检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药学杂志 2005年第14期40卷 1080-1082页

作者：徐希明沈玉萍余江南皋古云曹建平江苏大学药学院江苏镇江212001 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原和媒介生物学重点实验室上海200025

目的制备缓释疫苗微球。方法以聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)为载体,醋酸乙酯为有机溶剂,采用W/O/W溶剂扩散法制备PELA疫苗微球。扫描电子显微镜观察微球的形态,激光散射技术测定其粒径分布;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)研究微球包裹... 详细信息

目的制备缓释疫苗微球。方法以聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)为载体,醋酸乙酯为有机溶剂,采用W/O/W溶剂扩散法制备PELA疫苗微球。扫描电子显微镜观察微球的形态,激光散射技术测定其粒径分布;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)研究微球包裹前后疫苗蛋白的稳定性;BCA法测定疫苗微球的载药量和包封率,同时考察疫苗微球的体外释药性能。结果所得微球呈类球形,平均粒径为5.38μm,疫苗微球载药量为5.12%,包封率达75.25%;包裹前后疫苗蛋白的结构稳定; 体外释药结果显示,疫苗微球前3 d以Higuchi方程(r=0.997 7)释放,3 d后则以零级恒速释放(r=0.992 2),28 d累积释药量为69.10%。结论以PELA为载体的疫苗微球具有较高的包封率、载药量和明显的缓释效果。

关键词：聚乳酸-聚乙二醇共聚物微球疫苗缓释

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微小隐孢子虫卵囊DNA提取及用于PCR检测

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第4期23卷 228-230页

作者：沈玉娟曹建平卢潍媛李小红刘海鹏徐馀信周晓农汤林华刘述先中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因... 详细信息

目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因序列(L16996)设计一对寡核苷酸引物,分别对3种方法制备模板进行PCR扩增分析。Chelex-100提取的DNA也用于观察PCR检测的敏感性。结果3种方法制备的微小隐孢子虫卵囊模板用于PCR检测均获得1条446 bp条带,Chelex-100提取的DNA用于PCR检测的敏感性至少达0.5个卵囊。结论3种方法提取的微小隐孢子虫卵囊DNA均可用于PCR检测,Chelex-100法是一种高效而快速的微量提取DNA方法,适用于对隐孢子虫DNA的检测。

关键词：微小隐孢子虫卵囊脱氧核精核酸分离和提纯螯合树脂法聚合酶链反应

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血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅱ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗小鼠保护性免疫研究

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中国血吸虫病防治杂志 2005年第4期17卷 255-259页

作者：曹建平徐馀信韩海勃宋光承李小红卢潍媛沈玉娟刘述先中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的观察日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白DNA疫苗(pcDNA3-SjcTrx)在小鼠诱导抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法制备pcDNA3-SjcTrx重组质粒,将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只:pcDNA3-SjcTrx核酸疫苗免疫组、pcDNA3空质粒对照组... 详细信息

目的观察日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白DNA疫苗(pcDNA3-SjcTrx)在小鼠诱导抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法制备pcDNA3-SjcTrx重组质粒,将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只:pcDNA3-SjcTrx核酸疫苗免疫组、pcDNA3空质粒对照组和攻击感染对照组。核酸疫苗免疫组每只小鼠经股四头肌注射100μg核酸疫苗,共注射3次,间隔2周。空质粒对照组每只小鼠在相应时间经股四头肌注射100μgpcDNA3空质粒,感染对照组则不注射任何质粒。于末次免疫后3周,每只小鼠经腹部感染(30±1)条日本血吸虫尾蚴。小鼠于攻击感染后42天剖杀,门脉灌注收集成虫,计数成虫数和肝内虫卵数。分别在免疫前、攻击感染前和小鼠剖杀前采血并分离血清,用ELISA检测血清中特异性IgG抗体。另取6只雌性C57BL/6小鼠经股四头肌注射核酸疫苗,分别于注射后24、48小时和72小时取肌肉注射部位局部组织制备冰冻切片,用免疫酶染色试验(IEST)检测注射局部组织抗原的表达情况,以注射pcDNA3空质粒者为对照。结果IEST结果表明该DNA疫苗在小鼠肌肉组织内表达,ELISA检测表明DNA疫苗免疫小鼠后产生明显的抗体(IgG)免疫应答,并诱导出对攻击感染的45.7%的减虫率和41.4%的肝组织减卵率(P<0.05)。结论日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白DNA疫苗具有较好的免疫原性,在小鼠诱导出明显的免疫保护作用,可作为疫苗候选分子作进一步的研究。

关键词：日本血吸虫硫氧还蛋白 DNA疫苗小鼠免疫保护作用

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血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅰ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗的构建和鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2005年第4期17卷 250-254页

作者：曹建平韩海勃刘述先中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的构建日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白(Trx)DNA疫苗(pcDNA3-SjcTrx),并进行分子生物学鉴定。方法根据日本血吸虫菲律宾株Trx基因序列设计一对引物,上游引物引入BamHI酶切位点和起始密码子ATG,下游引物引入EcoRI酶切位点和终止密码子TC... 详细信息

目的构建日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白(Trx)DNA疫苗(pcDNA3-SjcTrx),并进行分子生物学鉴定。方法根据日本血吸虫菲律宾株Trx基因序列设计一对引物,上游引物引入BamHI酶切位点和起始密码子ATG,下游引物引入EcoRI酶切位点和终止密码子TCA。以日本血吸虫大陆株成虫总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增日本血吸虫大陆株Trx(SjcTrx)编码基因。经双酶切并纯化的PCR产物与经双酶切纯化的pcDNA3质粒DNA片段用T4DNA连接酶连接,克隆入真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3-SjcTrx,并经限制性内切酶双酶切、琼脂糖凝胶电泳、PCR检测和核苷酸序列测定进行鉴定。结果SjcTrx编码基因RT-PCR产物约334bp,构建的pcDNA3-SjcTrx重组质粒DNA经限制性内切酶双酶切和PCR扩增产物于琼脂糖凝胶电泳均观察到相同大小基因片段,根据核苷酸序列测定结果推导的氨基酸序列与日本血吸虫菲律宾株和曼氏血吸虫Trx分别有97%和43%的同源性。结论日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白DNA疫苗构建成功,为开展动物保护性免疫试验创造了条件。

关键词：日本血吸虫硫氧还蛋白真核表达载体核酸疫苗小鼠免疫

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犬钩虫特异性抗原基因的克隆与表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第1期21卷 12-15页

作者：郭湘荣薛海筹李铁华刘森中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病与媒介生物学重点实验室上海200025

目的　寻找可诱发宿主保护性免疫力的犬钩虫特异性抗原。　方法　用犬钩蚴免疫获得保护性免疫力的家犬血清 ,免疫筛选犬钩虫期幼虫 λZAP c DNA文库 ,阳性克隆基因经测序 ,在质粒 PUC18、PET2 8中进行一系列亚克隆 ,重组 p ET2 8C质... 详细信息

目的　寻找可诱发宿主保护性免疫力的犬钩虫特异性抗原。　方法　用犬钩蚴免疫获得保护性免疫力的家犬血清 ,免疫筛选犬钩虫期幼虫 λZAP c DNA文库 ,阳性克隆基因经测序 ,在质粒 PUC18、PET2 8中进行一系列亚克隆 ,重组 p ET2 8C质粒诱导表达并对表达产物进行 SDS- PAGE和 Western blotting分析。　结果　从 c DNA文库中筛获 5个相同的阳性克隆 ,携带的犬钩虫抗原 (Ac Ag)外源基因片段在原核体系 (p ET2 8C)中表达分子量为 4 3k Da的融合蛋白。 Western blotting分析该重组蛋白可与筛库的犬血清反应。　结论　 Ac Ag为新的犬钩虫特异性抗原 ,其基因与美丽纤杆线虫 (Caenorhabditis elegans)基因 unc- 89同源性为 35 %。该抗原诱发宿主保护性免疫力及作为疫苗的潜力值得进一步研究。

关键词：犬钩虫抗原免疫筛选克隆钩虫病基因表达

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旋毛虫死活快速鉴别的实验研究

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中国兽医寄生虫病 2003年第4期11卷 21-22页

作者：沈玉娟常正山张永年中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

为了寻找快速鉴别旋毛虫死活的染色方法。用 0 .0 3 %美蓝、美蓝 -伊红 -硼砂染液 (M.E.B)和 1%中性红3种染液 ,对死或活旋毛虫幼虫和成虫进行染色。结果 3种染液均能使死亡旋毛虫幼虫在 1分钟内着色 ,活虫则不着色。 3种染液对旋毛虫... 详细信息

为了寻找快速鉴别旋毛虫死活的染色方法。用 0 .0 3 %美蓝、美蓝 -伊红 -硼砂染液 (M.E.B)和 1%中性红3种染液 ,对死或活旋毛虫幼虫和成虫进行染色。结果 3种染液均能使死亡旋毛虫幼虫在 1分钟内着色 ,活虫则不着色。 3种染液对旋毛虫死、活成虫均不着色。结论认为

关键词：旋毛虫幼虫成虫美蓝 M.E.B. 中性红染色

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云南西双版纳勐腊并殖吸虫成虫扫描电镜观察

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中国兽医寄生虫病 2003年第3期11卷 1-2,F002,F003页

作者：陈韶红常正山沈炳贵陈名刚张永年冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

　目的是通过扫描电镜(SEM)观察勐腊并殖吸虫成虫体棘、口、腹吸盘,为鉴别其虫种提供资料。方法为直接从人工感染的猫体内解剖取出勐腊并殖吸虫成虫,用2.5%戊二醛和1%锇酸固定后,乙醇脱水,离子溅射仪镀金,JSM-820扫描电镜观察。结果表... 详细信息

　目的是通过扫描电镜(SEM)观察勐腊并殖吸虫成虫体棘、口、腹吸盘,为鉴别其虫种提供资料。方法为直接从人工感染的猫体内解剖取出勐腊并殖吸虫成虫,用2.5%戊二醛和1%锇酸固定后,乙醇脱水,离子溅射仪镀金,JSM-820扫描电镜观察。结果表明云南西双版纳瑶瓦区阿括拿青(阿括拿青)虫体的体棘均为丛生型皮棘。新回宽寨老熊青(老熊青)虫体体棘在腹吸盘上方以单棘为主,偶见双棘。腹吸盘下方,为单双棘混合存在。结论认为从SEM形态观察发现勐腊两个不同点采集的勐腊并殖吸虫形态上不完全相同,存在一定的差异。

关键词：勐腊并殖吸虫成虫扫描电镜鉴别体棘吸盘生殖孔感觉乳突

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我国五省斯氏并殖吸虫群体形态学的分类地位研究

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中国兽医寄生虫病 2003年第1期11卷 4-7,F003页

作者：崔爱利常正山陈名刚 David.Blair 陈韶红张永年冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 James Cook University of Australia

　目的在于从形态学角度研究我国五省(广东、福建、云南、湖北、四川)斯氏并殖吸虫各群体之间的种内差异以及四川并殖吸虫独立性问题。并比较宫崎、泡囊并殖吸虫与斯氏并殖吸虫在形态学方面的种间差异。应用光镜方法分别观察五省斯氏并... 详细信息

　目的在于从形态学角度研究我国五省(广东、福建、云南、湖北、四川)斯氏并殖吸虫各群体之间的种内差异以及四川并殖吸虫独立性问题。并比较宫崎、泡囊并殖吸虫与斯氏并殖吸虫在形态学方面的种间差异。应用光镜方法分别观察五省斯氏并殖吸虫成虫染色标本的主要形态特征并对表型观察指标(成虫长宽比例、睾丸长度与体长比例、口腹吸盘比例)进行统计学分析。从形态学方面观察结果来看,五省斯氏并殖吸虫群体之间存在的差异较小,其中四川并殖吸虫与斯氏并殖吸虫之间存在的差异也不大。泡囊并殖吸虫在形态学方面与斯氏并殖吸虫各地域株也较为相似。日本的宫崎并殖吸虫在形态学方面与斯氏并殖吸虫福建地域株最为接近。结论,其一综合以上形态学的研究结果,广东、福建、云南、湖北和四川五省斯氏并殖吸虫群体可能均属斯氏并殖吸虫同一虫种,由于受地理因素影响,种内可能存在着不同的地域株。四川并殖吸虫与斯氏并殖吸虫可能系同种异名。其二泡囊并殖吸虫与日本的宫崎并殖吸虫很可能也是斯氏并殖吸虫的同种异名。为进一步明确五省斯氏并殖吸虫群体及泡囊并殖吸虫与日本的宫崎并殖吸虫的分类地位尚需结合分子生物学的研究进行综合分析。

关键词：斯氏并殖吸虫形态学分类地位地域株中国省份

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卫氏并殖吸虫染色体制备方法的改进

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2002年第3期20卷 155-157页

作者：陈韶红常正山陈名刚张永年冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的　改进卫氏并殖吸虫染色体的制备方法 ,以利于并殖吸虫染色体核型的分析。　方法　将浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫成虫通过秋水仙胺作用后分离睾丸 ,所用试剂均进行预温 ,通过低渗、固定、制片和染色等处理。　结果　浙江永嘉地区卫氏... 详细信息

目的　改进卫氏并殖吸虫染色体的制备方法 ,以利于并殖吸虫染色体核型的分析。　方法　将浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫成虫通过秋水仙胺作用后分离睾丸 ,所用试剂均进行预温 ,通过低渗、固定、制片和染色等处理。　结果　浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫染色体采用改进后的制备方法 ,效果好。该虫染色体数 2n =2 2 ,核型公式 :2m +6sm +1 4t。　结论　改进后的染色体制备方法操作简便 ,染色体清晰 ,可读性好 ,便于进行核型分析。

关键词：制备方法卫氏并殖吸虫染色体核型

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