检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第4期26卷 258-262页

作者：张玲刘峰崔书健徐斌周晓农胡薇中国疾病预防控制中心寄生病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 人类南方基因组上海201203

目的利用蛋白质组学的方法鉴定吡喹酮处理前后日本血吸虫成虫蛋白质组,比较处理前后差异表达的蛋白质,探讨吡喹酮抗血吸虫机制。方法日本血吸虫合抱成虫分别暴露于吡喹酮(处理组,30μg/ml)和二甲基亚砜(对照组)中,18h后收集虫体,提取总... 详细信息

目的利用蛋白质组学的方法鉴定吡喹酮处理前后日本血吸虫成虫蛋白质组,比较处理前后差异表达的蛋白质,探讨吡喹酮抗血吸虫机制。方法日本血吸虫合抱成虫分别暴露于吡喹酮(处理组,30μg/ml)和二甲基亚砜(对照组)中,18h后收集虫体,提取总蛋白。采用二维-纳喷雾-液相色谱联合串联质谱(2D-nano-LC-MS/MS)鉴定吡喹酮处理组与对照组的蛋白质。数据库查询确定蛋白质的功能,统计分析其中差异表达的蛋白质。结果吡喹酮处理后明显上调的血吸虫成虫蛋白为12个,明显下调4个。上调蛋白中有10个功能明确,分别归属于细胞骨架蛋白家族的肌动蛋白、肌球蛋白、副肌球蛋白、微管蛋白、原肌球蛋白和膜联蛋白,应激蛋白家族的热休克蛋白70、热休克蛋白60和硫氧还原蛋白过氧化物酶和信号转导蛋白14-3-3。下调蛋白为参与转录调控的蛋白,即多聚合蛋白和髓磷脂基因表达因子。结论吡喹酮处理后日本血吸虫成虫蛋白质组具有差异,提示吡喹酮处理后促进或抑制了特定基因的表达。

关键词：日本血吸虫吡喹酮蛋白质组学

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三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚和吡喹酮单剂、多剂或联合用药治疗大鼠华支睾吸虫感染的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第5期26卷 321-326页

作者：肖树华薛剑 Marcel TANNER 张永年 Jennifer KEISER Jug UTZINGER 强慧琴刘晓云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 瑞士热带病研究所公共卫生和流行病学系巴塞尔CH-4002 瑞士热带病研究所医学寄生虫学和感染生物学系瑞士巴塞尔CH-4002 利物浦热带病医学院利物浦L3 5QA

目的观察三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚、或吡喹酮单剂、多剂给药,及其伍用治疗感染华支睾吸虫大鼠的疗效。方法147只SD大鼠各感染50个华支睾吸虫囊蚴,于感染后42～44d分组治疗。各药物采用灌胃给药。①60只感染大鼠随机分为11组(每组4～5... 详细信息

目的观察三苯双脒、青蒿琥酯、蒿甲醚、或吡喹酮单剂、多剂给药,及其伍用治疗感染华支睾吸虫大鼠的疗效。方法147只SD大鼠各感染50个华支睾吸虫囊蚴,于感染后42～44d分组治疗。各药物采用灌胃给药。①60只感染大鼠随机分为11组(每组4～5只),分别为三苯双脒150mg/kg(顿服)、75mg/(kg·d)×2d、50mg/(kg·d)×3d和25mg/kg(tid)×2d组;吡喹酮150mg/kg(顿服)、75mg/(kg·d)×2d和25mg/kg(tid)×2d;青蒿琥酯或蒿甲醚75mg/kg(顿服)和37.5mg/(kg·d)×2d组。②另87只感染大鼠随机分为15组(每组4～6只),用青蒿琥酯或蒿甲醚(30mg/kg)分别与吡喹酮(150mg/kg)、三苯双脒(50mg/kg和75mg/kg)伍用组;三苯双脒(50mg/kg)与吡喹酮(150mg/kg)伍用组;三苯双脒(75mg/kg)与吡喹酮(187.5mg/kg)伍用组,及各药的单用组。并设同批感染未治疗对照组。受治鼠于治疗后2周剖杀,收集胆管和肝组织内的残留华支睾吸虫,计算各组的平均虫数和减虫率,用非参数统计方法(Mann-Whitney秩和检验)对相应组间的平均虫数进行分析。结果感染华支睾吸虫的大鼠口服单剂三苯双脒或吡喹酮(150mg/kg)的减虫率分别为57.2%和63.8%。三苯双脒各小剂量多次给药组的减虫率稍高,达77.1%～79.4%,而吡喹酮小剂量多次给药组的减虫率则为50.6%～54.2%。但两种药物各组间的平均虫数的差异无统计学意义。青蒿琥酯和蒿甲醚各单剂给药组与小剂量多次给药组的减虫率均较高,分别为90.4%～98.5%和100%。三苯双脒小剂量(50或75mg/kg)与吡喹酮(150mg/kg或187.5mg/kg)伍用治疗,减虫率为74.9%～100%,高于其各单药组的减虫率(26.9%～79.6%)。青蒿琥酯或蒿甲醚小剂量(30mg/kg)与吡喹酮(150mg/kg)或三苯双脒(50或75mg/kg)伍用治疗,减虫率为74.9%～97.9%,亦高于其各药组的减虫率(24.8%～79.6%)。结论青蒿琥酯、蒿甲醚、吡喹酮和三苯双脒均为有效的抗华支睾吸虫药物,各药物小剂量伍用具有增效作用。

关键词：三苯双脒青蒿琥酯蒿甲醚吡喹酮大鼠华支睾吸虫联合治疗

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新的具有高度多态性的日本血吸虫微卫星位点的鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第2期26卷 104-109页

作者：殷明波朱根凤张祥林徐斌莫筱瑾孙胜强王升跃 David Blair 胡薇冯正华东理工大学生物工程学院上海200237 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 国家人类基因组南方研究中心上海201323 詹姆斯库克大学海洋与热带生物学院汤斯维尔市4811

目的从基因组序列中选择和设定新的、可用于研究日本血吸虫多态性的微卫星位点。方法672个日本血吸虫标本取自安徽、江西、湖南、湖北和四川等5省的7个流行区现场。根据日本血吸虫基因组数据库中的初始数据设计引物,对标本的17个全新的... 详细信息

目的从基因组序列中选择和设定新的、可用于研究日本血吸虫多态性的微卫星位点。方法672个日本血吸虫标本取自安徽、江西、湖南、湖北和四川等5省的7个流行区现场。根据日本血吸虫基因组数据库中的初始数据设计引物,对标本的17个全新的日本血吸虫微卫星位点进行分析。用GenMapper4.0软件(Applied Biosystems)进行初始数据处理,用GenClone1.0软件计算种群内各标本的遗传距离;用GenAlEx6软件统计等位基因的变化;用GenClone1.0软件计算种群内各标本的遗传距离;用UPGMA谱系图分析种群间遗传距离。结果17个微卫星位点均呈现多态性。对江西都昌种群的这17个位点进行分析,标本之间的遗传距离大多为25～32,显示江西都昌种群内各个标本之间的遗传差异明显。对7个地区种群分析的结果显示种群间的差异较为明显。类平均法系统聚类分析(UPGMA)谱系图显示,江西都昌、安徽铜陵、湖北沙市和湖南常德的种群同为一簇,其遗传距离为0.0178～0.0363;安徽贵池和湖南岳阳的为另外一簇,其遗传距离为0.0247;而四川西昌单独为一簇,与其他两簇的遗传距离为0.0192～0.0693。结论选择的17个微卫星位点可作为研究日本血吸虫种群遗传学的有效标记,并揭示中国大陆该虫种存在着复杂的遗传变异。

关键词：日本血吸虫微卫星多态性中国

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日本血吸虫乙醛脱氢酶全长基因编码序列的预测、验证与分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第1期26卷 30-34页

作者：王玮刘德立胡薇冯正杨忠中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 华中师范大学生命科学学院武汉430079 上海生物信息技术研究中心上海200235 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

目的利用生物信息学和实验相结合的方法,补平已知拼接序列中的缺失片段,获得日本血吸虫乙醛脱氢酶全长基因编码序列。方法通过生物信息学方法从已公开发布的日本血吸虫转录组数据库中提取乙醛脱氢酶表达序列标签(EST)序列数据,与其他物... 详细信息

目的利用生物信息学和实验相结合的方法,补平已知拼接序列中的缺失片段,获得日本血吸虫乙醛脱氢酶全长基因编码序列。方法通过生物信息学方法从已公开发布的日本血吸虫转录组数据库中提取乙醛脱氢酶表达序列标签(EST)序列数据,与其他物种的同源基因进行多序列联配,寻找分别与同一蛋白氨基酸序列的N端和C端配对的序列;设计引物,用RT-PCR扩增得到全长基因中间的缺失片段并测序。最终获得全长基因序列,并分析该蛋白的理化性质。结果找到日本血吸虫乙醛脱氢酶基因的可能EST序列片段8条,对其中的1对EST序列(AAW27891和AAW27047对应的氨基酸序列,中间缺少约80个氨基酸)进行blastn比对结果,预测为同一基因的2条片段。根据这两对EST序列设计正、反向引物,通过PCR扩增、对扩增产物进行测序及序列的生物信息学鉴定,找回了缺少的核酸序列,并与预测序列大小大致吻合(430bp)。组合成1条完整的日本血吸虫乙醛脱氢酶基因的编码序列(提交GenBank,其登录号为EF503564)。ORF全长为1596bp,编码531个氨基酸,编码的蛋白相对分子质量理论值为Mr57330.7,pI值为7.94,此序列的290～297位氨基酸与乙醛脱氢酶的模式序列[LIVMFGA]-E-[LIMSTAC]-[GS]-G-[KNLM]-[SADN]-[TAPFV]相匹配。结论利用生物信息学和实验相结合的方法,可以补平已知拼接序列中的缺失片段,获得日本血吸虫乙醛脱氢酶的全长基因编码序列。

关键词：日本血吸虫乙醛脱氢酶生物信息学序列拼接

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检测和鉴定疟原虫虫种PCR方法的比较

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国际医学寄生虫病杂志 2008年第1期35卷 17-22页

作者：刘燕汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

高灵敏度、准确、快速的疟原虫检测与鉴定对疟疾的防治起着至关重要的作用。随着分子实验技术的发展，在大规模流行病学调查中，PCR方法比传统的镜检方法更加高效、准确。该文搜集了部分用PCR方法检测、鉴定虫种的研究结果，综合比较了... 详细信息

高灵敏度、准确、快速的疟原虫检测与鉴定对疟疾的防治起着至关重要的作用。随着分子实验技术的发展，在大规模流行病学调查中，PCR方法比传统的镜检方法更加高效、准确。该文搜集了部分用PCR方法检测、鉴定虫种的研究结果，综合比较了不同的PCR技术在实验方法、检测精度、现场检测等方面的优劣。

关键词：疟原虫疟疾检测鉴定 PCR

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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端基因导入烟草叶绿体的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第4期26卷 263-267页

作者：陈勤梁婉琪钱炳俊申慧峰曹建平徐馀信张大兵汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 上海交通大学上海交通大学-中国科学院上海生命科学研究院-美国宾州州立大学生命科学联合研究中心上海200240 上海交通大学农业与生物学院上海200240

目的将恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端msp1-42基因(3D7株)导入烟草叶绿体基因组中并进行同质化筛选,为利用叶绿体表达系统生产MSP1-42蛋白提供基础材料。方法利用烟草偏爱密码子设计克隆恶性疟原虫(3D7株)msp1-42基因的引物,从含msp1-4... 详细信息

目的将恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端msp1-42基因(3D7株)导入烟草叶绿体基因组中并进行同质化筛选,为利用叶绿体表达系统生产MSP1-42蛋白提供基础材料。方法利用烟草偏爱密码子设计克隆恶性疟原虫(3D7株)msp1-42基因的引物,从含msp1-42基因的pBluntmsp质粒中扩增出msp1-42,构建烟草叶绿体表达载体LRrrmsp。通过基因枪转化法转化烟草叶片,在500mg/L壮观霉素的选择压力下筛选抗性植株,采用PCR鉴定抗性植株的msp1-42基因及aadA基因,对鉴定阳性植株进行同质化筛选(叶片切碎、在含500mg/L壮观霉素分化培养基上分化出新的植株)3轮以上,并采用多重PCR分析其同质化情况。结果构建了恶性疟原虫msp1-42基因的叶绿体表达载体LRrrmsp。基因枪转化后获得6个转化子,转化频率为0.6个/枪。转化3～5d后,小块叶片开始增大增厚,并逐渐由绿色变为黄绿色,7～10d后黄化或白化,再经约30d的筛选培养,叶片上出现绿色小芽。PCR检测抗性植株的msp1-42及aadA基因,分别扩增出约900bp与500bp的条带,与预期相符。多重PCR分析从经过3轮同质化筛选植株的叶绿体基因中扩增出与未转基因烟草对照大小一致的弱条带,表明经过3轮同质化筛选的转基因植株仍含有未插入外源基因的叶绿体基因组。结论获得含恶性疟原虫msp1-42的烟草叶绿体表达载体,并将恶性疟原虫msp1-42基因导入烟草叶绿体基因组中,获得尚未完全同质化的转基因烟草。

关键词：恶性疟原虫叶绿体基因表达裂殖子表面蛋白1 植物疫苗

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恶性疟原虫氯喹敏感株与抗性株对青蒿素类药物体外敏感性的研究

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国际医学寄生虫病杂志 2008年第2期35卷 68-71页

作者：黄芳冯晓平周水森汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的测定恶性疟原虫氯喹敏感株与抗性株对青蒿素类药物的体外敏感性. 方法运用体外微量法与酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定青蒿琥酯、蒿甲醚及双氢青蒿素等3种青蒿素类抗疟药物对体外培养的恶性疟原... 详细信息

目的测定恶性疟原虫氯喹敏感株与抗性株对青蒿素类药物的体外敏感性. 方法运用体外微量法与酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定青蒿琥酯、蒿甲醚及双氢青蒿素等3种青蒿素类抗疟药物对体外培养的恶性疟原虫氯喹敏感株与氯喹抗性株的体外敏感性,并比较两种方法测定的IC50值. 结果体外微量法测定的3种药物对恶性疟原虫氯喹敏感株的IC50值依次为3.12 nmol/L、4.30 nmol/L、2.18 nmol/L,对恶性疟原虫氯喹抗性株的IC50值依次为4.31nmol/L、3.90 nmol/L、3.17 nmol/L;同时,将体外微量法与ELISA法所获的结果进行相关性分析,两种方法结果基本一致(r2=0.93,P＜0.001). 结论恶性疟原虫氯喹抗性株对青蒿素类药物无明显的交叉抗性;ELISA法可用于恶性疟原虫对抗疟药物的体外敏感性检测.

关键词：恶性疟原虫青蒿素类抗疟药物敏感性

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多斑按蚊复合体研究进展

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国际医学寄生虫病杂志 2008年第2期35卷 82-86页

作者：武松汤林华 200025 上海中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室 230038 合肥安徽中医学院中西医结合临床学院中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

多斑按蚊复合体主要分布于东南亚,其中的部分成员种是马来西亚、泰国、老挝和我国云南等地传疟媒介.该文对多斑按蚊复合体的形态与分子鉴别、地理分布、生态习性与传疟作用等方面进行了综述.

关键词：多斑按蚊生态习性分子生物学

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实时荧光定量PCR测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶基因表达的影响

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中国病原生物学杂志 2008年第4期3卷 288-291页

作者：黄芳汤林华陈博周水森王琴美中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 复旦大学生命科学学院遗传系上海200433

目的测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶（RNR）基因表达的影响。方法体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素及其衍生物DA78与DA79作用后,抽提总RNA,并合成相应的特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）... 详细信息

目的测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶（RNR）基因表达的影响。方法体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素及其衍生物DA78与DA79作用后,抽提总RNA,并合成相应的特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫RNR基因表达的影响。结果恶性疟原虫体外经瑞香素及其衍生物作用后的RNR基因扩增标准曲线在10^5～10^9拷贝（copies）/ml范围内呈良好的线性关系,R^2为0.997 52;瑞香素及其衍生物DA78与DA79对恶性疟原虫RNR作用后,其原始拷贝数分别为81 173.23、124 830.83和74 801.35,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,而瑞香素的铁螯合能力被饱和后,对该基因的表达未产生显著抑制（P〉0.01）。结论瑞香素类抗疟化合物体外抑制恶性疟原虫RNR的基因表达,RNR可能作为瑞香素类抗疟化合物抗疟作用的候选靶分子之一。

关键词：瑞香素疟原虫,恶性核糖核酸还原酶实时荧光定量聚合酶链反应

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日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因的克隆、表达及各虫期转录和表达情况的研究

日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因的克隆、表达及各虫期转录和...

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全国寄生虫学与热带医学学术研讨会

作者：孔娟冯正徐斌邓王平鞠川胡薇中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室华东理工大学生物工程学院

目的克隆和表达日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因1(SjAPRT1),并研究该基因在各虫期转录和蛋白表达情况。方法根据文献报道的SjAPRT1序列(GenBank Accesion:AAW24796)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,分析其在日本血吸虫各虫期转录本差... 详细信息

目的克隆和表达日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因1(SjAPRT1),并研究该基因在各虫期转录和蛋白表达情况。方法根据文献报道的SjAPRT1序列(GenBank Accesion:AAW24796)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,分析其在日本血吸虫各虫期转录本差异。将目的基因亚克隆至载体pET28a,转化至大肠埃希菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。纯化的蛋白免疫小鼠和家兔,Western blotting分析其免疫反应性及在各虫期蛋白表达差异。结果 RT-PCR扩增结果显示在虫卵、尾蚴、童虫和成虫均检测到SjAPRT1基因转录本(561bp),SjAPRT1基因亚克隆入pET28a并得到表达。Western blotting分析结果表明纯化的重组蛋白SjAPRT1可被日本血吸虫感染兔血清识别,各虫期中只有成虫蛋白可被SjAPRT1多抗兔血清识别,在Mr25 000处有特异性条带出现。结论日本血吸虫SjAPRT1基因在体外获得表达,并在日本血吸虫虫卵、尾蚴、童虫和成虫中均发现SjAPRT1基因转录本,但只在日本血吸虫成虫中检测到目的蛋白。其表达蛋白具有一定的抗原性,它有可能成为日本血吸虫疫苗的候选抗原和具有良好的免疫诊断价值。

关键词：日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶转录本抗原性

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