检索结果-内蒙古大学图书馆

儿童轮状病毒胃肠炎免疫预防专家共识(2024年版)

中国疫苗和免疫 2024年第1期30卷 95-126页

作者：轮状病毒胃肠炎专家共识编写组段招军李金松张静邓莉赵鲁卿李丹地李静欣不详传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会医学病毒与病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所中国疾病预防控制中心首都儿科研究所北京中医医院

轮状病毒胃肠炎(Rotavirus gastroenteritis,RVGE)是严重威胁5岁以下儿童健康的全球性公共卫生问题。中国RVGE相关疾病负担重,防控难度大。本共识在《儿童轮状病毒胃肠炎免疫预防专家共识(2020版)》和《世界卫生组织轮状病毒疫苗立场文... 详细信息

轮状病毒胃肠炎(Rotavirus gastroenteritis,RVGE)是严重威胁5岁以下儿童健康的全球性公共卫生问题。中国RVGE相关疾病负担重,防控难度大。本共识在《儿童轮状病毒胃肠炎免疫预防专家共识(2020版)》和《世界卫生组织轮状病毒疫苗立场文件—2021年7月》的基础上,系统综述了RVGE流行病学、已上市轮状病毒(Rotavirus,RV)疫苗的安全性、有效性和免疫保护持久性、RV疫苗免疫策略等国内外研究进展,增补了常见的RVGE诊疗方案。本共识旨在从预防为主和医防融合的角度出发,推动落实以疫苗接种为重点的RVGE综合性防控措施,降低儿童RVGE疾病负担,为从事疾病预防控制、疫苗接种、临床诊疗等多领域的工作人员提供参考。

关键词：轮状病毒胃肠炎轮状病毒疫苗免疫预防共识

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人GⅡ.14诺如病毒VLP抗原性及组织血型抗原结合特征

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病毒学报 2024年第4期40卷 705-715页

作者：欧阳瑄泽柴鹏弟宋敬东靳淼李利利李金松孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730020 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

本研究旨在制备人GⅡ.14诺如病毒的(Norovirus,NoV)病毒样颗粒(Virus⁃like particle,VLP),探索其抗原性与组织血型抗原结合的特征。利用杆状病毒系统表达人GⅡ.14 NoV VP1蛋白,通过超速离心和分子筛层析纯化VLP;将VLP免疫动物制备兔多... 详细信息

本研究旨在制备人GⅡ.14诺如病毒的(Norovirus,NoV)病毒样颗粒(Virus⁃like particle,VLP),探索其抗原性与组织血型抗原结合的特征。利用杆状病毒系统表达人GⅡ.14 NoV VP1蛋白,通过超速离心和分子筛层析纯化VLP;将VLP免疫动物制备兔多抗血清,通过免疫印迹(Western blot,WB)、酶联免疫吸附(ELISA)进行抗原性评价及多抗功能验证;利用唾液结合实验检测人GⅡ.14 VLP的糖结合特征;通过蛋白序列及结构比较分析GⅡ.14 P蛋白潜在的糖结合位。纯化获得人GⅡ.14 VP1蛋白,电镜观察显示可以形成结构较为均一的VLP;制备的兔多抗能与GⅡ.14 VLP特异性结合,与检测的其他基因型VLP没有交叉反应;唾液结合实验表明GⅡ.14 VLP与人A/B/O/AB型别唾液都有较好的结合;序列和结构分析显示GⅡ.14 P蛋白模拟结构与GⅡ.9最为接近,具有与GⅡ.9以及流行株GⅡ.4等相似的潜在糖结合区。本研究表明GⅡ.14具有较为广泛的唾液结合特性,通过序列比对和结构学方法分析了GⅡ.14潜在的受体结合机制,为不同型别NoVs的流行监测提供了更多依据。

关键词：诺如病毒病毒样颗粒组织血型抗原

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2021-2022年中国5岁以下急性胃肠炎相关腺病毒分子特征分析

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国际病毒学杂志 2025年第1期32卷 1-6页

作者：董梦洁车如意熊光萍范佳欣唐晓苹张无敌李响周帅锋康倩傅忠燕曹冉冉唐梅荣李伟红王宇雷玥李静李楚楚王倩袁媛段招军李丹地中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 全国病毒性腹泻监测网络实验室北京102206

目的了解我国5岁以下急性胃肠炎患儿中人腺病毒(human adenovirus,HAdV)的分子特征和遗传进化规律,为疾病控制和预防提供基础数据。方法收集2021—2022年中国14省5岁以下因急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本1321份,对样本进行HAdV实时... 详细信息

目的了解我国5岁以下急性胃肠炎患儿中人腺病毒(human adenovirus,HAdV)的分子特征和遗传进化规律,为疾病控制和预防提供基础数据。方法收集2021—2022年中国14省5岁以下因急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本1321份,对样本进行HAdV实时荧光检测,对HAdV阳性样本和进行测序,利用BioAider 1.532、MEGA 11.0和BEAST 1.8软件对HAdV样本进行同源性、基因分型、系统发育分析。结果1321份样本中HAdV阳性74例(5.60%),包括4种HAdV亚型,HAdV-F占比高达89.19%,其次为HAdV-C(5.41%)、HAdV-A(4.05%)和HAdV-B(1.35%)。对占比最高的HAdV-F41基因型进行贝叶斯进化分析,HAdV-F41最近共同祖先时间约为1882年,平均进化率约为3.69×10^(-5)(HPD95%5.01×10^(-6)~8.41×10^(-5))替换/位点/年。结论我国5岁以下急性胃肠炎患儿中HAdV型别多样,HAdV-F41是最优势基因型,生物信息学分析结果显示我国HAdV进化速率较慢,且主要流行谱系暂未受到欧洲地区影响。对HAdV进行系统长期的监测有助于了解其在中国的多样性及其进化规律。

关键词：人腺病毒基因型急性胃肠炎分子特征

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人呼吸道合胞病毒监测体系的研究现状

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 967-982页

作者：夏百成从兵兵王慧玲马士豪宋金华王娜张燕李有传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所麻疹室北京102206 南京医科大学公共卫生学院国家疫苗研发创新平台南京211166

为实时监测我国不同地理区域流行的HRSV流行特征和疾病负担,进一步制定更加精准有效的预防干预策略,中国迫切需要建立覆盖全国的HRSV实时监测系统。本研究结合国内外HRSV监测研究及其体系现状和我国现有的监测框架,根据监测目的不同,并... 详细信息

为实时监测我国不同地理区域流行的HRSV流行特征和疾病负担,进一步制定更加精准有效的预防干预策略,中国迫切需要建立覆盖全国的HRSV实时监测系统。本研究结合国内外HRSV监测研究及其体系现状和我国现有的监测框架,根据监测目的不同,并考虑到实施的可行性,提出适用于我国的HRSV监测模式,为实时监测HRSV流行动态变化,及时开展风险研判和预测预警,进一步了解我国HRSV的疾病负担,也为我国HRSV感染相关疾病的诊断、防控,以及疫苗和药物的研发、使用和评价提供重要的科学技术支撑。

关键词：呼吸道合胞病毒监测预防控制

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人偏肺病毒假病毒阳性标准品的制备与鉴定

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病毒学报 2024年第6期40卷 1263-1273页

作者：郑诗源黄益曼孟小草贺佳阳宋敬东麻粉莲郑丽舒中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒与病毒病重点实验室北京100052 中国医科大学公共卫生学院沈阳110122

为制备一种安全、有效的人偏肺病毒(Human metapneumovirus,HMPV)假病毒阳性标准品,并用于核酸检测的质量控制,本研究对335条HMPV全基因序列比对分析,选择HMPV基因表达量高且进化较为保守的N基因构建重组假病毒颗粒。合成全长1185 bp的... 详细信息

为制备一种安全、有效的人偏肺病毒(Human metapneumovirus,HMPV)假病毒阳性标准品,并用于核酸检测的质量控制,本研究对335条HMPV全基因序列比对分析,选择HMPV基因表达量高且进化较为保守的N基因构建重组假病毒颗粒。合成全长1185 bp的N基因序列并与CD513B载体进行重组连接,采用第三代慢病毒包装体系构建HMPV假病毒颗粒,超速离心浓缩后感染HEK293T细胞,RT-qPCR核酸检测N基因和透射电镜观察鉴定重组假病毒颗粒,确定假病毒阳性标准品使用浓度,进一步评价阳性标准品的热稳定性和均一性。研究结果显示,包装获得的HMPV假病毒颗粒能够感染HEK293T细胞,假病毒颗粒为圆形或椭圆形病毒样结构,直径在150~200 nm之间,并带有G蛋白刺突。HMPV假病毒稀释10^(3)倍后Ct值最适于进行核酸检测,并且均一性和稳定性可达到阳性标准品要求。本研究成功构建了含有HMPV N基因全长的假病毒颗粒,可作为核酸检测方法的阳性标准品,实现HMPV核酸提取和核酸检测过程的全程质量控制。

关键词：人偏肺病毒假病毒阳性标准品

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G6P型牛轮状病毒的分离培养及鉴定

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中国人兽共患病学报 2024年第2期40卷 134-139页

作者：王铭月张锦华章青孔翔羽王宏孙晓曼李丹地庞立丽段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的从轮状病毒阳性的牛粪便标本中,分离出一株G6P[1]型牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV),对其进行培养和鉴定。方法用PBS溶液重悬粪便标本并离心,将其上清过滤除菌和胰酶处理后,利用MA104细胞进行分离培养;通过逆转录-聚合酶链式反应(... 详细信息

目的从轮状病毒阳性的牛粪便标本中,分离出一株G6P[1]型牛轮状病毒(Bovine Rotavirus,BRV),对其进行培养和鉴定。方法用PBS溶液重悬粪便标本并离心,将其上清过滤除菌和胰酶处理后,利用MA104细胞进行分离培养;通过逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription-polymerase Chain Reaction,RT-PCR)对样本VP4和VP7基因进行扩增和测序,与GenBank上的参考序列进行同源性分析,构建进化树,分析确定其G/P基因分型。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Polyacrylamine Gel Electrophoresis,PAGE)、噬斑实验和电镜(Transmission Electron Microscope,TEM)等技术对分离到的病毒进行鉴定和纯化。绘制病毒生长动力学曲线。结果分离培养了1株BRV毒株,将其命名BLL。VP7和VP4基因测序结果显示此毒株为G6P[1]型轮状病毒。PAGE胶结果显示分离株电泳型为长型,条带呈现A组轮状病毒排列电泳图谱;通过噬斑实验将毒株进行了纯化。电镜检测到典型的轮状病毒颗粒。病毒生长动力学曲线可发现病毒在感染后6 h已经开始复制。结论本研究成功分离到G6P[1]型牛型轮状病毒,为研究G6P[1]型轮状病毒的病原学特征提供实验基础和技术参考。

关键词：轮状病毒 G6P[1] 分离噬斑实验纯化序列分析

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柯萨奇病毒A组16型VP1-145位氨基酸变异影响对硫酸乙酰肝素结合能力的初步探究

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病毒学报 2024年第2期40卷 346-356页

作者：宗彦君孙甜甜王蕊刘莹李冀琛孙强刘志军张勇潍坊医学院潍坊261053 传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 国家脊髓灰质炎实验室国家卫生健康委员会实验室生物安全重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)与肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)是国内导致手足口病的重要病原体,二者同源,来自共同祖先,基因组结构相同,并且均使用硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)作为吸附受体。本研究基于E... 详细信息

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)与肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)是国内导致手足口病的重要病原体,二者同源,来自共同祖先,基因组结构相同,并且均使用硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate,HS)作为吸附受体。本研究基于EV-A71的VP1-145位氨基酸位点的相关研究结果,分析CVA16的VP1-145氨基酸差异,选取3株中国流行的,在该位点具有差异的CVA16,进行对HS结合能力影响的研究。使用不同浓度肝素酶Ⅰ处理人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞,比较不同CVA16株对肝素酶Ⅰ处理前后的RD细胞的吸附能力,以及接种后12h,24h,48h后各毒株在RD细胞的复制情况。结果表明,在使用5mIU/mL和10mIU/mL浓度肝素酶Ⅰ水解RD细胞表面的HS后,VP1-145氨基酸位点为甘氨酸(Glycine,G)的CVA16对RD细胞的吸附能力下降,其下降程度与肝素酶Ⅰ的作用浓度呈正相关,且影响了后续12h,24h,48h病毒在RD细胞中的复制,其差异具有统计学意义(P<0.05)。而VP1-145氨基酸位点为谷氨酸(Glutamic acid,E)的两株CVA16均未观察到此种趋势。为了进一步探究该种结合能力的差异与病毒致病力之间的关系,对三株病毒进行2日龄ICR乳鼠感染实验。通过观察乳鼠生存率、临床评分、体重变化,来评估不同CVA16株在小鼠感染模型中的致病力差异。结果表明,CVA16(VP1-145E)的致病力明显强于CVA16(VP1-145G)。后对三株病毒进行全基因组测序,测序结果显示,除VP1-145位点外,三株CVA16还存在其他的差异位点,故后续我们又通过反向遗传学拯救病毒,对VP1-145位点的作用机制进行了进一步的探讨。本研究结果证实,VP1-145位点的氨基酸变异会影响CVA16与HS的结合能力,145位点为E的病毒,其与HS的结合能力较差,当145位点由E突变至G时,病毒与HS的结合能力增强,其与RD细胞的结合能力受到肝素酶Ⅰ的影响。本研究为CVA16毒力位点与致病机制的研究提供了一定的理论基础。

关键词：柯萨奇病毒A组16型 VP1-145位点硫酸乙酰肝素致病力

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重组呼吸道合胞病毒G蛋白保守域的腺病毒载体疫苗的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第5期38卷 497-505页

作者：石艺柴鹏弟段招军章青孔翔羽王宏庞立丽李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的以非复制型的5型人腺病毒(human adenovirus type 5,Ad5)为载体,构建重组呼吸道合胞病毒G蛋白(RSV-G)保守域的腺病毒载体疫苗,利用小鼠评价其免疫原性及免疫保护效果。方法利用分子克隆方法构建插入能串联表达A亚型和B亚型RSV-G保守... 详细信息

目的以非复制型的5型人腺病毒(human adenovirus type 5,Ad5)为载体,构建重组呼吸道合胞病毒G蛋白(RSV-G)保守域的腺病毒载体疫苗,利用小鼠评价其免疫原性及免疫保护效果。方法利用分子克隆方法构建插入能串联表达A亚型和B亚型RSV-G保守域(Gbcc和Gacc)的重组Ad5载体质粒(Ad5-Gbcc-Gacc)并转染HEK293A细胞,获得重组腺病毒Ad5-Gbcc-Gacc;通过多酶切鉴定病毒Ad5-Gbcc-Gacc的基因组,用Western blot验证Gbcc-Gacc基因的表达水平;重组腺病毒通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠1次,在第6周用RSV Long毒株对小鼠以滴鼻的方式进行攻毒。用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测和评价免疫小鼠血清IgG及抗体亚型,用微中和检测的方法测定中和抗体水平,同时每天记录小鼠攻毒前后的体重,并检测小鼠肺组织的病理变化、肺和鼻组织中RSV病毒拷贝数。结果Western blot及多酶切鉴定结果与预期相符,表明重组腺病毒拯救成功。Ad5-Gbcc-Gacc在小鼠体内可以诱导较高滴度的特异性IgG、中和抗体水平及Th1/Th2平衡的免疫反应。与未免疫小鼠比较,经Ad5-Gbcc-Gacc免疫小鼠攻毒后肺部只有轻微病理损伤,且肺部及鼻甲的病毒拷贝数降低。结论Ad5-Gbcc-Gacc具备良好的免疫原性,并能对RSV感染小鼠有一定的保护作用,为进一步研制基于G蛋白的RSV疫苗奠定了基础。

关键词：腺病毒载体呼吸道合胞病毒 G蛋白中央保守域疫苗

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优化SARS-CoV-2 S-EABR在293T细胞中的分泌性表达

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第5期38卷 489-496页

作者：姜苏芮毛彤瑶张鹏段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的通过优化启动子、终止子、信号肽及胞内序列末端氨基酸来增加SARS-CoV-2 S-EABR蛋白在293T细胞系中的分泌性表达。方法首先构建四种含有不同元件(启动子和终止子)组合的PCDNA3.1(-)真核载体质粒(Mb、MS、Ab、AS),插入按照人密码子... 详细信息

目的通过优化启动子、终止子、信号肽及胞内序列末端氨基酸来增加SARS-CoV-2 S-EABR蛋白在293T细胞系中的分泌性表达。方法首先构建四种含有不同元件(启动子和终止子)组合的PCDNA3.1(-)真核载体质粒(Mb、MS、Ab、AS),插入按照人密码子优化的S-EABR-1目的序列,瞬时转染293T细胞,48 h后收取细胞培养上清液和细胞裂解液,通过Western Blot和ELISA检测上清S蛋白的表达水平。然后选择表达最好的元件组合载体,插入S-EABR-1和S-EABR-2(于S-EABR-1尾部添加4个氨基酸——HSLP)目的序列,比较上清S蛋白的表达水平。最后基于上述表达效果最好的元件组合载体及插入目的序列,构建替换SARS-CoV-2 S蛋白原始信号肽的5种载体质粒(tPA,AZ,IFNα2,HSA,GLUC),比较上清S蛋白表达水平。同时利用计算机模拟SRP54亚基与信号肽核酸序列的分子对接,将对接分值(Docking Score)作为对接评价标准,预测两者的结合情况。结果在293T细胞中,Ab组合的载体分泌表达S-EABR水平最高,产量相较于Mb增加了125%。基于Ab组合载体,S-EABR-2序列表达分泌S-EABR的水平较S-EABR-1增加了约50%,进一步替换成HSA信号肽后的S-EABR表达分泌水平较S蛋白原始信号肽增加了约83%。此外,计算机模拟结果显示HSA与SRP54亚基的对接分值最高,为1505.861。结论通过真核表达元件(启动子、终止子和信号肽)及胞内序列的优化可进一步提高经密码子优化后的S-EABR在293T细胞中的分泌性表达。信号肽与SRP54亚基亲和力的计算模拟对接分值与S-EABR分泌表达水平基本吻合的结果也为后续提高目的基因分泌性表达的信号肽筛选提供了一种设计思路和筛选策略。

关键词：新型冠状病毒 S-EABR 启动子终止子信号肽信号识别颗粒

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人H组轮状病毒VP7蛋白表达及其多克隆抗体制备

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第6期38卷 702-708页

作者：刘晓钰赵颖张璐琦欧阳瑄泽章青李丹地李金松李利利孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的表达和纯化人H组轮状病毒(group H rotavirus,RVH)J19株的VP7蛋白,制备VP7的多克隆抗体(多抗)并对其多抗功能进行鉴定。方法通过杆状病毒系统表达RVH J19株的VP7蛋白,通过亲和层析和凝胶过滤层析方法进行蛋白纯化。将纯化得到的RVH ... 详细信息

目的表达和纯化人H组轮状病毒(group H rotavirus,RVH)J19株的VP7蛋白,制备VP7的多克隆抗体(多抗)并对其多抗功能进行鉴定。方法通过杆状病毒系统表达RVH J19株的VP7蛋白,通过亲和层析和凝胶过滤层析方法进行蛋白纯化。将纯化得到的RVH J19株的VP7蛋白免疫兔子以制备VP7多抗血清,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)、免疫荧光荧光试验(Immunofluorescence,IF)等对VP7多抗血清进行鉴定。结果纯化得到可溶的J19 VP7蛋白;制备获得J19株VP7兔多抗;ELISA显示VP7多抗具有较好的结合效价,在稀释2048000倍时与人RVH VP7蛋白仍有结合;WB表明多抗能够结合J19 VP7蛋白;IF显示VP7多抗可以特异识别人H组轮状病毒J19株。结论本研究成功得到了人H组轮状病毒J19 VP7蛋白,制备的VP7多抗可以特异性识别人H组轮状病毒,为人H组轮状病毒的检测及病毒衣壳结构功能研究提供了基础。

关键词：人H组轮状病毒杆状病毒表达系统 VP7蛋白多克隆抗体

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