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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 475-478,483页

作者：逯兆喜吴亮姜旭淦沈玉娟傅行礼涂国华李礼陈盛霞曹建平江苏大学基础医学与医学技术学院镇江212013 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的比较安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)在人结肠腺癌(human ileocecal adenocarcinoma,HCT-8)细胞和人胃腺癌(human stomach adenocarcinoma,AGS)细胞中的增殖。方法取培养至对数生长期的HCT-8细胞和AGS细胞,接种于6孔培养板中,待细胞生长融合至60%～70%时,加入2.5×105个安氏隐孢子虫卵囊,培养至24 h和48 h,以Giemsa染色法和Real-time PCR技术检测虫体在细胞中的增殖。结果 Giemsa染色法观察24 h和48 h HCT-8细胞中虫体数量均高于AGS细胞(P<0.05)。Real-time PCR技术测得24 h和48 h HCT-8细胞中安氏隐孢子虫卵囊COWP基因拷贝数均高于AGS细胞(P<0.05)。结论与AGS细胞相比,以HCT-8细胞作为体外感染模型更利于安氏隐孢子虫的增殖。

关键词：安氏隐孢子虫 HCT-8细胞 AGS细胞 Giemsa染色 Real—time PCR

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我国细粒棘球绦虫新疆分离株AgB8/3亚基克隆表达及其检测囊型包虫病价值分析

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中国人兽共患病学报 2011年第11期27卷 966-969页

作者：高春花崔刚汪俊云杨玥涛石锋朱慧慧中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州地方病防治研究所阿图什845350

目的评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA... 详细信息

目的评价重组细粒棘球蚴AgB8/3亚基检测囊型包虫病价值。方法从新疆源细粒棘球蚴原头节中提取总RNA,通过RT-PCR扩增目的基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,IPTG诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法评价其诊断价值并与本课题组制备的重组AgB8/1和AgB8/2进行比较。结果酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒,并在原核细胞用IPTG成功诱导目的蛋白表达。rAgB8/3检测囊型包虫病患者血清的敏感度为55.9%(66/118);检测泡型包虫病患者血清阳性率为44.12%(15/34);59份其它寄生虫病患者血清中除3份囊尾蚴病人血清阳性外,其他均为阴性;50份健康者血清全部为阴性,总特异度为87.4%(125/143)。rAgB8/3检测的敏感度与rAgB8/1相当(P>0.05)而低于rAgB8/2(P<0.05);rAgB8/3检测的特异度与rAgB8/1和rAgB8/2均无统计学差异(P>0.05)。结论成功构建新疆源细粒棘球蚴pGEX-3X-AgB8/3重组质粒并在原核细胞表达,rAgB8/3检测囊型包虫病结果与rAgB8/1无统计学差异。

关键词：细粒棘球蚴 AgB8/3亚基基因克隆和表达 ELISA

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安乡县淘汰散放牛控制血吸虫病传播效果

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中国血吸虫病防治杂志 2011年第5期23卷 546-550页

作者：朱绍平李胜明魏成建杨其云鲁丙坤廖远志陈均安贾铁武湖南省安乡县血吸虫病防治工作领导小组办公室 415600 湖南省血吸虫病防治所中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病、丝虫病合作中心卫生部寄生虫与媒介生物学重点实验室

目的评价以传染源控制为主的血吸虫病综合防治策略在湖沼型流行区的实施效果。方法在湖南安乡县的2个邻近乡(镇)各选择7个行政村为试点村和对照村,每年均开展人畜化疗和易感地带灭螺等常规血防措施。2005年,在试点村淘汰所有存栏牛和羊... 详细信息

目的评价以传染源控制为主的血吸虫病综合防治策略在湖沼型流行区的实施效果。方法在湖南安乡县的2个邻近乡(镇)各选择7个行政村为试点村和对照村,每年均开展人畜化疗和易感地带灭螺等常规血防措施。2005年,在试点村淘汰所有存栏牛和羊,并辅以封洲禁牧、以机代牛、改水改厕等巩固措施。2005-2011年采取统一的调查方法对人群和钉螺感染情况进行跟踪观测。结果试点村人群感染率在干预后的第3年降至1%以下,垸外无感染螺。对照村第4年后感染率仍徘徊在2%～3%。淘汰牛等传染源控制措施使试点村近50%的人口免于感染或再感染血吸虫。结论淘汰或杜绝散放牛是湖沼型血吸虫病流行区传染源控制策略的核心技术,有助于该类疫区早日实现控制和阻断血吸虫病传播的远期目标。

关键词：血吸虫病湖沼型流行区传染源淘汰牛效果

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华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白免疫诊断价值的评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第3期29卷 172-176页

作者：周岩许学年姚恺龄张鸿满程娜包意芳张陆娟徐斌江河黎学铭 Peter Chun 冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 益思美诠生物科技(上海)有限公司上海201206 广西壮族自治区疾病预防控制中心南宁530028

目的应用华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白（rCs2）建立2种华支睾吸虫病免疫学检测方法,并进行初步评价。方法以可溶性rCs2作为诊断抗原,建立间接ELISA检测方法,并研制胶体金免疫层析检测（GICA）动力流体型试条,检测血清中的特异性... 详细信息

目的应用华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白（rCs2）建立2种华支睾吸虫病免疫学检测方法,并进行初步评价。方法以可溶性rCs2作为诊断抗原,建立间接ELISA检测方法,并研制胶体金免疫层析检测（GICA）动力流体型试条,检测血清中的特异性抗体。采用ELISA法和GICA试条共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性患者、15例日本血吸虫病患者、15例卫氏并殖吸虫病患者和13例猪囊尾蚴病患者的血清,以及33份健康人血清。为进一步评价诊断价值,8只新西兰兔各感染600个华支睾吸虫囊蚴,随机均分为感染组和治疗组,感染第56天,治疗组各兔给予吡喹酮治疗[150 mg/（kg.d）×2 d],用ELISA法和GICA法检测两组兔0~44周抗rCs2特异性抗体的消长。结果 ELISA法的敏感性为71.4%（25/35）,特异性为93.4%（71/76）,总符合率为86.5%（96/111）,与日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病和猪囊尾蚴病患者血清的交叉反应阳性率分别为1/15、1/15和1/13。GICA试条检测法的敏感性为85.7%（30/35）,特异性为92.1%（70/76）,总符合率为90.1%（100/111）。经ELISA检测,感染组兔自感染后第4周抗rCs2特异性抗体水平开始上升,于第6周达到高峰,随后快速下降,至第20周已呈较低水平;治疗组的特异性抗体消长趋势同感染组,同一时点的2组实验兔的抗体水平差异无统计学意义（P〉0.05）。GICA试条检测结果表明,2组兔血清均仅在4~16周检出阳性。结论以PPMPⅠ型抗原rCs2建立的间接ELISA方法和GICA动力流体型试条对华支睾吸虫病具有较好的诊断价值。

关键词：华支睾吸虫免疫学诊断 ELISA 胶体金免疫层析检测动力流体型血清学抗体消长

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日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白基因的克隆表达及鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2011年第4期23卷 406-411页

作者：王晓娜徐斌冯正王小宁胡薇华东理工大学生物工程学院上海200237 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心华南理工大学生物科学与工程学院

目的克隆、表达日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白(SjTollip)基因,并研究该基因在日本血吸虫各虫期的转录表达情况。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出Toll样受体相互作用蛋白基因进行体外扩增,并克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠埃希... 详细信息

目的克隆、表达日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白(SjTollip)基因,并研究该基因在日本血吸虫各虫期的转录表达情况。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出Toll样受体相互作用蛋白基因进行体外扩增,并克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物。制备日本血吸虫各虫期阶段总RNA和重组SjTollip蛋白免疫新西兰白兔的免疫兔血清,利用RT-PCR和蛋白质免疫印迹分析SjTollip基因在日本血吸虫各期转录表达的差异及重组SjTollip蛋白的免疫原性。结果构建了重组原核表达载体SjTollip/pET-28a,诱导获得以包涵体形式表达的不可溶重组蛋白,相对分子质量约为24000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符。纯化后的重组蛋白rSjTollip可被日本血吸虫感染兔血清识别。虫期转录特异性分析显示,该基因在尾蚴和雄虫中转录水平较低。免疫印迹分析结果显示,在虫卵、尾蚴、童虫、雄虫、雌虫各发育阶段都检测到该蛋白,但童虫和雌虫中表达水平明显升高。结论 SjTollip基因在日本血吸虫各发育阶段转录表达水平有较大差异,其有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。

关键词：日本血吸虫 Toll样受体相互作用蛋白虫期特异性克隆表达鉴定

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恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位预测及免疫学分析

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第3期38卷 140-143页

作者：陈勤张国庆徐馀信沈玉娟官亚宜冯晓平曹建平汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的对恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位进行预测，表达其重组蛋白并进行免疫学鉴定。方法利用生物信息学分析方法对MAL13P1．129基因的线性抗原表位进行预测，从亲水性、表面可及性、柔韧性及二级结构等方面对抗原表位进行筛选。... 详细信息

目的对恶性疟原虫MAL13P1．129基因的抗原表位进行预测，表达其重组蛋白并进行免疫学鉴定。方法利用生物信息学分析方法对MAL13P1．129基因的线性抗原表位进行预测，从亲水性、表面可及性、柔韧性及二级结构等方面对抗原表位进行筛选。人工合成经密码子优化的MAL13P1．129基因，构建至PET32a（＋）表达载体，获得PET32a129表达质粒，热激转化至宿主菌Rosettagami（DE3）中进行诱导表达，分别用抗His-标记的IgG及恶性疟患者的血清作Western印迹分析鉴定表达产物。结果MAL13P1．129基因具有2个潜在的抗原表位，分别位于氨基酸44～51、98～106。表达获得的重组蛋白与His-标记的IgG进行Western印迹有反应条带，与恶性疟患者血清无反应条带。结论MAL13P1．129蛋白具有2个抗原表位，其在大肠埃希菌中表达的重组蛋白能被His-标记的IgG识别，但不能被恶性疟患者血清识别。

关键词：恶性疟原虫抗原表位预测大肠杆菌基因表达

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一种新发寄生虫病实验室生物安全风险评估

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第2期38卷 125-128页

作者：熊彦红官亚宜曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

由隐孢子虫引起的以腹泻为主的隐孢子虫病属于新发寄生虫病的一种。在对隐孢子虫开展实验室研究的过程中，实验工作者处于实验室获得性感染的危险中。该文从生物学背景资料、实验活动可能产生的危害、实验人员的相关风险分析以及其他相... 详细信息

由隐孢子虫引起的以腹泻为主的隐孢子虫病属于新发寄生虫病的一种。在对隐孢子虫开展实验室研究的过程中，实验工作者处于实验室获得性感染的危险中。该文从生物学背景资料、实验活动可能产生的危害、实验人员的相关风险分析以及其他相关因素分析共4个方面对隐孢子虫病实验室生物安全进行了初步的风险评估，以期为从事隐孢子虫有关操作的实验室人员做好相关的风险评估及生物安全防护工作提供依据。

关键词：隐孢子虫病风险评估实验室生物安全隐孢子虫

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由阿尔及利亚输入我国的1例皮肤利什曼病

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第2期38卷 123-124页

作者：杨玥涛高春花石锋管立人汪俊云中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病源与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海 200025

病例：患者吴某某，男性，37岁，安徽巢湖市人，农民。主诉于2010年5月在胸、背、臂及臀部出现多个溃疡性皮肤损害，而来中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所就诊。

关键词：皮肤利什曼病阿尔及利亚中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所皮肤损害巢湖市溃疡性

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定性数据的主成分分析及其SAS实现

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中国预防医学杂志 2011年第12期12卷 991-994页

作者：徐俊芳李石柱贾铁武刘琴周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝病虫合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室

目的探讨主成分分析在定性数据分析中的应用及其SAS实现。方法采用分层整群抽样方法,随机抽取某血吸虫病流行区1 247户家庭进行问卷调查,并应用主成分分析法对居民家庭经济状况进行综合评价。结果 21个家庭经济状况的变量主要受前6个主... 详细信息

目的探讨主成分分析在定性数据分析中的应用及其SAS实现。方法采用分层整群抽样方法,随机抽取某血吸虫病流行区1 247户家庭进行问卷调查,并应用主成分分析法对居民家庭经济状况进行综合评价。结果 21个家庭经济状况的变量主要受前6个主成分的影响,6个主成分依次主要综合了一般的日常生活用品、家庭收支情况、家庭固有资产或不动产、高消费家庭生活用品、家庭农用机械及耕牛的信息。结论进行主成分分析时,应根据数据类型选用合适的主成分分析方法,可以获得更为客观的分析结论。

关键词：定性数据主成分分析评价

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应用FTA／PCR检测粪便中隐孢子虫的实验研究

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国际医学寄生虫病杂志 2011年第4期38卷 211-214页

作者：田利光张小萍陈韶红刘琴郭俭蔡玉春陈家旭周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 上海市疾病预防控制中心上海200336

目的建立用FTA／PCR检测粪便中隐孢子虫的技术，并与常用的商业化的粪便DNA抽提试剂盒进行比较。方法选择经病原学检测已经确诊的隐孢子虫阳性和阴性粪便，分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA，进行巢式PCR扩增，对PC... 详细信息

目的建立用FTA／PCR检测粪便中隐孢子虫的技术，并与常用的商业化的粪便DNA抽提试剂盒进行比较。方法选择经病原学检测已经确诊的隐孢子虫阳性和阴性粪便，分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA，进行巢式PCR扩增，对PCR阳性产物进行测序并利用BLAST在NCBI上与GenBank数据库进行比对，做同源性分析，确定虫种。结果应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA，无论是否反复冻融破壁，2个阳性对照样本扩增出目的片段，另3个阳性样本未扩增出特异性条带。样本纯化后应用FTA卡抽提DNA进行PCR检测，所有阳性粪样均扩增出830bp左右的目的片段，通过测序和比对，其中2个为贝氏隐孢子虫，1个为火鸡隐孢子虫。结论应用FTA进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点，可以应用于粪便中隐孢子虫的检测。

关键词：隐孢子虫巢式PCR 检测

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