检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血吸虫病防治杂志 2011年第2期23卷 202-203页

作者：田利光程国金汪峰峰郭俭蔡玉春汪天平陈家旭周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 安徽省阜阳市疾病预防控制中心安徽省血吸虫病防治研究所

目的了解三苯双脒治疗钩虫感染的效果。方法以横断面调查中发现的钩虫感染者为研究对象,随机分成实验组和对照组,分别给予三苯双脒和阿苯达唑治疗,观察两组钩虫感染转阴率及不良反应情况。结果共调查47例钩虫感染者,实验组23例,对照组2... 详细信息

目的了解三苯双脒治疗钩虫感染的效果。方法以横断面调查中发现的钩虫感染者为研究对象,随机分成实验组和对照组,分别给予三苯双脒和阿苯达唑治疗,观察两组钩虫感染转阴率及不良反应情况。结果共调查47例钩虫感染者,实验组23例,对照组24例。三苯双脒和阿苯达唑治疗钩虫感染转阴率分别为95.65%和95.83%,不良反应率分别为8.70%和8.33%,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论三苯双脒治疗钩虫感染的疗效与阿苯达唑相仿。

关键词：钩虫三苯双脒阿苯达唑治疗效果

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日本血吸虫金属蛋白酶基因的克隆和表达及其对小鼠的免疫保护性研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第2期29卷 81-86页

作者：徐斌鞠川卢艳莫筱谨冯正许学年胡薇中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 华东理工大学生物工程学院上海200237 华中师范大学昆虫学研究所武汉430079

目的克隆和表达日本血吸虫金属蛋白酶(metalloprotease)编码基因并纯化表达产物,观察其在成虫体内定位及在小鼠的免疫试验。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,从含有金属蛋白酶基因的日本血吸虫cDNA克隆(SJM2CFB04,简称SjB... 详细信息

目的克隆和表达日本血吸虫金属蛋白酶(metalloprotease)编码基因并纯化表达产物,观察其在成虫体内定位及在小鼠的免疫试验。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,从含有金属蛋白酶基因的日本血吸虫cDNA克隆(SJM2CFB04,简称SjB04)中扩增得到该编码基因片段,亚克隆至原核表达载体pET28a中表达,应用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物,蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫原性。应用间接免疫荧光法,观察金属蛋白酶在血吸虫成虫体内的分布。将18只C57BC/6小鼠随机分成两组,实验组用SjB04重组蛋白(25μg/只)免疫小鼠,共3次,每次间隔2周;对照组用佐剂免疫(50μl/只)。末次免疫后2周,每鼠腹部感染40±2条日本血吸虫尾蚴,攻击后第37天起连续收集6 d小鼠粪便,计算每克粪虫卵数和减卵率;第42天剖杀小鼠,门静脉灌注收集成虫并计算减虫率。结果获得了SjB04基因(ORF 528 bp)的编码序列,构建了原核表达载体,并在大肠埃希菌中表达,经组氨酸标签亲和层析法获得纯化重组蛋白SjB04。免疫荧光法检测结果显示,SjB04主要定位于日本血吸虫成虫的肠管表皮。Western blotting分析结果显示,该纯化重组蛋白SjB04能被感染兔血清和免疫兔血清识别,在相对分子质量(Mr)29 800处出现一清晰条带。用该纯化蛋白免疫C57BC/6小鼠后,减虫率为27.1%,粪减卵率为57.8%。结论克隆获得的日本血吸虫SjB04重组蛋白主要定位于日本血吸虫成虫的肠管表皮,该蛋白可明显减少感染日本血吸虫的C57BC/6小鼠的粪卵排出量。

关键词：日本血吸虫金属蛋白酶免疫保护力

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中缅边境(西段)传疟媒介的初步调查

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第2期29卷 134-137页

作者：施文琦周晓俊张仪周晓农胡铃王学忠王剑李艳君中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心.上海200025 云南省寄生虫病防治所普洱665000 大理医学院病原与媒介生物研究所大理671000

目的了解中缅边境(西段)传疟媒介的分布与构成。方法 2008年8～9月,在中缅边境的中国云南省盈江县及其相邻的缅甸昔懂县6个自然村,用诱蚊灯在人房和牛棚共进行20次通宵诱捕。将捕获的蚊虫以传统方法进行形态学鉴定,然后用复合PCR法鉴别... 详细信息

目的了解中缅边境(西段)传疟媒介的分布与构成。方法 2008年8～9月,在中缅边境的中国云南省盈江县及其相邻的缅甸昔懂县6个自然村,用诱蚊灯在人房和牛棚共进行20次通宵诱捕。将捕获的蚊虫以传统方法进行形态学鉴定,然后用复合PCR法鉴别微小按蚊、乌头按蚊和杰普按蚊。同时,抽提部分蚊虫标本总基因组DNA,以巢式PCR方法检测蚊体内的疟原虫感染情况。结果共捕获各类蚊虫4 571只,隶属9属50种,其中按蚊属是优势蚊种,占总量的54.32%(2 483/4 571)。人房和牛棚的按蚊蚊种构成差异有统计学意义,其中人房以腹簇按蚊、微小按蚊和中华按蚊为主,而牛棚以腹簇按蚊(223只)、环纹按蚊(184只)、迷走按蚊(131只)和杰普按蚊(129只)为主。对比有牛村和无牛村中人房的蚊种构成发现,有牛村的人房以微小按蚊(260只)和腹簇按蚊(49只)为主,而无牛村人房则以腹簇按蚊(481只)和中华按蚊(124只)为主。巢式PCR检测1 075只按蚊,其中9只检出疟原虫阳性,分别为微小按蚊(7/408)、乌头按蚊(1/125)和伪威氏按蚊(1/101)。经测序鉴定均为恶性疟原虫感染,目的条带长204 bp。结论中缅边境(西段)蚊虫密度高、种类多,在传疟作用中以微小按蚊最为重要,乌头按蚊和伪威氏按蚊亦为当地的传播媒介。

关键词：传疟媒介复合PCR 巢式PCR 子孢子中缅边境

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入境黄鳝颚口线虫检疫及虫种鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第5期29卷 358-362页

作者：李树清李雯雯陈志飞李健陈韶红张永年黄维义王巧全上海出入境检验检疫局上海200135 广西大学动物科学技术学院南宁530005 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的检查进口黄鳝（Monopterus albus）体内的颚口线虫Ⅲ期幼虫,并鉴定虫种。方法对2010年1月至2011年3月间从上海口岸入境的10批黄鳝进行颚口线虫寄生情况检疫。采样52尾,3-10尾/批,分别来自菲律宾（25尾）、印度尼西亚（24尾）和孟加... 详细信息

目的检查进口黄鳝（Monopterus albus）体内的颚口线虫Ⅲ期幼虫,并鉴定虫种。方法对2010年1月至2011年3月间从上海口岸入境的10批黄鳝进行颚口线虫寄生情况检疫。采样52尾,3-10尾/批,分别来自菲律宾（25尾）、印度尼西亚（24尾）和孟加拉国（3尾）,分尾解剖、切碎、蛋白酶消化后,悬液用10目铜筛过滤,取滤液沉淀。体视镜下挑出完整虫体,进行形态学鉴定,并计算感染率和感染度。提取颚口线虫基因组DNA,PCR扩增核糖体DNA第二内转录间隔区（internal transcribed spacer region 2,ITS2）和线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（cytochromec oxidase subunit 1,cox1）基因,对产物进行电泳和测序。测序结果与GenBank相应序列进行多重序列比对。结果从菲律宾和印度尼西亚进口的黄鳝中均检出有颚口线虫Ⅲ期幼虫寄生,阳性率分别为36.0%（9/25）和50.0%（12/24）,平均感染度分别为7.8（70/9）和2.8（34/12）。孟加拉国进口的黄鳝采样中未检出虫体。镜下显示,检获的虫体有头球,头球上有4环小钩,体表有横纹和小棘,体前部棘明显大而密,体后部棘渐小而疏。有1对颈乳突和4个颈囊。形态学特征与棘颚口线虫（Gnathostoma spinigerum）Ⅲ期幼虫相似。PCR结果显示,ITS-2和cox1扩增产物的长度分别为647 bp和441 bp,与预期大小一致。经测序后比对分析结果显示,2个扩增产物分别与棘颚口线虫ITS-2（GenBank登录号为AB181155和Z97175）和cox1（GenBank登录号为AY501388、AB180099和AB551552）基因片段序列一致性为99%~100%。结论从菲律宾和印度尼西亚进口黄鳝中检出的颚口线虫均为棘颚口线虫。

关键词：棘颚口线虫黄鳝菲律宾印度尼西亚虫种鉴定

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日本血吸虫感染适宜与非适宜宿主的免疫学特征初步研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第4期29卷 267-271页

作者：卢潍媛胡媛袁忠英李佩徐馀信沈玉娟周何军陈盛霞曹建平江苏大学基础医学与医学技术学院镇江212013 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 上海交通大学图书馆上海200240

目的研究3种不同易感性宿主感染日本血吸虫后免疫应答特征的差异,初步探讨适宜和非适宜鼠类宿主感染血吸虫后免疫应答的机制。方法 C57BL/6小鼠、Sprague Dawley(SD)大鼠和东方田鼠(Microtus fortis)各12只,均随机分为感染组和未感染组... 详细信息

目的研究3种不同易感性宿主感染日本血吸虫后免疫应答特征的差异,初步探讨适宜和非适宜鼠类宿主感染血吸虫后免疫应答的机制。方法 C57BL/6小鼠、Sprague Dawley(SD)大鼠和东方田鼠(Microtus fortis)各12只,均随机分为感染组和未感染组,每组6只。C57BL/6小鼠、SD大鼠和东方田鼠的感染组每鼠经腹部皮肤分别感染日本血吸虫尾蚴20、200和1000条。感染后42d,剖杀各组动物,观察门脉系统成虫寄生及肝脏肉芽肿情况。收集血清,ELISA法检测细胞因子白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)和血清特异性抗体IgG、IgG_(2a)及IgG_1的水平。结果感染日本血吸虫后42d,C57BL/6小鼠和SD大鼠均检获日本血吸虫成虫,并在宿主肝脏发现虫卵肉芽肿,而东方田鼠未检获血吸虫成虫及虫卵,肝脏正常。SD大鼠血清中IL-10的含量[(2.21±0.12)pg/ml]明显高于东方田鼠[(1.64±0.39)pg/ml](P<0.05)和C57BL/6小鼠[(0.10±0.04)pg/ml)](P<0.01),而东方田鼠也显著高于C57BL/6小鼠(P<0.01);SD大鼠血清中IFN-γ的含量[(0.21±0.11)pg/ml]均高于东方田鼠[(0.11±0.03)pg/ml]和C57B1/6小鼠[(0.09±0.02)pg/ml](P<0.05),而C57BL/6小鼠与东方田鼠组间差异无统计学意义(P>0.05);SD大鼠IgG(1.53±0.31)、IgG_1(1.48±0.44)、IgG_(2a)(0.41±0.11)水平均显著高于东方田鼠各抗体亚类水平(0.48±0.14、0.15±0.03和0.12±0.06)(P<0.01),C57BL/6小鼠IgG(1.21±0.16)和IgG_1(0.88±0.31)水平也显著高于东方田鼠(P<0.01),3种鼠血清抗体亚类均以IgG_1占优势。未感染组C57BL/6小鼠、SD大鼠及东方田鼠均未检测出IL-10、IFN-γ及抗体亚类IgG、IgG_1、IgG_(2a)的表达。结论与Th2型免疫应答主要相关的细胞因子IL-10在血吸虫非适宜宿主体内水平显著高于适宜宿主,可能在抗血吸虫机制中发挥重要作用。

关键词：日本血吸虫适宜宿主非适宜宿主免疫 T辅助细胞2

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安氏隐孢子虫在HCT-8和AGS细胞中增殖效果的研究

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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 475-478,483页

作者：逯兆喜吴亮姜旭淦沈玉娟傅行礼涂国华李礼陈盛霞曹建平江苏大学基础医学与医学技术学院镇江212013 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的比较安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)在人结肠腺癌(human ileocecal adenocarcinoma,HCT-8)细胞和人胃腺癌(human stomach adenocarcinoma,AGS)细胞中的增殖。方法取培养至对数生长期的HCT-8细胞和AGS细胞,接种于6孔培养板中,待细胞生长融合至60%～70%时,加入2.5×105个安氏隐孢子虫卵囊,培养至24 h和48 h,以Giemsa染色法和Real-time PCR技术检测虫体在细胞中的增殖。结果 Giemsa染色法观察24 h和48 h HCT-8细胞中虫体数量均高于AGS细胞(P<0.05)。Real-time PCR技术测得24 h和48 h HCT-8细胞中安氏隐孢子虫卵囊COWP基因拷贝数均高于AGS细胞(P<0.05)。结论与AGS细胞相比,以HCT-8细胞作为体外感染模型更利于安氏隐孢子虫的增殖。

关键词：安氏隐孢子虫 HCT-8细胞 AGS细胞 Giemsa染色 Real—time PCR

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我国细粒棘球绦虫新疆分离株AgB8/3亚基克隆表达及其检测囊型包虫病价值分析

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中国人兽共患病学报 2011年第11期27卷 966-969页

作者：高春花崔刚汪俊云杨玥涛石锋朱慧慧中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州地方病防治研究所阿图什845350

目的评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA... 详细信息

目的评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法评价其诊断价值并与本课题组制备的重组AgB8/1和AgB8/2进行比较。结果酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒,并在原核细胞用IPTG成功诱导目的蛋白表达。rAgB8/3检测囊型包虫病患者血清的敏感度为55.9%(66/118);检测泡型包虫病患者血清阳性率为44.12%(15/34);59份其它寄生虫病患者血清中除3份囊尾蚴病人血清阳性外,其他均为阴性;50份健康者血清全部为阴性,总特异度为87.4%(125/143)。rAgB8/3检测的敏感度与rAgB8/1相当(P>0.05)而低于rAgB8/2(P<0.05);rAgB8/3检测的特异度与rAgB8/1和rAgB8/2均无统计学差异(P>0.05)。结论成功构建新疆源细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒并在原核细胞表达,rAgB8/3检测囊型包虫病结果与rAgB8/1无统计学差异。

关键词：细粒棘球蚴 AgB8/3亚基基因克隆和表达 ELISA

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华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白免疫诊断价值的评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第3期29卷 172-176页

作者：周岩许学年姚恺龄张鸿满程娜包意芳张陆娟徐斌江河黎学铭 Peter Chun 冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 益思美诠生物科技(上海)有限公司上海201206 广西壮族自治区疾病预防控制中心南宁530028

目的应用华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白（rCs2）建立2种华支睾吸虫病免疫学检测方法,并进行初步评价。方法以可溶性rCs2作为诊断抗原,建立间接ELISA检测方法,并研制胶体金免疫层析检测（GICA）动力流体型试条,检测血清中的特异性... 详细信息

目的应用华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白（rCs2）建立2种华支睾吸虫病免疫学检测方法,并进行初步评价。方法以可溶性rCs2作为诊断抗原,建立间接ELISA检测方法,并研制胶体金免疫层析检测（GICA）动力流体型试条,检测血清中的特异性抗体。采用ELISA法和GICA试条共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性患者、15例日本血吸虫病患者、15例卫氏并殖吸虫病患者和13例猪囊尾蚴病患者的血清,以及33份健康人血清。为进一步评价诊断价值,8只新西兰兔各感染600个华支睾吸虫囊蚴,随机均分为感染组和治疗组,感染第56天,治疗组各兔给予吡喹酮治疗[150 mg/（kg.d）×2 d],用ELISA法和GICA法检测两组兔0~44周抗rCs2特异性抗体的消长。结果 ELISA法的敏感性为71.4%（25/35）,特异性为93.4%（71/76）,总符合率为86.5%（96/111）,与日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病和猪囊尾蚴病患者血清的交叉反应阳性率分别为1/15、1/15和1/13。GICA试条检测法的敏感性为85.7%（30/35）,特异性为92.1%（70/76）,总符合率为90.1%（100/111）。经ELISA检测,感染组兔自感染后第4周抗rCs2特异性抗体水平开始上升,于第6周达到高峰,随后快速下降,至第20周已呈较低水平;治疗组的特异性抗体消长趋势同感染组,同一时点的2组实验兔的抗体水平差异无统计学意义（P〉0.05）。GICA试条检测结果表明,2组兔血清均仅在4~16周检出阳性。结论以PPMPⅠ型抗原rCs2建立的间接ELISA方法和GICA动力流体型试条对华支睾吸虫病具有较好的诊断价值。

关键词：华支睾吸虫免疫学诊断 ELISA 胶体金免疫层析检测动力流体型血清学抗体消长

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日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白基因的克隆表达及鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2011年第4期23卷 406-411页

作者：王晓娜徐斌冯正王小宁胡薇华东理工大学生物工程学院上海200237 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心华南理工大学生物科学与工程学院

目的克隆、表达日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白(SjTollip)基因,并研究该基因在日本血吸虫各虫期的转录表达情况。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出Toll样受体相互作用蛋白基因进行体外扩增,并克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠埃希... 详细信息

目的克隆、表达日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白(SjTollip)基因,并研究该基因在日本血吸虫各虫期的转录表达情况。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出Toll样受体相互作用蛋白基因进行体外扩增,并克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物。制备日本血吸虫各虫期阶段总RNA和重组SjTollip蛋白免疫新西兰白兔的免疫兔血清,利用RT-PCR和蛋白质免疫印迹分析SjTollip基因在日本血吸虫各期转录表达的差异及重组SjTollip蛋白的免疫原性。结果构建了重组原核表达载体SjTollip/pET-28a,诱导获得以包涵体形式表达的不可溶重组蛋白,相对分子质量约为24000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符。纯化后的重组蛋白rSjTollip可被日本血吸虫感染兔血清识别。虫期转录特异性分析显示,该基因在尾蚴和雄虫中转录水平较低。免疫印迹分析结果显示,在虫卵、尾蚴、童虫、雄虫、雌虫各发育阶段都检测到该蛋白,但童虫和雌虫中表达水平明显升高。结论 SjTollip基因在日本血吸虫各发育阶段转录表达水平有较大差异,其有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。

关键词：日本血吸虫 Toll样受体相互作用蛋白虫期特异性克隆表达鉴定

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恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位预测及免疫学分析

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第3期38卷 140-143页

作者：陈勤张国庆徐馀信沈玉娟官亚宜冯晓平曹建平汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的对恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位进行预测，表达其重组蛋白并进行免疫学鉴定。方法利用生物信息学分析方法对MAL13P1．129基因的线性抗原表位进行预测，从亲水性、表面可及性、柔韧性及二级结构等方面对抗原表位进行筛选。... 详细信息

目的对恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位进行预测，表达其重组蛋白并进行免疫学鉴定。方法利用生物信息学分析方法对MAL13P1．129基因的线性抗原表位进行预测，从亲水性、表面可及性、柔韧性及二级结构等方面对抗原表位进行筛选。人工合成经密码子优化的MAL13P1．129基因，构建至PET32a（＋）表达载体，获得PET32a129表达质粒，热激转化至宿主菌Rosettagami（DE3）中进行诱导表达，分别用抗His-标记的IgG及恶性疟患者的血清作Western印迹分析鉴定表达产物。结果MAL13P1．129基因具有2个潜在的抗原表位，分别位于氨基酸44～51、98～106。表达获得的重组蛋白与His-标记的IgG进行Western印迹有反应条带，与恶性疟患者血清无反应条带。结论MAL13P1．129蛋白具有2个抗原表位，其在大肠埃希菌中表达的重组蛋白能被His-标记的IgG识别，但不能被恶性疟患者血清识别。

关键词：恶性疟原虫抗原表位预测大肠杆菌基因表达

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