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热带农业科学 2015年第10期35卷 75-77,93页

作者：孙燕芳刘巧莲陈河龙郑金龙高建明张世清易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开方实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开发实验室海南海口571101

为了解不同芦笋种质对茎枯病的抗性差异,采用孢子喷雾法对其幼苗进行喷雾后48 h保湿处理,7 d后统计分析各种质的发病情况并计算病情指数。结果表明:野生型大理天门冬和B7/TX-4病情指数均为0,为免疫种质;井冈701、TC山东、井冈全雄(2)、B... 详细信息

为了解不同芦笋种质对茎枯病的抗性差异,采用孢子喷雾法对其幼苗进行喷雾后48 h保湿处理,7 d后统计分析各种质的发病情况并计算病情指数。结果表明:野生型大理天门冬和B7/TX-4病情指数均为0,为免疫种质;井冈701、TC山东、井冈全雄(2)、B4-a/B20-a(紫)、B19-c(H)、B2-a/SD、B3/TX-6,病情指数均小于20,为中抗种质;太平洋2000病情指数为81.25,为感病种质。

关键词：芦笋茎枯病种质抗病性病情指数

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热带作物根际土壤解磷微生物筛选鉴定及其生防效果评价

热带作物根际土壤解磷微生物筛选鉴定及其生防效果评价

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中国植物保护学会2015年学术年会

作者：梁艳琼吴伟怀李锐郑肖兰郑金龙习金根贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

磷是植物细胞中能量物质ATP和遗传物质的基本构成元素,是植物生长发育必需的重要元素之一,同时也以多种方式参与植物体内各种生理生化过程,对促进植物的新陈代谢、生长发育具有重要的作用。植物所吸收利用的磷素主要来自土壤。因此利用... 详细信息

磷是植物细胞中能量物质ATP和遗传物质的基本构成元素,是植物生长发育必需的重要元素之一,同时也以多种方式参与植物体内各种生理生化过程,对促进植物的新陈代谢、生长发育具有重要的作用。植物所吸收利用的磷素主要来自土壤。因此利用溶磷圈法和钼蓝比色法从海南岛内芒果、胡椒、橡胶树、香蕉、荔枝、菠萝蜜等热带作物根际土壤分离和筛选获得72株具有一定溶磷能力的微生物菌株,其中,真菌7株,细菌65株;从7株真菌菌株中复筛获得3株溶磷能力强的真菌(PSFM、PSFC和PSFH3),从65株细菌菌株中复筛获得7株溶磷能力较强的细菌(PSB3、PSB4、PSB7、PSB12、PSB15、PSB58和PSB65),其D/d值(溶磷圈直径D与菌落直径d比值)均超过1.40,最高达到1.80,有效溶磷量均超过358.75mg/L,最高达到511.28mg/L;通过形态学和分子生物学鉴定,将PSFM、PSFC和PSFH3菌株分别鉴定为Aspergillus niger、Peniciillium janthinellum和Penicillium aculeatum;PSB3、PSB4、PSB7、PSB12、PSB15、PSB58和PSB65菌株分别鉴定为Burkholderia sp.、Klebsiella sp.、Burkholderia cepacia、Uncultured Pseudomonas sp.、Burkholderia sp.、Salmonella enterica subsp.、Burkholderia sp.和Burkholderia sp.利用平板对峙法测定了10株解磷微生物对15个热带作物常见病原菌的拮抗作用,发现这些解磷菌株对西瓜枯萎病、香蕉枯萎病、胡椒枯萎病、芒果炭疽病、香蕉黑星病、橡胶炭疽病等病原菌均有不同程度的拮抗作用,并对拮抗效果较好的进行了拮抗后病原菌菌体形态观察,发现这些病原菌有较明显的形态畸变。该研究结果初步揭示了热带作物根际土壤的解磷菌结构,对我国热带农业土壤的磷利用问题具有较强的针对性和区域特色。

关键词：热带作物根际土壤解磷微生物生防效果

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橡胶树褐根病菌的分子检测

橡胶树褐根病菌的分子检测

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中国植物病理学会2015年学术年会

作者：梁艳琼吴伟怀李锐郑肖兰郑金龙习金根贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

由有害层孔菌（Phellinus ***.）引起的橡胶树褐根病是危害橡胶生产的主要根部病害。橡胶树褐根病发生早期难于甄别,建立一种快速、灵敏、准确的褐根病菌检测技术十分必要和迫切。因此利用褐根病菌的一对特异性引物G1-F/G1-R,对不同来... 详细信息

由有害层孔菌（Phellinus ***.）引起的橡胶树褐根病是危害橡胶生产的主要根部病害。橡胶树褐根病发生早期难于甄别,建立一种快速、灵敏、准确的褐根病菌检测技术十分必要和迫切。因此利用褐根病菌的一对特异性引物G1-F/G1-R,对不同来源橡胶树褐根病菌菌株及其发病组织的rDNA-ITS区进行PCR扩增,并构建其系统发育树。结果表明,10株不同来源橡胶树褐根病菌菌株DNA均能扩增出一条653bp的特异片段,而橡胶树红根病菌、紫根病菌、臭根病菌、白根病菌和清水对照均无扩增条带。对发病组织检测结果表明,该引物能特异性检测到橡胶树褐根病菌的存在,其对橡胶树褐根病菌基因组DNA检测灵敏度为100 ag/μL。基于rDNA-ITS系统发育分析表明,供试菌株与GenBank中的菌株KF233592、KM079591聚在同一分支上,其亲缘关系最近,均属于Phellinus noxius。该研究旨在为有害层孔菌引起的橡胶树褐根病的早期快速诊断和防治提供技术方法。

关键词：橡胶树褐根病特异性引物分子检测

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剑麻斑马纹病菌5个多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆与序列分析

剑麻斑马纹病菌5个多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆与序列分析

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中国植物保护学会2015年学术年会

作者：吴伟怀梁艳琼郑金龙习金根郑肖兰李锐刘巧莲张弛成贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南大学环境与植物保护学院

由烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是一种严重为害剑麻的主要病害。本研究以寄生疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pppg1ppg5等5个基因cDNA序列为参考,设计基因编码区特异性引物。利用5对引物分别对剑麻斑马纹病菌进行了分子检测以及基因同源克隆。通... 详细信息

由烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是一种严重为害剑麻的主要病害。本研究以寄生疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pppg1ppg5等5个基因cDNA序列为参考,设计基因编码区特异性引物。利用5对引物分别对剑麻斑马纹病菌进行了分子检测以及基因同源克隆。通过此方法首次从剑麻斑马纹病菌中获得了5个多聚半乳糖醛酸酶基因,并分别命名为Szpg1zpg5。检测结果表明,Szpg1zppg5基因普遍存在于被检测剑麻斑马纹病菌中。序列分析结果表明,Szpg1zpg5基因与pppg1ppg5对应基因之间存在核苷酸序列差异,由此导致个别氨基酸的差异,甚至提前终止。由此推测,Szpg1zpg5基因与pppg1ppg5在功能上可能存在着一定的差异。本研究为进一步研究剑麻斑马纹病菌PG在致病过程中的作用奠定了基础。

关键词：剑麻斑马纹病多聚半乳糖醛酸酶基因克隆

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邦得2号杂交狼尾草叶斑病菌分离与鉴定

邦得2号杂交狼尾草叶斑病菌分离与鉴定

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中国植物保护学会2015年学术年会

作者：张驰成吴伟怀梁艳琼唐文郑金龙习金根郑肖兰许沛冬李锐贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南大学环境与植物保护学院海南大学农学院

对采自广西北海的邦得2号杂交狼尾草叶斑病病样进行了分离和纯化,得到6株致病性真菌。对其进行了培养特性以及形态观察,从形态上初步鉴定为弯孢菌。进而利用真菌核糖体转录间隔区通用引物ITS1和ITS4,对其基因组DNA进行了PCR扩增,均扩增... 详细信息

对采自广西北海的邦得2号杂交狼尾草叶斑病病样进行了分离和纯化,得到6株致病性真菌。对其进行了培养特性以及形态观察,从形态上初步鉴定为弯孢菌。进而利用真菌核糖体转录间隔区通用引物ITS1和ITS4,对其基因组DNA进行了PCR扩增,均扩增出约600 bp的特异性条带。回收特异性条带克隆后测序。经测序获得了590bp长的序列。将获得6个供试菌株ITS序列分别于GenBank中进行同源性搜索,结果显示6条序列与新月弯孢菌(Curvularia lunata)的同源性非常高,高达95%以上。由此,通过形态并结合分子鉴定结果,将来自邦得2号杂交狼尾草叶斑病致病菌株鉴定为新月弯孢菌(Curvularia lunata)。

关键词：杂交狼尾草分离与鉴定 ITS

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热带牧草真菌病害调查及病原菌初步鉴定

热带牧草真菌病害调查及病原菌初步鉴定

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中国植物病理学会2015年学术年会

作者：张驰成吴伟怀粱艳琼唐文郑金龙习金根郑肖兰许沛冬贺春萍易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南大学环境与植物保护学院海南大学农学院

热带牧草病害是影响其产量和品质的重要因素之一。为了明确其真菌病害发生种类,对海南、广西、广东3个省份的热带牧草的病害种类与危害情况等进行了初步调查,并采集病害样本,通过病原分离培养鉴定等方法确定病害的种类。调查及分离鉴定... 详细信息

热带牧草病害是影响其产量和品质的重要因素之一。为了明确其真菌病害发生种类,对海南、广西、广东3个省份的热带牧草的病害种类与危害情况等进行了初步调查,并采集病害样本,通过病原分离培养鉴定等方法确定病害的种类。调查及分离鉴定的结果表明,从海南柱花草、矮象草、王草、黑籽雀稗、坚尼草等19种牧草上发现真菌病害26种,其中柱花草炭疽菌比较严重,而其他牧草主要是茎叶部病害,属于轻至中度危害;而从广西、广东的柱花草、矮象草、香根草、桂牧1号、红象草等17种主要牧草上,共发现了31种真菌性病害,主要危害茎叶部。整体而言,由炭疽菌(Colletotrichum)、稻梨孢菌(Pyricularia grisea)、链格孢(Atternaria)、尾孢菌(Cercospora)、镰刀菌(Fusatium)、黑孢霉(Nigrospora sphaeri)等侵染引起的茎叶部病害发生普遍。通过此次热带牧草病害调查,基本掌握了热带牧草上常见及多发性真菌病害种类,为热带牧草病害的预测、预报以及防治奠定了基础。

关键词：热带牧草真菌病害调查病原菌鉴定

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尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中FoGAS1基因的克隆与序列分析

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基因组学与应用生物学 2014年第4期33卷 796-801页

作者：陈平亚毛超杨腊英黄俊生海南大学环境与植物保护学院海口5702282 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海口571101

采用PCR和RT-PCR的方法,从尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中克隆得到了FoGAS1基因的DNA及cDNA序列,并运用生物信息学的方法对该基因所编码的氨基酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的结构和功能。结果表明,FoGAS1基因全长1 672 bp,其中... 详细信息

采用PCR和RT-PCR的方法,从尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中克隆得到了FoGAS1基因的DNA及cDNA序列,并运用生物信息学的方法对该基因所编码的氨基酸序列进行分析,预测其编码蛋白质的结构和功能。结果表明,FoGAS1基因全长1 672 bp,其中开放阅读框全长1 623 bp,编码含有540个氨基酸残基的蛋白质,该蛋白分子量为58398.1,等电点pI=4.83,为性质稳定的亲水性蛋白。FoGAS1蛋白为跨膜蛋白,含有22个丝氨酸磷酸化位点,2个苏氨酸磷酸化位点,8个酪氨酸磷酸化位点。该蛋白在C端有一个信号肽结构,为一种分泌蛋白。通过系统进化树分析,该蛋白在不同种属镰刀菌中高度保守。

关键词： FOC4 GAS1 生物信息学分析

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香蕉枯萎病菌4号生理小种中CHS基因家族的克隆与蛋白序列分析

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生物技术通报 2014年第3期30卷 79-85页

作者：毛超杨腊英戴青冬黄俊生海南大学海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海口571101

为了解香蕉枯萎病菌4号生理小种(FOC4)中的几丁质合酶(Chitin synthase,CHS)基因的特点,从而为进一步研究相关基因功能奠定基础。根据丝状真菌中CHS基因设计简并引物,采用RT-PCR的方法扩增得到FOC4中全长cDNA,测序后对该基因家族编码的... 详细信息

为了解香蕉枯萎病菌4号生理小种(FOC4)中的几丁质合酶(Chitin synthase,CHS)基因的特点,从而为进一步研究相关基因功能奠定基础。根据丝状真菌中CHS基因设计简并引物,采用RT-PCR的方法扩增得到FOC4中全长cDNA,测序后对该基因家族编码的蛋白进行分析。结果表明,FOC4共有8个CHS基因,根据蛋白聚类分析表明可其可划分为2个家族,并可根据氨基酸序列特征进一步划分为7个小类,该基因家族成员在不同种镰刀菌中保守程度较高。

关键词： FOC4 几丁质合酶序列分析

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尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中Fsr1基因的克隆及生物信息学分析

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基因组学与应用生物学 2014年第1期33卷 36-41页

作者：毛超戴青冬杨腊英汪军黄俊生海南大学农学院海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点实验室海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室海口571101

以尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种为材料,克隆其Fsr1基因的DNA及cDNA全长,并对其进行生物信息学分析。根据镰刀菌中相关基因设计简并引物,结合PCR与RT-PCR技术扩增目的片段,进行氨基酸序列推导后分析。得到结果 FoFsr1基因开放阅读框... 详细信息

以尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种为材料,克隆其Fsr1基因的DNA及cDNA全长,并对其进行生物信息学分析。根据镰刀菌中相关基因设计简并引物,结合PCR与RT-PCR技术扩增目的片段,进行氨基酸序列推导后分析。得到结果 FoFsr1基因开放阅读框为2 474 bp,共编码824个氨基酸;FoFsr1基因编码蛋白可能是存在于细胞核中的跨膜亲水蛋白,含有54个蛋白磷酸化位点,不含有信号肽;该蛋白主要含有1个Striatin结构域及7个WD40结构域,二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成,其中不含有亮氨酸拉链结构;同源性分析发现其与丛赤壳菌属中的Fsr1蛋白亲缘关系最近。通过结构分析发现,推测该蛋白可能在细胞周期及细胞凋亡过程中起信号转导与转录调控的作用,从而对病原菌的致病力产生影响。

关键词： FOC4 Fsr1 生物信息学分析

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剑麻茎腐病菌基因组SSR标记开发

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热带作物学报 2014年第4期35卷 758-763页

作者：吴伟怀贺春萍严传帝郑金龙李锐郑肖兰刘巧莲易克贤中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南海口571101 海南大学环境与植物保护研究所海南海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

下载 Aspergillus niger ATCC 1015菌株全基因组序列，利用GRAMENE网站提供的SSR鉴定工具SSRIT（Simple Sequence Repeat Identification Tool），并按含有2～10个碱基重复、碱基数在18bp以上的SSR基元为标准进行SSR鉴定。结果从*** ATCC1015全基因组中．共发现4000个2～10碱基SSR．其中含9个碱基重复基元类型最多．共有1433个．占所鉴定SSR总数的35．8％。其次为6个碱基重复基元类型，共有753个，占SSR总数的18．8％；接着为3个碱基重复类型，共有547个，占13．6％。从鉴定出来的SSR中，选择含有SSR的合适区段．从中设计了36对引物．对剑麻茎腐病菌17个菌株的基因组DNA进行了PCR检测，发现这些引物都能从剑麻茎腐病菌基因组DNA中有效扩增。由此表明．黑曲霉ATCC1015菌株基因组SSR在剑麻茎腐病菌基因组中具有通用性。这为研究剑麻茎腐病菌群体遗传变异、多样性和进化，定位和克隆功能基因等提供了分子标记．

关键词：黑曲霉剑麻 SSR标记

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