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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 218-225页

作者：肖树华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

全球有2亿人感染血吸虫,其治疗仅依赖吡喹酮一种药物是很不相适应的。吡喹酮虽有很好的治疗效果,但无预防作用,故发展抗血吸虫新药倍受关注。本文综述近年来报道的恶二唑-2-氧化物和甲氟喹等抗血吸虫新药的实验研究,阐述这些药物的发展... 详细信息

全球有2亿人感染血吸虫,其治疗仅依赖吡喹酮一种药物是很不相适应的。吡喹酮虽有很好的治疗效果,但无预防作用,故发展抗血吸虫新药倍受关注。本文综述近年来报道的恶二唑-2-氧化物和甲氟喹等抗血吸虫新药的实验研究,阐述这些药物的发展过程,及其抗血吸虫特点。

关键词：血吸虫血吸虫病恶二唑-2-氧化物甲氟喹吡喹酮

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甲氟喹单剂口服治疗对小鼠体内日本血吸虫成虫皮层的损害(英文)

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 1-7页

作者：肖树华薛剑沈炳贵中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的观察甲氟喹对感染小鼠体内日本血吸虫成虫皮层的损害。方法12只雌性昆明小鼠每鼠感染60～80条日本血吸虫尾蚴,其中10只小鼠于感染后35d用甲氟喹单剂400mg/kg口服治疗,治疗后8h、24h、3d、7d和14d分别剖杀2只,用灌注法收集血吸虫,常... 详细信息

目的观察甲氟喹对感染小鼠体内日本血吸虫成虫皮层的损害。方法12只雌性昆明小鼠每鼠感染60～80条日本血吸虫尾蚴,其中10只小鼠于感染后35d用甲氟喹单剂400mg/kg口服治疗,治疗后8h、24h、3d、7d和14d分别剖杀2只,用灌注法收集血吸虫,常规方法固定、逐级乙醇脱水和临界点干燥器干燥,用扫描电镜观察,另2只未治疗的感染小鼠取虫作对照。结果甲氟喹给药后8h,雌、雄虫即示虫体局部肿大,有广泛的皮层褶嵴肿胀、紧密接触和融合,并有少数感觉结构(sensory structure)肿大或部分有破溃。给药后24h,雄虫和雌虫头部高度肿大,并伴有严重的口吸盘损害。给药后3d,虫体普遍出现局部肿大,雌、雄虫的受损皮层融合形成大的块状物,突出于体表,并见局灶性或广泛的皮层剥落,或因肿大的感觉结构破溃形成洞样外观。给药后7d,甲氟喹引起的虫体局部肿大和皮层损害与给药后3d相仿,并见局灶性皮层剥落、肿大,感觉结构的破溃和雌、雄虫口吸盘毁形。给药后14d,个别存活雄虫的虫体仍有轻度局部肿大,但其头部皮层褶嵴正常。结论甲氟喹可引起血吸虫成虫虫体局部肿大和广泛严重的皮层损害。

关键词：甲氟喹日本血吸虫血吸虫病扫描电镜术

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日本血吸虫肌球蛋白调节轻链的原核克隆表达及虫期转录特异性

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 17-20页

作者：钱门宝徐斌孔娟鞠川冯正胡薇中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的在原核系统中克隆表达日本血吸虫肌球蛋白调节轻链(SjMRLC)并分析其基因的虫期转录特异性。方法根据SjMRLC的核苷酸序列(GenBank登录号为AY815219)设计特异性引物,PCR扩增目的基因,并克隆入原核表达载体pGEX4T-3;转至大肠埃希菌BL21... 详细信息

目的在原核系统中克隆表达日本血吸虫肌球蛋白调节轻链(SjMRLC)并分析其基因的虫期转录特异性。方法根据SjMRLC的核苷酸序列(GenBank登录号为AY815219)设计特异性引物,PCR扩增目的基因,并克隆入原核表达载体pGEX4T-3;转至大肠埃希菌BL21株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达;蛋白质印迹分析(Western blotting)鉴定表达产物;提取日本血吸虫各虫期总RNA,反转录成cDNA,PCR扩增分析SjMRLC基因的虫期转录特异性。结果构建pGEX 4T-3/SjMRLC重组质粒,测序表明插入的外源基因片段正确,诱导表达获得带有GST标签的可溶性蛋白(Mr49000);虫期转录特异性分析显示该基因在日本血吸虫各个虫期均有转录,且水平一致。结论成功获得可溶性的带有GST标签的SjMRLC;SjMRLC是管家基因。

关键词：日本血吸虫肌球蛋白调节轻链克隆表达虫期转录特异性

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日本血吸虫可溶性虫卵抗原经两种免疫途径获得的鸡卵黄抗体IgY动态观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第2期28卷 121-124页

作者：蔡玉春陈家旭郭俭陈韶红童小妹田利光中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的对比两种免疫途径产生抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的特异性IgY抗体水平动态变化。方法7只新西兰兔感染日本血吸虫尾蚴(1500/只)42d后解剖收集虫卵,制备SEA。将SEA分别经皮下和静脉注射免疫健康海蓝蛋鸡(3只/组),首次和第2次免... 详细信息

目的对比两种免疫途径产生抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的特异性IgY抗体水平动态变化。方法7只新西兰兔感染日本血吸虫尾蚴(1500/只)42d后解剖收集虫卵,制备SEA。将SEA分别经皮下和静脉注射免疫健康海蓝蛋鸡(3只/组),首次和第2次免疫间隔2周,之后每次间隔4周,共免疫5次,50μg/(只·次)。取两组免疫前,以及首次免疫后2～18周生产的鸡蛋,用水稀释法粗提IgY,ELISA检测每2周IgY的动态变化。IgY纯化试剂盒(EGGstract IgY Purifiction System)纯化静脉组首次免疫后8～18周的IgY,紫外吸收法检测抗体浓度,琼脂糖双扩散法和ELISA检测IgY峰值水平的抗体效价,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析比较免疫前后抗体特异性。结果静脉组和皮下组分别在首次免疫后8和12周IgY抗体水平达高峰,A492值分别为1.28和0.78,静脉组IgY水平至18周仍维持较高水平,皮下组抗体水平达到峰值后逐渐下降。纯化后IgY浓度约为6.5～9.0mg/ml,琼脂糖双扩散法和ELISA测得静脉注射组峰值水平抗体效价分别为1∶16和1∶51200。经SDS-PAGE和Western blotting分析,纯化后的IgY在相对分子质量(Mr)25000和68000处各有一条清晰条带,且免疫后IgY可与SEA发生特异性反应。结论静脉注射法比皮下注射法能获得更高水平的鸡抗日本血吸虫SEA特异性IgY抗体,且纯化后的IgY抗体具有较好的特异性。

关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原 IgY 免疫

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按蚊中肠细菌及其应用的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第5期28卷 372-376页

作者：李美汤林华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

按蚊中肠细菌能够在控制传疟按蚊种群数量和抑制疟原虫在按蚊体内的发育等方面发挥重要作用。本文从细菌与按蚊的食物关系、按蚊幼虫和成蚊中肠细菌及其应用、细菌在按蚊体内的经发育期传递、细菌与按蚊成蚊的免疫反应,以及利用细菌防... 详细信息

按蚊中肠细菌能够在控制传疟按蚊种群数量和抑制疟原虫在按蚊体内的发育等方面发挥重要作用。本文从细菌与按蚊的食物关系、按蚊幼虫和成蚊中肠细菌及其应用、细菌在按蚊体内的经发育期传递、细菌与按蚊成蚊的免疫反应,以及利用细菌防控疟疾流行的可行性等方面进行综述。

关键词：按蚊细菌疟原虫食物免疫反应

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6种抗蠕虫药物治疗小鼠尖吻蝮蛇舌状虫感染的疗效观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第4期28卷 277-279页

作者：徐莉莉薛剑张永年强慧琴肖树华中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室、世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的观察吡喹酮、甲苯达唑、三苯双脒、伊维菌素、蒿甲醚和双氢青蒿素对感染舌状虫小鼠的疗效。方法 35只小鼠每鼠口服感染40个尖吻蝮蛇舌状虫虫卵25～37周后,分为10组,每组2～8只,其中9组分别用吡喹酮500mg/(kg·d)×5d、500mg... 详细信息

目的观察吡喹酮、甲苯达唑、三苯双脒、伊维菌素、蒿甲醚和双氢青蒿素对感染舌状虫小鼠的疗效。方法 35只小鼠每鼠口服感染40个尖吻蝮蛇舌状虫虫卵25～37周后,分为10组,每组2～8只,其中9组分别用吡喹酮500mg/(kg·d)×5d、500mg/(kg·d)×14d,甲苯达唑300mg/(kg·d)×5d,三苯双脒300mg/(kg·d)×5d,伊维菌素8mg/(kg·d)×3d、10mg/(kg·d)×3d和15mg/(kg·d)×14d、蒿甲醚400mg/(kg·d)×5d和双氢青蒿素200mg/(kg·d)×5d治疗,余1组不治疗为对照组。治毕后1～3周剖检小鼠,自腹壁和内脏剥离含有若虫的囊包,观察其在生理盐水中的活动情况并计数。结果感染尖吻蝮蛇舌状虫的小鼠用吡喹酮、甲苯达唑、三苯双脒、伊维菌素、蒿甲醚和双氢青蒿素治疗,各组的平均若虫数与对照组的差异均无统计学意义(P>0.05),减虫率为8.3%～35.0%。在剖检受治鼠过程中未查见异常的若虫囊包,若虫的形态、色泽、大小和在生理盐水中的活动均与对照组相仿。结论吡喹酮、甲苯达唑、三苯双脒、伊维菌素、蒿甲醚和双氢青蒿素在所用的实验条件下对小鼠的尖吻蝮蛇舌状虫若虫感染疗效不佳。

关键词：尖吻蝮蛇舌状虫若虫抗蠕虫药物治疗

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中华按蚊实验室种群中肠内细菌菌群分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第2期28卷 143-147页

目的为获取实验室饲养的3个发育期中华按蚊中肠内的革兰氏阴性菌菌株。方法取实验室饲养的20只中华按蚊吸血成蚊的中肠,研磨稀释后涂板培养,挑取单个菌落,培养扩增。以各菌株的DNA为模板,对16SrRNA基因的V3高变区进行PCR扩增、测序和Bl... 详细信息

目的为获取实验室饲养的3个发育期中华按蚊中肠内的革兰氏阴性菌菌株。方法取实验室饲养的20只中华按蚊吸血成蚊的中肠,研磨稀释后涂板培养,挑取单个菌落,培养扩增。以各菌株的DNA为模板,对16SrRNA基因的V3高变区进行PCR扩增、测序和Blast分析。对经鉴定的各类细菌进行革兰氏染色。以中华按蚊的Ⅳ龄幼虫(10只)、刚羽化雌成蚊(50只)和吸血雌成蚊(20只)等3个发育期的中肠基因组DNA为模板,用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)分析3个发育期中肠细菌16SrDNAV3区序列;建立在3个发育期均存在的16SrDNAV3区的克隆文库,并进行测序分析。将两种方法获得的16SrDNAV3区序列进行亲缘关系分析,确定同种的革兰氏阴性菌。结果从吸血成蚊的中肠分离到28个菌株,经分类鉴定为5种细菌,除短芽孢杆菌革兰氏染色呈阳性外,气单孢菌、丛毛单胞菌、金黄杆菌和A4菌均为革兰氏阴性菌。DGGE分析显示,共检测到4组条带在3个发育期均存在,经序列分析来源于5种细菌,分别为气单孢菌、A4菌、假单胞菌、无色杆菌和某未知菌种,其中气单孢菌(GQ301543)和A4菌(FJ8701127)来源的16SrDNAV3区与分离得到的该两种菌株的序列一致性均为100%。结论获得2种在中华按蚊3个发育期中肠内均存在的革兰氏阴性菌株,分别为气单孢菌和A4菌。

关键词：中华按蚊细菌菌群克隆文库变性梯度凝胶电泳革兰氏阴性菌

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用多重PCR技术检测小管福寿螺体内广州管圆线虫幼虫

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第5期28卷 355-358页

作者：危芙蓉刘和香吕山胡玲张仪中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所.卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的建立一种多重PCR方法检测小管福寿螺体内的广州管圆线虫幼虫。方法根据广州管圆线虫核糖体小亚基rDNA基因序列(GenBank登录号为AY295804)设计特异性引物,并与小管福寿螺16srDNA的特异性引物组合,建立多重PCR检测方法。分别以阳性和... 详细信息

目的建立一种多重PCR方法检测小管福寿螺体内的广州管圆线虫幼虫。方法根据广州管圆线虫核糖体小亚基rDNA基因序列(GenBank登录号为AY295804)设计特异性引物,并与小管福寿螺16srDNA的特异性引物组合,建立多重PCR检测方法。分别以阳性和阴性小管福寿螺DNA为模板进行多重PCR扩增,电泳鉴定并测序。用阴性小管福寿螺DNA倍比稀释200条广州管圆线虫Ⅲ期幼虫DNA模板,使之浓度分别为1200ng/μl、120ng/μl、12ng/μl、1200pg/μl、120pg/μl和12pg/μl,检测该方法的敏感性。野外采集小管福寿螺172只,肺检法检测后,进行多重PCR扩增,计算敏感性和特异性。结果电泳和测序结果证实该多重PCR检测方法能有效扩增出目的片段,小管福寿螺和广州管圆线虫的目的片段分别为550和405bp。该方法可检测出广州管圆线虫Ⅲ期幼虫DNA的最小浓度为120pg/μl。肺检法和多重PCR法检测均为阳性结果的45只,两法均为阴性的100只。肺检法为阴性、多重PCR法为阳性的24只,肺检法为阳性而多重PCR法检测为阴性的3只。多重PCR的敏感性和特异性分别为93.8%(45/48)和80.6%(100/124)。多重PCR法的阳性检出率为40.1%(69/172),肺检法阳性检出率为27.9%(48/172),差异具有统计学意义(χ2=14.8,P<0.01)。结论建立了检测小管福寿螺体内广州管圆线虫的多重PCR方法。

关键词：广州管圆线虫多重PCR 检测小管福寿螺

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三苯双脒和阿苯达唑治疗感染旋毛虫小鼠的疗效观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 8-11页

作者：薛剑肖树华徐莉莉张永年强慧琴中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的观察三苯双脒和阿苯达唑对感染旋毛虫小鼠的疗效。方法将85只昆明小鼠(每鼠感染旋毛虫幼虫100条)分成3组,A组(成虫期,即感染后5d)、B组(幼虫移行期,即感染后15d)和C组(幼虫成囊期,即感染后35d)。A组小鼠35只,均分为7组,三苯双脒和... 详细信息

目的观察三苯双脒和阿苯达唑对感染旋毛虫小鼠的疗效。方法将85只昆明小鼠(每鼠感染旋毛虫幼虫100条)分成3组,A组(成虫期,即感染后5d)、B组(幼虫移行期,即感染后15d)和C组(幼虫成囊期,即感染后35d)。A组小鼠35只,均分为7组,三苯双脒和阿苯达唑各治疗3组,两药给药剂量相同,分别为顿服6.25、12.5和25mg/kg,另设1组为对照组。B、C两组各25只小鼠,各均分为5组,三苯双脒和阿苯达唑各治疗2组,两药给药剂量相同,分别为100和200mg/(kg·d),另各设1组为对照组。A组小鼠治疗后2d处死,计数小肠内成虫。B、C两组小鼠连续治疗7d,治疗结束后15d处死,剖取全部膈肌,消化液消化,镜下计数幼虫。计算各组平均虫数和减虫率,统计分析各组治疗效果。结果A组,三苯双脒各组平均成虫数均显著少于对照组(P<0.01),减虫率分别为63.3%、86.2%和98.5%;阿苯达唑6.25和12.5mg/kg组的平均成虫数与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),但25mg/kg组的平均成虫数则少于对照组(P<0.05),减虫率为41.2%。B组,两种药物平均虫数都显著少于对照组(P<0.01),三苯双脒治疗组减虫率分别为64.4%和89.6%,阿苯达唑组减虫率分别为56.7%和78.4%。C组,仅阿苯达唑200mg/(kg·d)组的平均幼虫(成囊期)数显著少于对照组(P<0.01),减虫率为71.8%,其余各组均无效。结论三苯双脒对小鼠旋毛虫成虫和移行期幼虫有较好的疗效,但对成囊期幼虫无效。较大剂量阿苯达唑对小鼠旋毛虫成虫、移行期和成囊期幼虫均有效。

关键词：三苯双脒阿苯达唑旋毛虫成虫幼虫移行期幼虫成囊期疗效

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宿主树突状细胞与血吸虫感染

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第1期28卷 67-71页

作者：李小红汤林华曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

树突状细胞是目前已知的功能最强的一类抗原呈递细胞,是连接固有免疫和获得性免疫的桥梁,近年来研究进展显著。在血吸虫病领域的研究发现,宿主树突状细胞经血吸虫感染刺激后的表型与常规成熟的表型不同。研究血吸虫感染与宿主树突状细... 详细信息

树突状细胞是目前已知的功能最强的一类抗原呈递细胞,是连接固有免疫和获得性免疫的桥梁,近年来研究进展显著。在血吸虫病领域的研究发现,宿主树突状细胞经血吸虫感染刺激后的表型与常规成熟的表型不同。研究血吸虫感染与宿主树突状细胞之间的相互作用将有助于丰富该类细胞的生物学研究,也将为血吸虫病的疫苗和治疗研究提供支撑。

关键词：树突状细胞血吸虫

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