检索结果-内蒙古大学图书馆

基于水解酶的抗寄生虫前药研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第2期30卷 139-145页

作者：温爱丹张皓冰中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

前药策略已被广泛应用于各种基于药剂学、药代动力学和药效学的药物优化。多数涉及前药转化的酶都属于水解酶,其中以酯水解酶和酰胺水解酶的研究最为广泛。本文综述了基于这两种水解酶的抗寄生虫前药的研究进展。

关键词：前药水解酶酯水解酶酰胺水解酶抗寄生虫药

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湖北钉螺硫氧还蛋白过氧化物酶全长基因克隆、表达与蛋白活性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第4期30卷 262-267页

作者：马宪亮刘琴张仪中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的克隆湖北钉螺(Oncomelania hupensis)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)全长基因cDNA,并分析其表达蛋白的抗氧化活性。方法抽提人工饲养的阴性湖北钉螺总RNA,采用逆转录PCR方法扩增TPx基因片段。使用快速扩增cDNA末端法(RACE)扩增TPx基因,... 详细信息

目的克隆湖北钉螺(Oncomelania hupensis)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)全长基因cDNA,并分析其表达蛋白的抗氧化活性。方法抽提人工饲养的阴性湖北钉螺总RNA,采用逆转录PCR方法扩增TPx基因片段。使用快速扩增cDNA末端法(RACE)扩增TPx基因,获得全长基因cDNA,与质粒pGEM-Teasy连接后,转化大肠埃希菌(***)DH5α,筛选、测序,并进行生物信息学分析。克隆质粒pGEM-Teasy/TPx和表达载体pET28a经双酶切后连接,构建重组表达质粒pET28a/TPx,转入*** BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,通过组蛋白标签镍离子(Ni-NTA)层析柱分离纯化可溶性蛋白。在体外过氧化氢(H2O2)还原试验中,分别加入不同浓度的TPx重组蛋白(10、20、30、40和50μg/ml),各浓度均设二硫苏糖醇(DTT)平行对照,计算H2O2清除率。在DNA超螺旋保护试验中,分别加入2.5、5.0和10μg/ml重组蛋白,观察其对DNA超螺旋结构的保护作用。结果 TPx全长基因cDNA为992bp,开放阅读框(ORF)为747bp,GenBank登录号为JN831437,编码249个氨基酸,预期蛋白相对分子质量(Mr)为27 000。重组质粒pET28a/TPx构建成功,经诱导表达和纯化后获得了可溶性重组蛋白。SDS-PAGE结果显示,Mr为27000。体外H2O2还原试验结果显示,含有DTT的反应体系H2O2清除率均显著高于不含DTT的体系(均P<0.05),各个浓度组间差异无统计学意义(均P>0.05)。DNA超螺旋保护试验结果显示,5.0μg/ml组保护效果优于2.5μg/ml组,但5.0μg/ml组和10μg/ml组的保护效果差异不明显。结论获得湖北钉螺TPx全长基因cDNA,且重组表达蛋白具有一定抗氧化功能。

关键词：湖北钉螺硫氧还蛋白过氧化物酶克隆表达

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快速诊断多房棘球蚴病胶体金免疫层析试条方法的建立与评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第2期30卷 90-94页

作者：高春花石锋汪俊云杨玥涛朱慧慧中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心.上海200025

目的建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白;采用柠檬酸三钠还原法... 详细信息

目的建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IgG单克隆抗体;将重组Em18抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的胶体金免疫层析试条。用该试条检测多房棘球蚴病(56份)、细粒棘球蚴病(87份)、囊尾蚴病(30份)、日本血吸虫病(10份)和弓形虫病(10份)患者血清,以及健康人(50份)血清,以评价其检测的敏感性和特异性,同时用ELISA法进行平行检测,以评价该试条的诊断性能。结果以重组蛋白Em18为抗原胶体金免疫层析试条检测多房棘球蚴病患者血清,敏感性为92.9%(52/56)。与细粒棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清分别存在9.2%(8/87)和3.3%(1/30)的交叉反应,与健康人血清存在8.0%(4/50)的假阳性率,与日本血吸虫病和弓形虫病患者血清则无交叉反应,特异性为93.0%(174/187)。ELISA法检测的敏感性和特异性分别为94.6%(54/56)和92%(172/187),与试条法比较两者差异均无统计学意义(P>0.05)。kappa分析结果显示,试条法与ELISA法检测多房棘球蚴病患者血清的结果高度一致(κ=0.98)。结论以重组Em18抗原建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测多房棘球蚴病的敏感性和特异性均较高。

关键词：多房棘球蚴病重组Em18抗原免疫层析试条 ELISA 诊断

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2011年全国疟疾疫情分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第6期30卷 419-422页

作者：夏志贵杨曼尼周水森中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

本文根据2011年27个省（市、区）疾病预防控制中心或寄生虫病防治研究所上报的《疟疾防治工作调查表》（全国疾病控制调查制度2010年版“卫统29表”）汇总整理，未统计香港、澳门和台湾地区。

关键词：疟疾防治疫情分析疾病预防控制中心调查制度疾病控制寄生虫病台湾地区调查表

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犬内脏利什曼病诊断方法的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第5期30卷 406-410页

作者：丁丹汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

犬内脏利什曼病由婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)感染引起,病犬和无症状感染犬是动物源型内脏利什曼病流行区人内脏利什曼病的主要传染源。对犬内脏利什曼病的诊断是控制动物源型内脏利什曼病的关键,应高度重视诊断方法的研究。... 详细信息

犬内脏利什曼病由婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)感染引起,病犬和无症状感染犬是动物源型内脏利什曼病流行区人内脏利什曼病的主要传染源。对犬内脏利什曼病的诊断是控制动物源型内脏利什曼病的关键,应高度重视诊断方法的研究。本文就犬内脏利什曼病诊断方法的研究进展作一综述。

关键词：犬内脏利什曼病诊断病原学方法分子生物学方法免疫学方法

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小鼠口服3种苯并咪唑类药物的油酸、大豆油和1%西黄耆胶混悬剂的药动学

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中国药学杂志 2012年第23期47卷 1915-1919页

作者：姜斌张皓冰刘丛珊陶奕中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的观察3种苯并咪唑类药物(阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑)的3种混悬剂(油酸、大豆油和1%西黄耆胶的混悬剂)在小鼠体内的药动学参数及其在相应介质中溶解度和生物利用度的相关性。方法用球磨机制备阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑在油酸... 详细信息

目的观察3种苯并咪唑类药物(阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑)的3种混悬剂(油酸、大豆油和1%西黄耆胶的混悬剂)在小鼠体内的药动学参数及其在相应介质中溶解度和生物利用度的相关性。方法用球磨机制备阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑在油酸、大豆油和1%西黄耆胶的混悬剂(作对照剂型)。每组45～54只小鼠1次口服1种上述的苯并咪唑类药物混悬液,剂量除阿苯达唑选用100 ***-1外,其余芬苯达唑和氟苯达唑均为50 ***-1,并于给药后0.25～24 h的不同间隔时间取血,用高效液相色谱法测定血药浓度,用DAS程序计算3种苯并咪唑类药物的药动学参数。结果小鼠口服3种苯并咪唑类药物在油酸、大豆油和1%西黄耆胶混悬剂后,阿苯达唑的平均滞留时间(MRT)分别为(3.91±0.29)、(3.70±0.09)和(1.59±0.14)h,峰浓度(ρmax)分别为(0.66±0.08)、(0.29±0.05)和(0.34±0.09)mg.L-1,药物浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为(3.19±0.40)、(1.25±0.09)和(0.50±0.05)mg.L.h-1,相对生物利用度F(油酸或大豆油混悬剂组的AUC与1%西黄耆胶混悬剂组AUC之比,下同)分别为6.38和2.50;芬苯达唑的MRT分别为(5.72±0.14)、(4.83±0.38)和(3.85±0.25)h,ρmax分别为(0.70±0.11)、(0.20±0.05)和(0.12±0.03)mg.L-1,AUC分别为(5.02±0.73)、(1.08±0.21)和(0.52±0.07)mg.h.L-1,F分别为9.65和2.08;氟苯达唑的MRT分别为(5.71±0.37)、(4.59±0.39)和(3.34±0.20)h,ρmax分别为(0.93±0.14)、(0.58±0.09)和(0.41±0.09)mg.L-1,AUC分别为(6.90±0.73)、(3.33±0.39)和(1.94±0.55)mg.h.L-1;F分别为3.57和1.72。结论小鼠一次口服阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑的2种油相混悬剂后,与1%西黄耆胶混悬剂相比,其药动学参数明显改善,延长了MRT,提高了ρmax,同时增加了AUC和F,而且3种苯并咪唑类药物在3种介质中的溶解度与其在小鼠体内的MRT、ρmax、AUC基本呈正相关。

关键词：苯并咪唑类药物阿苯达唑芬苯达唑氟苯达唑油酸大豆油混悬剂药动学生物利用度

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田鼠巴贝虫实验动物模型的建立

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第6期30卷 423-427页

作者：卢艳蔡玉春陈韶红陈家旭郭俭陈木新艾琳储言红陈卓周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的建立田鼠巴贝虫（Babesin microti）的实验动物模型。方法自感染田鼠巴贝虫的种鼠取血，腹腔注射接种3～4周龄雌性BALB／c小鼠（7只）、免疫抑制BALB／c小鼠（4只）、雄性SCID小鼠（4只）和NOD—SCID小鼠（4只）。感染后每天采血，... 详细信息

目的建立田鼠巴贝虫（Babesin microti）的实验动物模型。方法自感染田鼠巴贝虫的种鼠取血，腹腔注射接种3～4周龄雌性BALB／c小鼠（7只）、免疫抑制BALB／c小鼠（4只）、雄性SCID小鼠（4只）和NOD—SCID小鼠（4只）。感染后每天采血，涂制薄血片，吉氏染色，油镜下观察田鼠巴贝虫的生长、增殖情况，记录红细胞的感染率。解剖3只不同红细胞感染率的BALB／c小鼠，油镜下观察心、肝、脾、肺、肾、脑和骨髓等组织的感染情况。记录各组织中红细胞的感染率．并分析与外周血红细胞感染率的关系。取红细胞感染率大于40％的BALB／c小鼠血液．冷冻保存2个月后用同样的方法接种小鼠，观察田鼠巴贝虫的增殖情况。结果BALB／c小鼠、免疫抑制BALB／c小鼠、SCID小鼠和NOD—SCID小鼠接种后，末梢血液中均检测出田鼠巴贝虫。BALB／c小鼠的红细胞感染率在d7达到峰值（82．4％）．免疫抑制BALB／c小鼠的红细胞感染率在d5达到峰值（73．2％），SCID小鼠和NOD—SCID小鼠的红细胞感染率均在d8达到峰值（86．4％和72．5％）。红细胞感染率达到峰值后，BALB／c小鼠的红细胞感染率迅速下降，免疫抑制BALB／c小鼠的红细胞感染率缓慢降低．SCID小鼠和NOD—SCID小鼠的红细胞感染率则出现震荡变化。感染的BALB／c小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和骨髓等组织内均可观察到田鼠巴贝虫，虫体主要位于红细胞内，各组织内的红细胞感染率随外周血红细胞感染率的升高而增高。冷冻保存的虫种复苏后可感染健康BALB／c小鼠，末梢血中出现虫体的时间与新鲜含虫血液感染鼠的比较滞后2d．达到感染高峰的时间滞后1d。结论成功建立田鼠巴贝虫的小鼠模型．红细胞的感染情况与机体的免疫状态相关。

关键词：田鼠巴贝虫小鼠动物模型

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热带病舆情分析系统设计研究

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中国数字医学 2013年第3期8卷 35-37页

作者：卢延鑫姚旭峰王松旺中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海市瑞金二路207号200025 上海理工大学上海医疗器械高等专科学校上海市杨浦区军工路516号200091 中国疾病预防控制中心公共卫生监测与信息服务中心北京市昌平区昌百路155号102206

首先对热带病舆情分析平台进行了需求分析,然后根据该需求设计了热带病舆情分析平台系统的架构、功能等;详细论述了热带病舆情采集、舆情信息处理和分析、舆情服务等各模块的组件及其作用。

关键词：热带病舆情分析信息处理

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应用微卫星DNA标记探讨我国长江中下游地区湖北钉螺群体遗传结构

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第4期30卷 268-273页

作者：李石柱张丽刘琴吕山王强钱颖骏杨坤周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的应用微卫星DNA分子标志分析中国长江中下游地区湖北钉螺群体的遗传结构。方法利用6对微卫星DNA引物,对采集自湖沼型血吸虫病流行区的湖南汉寿县、湖北阳新县、江西星子县、安徽当涂县和江苏扬州邗江区的湖北钉螺的P84、T5-13、T5-11... 详细信息

目的应用微卫星DNA分子标志分析中国长江中下游地区湖北钉螺群体的遗传结构。方法利用6对微卫星DNA引物,对采集自湖沼型血吸虫病流行区的湖南汉寿县、湖北阳新县、江西星子县、安徽当涂县和江苏扬州邗江区的湖北钉螺的P84、T5-13、T5-11、T4-22、T6-27和P82等6个位点进行荧光标记通用引物PCR扩增。每个采集点采集20～50个钉螺标本,共165个。统计分析各群体的等位基因数(Na)、近交系数(FIS)、期望杂合度(He)、观察杂合度(Ho)、多态信息含量(PIC)、群体间的遗传分化系数(FST)和遗传距离,根据遗传距离进行聚类分析,并进行分子变异方差分析(AMOVA)。结果 5个湖北钉螺群体在6个微卫星位点等位基因数范围为3～33,平均为15.833。群体的平均He和Ho范围分别为0.600～0.883和0.308～0.759,两者在湖北群体最高,在江苏群体最低。群体的FIS范围为0.143～0.539。成对群体间的FST范围为0.0006～0.0531,由于FST值较小,提示群体间未出现明显遗传分化。各群体的平均PIC为0.511～0.850,除江苏群体外,均为高度多态。分级AMOVA结算结果显示,变异主要存在于个体间,占总变异的95.2%。聚类分析结果显示,安徽群体与江苏群体首先聚为一支,然后依次同湖南、江西、湖北群体聚在一起。结论湖北钉螺多样性较为丰富;聚类分析结果符合湖北钉螺的地理分布格局;5个群体之间遗传差异较小,微卫星DNA的变异主要存在个体间。

关键词：湖北钉螺微卫星DNA 群体遗传差异

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我国4种白蛉的核糖体内转录间隔2区PCR-RFLP多态性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第2期30卷 100-101,108页

作者：顾灯安张仪兰勤娴中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 苏州市疾病预防控制中心苏州215004

采用PCR-RFLP方法对我国内脏利什曼病传播媒介中华白蛉(Phlebotomus chinensis)、吴氏白蛉(***)、长管白蛉(***)和亚历山大白蛉(***)等4种白蛉的核糖体内转录间隔2区(ITS2)进行分型。PCR-RFLP结果显示,以限制性内切酶DraⅠ酶切ITS2片段... 详细信息

采用PCR-RFLP方法对我国内脏利什曼病传播媒介中华白蛉(Phlebotomus chinensis)、吴氏白蛉(***)、长管白蛉(***)和亚历山大白蛉(***)等4种白蛉的核糖体内转录间隔2区(ITS2)进行分型。PCR-RFLP结果显示,以限制性内切酶DraⅠ酶切ITS2片段,可分出4种RFLP带型,即A为450 bp,B为154 bp/127 bp/93 bp/66 bp/10 bp,C为311 bp/80 bp/60 bp,D为353 bp/300 bp/160 bp/58 bp。结果显示,4种白蛉均只有1种RFLP带型,中华白蛉为AA型,亚历山大白蛉为BB型,吴氏白蛉为CC型,长管白蛉为DD型。利用PCR-RFLP方法可区分我国4种内脏利什曼病传播媒介的种类。

关键词：白蛉内转录间隔2区(ITS2) 限制性片段长度多态性(RFLP)

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