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中国人兽共患病学报 2012年第4期28卷 367-370,379页

作者：张玲玲陈家旭陈韶红蔡玉春郭俭中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的分析尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原的蛋白组成、免疫特性及在舌形虫病诊断中的诊断效果。方法自感染尖吻蝮蛇舌形虫虫卵4个月的小鼠体内取尖吻蝮蛇舌形虫若虫,匀浆,用盐析法制备抗原。以此粗制抗原包被微量反应板,用间接ELISA方法检测... 详细信息

目的分析尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原的蛋白组成、免疫特性及在舌形虫病诊断中的诊断效果。方法自感染尖吻蝮蛇舌形虫虫卵4个月的小鼠体内取尖吻蝮蛇舌形虫若虫,匀浆,用盐析法制备抗原。以此粗制抗原包被微量反应板,用间接ELISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人、感染小鼠及其它寄生虫病人血清中的特异性IgG抗体。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western Blot)技术分析该粗制抗原的有效抗原蛋白组分。结果 ELISA方法检测尖吻蝮蛇舌形虫病人血清5份,正常人血清17份,感染小鼠、血吸虫病、肺吸虫病、肝吸虫病、囊虫病、旋毛虫病病人血清各20份,蛔虫病、钩虫病、鞭虫病病人血清各10份,发现舌形虫病人和感染小鼠血清均为阳性,其它寄生虫病人血清均为阴性。经SDS-PAGE和Western Blot分析,尖吻蝮蛇舌形虫成虫粗抗原可见5条主带和14条次带(Mr16-200kDa);若虫粗抗原可见9条主带和13条次带(Mr16-150kDa),其中有16条特异性条带可被感染小鼠血清识别,5条特异性条带可被舌形虫病人血清识别,与肺吸虫病、鞭虫病病人血清在约Mr34kDa附近处出现较微弱的交叉反应带,同其它寄生虫病人血清未出现交叉反应带。结论尖吻蝮蛇舌形虫若虫粗抗原同其它寄生虫病的交叉反应较小,可用于尖吻蝮蛇舌形虫病的血清学检测,而其有效的诊断抗原成分需经纯化后再行进一步的分析。

关键词：舌形虫病尖吻蝮蛇舌形虫粗抗原 ELISA Western Blot

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腹泻病人隐孢子虫及其他原虫感染粪样检测分析

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中国人兽共患病学报 2012年第8期28卷 815-819页

作者：陈韶红艾琳田利光张永年童小妹李浩陈家旭中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的检测分析腹泻病人粪便中隐孢子虫及其他原虫感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据。方法用直接涂片法、碘液染色、改良抗酸染色法和金胺酚染色法作为病原学检测的金标准,同时联用ELISA、免疫试条法和FTA巢式PCR法,对临床109例... 详细信息

目的检测分析腹泻病人粪便中隐孢子虫及其他原虫感染情况,为该病的诊断、防治提供科学依据。方法用直接涂片法、碘液染色、改良抗酸染色法和金胺酚染色法作为病原学检测的金标准,同时联用ELISA、免疫试条法和FTA巢式PCR法,对临床109例腹泻病人隐孢子虫及其他原虫感染情况进行粪样检测分析。结果 109例腹泻病人中男性为65人,女性为44人,年龄在6～65岁,原虫检出率达到45%(49/109),感染对男女年龄无显著性差别(P>0.05)。其中,用直接涂片法和碘液染色法检测阿米巴原虫感染的阳性率为2.8%(3/109),人芽囊原虫感染的阳性率为34.9%(38/109),没有查到蓝氏贾第鞭毛虫;改良抗酸染色法加金胺酚染色法,隐孢子虫感染的阳性率为8.3%(9/109),微孢子虫阳性率为1.8%(2/109);隐孢子虫ELISA试剂盒法检测隐孢子虫感染的阳性率为6.4%(7/109);隐孢子虫免疫试条法检测的隐孢子虫感染的阳性率为1.8%(2/109);巢式PCR法检测隐孢子虫感染的阳性率达到9.1%(10/109),经过测序后为微小隐孢子虫和猫隐孢子虫。结论联合多种检测手段能提高肠道原虫的检出率,腹泻病人感染的原虫主要为隐孢子虫和人芽囊原虫。

关键词：腹泻原虫感染检测隐孢子虫

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西藏林芝地区间日疟原虫PvMSP-3α基因多态性研究

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中国人兽共患病学报 2012年第6期28卷 536-538页

作者：李军伟周水森黄芳中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的分析西藏林芝地区间日疟原虫遗传多态性。方法以间日疟原虫裂殖子表面蛋白3α(Plasmodium vivax merozoite surface protein-3α,PvMSP-3α)为分子标志,利用PCR-RFLP技术对西藏林芝地区间日疟原虫多态性进行分析。结果共发现2种类型... 详细信息

目的分析西藏林芝地区间日疟原虫遗传多态性。方法以间日疟原虫裂殖子表面蛋白3α(Plasmodium vivax merozoite surface protein-3α,PvMSP-3α)为分子标志,利用PCR-RFLP技术对西藏林芝地区间日疟原虫多态性进行分析。结果共发现2种类型的MSP-3α基因,多数为A型(90.3%),B型较少(9.7%),无混合感染。PCR-RFLP分析MSP-3α基因存在较低多态性。结论西藏林芝地区间日疟原虫的遗传多态性较低。

关键词：间日疟原虫遗传多态性 PvMSP-3α

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日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒的现场应用评价及质控分析

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第6期24卷 685-687页

作者：储言红艾琳姚俊敏郭俭蔡玉春陈家旭中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的评价日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒在血吸虫病流行区的应用效果。方法在云南省洱源县2个血吸虫病流行村选择505例常住居民作为检测对象,采用尼龙绢集卵孵化法进行血吸虫病病原法检测。采用Levey-Jennings(L-J)质控图法对整个试验过... 详细信息

目的评价日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒在血吸虫病流行区的应用效果。方法在云南省洱源县2个血吸虫病流行村选择505例常住居民作为检测对象,采用尼龙绢集卵孵化法进行血吸虫病病原法检测。采用Levey-Jennings(L-J)质控图法对整个试验过程进行质量控制。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对调查对象进行日本血吸虫IgG抗体检测,并对检测结果进行分析。结果505名检测对象中,ELISA法查出IgG抗体阳性者290例,阳性率为57.43%;质控血清A和质控血清B检测结果均在L J质控图可控范围内,ELISA检测结果可信。尼龙绢集卵孵化法查出虫卵阳性者20例,阳性率为3.96%。ELISA与粪检的阳性符合率为90.00%。结论日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒有较好的稳定性、可靠性,适于现场血吸虫病人的筛查。

关键词：血吸虫病酶联免疫吸附试验质量控制试剂盒

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化学农药的使用对嗜人按蚊分布与疟疾发病率影响的探讨

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第3期30卷 218-223页

作者：潘嘉云郑香钱会霖柳朝藩郭传坤蒋妙根陈怀录顾政诚中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 广西壮族自治区疾病预防控制中心南宁530021 浙江省疾病预防控制中心杭州310051 四川省寄生虫病防治研究所成都610041

目的探讨稻田使用化学农药对嗜人按蚊种群分布与疟疾发病率的影响。方法选择历史调查证实为嗜人按蚊分布的浙江(1987年,杭嘉湖地区的湖州、德清、安吉、长兴、余杭、萧山和嘉兴等7县的11个调查点)、四川(1987年,乐山的沐川、峨嵋、夹江... 详细信息

目的探讨稻田使用化学农药对嗜人按蚊种群分布与疟疾发病率的影响。方法选择历史调查证实为嗜人按蚊分布的浙江(1987年,杭嘉湖地区的湖州、德清、安吉、长兴、余杭、萧山和嘉兴等7县的11个调查点)、四川(1987年,乐山的沐川、峨嵋、夹江和沙湾,及宜宾地区的兴文、长宁、筠连和高县等8个县10个村)和广西自治区(1983年,河池地区环江县川山公社的社村、何顿和白丹等3个村)的16个县共24个村作为调查点,用半通宵室内人饵诱捕和清晨全部人房蚊帐搜捕法,调查嗜人按蚊密度和种群比例。收集当地历年按蚊调查资料、疟疾发病率资料、单双季稻种植面积和稻田化学农药使用量情况,分析嗜人按蚊种群密度和疟疾发病率的变化与化学农药使用量的关系。结果浙江省杭嘉湖地区调查点以种植双季稻为主,至1973年农药使用量为45 kg/hm2,是20世纪50年代的50倍;嗜人按蚊密度逐年下降,至80年代末11个调查点均未发现嗜人按蚊;疟疾发病率降至1/万以下。四川省乐山和宜宾地区调查点以种植单季稻为主,60年代开始稻田使用化学农药,70～80年代初期农药使用量平均为8.6 kg/hm2,嗜人按蚊密度(86.2%)与60年代初(82.2%)比较无明显变化(χ2=0.63,P>0.05);80年代中期以后,农药使用量逐渐增加,至2000年及以后的使用量均约为18.18 kg/hm2,嗜人按蚊密度逐年下降。至2010年调查点未发现嗜人按蚊;全县无疟疾病例报告。广西环江县以双季稻为主,60、70和80年代初期稻田用农药量分别约为1.79、5.13和7.68 kg/hm2,80年代初嗜人按蚊密度为52%(1747/3 392);2000年以后平均稻田农药使用量达20.38 kg/hm2,嗜人按蚊密度明显下降。2008年后,在人房已较难捕获到嗜人按蚊,年平均发病率下降至0.14/万。结论农耕制度的改变和稻田高剂量使用化学农药,在一定程度上可破坏嗜人按蚊的孳生环境,使其分布范围缩小,数量减少或"消失",削弱了其传疟作用。

关键词：嗜人按蚊疟疾化学农药

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微卫星标记技术及其在疟原虫遗传多态性研究中的应用

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第2期24卷 232-234,238页

微卫星标记是以1-6个碱基为重复单位组成的简单串联重复序列,其广泛存在于各类真核生物基因组中,一般为散在分布的中等程度重复序列,具有数量多、多态性高、共显性遗传、选择中性和可重复性好等优点,近年来常用于研究生物的遗传多态性... 详细信息

微卫星标记是以1-6个碱基为重复单位组成的简单串联重复序列,其广泛存在于各类真核生物基因组中,一般为散在分布的中等程度重复序列,具有数量多、多态性高、共显性遗传、选择中性和可重复性好等优点,近年来常用于研究生物的遗传多态性。本文简述了微卫星标记技术基本原理、优点和检测方法及其在疟原虫遗传多态性研究中的应用。

关键词：微卫星标记疟原虫遗传多态性

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利什曼原虫实验室生物安全风险评估

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第3期24卷 342-344,363页

作者：熊彦红官亚宜曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的为从事利什曼原虫相关操作的实验室人员做好风险评估及生物安全防护工作提供依据。方法从利什曼原虫生物学背景资料、实验活动可能产生的危害、实验人员的相关风险分析等方面对利什曼原虫实验室生物安全进行初步的风险评估。结果利... 详细信息

目的为从事利什曼原虫相关操作的实验室人员做好风险评估及生物安全防护工作提供依据。方法从利什曼原虫生物学背景资料、实验活动可能产生的危害、实验人员的相关风险分析等方面对利什曼原虫实验室生物安全进行初步的风险评估。结果利什曼原虫实验室生物安全风险评估有利于建立利什曼原虫实验室标准操作程序,从而有助于保护利什曼原虫相关实验人员。结论利什曼原虫的实验室生物安全风险评估是利什曼原虫实验室活动安全的重要保障,对保护实验室工作人员的安全具有非常重要的意义。

关键词：利什曼原虫实验室生物安全风险评估

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细粒棘球绦虫烯醇酶基因克隆表达及免疫诊断研究

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第5期24卷 549-552,556页

作者：王莹张璟袁忠英周何军沈玉娟徐馀信王燕娟伍卫平曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的克隆表达细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEno)基因,并对其免疫诊断价值进行初步评价。方法从细粒棘球绦虫cDNA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化***21(DE3),经异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,进行SDS PAGE和免疫印迹法鉴定;... 详细信息

目的克隆表达细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEno)基因,并对其免疫诊断价值进行初步评价。方法从细粒棘球绦虫cDNA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化***21(DE3),经异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,进行SDS PAGE和免疫印迹法鉴定;采用细粒棘球蚴病及其他几种寄生虫病患者的血清和健康人血清,通过ELISA法评价重组EgEno抗原的免疫诊断效果。结果重组质粒pET28a EgEno构建成功。SDS PAGE和免疫印迹法结果显示,重组蛋白在***21(DE3)中获得高效表达,重组蛋白EgEno相对分子量约为50 kDa,可被细粒棘球蚴病患者血清识别。EgEno对细粒棘球蚴病患者血清的免疫诊断敏感性为81.25%。结论克隆出细粒棘球绦虫EgEno基因并在***21(DE3)中表达,重组EgEno对细粒棘球蚴病有较好的免疫诊断价值。

关键词：细粒棘球绦虫 EgEno基因克隆表达免疫诊断

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2011年全国寄生虫病防治技术竞赛成绩分析报告:蠕虫检测能力分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第4期30卷 305-308页

作者：张丽李石柱王强付青柳伟祝红庆许静陈颖丹陈韶红陈家旭陈朝王立英周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 中华人民共和国卫生部疾病预防控制局北京100044

目的通过竞赛了解当前我国各级疾控机构寄生虫病防治专业人员的蠕虫检测能力，从而推动各级疾控机构的能力建设。方法2011年9月以省（区、市）为单位，每省选送各级疾控机构的在职专业技术人员4名（年龄〈45周岁，县级不少于2名）。竞... 详细信息

目的通过竞赛了解当前我国各级疾控机构寄生虫病防治专业人员的蠕虫检测能力，从而推动各级疾控机构的能力建设。方法2011年9月以省（区、市）为单位，每省选送各级疾控机构的在职专业技术人员4名（年龄〈45周岁，县级不少于2名）。竞赛内容包括粪便标本改良加藤厚涂片制作（每参赛选手30rain内制作完成5张涂片；计满分为15分，9分为及格）和11种常见蠕虫卵镜检鉴别（每张标本片含1种或1种以上蠕虫卵；镜检10张，每张5min；计满分为60分，36分为及格）。结果来自30个省（市、区）的119名参赛选手中，改良加藤厚涂片制片成绩，平均为11．4分，及格者111人，占93．3％；11种常见蠕虫卵镜检读片成绩，平均为22．0分，及格者20人，占16．8％。不同性别、年龄（≤30岁、31～40岁和〉40岁）、专业技术职称（初级、中级和高级）、来源单位的级别（省级、市级和县级）的参赛人员制片和镜检成绩的差异无统计学意义（P〉0．05）。来自有血吸虫病防治任务省份的参赛选手的制片（12．1±1．7）、镜检读片（32．1±11．5）成绩均好于没有血吸虫病防治任务的省份（11．1±1．8和18．1±10．5）；西部地区参赛选手的镜检读片成绩（18．4±11．4）均低于东部（25．2±12．4）和中部（24．1±13．1）。结论我国寄生虫病防治机构的病原检测能力总体水平发展不均衡，仅部分地区检测能力较强，有待进一步的加强和提高。

关键词：寄生虫病竞赛蠕虫检测能力分析

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2011年全国寄生虫病防治技术竞赛成绩分析报告:常见寄生虫病检测基础知识考核结果分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第5期30卷 378-381,386页

作者：王强李石柱张丽付青柳伟许静陈颖丹夏志贵陈朝王立英周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025 中华人民共和国卫生部疾病预防控制局北京100044

目的了解当前我国各级疾病预防控制机构寄生虫病防治人员的寄生虫病检测基础理论知识水平。方法 2011年9月组织全国30个省(市、区)各级疾病预防控制机构的119名寄生虫病防治专业人员进行寄生虫病检测基础理论知识竞赛,构建竞赛人员基本... 详细信息

目的了解当前我国各级疾病预防控制机构寄生虫病防治人员的寄生虫病检测基础理论知识水平。方法 2011年9月组织全国30个省(市、区)各级疾病预防控制机构的119名寄生虫病防治专业人员进行寄生虫病检测基础理论知识竞赛,构建竞赛人员基本信息和考试成绩数据库,分析参赛选手寄生虫病检测基础理论知识掌握情况,并分析不同性别、年龄、职称、单位级别和地区参赛选手间的差异。结果所有参赛选手理论考试的平均成绩为(66.37±11.80)分,最高者为93分,最低者为40分,及格率为74.95%。不同性别、年龄组、职称的选手间理论考试总得分均无显著性差异(P>0.05)。除蠕虫检测技能知识点外,其余各知识点的得分率,有血吸虫病防治任务省份参赛选手高于无血吸虫病防治任务省的(P<0.05),设有寄生虫病综合防治示范区省参赛选手高于未设寄生虫病综合防治示范区省的(P<0.05),有一、二类疟疾流行县省参赛选手高于无疟疾一、二类流行县省的(P<0.05)。结论各级疾控机构寄生虫病防治专业人员的寄生虫病检测基础理论水平总体偏低,需加强培训,以提升检测技能,提高寄生虫病防治技术水平。

关键词：寄生虫病技术竞赛知识考核成绩分析

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