检索结果-内蒙古大学图书馆

2021-2022年中国5岁以下急性胃肠炎相关腺病毒分子特征分析

国际病毒学杂志 2025年第1期32卷 1-6页

作者：董梦洁车如意熊光萍范佳欣唐晓苹张无敌李响周帅锋康倩傅忠燕曹冉冉唐梅荣李伟红王宇雷玥李静李楚楚王倩袁媛段招军李丹地中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 全国病毒性腹泻监测网络实验室北京102206

目的了解我国5岁以下急性胃肠炎患儿中人腺病毒(human adenovirus,HAdV)的分子特征和遗传进化规律,为疾病控制和预防提供基础数据。方法收集2021—2022年中国14省5岁以下因急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本1321份,对样本进行HAdV实时... 详细信息

目的了解我国5岁以下急性胃肠炎患儿中人腺病毒(human adenovirus,HAdV)的分子特征和遗传进化规律,为疾病控制和预防提供基础数据。方法收集2021—2022年中国14省5岁以下因急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本1321份,对样本进行HAdV实时荧光检测,对HAdV阳性样本和进行测序,利用BioAider 1.532、MEGA 11.0和BEAST 1.8软件对HAdV样本进行同源性、基因分型、系统发育分析。结果1321份样本中HAdV阳性74例(5.60%),包括4种HAdV亚型,HAdV-F占比高达89.19%,其次为HAdV-C(5.41%)、HAdV-A(4.05%)和HAdV-B(1.35%)。对占比最高的HAdV-F41基因型进行贝叶斯进化分析,HAdV-F41最近共同祖先时间约为1882年,平均进化率约为3.69×10^(-5)(HPD95%5.01×10^(-6)~8.41×10^(-5))替换/位点/年。结论我国5岁以下急性胃肠炎患儿中HAdV型别多样,HAdV-F41是最优势基因型,生物信息学分析结果显示我国HAdV进化速率较慢,且主要流行谱系暂未受到欧洲地区影响。对HAdV进行系统长期的监测有助于了解其在中国的多样性及其进化规律。

关键词：人腺病毒基因型急性胃肠炎分子特征

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咖啡酸苯乙酯对朊病毒体外复制、扩增和纤维形成的抑制作用研究

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 1011-1019页

作者：晁志悦贾筱溪曾嘉锋武月章肖康高利萍石琦董小平陈操传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国疾病预防控制中心-中国科学院武汉病毒研究所新发传染病与生物安全联合研究中心、中国科学院生物安全大科学研究中心武汉430071

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利... 详细信息

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利用蛋白质免疫印迹方法分析CAPE处理前后细胞内PrPSc的含量变化。利用蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)技术和蛋白质免疫印迹方法检测CAPE处理前后扩增产物中PrP^(Sc)的含量变化。利用实时震动蛋白诱导扩增(RT-QuIC)技术检测CAPE处理前后朊蛋白纤维形成的变化情况。通过分子相互作用检测CAPE与小鼠重组全长朊蛋白的结合能力。结果 CCK8细胞活力实验结果显示:1 μmol/L CAPE处理细胞3、7 d时细胞存活率与对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05),当CAPE浓度超过1 μmol/L时,CAPE处理细胞3、7 d细胞存活率降低,与对照组之间差异均存在统计学意义(均P<0.05),因此1 μmol/L为CAPE处理SMB-S15细胞的最大安全浓度。蛋白质免疫印迹实验结果显示:CAPE处理3、7 d均可检测到SMB-S15细胞中PrPSc含量的降低(均P<0.05)。PMCA实验产物通过蛋白质免疫印迹方法检测结果显示:经CAPE处理后,适应株SMB-S15、139A、ME7的PMCA扩增产物中PrPSc含量(相对灰度值)降低,与对照组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。RT-QuIC实验结果显示:CAPE处理后139A、ME7、SMB-S15小鼠适应株和朊病毒感染细胞SMB-S15在反应中形成朊蛋白纤维(ThT峰值)均降低,且CAPE对不同种子朊蛋白纤维的抑制程度差异有统计学意义(均P<0.05),其中对ME7的抑制作用更明显。分子相互作用结果显示:CAPE与鼠源重组朊蛋白存在明显的分子结合,平衡解离常数KD为(2.92±0.41)×10^(-6) mol/L。结论 CAPE对PrPSc体外复制、扩增和纤维形成均具有抑制作用,可能与CAPE和朊蛋白特异性结合有关。

关键词：咖啡酸苯乙酯朊病毒朊蛋白

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我国罕见G9P-A2基因型重配株轮状病毒全基因组分子特征分析

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疾病监测 2024年第5期39卷 586-591页

作者：熊光萍彭蕊王萌璇魏宇航范佳欣唐晓苹王宏章青庞立丽孔翔羽李希希李丹地传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 甘肃中医药大学公共卫生学院甘肃兰州730000

目的了解我国1株G9P[8]基因型A组轮状病毒(RVA)JL18221140的全基因组分子特征。方法对我国吉林省1例G9P[8]基因型RVA(JL18221140)原始粪便标本采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)一步法扩增11个基因节段,并通过DNAStar, MEGA 11.0等... 详细信息

目的了解我国1株G9P[8]基因型A组轮状病毒(RVA)JL18221140的全基因组分子特征。方法对我国吉林省1例G9P[8]基因型RVA(JL18221140)原始粪便标本采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)一步法扩增11个基因节段,并通过DNAStar, MEGA 11.0等生物信息分析软件进行同源性及进化分析。结果 JL18221140的全基因组11个节段的基因型为G9-P[8]-I1-R1-C1-M1-A2-N1-T1-E1-H1,NSP1基因型呈现DS-1样特征。系统发育分析显示VP7和VP4分别聚集在谱系G9-Ⅵ和P[8]-Ⅲ中。结论 JL18221140为G9P[8]基因型中罕见的G9P[8]-A2重配株,该基因型可能是由中国流行的G9P[8]-A1和G2P[4]-A2毒株共感染过程中基因组间重配产生的。表明对RVA持续监测并对全基因组测序的重要性,有利于了解我国RVA毒株的遗传变异情况,为今后病毒的防控和疫苗的研发提供更有效的基础数据。

关键词： A组轮状病毒全基因组测序 G9P[8] 变异重配

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融合表达新冠病毒S1与N蛋白的非复制型重组腺病毒的构建与鉴定

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病毒学报 2024年第2期40卷 225-232页

作者：毛彤瑶张鹏姜苏芮李丹地段招军传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000

体外构建融合表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)S1抗原与N抗原的复制缺陷型重组腺病毒疫苗,为深入开展该疫苗免疫原性的研究提供基础。利用Overlap PCR和同源重组方法构建插入SARS-CoV-2的S1-N基因的重组腺病毒质粒pKAd5-S1-N,通过琼脂糖凝... 详细信息

体外构建融合表达新型冠状病毒(SARS-CoV-2)S1抗原与N抗原的复制缺陷型重组腺病毒疫苗,为深入开展该疫苗免疫原性的研究提供基础。利用Overlap PCR和同源重组方法构建插入SARS-CoV-2的S1-N基因的重组腺病毒质粒pKAd5-S1-N,通过琼脂糖凝胶电泳、多酶切、测序等方法鉴定重组质粒正确性;重组质粒转染HEK293A细胞获得病毒毒种AdV5-S1-N并扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化病毒,有限稀释分析法测病毒滴度,Western blot方法验证AdV5-S1-N重组腺病毒S1-N融合蛋白表达情况;将AdV5-S1-N疫苗通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,第14d采集颌下静脉血,ELISA法检测血清针对S1和N蛋白抗原的特异性抗体滴度。成功获得滴度为9.45×10^(11)IU/mL的重组腺病毒AdV5-S1-N。Western blot结果发现:AdV5-S1-N感染细胞后,融合蛋白可正常表达,与抗S1蛋白及抗N蛋白抗体均有特异结合。ELISA结果显示免疫重组腺病毒的小鼠可产生针对S1和N蛋白的特异性IgG抗体。应用复制缺陷型腺病毒载体成功获得融合表达SARS-CoV-2 Omicron突变株S1-N蛋白的高滴度重组腺病毒,该重组病毒能在小鼠诱导针对S1和N蛋白的特异性免疫应答,为后续深入研究和评价该候选疫苗奠定了基础。

关键词：新型冠状病毒腺病毒载体疫苗体液免疫融合表达

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人呼吸道合胞病毒监测体系的研究现状

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 967-982页

作者：夏百成从兵兵王慧玲马士豪宋金华王娜张燕李有传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所麻疹室北京102206 南京医科大学公共卫生学院国家疫苗研发创新平台南京211166

为实时监测我国不同地理区域流行的HRSV流行特征和疾病负担,进一步制定更加精准有效的预防干预策略,中国迫切需要建立覆盖全国的HRSV实时监测系统。本研究结合国内外HRSV监测研究及其体系现状和我国现有的监测框架,根据监测目的不同,并... 详细信息

为实时监测我国不同地理区域流行的HRSV流行特征和疾病负担,进一步制定更加精准有效的预防干预策略,中国迫切需要建立覆盖全国的HRSV实时监测系统。本研究结合国内外HRSV监测研究及其体系现状和我国现有的监测框架,根据监测目的不同,并考虑到实施的可行性,提出适用于我国的HRSV监测模式,为实时监测HRSV流行动态变化,及时开展风险研判和预测预警,进一步了解我国HRSV的疾病负担,也为我国HRSV感染相关疾病的诊断、防控,以及疫苗和药物的研发、使用和评价提供重要的科学技术支撑。

关键词：呼吸道合胞病毒监测预防控制

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我国2019—2023年登革热报告病例流行病学特征

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中国热带医学 2024年第8期24卷 925-930页

作者：李卓威黄晓霞田婷婷李阿茜杜珊珊何广学李建东传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会生物安全重点实验室医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 滨州医学院公共卫生学院山东烟台264003

目的分析我国2019—2023年登革热报告病例的流行病学特征,为登革热防控工作提供科学依据。方法利用Joinpoint回归、SaTScan及ArcGIS等软件对中国疾病预防控制信息系统(NNDRS)中报告的登革热病例数时间、空间和人间分布特征及发展趋势进... 详细信息

目的分析我国2019—2023年登革热报告病例的流行病学特征,为登革热防控工作提供科学依据。方法利用Joinpoint回归、SaTScan及ArcGIS等软件对中国疾病预防控制信息系统(NNDRS)中报告的登革热病例数时间、空间和人间分布特征及发展趋势进行分析。结果我国2019—2023年共报告病例43095例,平均报告发病率为0.61/10万,年报告发病率波动显著(AAPC=-3.16%,95%CI:-54.16%~91.47%),主要集中在2019年和2023年,约占近5年总报告病例数的96.83%。各年龄组人群均可发病,30~<40岁年龄组病例占22.6%。全年均有病例发生,6月份开始快速上升,高峰期集中在8—10月份,为34780例(RR=12.44,LLR=29262.52,P<0.05)。疫情特征以输入引发本地传播为主,输入病例主要来源于东南亚地区(占86.56%),其中柬埔寨3284例(占46.11%)、缅甸1851例(占25.99%)为病例主要来源国家。不同年份有显著不同,西南地区、华南地区、华东地区发生本地传播疫情风险高,高发地区主要分布在云南和广东,疫情高峰期持续时间受本地传播疫情早期及时性发现影响,疫情峰值与有防控措施落实有效性有关,疫情规模受境外输入压力和本地疫情防控措施落实能力影响。结论随着全球登革热传播日益上升的趋势,我国发生登革热本地传播疫情风险增加,宜加强早期疫情主动监测和做好本地传播疫情发生后预防控制方案、人员、技术和物质的准备,因地制宜探索跨境流动人员的管理,及时进行风险评估,有效降低输入引发本地传播疫情风险。

关键词：登革热流行病学特征发病时空分析境外输入中国

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人偏肺病毒假病毒阳性标准品的制备与鉴定

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病毒学报 2024年第6期40卷 1263-1273页

作者：郑诗源黄益曼孟小草贺佳阳宋敬东麻粉莲郑丽舒中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒与病毒病重点实验室北京100052 中国医科大学公共卫生学院沈阳110122

为制备一种安全、有效的人偏肺病毒(Human metapneumovirus,HMPV)假病毒阳性标准品,并用于核酸检测的质量控制,本研究对335条HMPV全基因序列比对分析,选择HMPV基因表达量高且进化较为保守的N基因构建重组假病毒颗粒。合成全长1185 bp的... 详细信息

为制备一种安全、有效的人偏肺病毒(Human metapneumovirus,HMPV)假病毒阳性标准品,并用于核酸检测的质量控制,本研究对335条HMPV全基因序列比对分析,选择HMPV基因表达量高且进化较为保守的N基因构建重组假病毒颗粒。合成全长1185 bp的N基因序列并与CD513B载体进行重组连接,采用第三代慢病毒包装体系构建HMPV假病毒颗粒,超速离心浓缩后感染HEK293T细胞,RT-qPCR核酸检测N基因和透射电镜观察鉴定重组假病毒颗粒,确定假病毒阳性标准品使用浓度,进一步评价阳性标准品的热稳定性和均一性。研究结果显示,包装获得的HMPV假病毒颗粒能够感染HEK293T细胞,假病毒颗粒为圆形或椭圆形病毒样结构,直径在150~200 nm之间,并带有G蛋白刺突。HMPV假病毒稀释10^(3)倍后Ct值最适于进行核酸检测,并且均一性和稳定性可达到阳性标准品要求。本研究成功构建了含有HMPV N基因全长的假病毒颗粒,可作为核酸检测方法的阳性标准品,实现HMPV核酸提取和核酸检测过程的全程质量控制。

关键词：人偏肺病毒假病毒阳性标准品

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G6P型牛轮状病毒的分离培养及鉴定

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中国人兽共患病学报 2024年第2期40卷 134-139页

作者：王铭月张锦华章青孔翔羽王宏孙晓曼李丹地庞立丽段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的从轮状病毒阳性的牛粪便标本中,分离出一株G6P[1]型牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV),对其进行培养和鉴定。方法用PBS溶液重悬粪便标本并离心,将其上清过滤除菌和胰酶处理后,利用MA104细胞进行分离培养;通过逆转录-聚合酶链式反应(... 详细信息

目的从轮状病毒阳性的牛粪便标本中,分离出一株G6P[1]型牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV),对其进行培养和鉴定。方法用PBS溶液重悬粪便标本并离心,将其上清过滤除菌和胰酶处理后,利用MA104细胞进行分离培养;通过逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription-polymerase Chain Reaction,RT-PCR)对样本VP4和VP7基因进行扩增和测序,与GenBank上的参考序列进行同源性分析,构建进化树,分析确定其G/P基因分型。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Polyacrylamine Gel Electrophoresis,PAGE)、噬斑实验和电镜(Transmission Electron Microscope,TEM)等技术对分离到的病毒进行鉴定和纯化。绘制病毒生长动力学曲线。结果分离培养了1株BRV毒株,将其命名BLL。VP7和VP4基因测序结果显示此毒株为G6P[1]型轮状病毒。PAGE胶结果显示分离株电泳型为长型,条带呈现A组轮状病毒排列电泳图谱;通过噬斑实验将毒株进行了纯化。电镜检测到典型的轮状病毒颗粒。病毒生长动力学曲线可发现病毒在感染后6 h已经开始复制。结论本研究成功分离到G6P[1]型牛型轮状病毒,为研究G6P[1]型轮状病毒的病原学特征提供实验基础和技术参考。

关键词：轮状病毒 G6P[1] 分离噬斑实验纯化序列分析

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人呼吸道合胞病毒中和抗体检测方法的建立与初步应用

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 959-966页

作者：张丽李海曹蕾胡宏俏王娜李海鑫江洁毛乃颖李晓梅张燕山东第一医科大学(山东省医学科学院)公共卫生与健康管理学院济南250117 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的建立用于人呼吸道合胞病毒(HRSV)中和抗体滴度检测的噬斑减少中和实验(PRNT),并进行条件优化与初步应用。方法应用CHO表达系统制备帕利珠单克隆抗体(Palivizumab),同时对细胞种类、细胞培养时间、固定通透方法、封闭方法等影响因素... 详细信息

目的建立用于人呼吸道合胞病毒(HRSV)中和抗体滴度检测的噬斑减少中和实验(PRNT),并进行条件优化与初步应用。方法应用CHO表达系统制备帕利珠单克隆抗体(Palivizumab),同时对细胞种类、细胞培养时间、固定通透方法、封闭方法等影响因素进行优化。验证该方法的重复性,并与传统PRNT验证其相关性。利用优化的PRNT方法检测BALB/c小鼠血清(融合蛋白肌肉注射免疫)对HRSV A和B亚型的中和抗体滴度。结果Palivizumab的表达量约为50 mg/L。PRNT的最佳工作条件为:培养细胞为HEp-2细胞,细胞培养时间为2 d,最佳固定通透方式为4%(V/V)多聚甲醛室温固定15 min后0.2%(V/V)Triton X-100通透15 min,去掉封闭步骤。优化后该方法的重复性验证总体变异系数均<15%,与传统PRNT呈现良好的线性关系,Spearman相关系数rs高达0.983。在检测小鼠血清对HRSV A亚型long株和B亚型9320株的中和抗体滴度时,融合蛋白联合AlOH和CpG佐剂诱导小鼠产生的中和抗体滴度最高。结论本研究建立的HRSV中和抗体检测方法快速、可重复、高通量,能够适用于A、B亚型HRSV的中和抗体检测。

关键词：人呼吸道合胞病毒免疫染色噬斑减少中和实验中和抗体

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人GⅡ.14诺如病毒VLP抗原性及组织血型抗原结合特征

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病毒学报 2024年第4期40卷 705-715页

作者：欧阳瑄泽柴鹏弟宋敬东靳淼李利利李金松孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730020 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

本研究旨在制备人GⅡ.14诺如病毒的(Norovirus,NoV)病毒样颗粒(Virus⁃like particle,VLP),探索其抗原性与组织血型抗原结合的特征。利用杆状病毒系统表达人GⅡ.14 NoV VP1蛋白,通过超速离心和分子筛层析纯化VLP;将VLP免疫动物制备兔多... 详细信息

本研究旨在制备人GⅡ.14诺如病毒的(Norovirus,NoV)病毒样颗粒(Virus⁃like particle,VLP),探索其抗原性与组织血型抗原结合的特征。利用杆状病毒系统表达人GⅡ.14 NoV VP1蛋白,通过超速离心和分子筛层析纯化VLP;将VLP免疫动物制备兔多抗血清,通过免疫印迹(Western blot,WB)、酶联免疫吸附(ELISA)进行抗原性评价及多抗功能验证;利用唾液结合实验检测人GⅡ.14 VLP的糖结合特征;通过蛋白序列及结构比较分析GⅡ.14 P蛋白潜在的糖结合位。纯化获得人GⅡ.14 VP1蛋白,电镜观察显示可以形成结构较为均一的VLP;制备的兔多抗能与GⅡ.14 VLP特异性结合,与检测的其他基因型VLP没有交叉反应;唾液结合实验表明GⅡ.14 VLP与人A/B/O/AB型别唾液都有较好的结合;序列和结构分析显示GⅡ.14 P蛋白模拟结构与GⅡ.9最为接近,具有与GⅡ.9以及流行株GⅡ.4等相似的潜在糖结合区。本研究表明GⅡ.14具有较为广泛的唾液结合特性,通过序列比对和结构学方法分析了GⅡ.14潜在的受体结合机制,为不同型别NoVs的流行监测提供了更多依据。

关键词：诺如病毒病毒样颗粒组织血型抗原

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