成虫不同发育阶段的选择性,结果表明:副珠蜡蚧阔柄跳小蜂喜欢产卵于褐色期至少量幼虫出壳期的... 详细信息

研究了副珠蜡蚧阔柄跳小蜂Metaphycus parasaissetiae Zhang and Huang在室内温度为25℃条件下对寄主橡副珠蜡蚧parasaissetia nigra Nietner成虫不同发育阶段的选择性,结果表明:副珠蜡蚧阔柄跳小蜂喜欢产卵于褐色期至少量幼虫出壳期的橡副珠蜡蚧成虫体内,只有在较高的接蜂比例条件下,初期成虫才能被寄生;单个寄主体内的产卵量以寄生产卵初期的成虫最高,寄生率和选择系数则均以褐色期成虫最高;副珠蜡蚧阔柄跳小蜂寄生于橡副珠蜡蚧的初期成虫至少量幼虫出壳成虫体内的发育历期差异不大,为16～17 d;出蜂数以产卵初期成虫最高,为112.6头,明显高于其它几阶段。结合发育历期、寄生率、出蜂数等参数,橡副珠蜡蚧成虫的产卵初期和少量幼虫出壳期成虫是副珠蜡蚧阔柄跳小蜂寄生的最佳时期。

关键词：橡副珠蜡蚧副珠蜡蚧阔柄跳小蜂发育期选择

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解磷细菌对7种常见抗生素的抗性研究

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中国农学通报 2013年第33期29卷 207-213页

作者：梁艳琼贺春萍郑肖兰吴伟怀李锐雷照鸣中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海口571101 中国热带农业科学院试验场海南儋州571737

研究PSB3(Burkholderia cepacia)、PSB4(Burkholderia sp.)、PSB13(Burkholderia sp.)、PSB15(Salmonella enterica subsp.)、PSB26(Klebsiella sp.)、PSB58(Uncultured Pseudomonas sp.)、PSB67(Burkholderia anthina)、PSB77(Burkholderia sp.)对常见抗生素的抗性敏感,以期为今后研究8株解磷细菌在土壤中的定植状态打好基础。利用平板生长法测定这8株解磷细菌对氨苄青霉素、四环素、链霉素、卡那霉素、利福平、头孢霉素、氯霉素的不同浓度的抗性反应。PSB3、PSB15菌株对氨苄青霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、利福平具有天然抗性,而对链霉素、头孢霉素不具有抗性;PSB4菌株对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、利福平具有抗性,当头孢霉素浓度大于10μg/mL时,菌株生长;PSB13、PSB26和PSB67菌株对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、利福平6种抗生素具有天然抗性,而对头孢霉素没抗性;PSB58菌株对氨苄青霉素、链霉素、四环素、利福平5种抗生素有抗性,而对卡那霉素、氯霉素、头孢霉素不具有抗性;PSB77菌株对氨苄青霉素、卡那霉素、四环素、氯霉素、利福平、头孢霉素6种抗生素有抗性,而对链霉素无抗性。PSB3、PSB15菌株可选择链霉素或头孢霉素进行抗性标记或双重标记;PSB4菌株可利用浓度大于10μg/mL的头孢霉素作为抗性标记,PSB13、PSB26和PSB67菌株可利用头孢霉素进行标记;PSB77菌株可用抗链霉素标记法。

关键词：解磷细菌抗生素抗性

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剑麻茎腐病菌SSR标记开发

剑麻茎腐病菌SSR标记开发

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中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会

作者：吴伟怀严传帝郑金龙梁艳琼郑肖兰李锐贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南大学环境与植物保护学院海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

从(http://***/genbank/)网站下载Aspergillus nigerATCC 1015菌株全基因组序列(ACJE00000000)。利用GRAMENE网站(http://***/db/markers/ssrtool)提供的SSR鉴定工具SSRIT(Simple Sequence Re-peat Identification Tool),并按SSR鉴定标准为含有2～10个碱基重复、碱基数在18bp以上的SSR基元,也即含2、3、4、5、6、7、8、9和10核苷酸基元SSR的最小重复数分别为9,6,5,3、3、3、2和2次进行SSR鉴定。结果从*** ATCC 1015全基因组中,共发现3 665个2～10碱基SSR,其中含9个碱基重复基元类型最多,共有1 305个,占所鉴定SSR总数的35.6%。其次为6个碱基重复基元类型,共有622个,总SSR总数的16.97%;接着为3个碱基重复类型,共有547个,占14.92%。从搜索出来的SSR中,选择含有SSR的合适区段,从中设计了36对引物,对17个剑麻茎腐病菌菌株基因组DNA进行了PCR检测,最终所开发的引物全部能从剑麻茎腐病菌基因组DNA中有效扩增。由此表明,黑曲霉ATCC 1015菌株基因组SSR在剑麻茎腐病菌基因组中具有通用性。这为研究剑麻茎腐病菌遗传变异、遗传多样性、进化以及功能基因的定位和克隆等提供了大量的分子标记。

关键词：剑麻茎腐病菌基因组遗传

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15种药剂对芦笋茎枯病病原菌的毒力测定

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热带农业科学 2013年第4期33卷 71-75页

作者：孙燕芳郑金龙刘巧莲陈河龙高建明习金根张世清易克贤华中农业大学植物科学技术学院湖北武汉430070 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开发实验室海南海口571101

通过菌丝生长法对芦笋茎枯病进行15种药剂的室内筛选实验,以期为该病害的大田防治提供参考。综合分析结果表明:50%多菌灵、75%百菌清和70%甲基托布津的EC50和EC95最小,抑菌效果最好;2%嘧啶核苷悬浮剂和20%噻菌铜的EC50和EC95最大。通过... 详细信息

通过菌丝生长法对芦笋茎枯病进行15种药剂的室内筛选实验,以期为该病害的大田防治提供参考。综合分析结果表明:50%多菌灵、75%百菌清和70%甲基托布津的EC50和EC95最小,抑菌效果最好;2%嘧啶核苷悬浮剂和20%噻菌铜的EC50和EC95最大。通过对药剂抑菌效果和使用成本的分析,生产上使用50%多菌灵、75%百菌清、70%甲基托布津、25%阿米西达、50%异菌脲、80%代森锰锌和30%爱苗防治芦笋茎枯病。

关键词：芦笋茎枯病拟茎点霉杀菌剂毒力测定

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不同肥料对生防菌淡紫拟青霉E7定殖的影响

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广东农业科学 2012年第19期39卷 61-63页

作者：潘江禹汪军毛超戴青冬黄俊生海南大学环境与植物保护学院海南海口571101 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点实验室/海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海南儋州571737

为了解不同肥料对淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的影响,以淡紫拟青霉E7为材料,研究了不同肥料对E7在香蕉根际土壤定殖的影响。结果表明,最适宜淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的尿素(F1)浓度为1.6 g/kg,其后依次为3.2、6.4、0.8、0.4g/kg;芭... 详细信息

为了解不同肥料对淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的影响,以淡紫拟青霉E7为材料,研究了不同肥料对E7在香蕉根际土壤定殖的影响。结果表明,最适宜淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的尿素(F1)浓度为1.6 g/kg,其后依次为3.2、6.4、0.8、0.4g/kg;芭田世界通复合肥(F2)的最适浓度为0.8 g/kg,其次为1.6 g/kg和0.4 g/kg;有机钾宝(F3)最适浓度为6.4 g/kg,其后依次为3.2、1.6、0.8、0.4 g/kg;奥普尔腐植酸有机矿化活性冲施肥(F4)最适浓度为6.4 g/kg,其后依次为3.2、1.6、0.8、0.4 g/kg。施用一定浓度的肥料能有效提高淡紫拟青霉的根际定殖能力。

关键词：淡紫拟青霉肥料定殖

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