检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2024年第6期38卷 702-708页

作者：刘晓钰赵颖张璐琦欧阳瑄泽章青李丹地李金松李利利孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的表达和纯化人H组轮状病毒(group H rotavirus,RVH)J19株的VP7蛋白,制备VP7的多克隆抗体(多抗)并对其多抗功能进行鉴定。方法通过杆状病毒系统表达RVH J19株的VP7蛋白,通过亲和层析和凝胶过滤层析方法进行蛋白纯化。将纯化得到的RVH ... 详细信息

目的表达和纯化人H组轮状病毒(group H rotavirus,RVH)J19株的VP7蛋白,制备VP7的多克隆抗体(多抗)并对其多抗功能进行鉴定。方法通过杆状病毒系统表达RVH J19株的VP7蛋白,通过亲和层析和凝胶过滤层析方法进行蛋白纯化。将纯化得到的RVH J19株的VP7蛋白免疫兔子以制备VP7多抗血清,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)、免疫荧光荧光试验(Immunofluorescence,IF)等对VP7多抗血清进行鉴定。结果纯化得到可溶的J19 VP7蛋白;制备获得J19株VP7兔多抗;ELISA显示VP7多抗具有较好的结合效价,在稀释2048000倍时与人RVH VP7蛋白仍有结合;WB表明多抗能够结合J19 VP7蛋白;IF显示VP7多抗可以特异识别人H组轮状病毒J19株。结论本研究成功得到了人H组轮状病毒J19 VP7蛋白,制备的VP7多抗可以特异性识别人H组轮状病毒,为人H组轮状病毒的检测及病毒衣壳结构功能研究提供了基础。

关键词：人H组轮状病毒杆状病毒表达系统 VP7蛋白多克隆抗体

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一例罕见G1P-E2基因型轮状病毒重配株全基因序列分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第4期37卷 389-397页

作者：范佳欣王萌璇魏宇航彭蕊熊光萍唐晓苹李丹地中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000

目的研究我国一例G1P[8]基因型A组轮状病毒(group A rotvirus,RVA)SC18511073的序列特征及进化规律,分析SC18511073与RotaTeq^(TM)和Rotarix^(TM)疫苗的抗原表位之间的差异。方法用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对SC18511073的11个节段进行RT-PCR扩增,利用在线RVA自动分型工具对其分型,采用DNAstar5.1和Mega11.0等软件对11个节段进行同源性及遗传进化分析。结果SC18511073全基因组基因型为G1P[8]-I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E2-H1,NSP4为E2型。VP7和NSP3与同年份四川流行G1P[8]-E1型毒株同源性较高,系统进化树显示位于同一分支,其余9个基因节段均与我国流行的G9P[8]-E2型RVA高度同源,且归属于同一进化分支。SC18511073与RotaTeq^(TM)和Rotarix^(TM)在VP7的抗原表位中7-1a和7-2区域存在5个氨基酸差异;VP4蛋白裂解后的VP8^(*)抗原表位中8-1、8-3区域存在差异。结论我国2018年RVA毒株SC18511073为罕见的G1P[8]-E2型,推测是由G1P[8]-E1基因型与G9P[8]-E2基因型RVA毒株共感染过程中VP7和NSP3节段发生重配产生的新型毒株。SC18511073与RotaTeq^(TM)和Rotarix^(TM)在VP7和VP4上的抗原表位存在较多氨基酸位点差异。

关键词： A组轮状病毒基因型重配株系统发育分析抗原表位

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2004-2021年中国肾综合征出血热报告病例流行病学特征分析

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疾病监测 2023年第1期38卷 70-74页

作者：邓雪飞杜珊珊黄晓霞王芹李阿茜李川孙丽娜芜为李昊刘铁柱田婷婷王世文梁米芳李德新谢春李建东贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的分析我国近年来肾综合征出血热(HFRS)报告病例流行特征,加强对该病流行现状的理解。方法从全国疾病监测信息报告管理系统获得2004—2021年HFRS病例信息,描述分析其分布动态变化特征以及病例诊断情况。结果2004—2021年全国31个省(... 详细信息

目的分析我国近年来肾综合征出血热(HFRS)报告病例流行特征,加强对该病流行现状的理解。方法从全国疾病监测信息报告管理系统获得2004—2021年HFRS病例信息,描述分析其分布动态变化特征以及病例诊断情况。结果2004—2021年全国31个省(自治区、直辖市)都有病例报告,HFRS发病总体呈下降趋势,累计报告病例224396例,死亡2068例,年均发病率约为0.93/10万,病死率0.92%。病例呈高度分散又相对集中的分布特征,发病数前10位的省份报告发病185207例,占全国总报告病例数的82.54%。发病呈春夏季峰(4—7月)、秋冬季峰(10月至次年1月)季两个发病高峰,春夏季以5月或6月为高峰,11月或12月是秋冬季发病高峰,春夏季峰占32.20%,秋冬季峰占47.85%,秋冬季峰明显高于春夏季峰。男女性病例性别比为2.93∶1,55岁以上人群发病率呈明显上升趋势,30~45岁人群发病率明显下降,14岁以下儿童病例占比出现上升趋势。职业分布仍以农民为主(占67.74%),待业和居家人群病例占比出现明显上升。结论2004—2021年,中国HFRS报告病例数逐步下降到相对低位水平,伴随局部地区发病率的显著起伏;疫情分布地域扩大,部分地区出现再发疫情;高龄人群和儿童病例占比有升高趋势,应引起关注,并制定针对性的策略和措施。

关键词：肾综合征出血热流行特征疾病监测汉坦病毒

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柯萨奇病毒A10型对利巴韦林耐药性的初步研究

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病毒学报 2024年第2期40卷 337-345页

作者：孙甜甜宗彦君王蕊李冀琛刘莹李晓亮韩振志于力恒刘志军孙强张勇潍坊医学院潍坊261053 传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 国家脊髓灰质炎实验室国家卫生健康委员会实验室生物安全重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒与病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 山东第一医科大学济南250117 首都儿科研究所病毒学研究室儿童病毒病病原学北京市重点实验室北京100020

近年来,全国范围内手足口病(Hand, foot, and mouth disease,HFMD)的感染率逐渐上升,其中柯萨奇病毒A组10型(Coxsackievirus A10,CV-A10)是主要病原体之一,利巴韦林是临床上治疗儿童手足口病的常用药物之一。为了评价利巴韦林在体外对CV... 详细信息

近年来,全国范围内手足口病(Hand, foot, and mouth disease,HFMD)的感染率逐渐上升,其中柯萨奇病毒A组10型(Coxsackievirus A10,CV-A10)是主要病原体之一,利巴韦林是临床上治疗儿童手足口病的常用药物之一。为了评价利巴韦林在体外对CVA10的抑制效果,本研究中,我们随机选取了19条2009-2021年的不同地区和不同年代的有代表性的中国内地优势流行基因型C基因型的CVA10毒株,通过细胞毒性实验(Cell counting kit-8,CCK8)来检测利巴韦林在RD细胞上对CVA10的抑制率。将抑制率大于85%的CVA10定义为对利巴韦林敏感组,抑制率小于15%的CVA10定义为对利巴韦林耐药组。结果显示利巴韦林在0.78mmol/L浓度下可以对CVA10产生较好的抑制作用并且对细胞的毒性较低。19株CVA10中有4株表现出对利巴韦林耐药性,2株表现出对利巴韦林敏感性,剩余13株的敏感性在85%~15%之间。通过7日龄ICR乳鼠感染实验比较对利巴韦林敏感组和耐药组毒株的致病力差异,通过观察乳鼠临床评分、生存率、体重及组织取材的滴度测定结果均表明对利巴韦林敏感组CVA10在小鼠上的致病力比耐药组强。进一步使用MEGA 7.0软件对影响CVA10复制和翻译的2C区氨基酸序列进行差异性分析,以分析可能的耐药位点。结果显示对利巴韦林耐药组和敏感组CVA10的2C区的327位和328位氨基酸位点存在差异。本研究发现当前国内流行的CVA10存在广泛对利巴韦林耐药现象,其中部分CVA10对利巴韦林完全耐药。因此,有必要加强对CVA10耐药株的监测,以便更好地指导临床医生正确地选择抗病毒药物,为个体化的治疗提供理论依据。

关键词：柯萨奇病毒A10型利巴韦林耐药性 2C区差异位点

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基孔肯雅病毒感染性克隆的构建与鉴定

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病毒学报 2025年第2期41卷 428-436页

作者：林启晗郑张琦顾天梦李川杜珊珊朱武洋王世文李建东传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会生物安全重点实验室医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳561113

基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)主要经伊蚊叮咬可在人间快速传播,引发大范围规模性疫情,此外,病毒适应性突变可对病毒传播特征造成显著影响。本研究通过分步克隆的方法,以我国本地传播病毒分离株(CHIKV-GD133)基因组为模板,以... 详细信息

基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)主要经伊蚊叮咬可在人间快速传播,引发大范围规模性疫情,此外,病毒适应性突变可对病毒传播特征造成显著影响。本研究通过分步克隆的方法,以我国本地传播病毒分离株(CHIKV-GD133)基因组为模板,以商业化质粒pSMART为载体骨架,分4步利用TOP10F、和EPI300两种感受态细胞构建了分别在T7和CMV启动子驱动下的CHIKV的全长感染性克隆,分别转染表达有T7聚合酶的BHK细胞系(BHK/T7-9)和Vero细胞后,通过显微镜观察、RT-PCR、IFA和噬斑滴定等方法,检测细胞病变效应、结构蛋白的表达、子代病毒粒子基因组序列、病毒基因组复制水平等,确认所构建2种感染性克隆在转染相应细胞系后,能够有效复制、装配形成有感染性的病毒颗粒,且该病毒颗粒可在Vero细胞内传代增殖,其感染复制特征与亲本野毒株无显著性差异。本研究为进一步探索影响CHIKV感染、复制、传播和致病等关键机制研究奠定了基础。

关键词：基孔肯雅病毒感染性克隆反向遗传 T7 RNA聚合酶

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2018—2024年北京市某儿童医院普通外科住院疾病谱分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2025年第1期39卷 51-55页

作者：王雪琪王世文刘铁柱李颀首都儿科研究所附属儿童医院普通外科北京100020 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的通过分析2018年1月至2024年6月北京某儿童医院普通外科住院病人的疾病谱和构成情况,了解新冠疫情对儿童医院住院患儿数量和病种构成造成的影响,为医院能力建设和疫情出现后的医疗应对提供科学证据。方法通过收集该儿童医院2018年1月... 详细信息

目的通过分析2018年1月至2024年6月北京某儿童医院普通外科住院病人的疾病谱和构成情况,了解新冠疫情对儿童医院住院患儿数量和病种构成造成的影响,为医院能力建设和疫情出现后的医疗应对提供科学证据。方法通过收集该儿童医院2018年1月1日至2024年6月30日普通外科病房患儿的住院病案资料,使用SPSS 22.0软件和EXCEL工具,从不同年份、不同性别、不同年龄组三个维度分析医院普通外科疾病顺位和构成情况,同时按照省份统计该院患儿的来源地。结果总体上,2020年开始住院患儿总量出现明显下降,此后缓慢回升;急性阑尾炎、腹股沟斜疝和胆总管囊肿在每年的疾病顺位中分列前三位;从性别维度,男性患儿中腹股沟斜疝、急性阑尾炎,女性患儿中急性阑尾炎、胆总管囊肿的数量最多;从年龄维度,1~岁组腹股沟斜疝患儿数量排在首位,而5~岁组和10~18岁组中,急性阑尾炎数量排在首位;2020—2024年上半年与2018—2019年相比,腹股沟斜疝住院患儿数量骤降,第一顺位疾病由的腹股沟斜疝变为急性阑尾炎。结论本研究分析了该儿童医院在新冠疫情前后的疾病谱和构成情况,对儿童医院能力建设、资源分配和疫情应对具有重要参考价值。

关键词：儿童疾病疾病谱疾病顺位

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RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对儿童轮状病毒胃肠炎保护效果和安全性的Meta分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第1期37卷 106-111页

作者：魏宇航彭蕊王萌璇毛彤瑶王明雯范佳欣吴铮孙晓曼李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的为探求RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对轮状病毒胃肠炎(rotavirus gastroenteritis,RVGE)患儿的保护效果及安全性,以更好指导RotaTeq疫苗的使用。方法通过检索2006年2月至2021年12月有关RotaTeq疫苗高死亡率地区公开发表的文献,根... 详细信息

目的为探求RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对轮状病毒胃肠炎(rotavirus gastroenteritis,RVGE)患儿的保护效果及安全性,以更好指导RotaTeq疫苗的使用。方法通过检索2006年2月至2021年12月有关RotaTeq疫苗高死亡率地区公开发表的文献,根据排除纳入标准进行筛选和数据整理,运用RevMan 5.3、Stata 14.0和SPSS 26.0软件进行数据分析。结果共纳入文献5篇,研究对象共包含63974名,其中疫苗组32092名研究对象,安慰剂组31882名研究对象。在高死亡率地区,RotaTeq对RVGE、严重轮状病毒胃肠炎(severe RVGE,SRVGE)、非常严重轮状病毒胃肠炎(very severe RVGE,VSRVGE)的保护率分别为VERVGE=35%(95%CI:28%~41%)、VESRVGE=51%(95%CI:33%~65%)、VEVSRVGE=64%(95%CI:41%~78%)。亚洲、非洲高死亡率地区SRVGE的保护率分别为VESRVGE=43%(95%CI:28%~55%)、VESRVGE=57%(95%CI:17%~77%)。RotaTeq严重不良反应事件(serious adverse events,SAEs)发生率在疫苗组与安慰剂组间差异无统计学意义(χ^(2)=2.05,P=0.152)。结论RotaTeq疫苗在高死亡率地区对重症以上RVGE有一定的保护作用,并且具有较好的安全性。

关键词：轮状病毒胃肠炎疫苗保护率安全性

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人A组轮状病毒G1P基因型VP7蛋白的表达及其抗体制备

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第6期37卷 643-649页

作者：赵颖苏韫曦章青李慧莹李丹地李金松孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的表达和纯化人A组G1P[8]轮状病毒VP7蛋白(G1 VP7);制备VP7多克隆抗体并进行抗体功能鉴定。方法利用杆状病毒系统表达G1 VP7蛋白,通过亲和层析法进行蛋白纯化。将纯化后的G1 VP7蛋白免疫新西兰大白兔制备兔多抗血清,纯化得到G1 VP7兔... 详细信息

目的表达和纯化人A组G1P[8]轮状病毒VP7蛋白(G1 VP7);制备VP7多克隆抗体并进行抗体功能鉴定。方法利用杆状病毒系统表达G1 VP7蛋白,通过亲和层析法进行蛋白纯化。将纯化后的G1 VP7蛋白免疫新西兰大白兔制备兔多抗血清,纯化得到G1 VP7兔多抗。通过免疫印迹(Western blot,WB)、酶联免疫吸附(ELISA)和免疫荧光试验进行多抗功能验证。结果利用杆状病毒表达系统获得人A组G1P[8]轮状病毒可溶VP7蛋白,并且G1 VP7蛋白主要以三聚体形式存在;制备得到G1 VP7多抗,ELISA结果显示VP7多抗具有较高的效价;WB和ELISA实验表明VP7多抗能够识别多个G型轮状病毒的VP7;免疫荧光试验结果进一步显示G1 VP7多抗可以结合不同A组轮状病毒,包括Wa株(基因型G1P[8])、DS-1(基因型G2P[4])、SA11(基因型G3P[2])、人G9P[8]株。此外,双夹心ELISA初步结果显示包被VP7多抗可以检测到轮状病毒临床样本。结论本研究成功得到可溶G1 VP7蛋白并制备VP7多抗;G1 VP7多抗可以结合多种G型轮状病毒,为不同G型轮状病毒检测方法的建立奠定基础。

关键词：轮状病毒 VP7蛋白杆状病毒表达系统多克隆抗体

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中国两株罕见G9P⁃N1基因型轮状病毒重配株全基因组序列分析

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病毒学报 2025年第2期41卷 462-472页

作者：唐晓苹范佳欣熊光萍魏宇航董梦洁车如意张无敌李楚楚沙比热木·托合塔木王宏章青孔翔羽庞立丽李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 江苏省疾病预防控制中心南京210000 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心病原检定所乌鲁木齐830002 北京市通州区卫生健康监督所北京101100

为研究中国两株罕见G9P[4]-N1型RVA重配株的全基因组特征,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2022年收集的两份G9P[4]-N1型RVA标本进行全基因组扩增。应用MEGA11.0、Geneious Prime2023.2.1、Geneious9.0.2和DNASTAR等软件对RVA毒株进行全序列及遗传变异和进化分析,成功获取两株G9P[4]-N1型RVA的全基因组序列。结果显示两株RVA毒株的全基因组基因型均为G9-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N1-T2-E2-H2,两株RVA毒株所有节段核苷酸序列的相似性为:98.5%~99.5%。系统进化树显示VP7、VP4和NSP2基因分别为G9-Ⅲ、P[4]-Ⅴ、NSP2-N1。中国两株G9P[4]型RVA毒株为罕见的G9-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N1-T2-E2-H2型,VP7、VP4、NSP2等关键基因节段与美国、俄罗斯、捷克等国外G9P[4]型RVA相似度高,且与本国G9型流行株亲缘关系相对较远,推测该罕见G9P[4]-N1型RVA重配株可能由境外输入。中国两株G9P[4]基因型JS97、XJ1109毒株与疫苗株RotaTeq^(TM)(G1~G4、P[8])和疫苗株Rotarix^(TM)、疫苗Rotavac原始株116E及LLR原始毒株核苷酸相似性为81.2%~91.3%,在关键中和抗原表位存在较多氨基酸位点差异,该差异是否会影响疫苗针对中国G9P[4]-N1基因型的保护效果需要进一步研究。

关键词：轮状病毒 G9P[4]基因型分子特征全基因组

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自噬受体蛋白p62的表达及功能研究

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中国免疫学杂志 2022年第6期38卷 715-719页

作者：王娇张莉李颖王慧王湛刘宏图(指导) 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的:构建人自噬受体蛋白p62的真核表达质粒,初步探索p62在氧化应激中的功能。方法:从HeLa细胞系中扩增SQSTM1基因,插入真核表达载体nFLAG/pRK5,构建p62的重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5。采用HEK293T细胞表达带有FLAG标签的重组p62蛋白... 详细信息

目的:构建人自噬受体蛋白p62的真核表达质粒,初步探索p62在氧化应激中的功能。方法:从HeLa细胞系中扩增SQSTM1基因,插入真核表达载体nFLAG/pRK5,构建p62的重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5。采用HEK293T细胞表达带有FLAG标签的重组p62蛋白,免疫共沉淀法观察p62和核因子E2相关因子2(Nrf2)相互作用。结果:重组表达质粒nFLAG-SQSTM1/pRK5经琼脂糖凝胶电泳和测序对比均与预期结果一致,Western blot实验中p62蛋白可正常表达,且大小与预期结果一致。免疫共沉淀和蛋白质谱证明p62与氧化应激转录调控蛋白Nrf2可相互作用。结论:采用真核表达系统成功表达p62蛋白,并发现其与Nrf2可相互作用,为进一步研究p62与Keap1-Nrf2通路关系提供依据。

关键词： SQSTM1基因 p62蛋白自噬真核表达 Nrf2蛋白

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