检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2021年第3期37卷 695-711页

作者：冯晔囡宋洋王世文陈操许文波中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国科学院生物安全大科学研究中心武汉430071

截至2021年5月11日,基于Pango命名法,依据新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的基因组变异变迁将其划分为1281种亚型或分支。而SARS-CoV-2刺突(spike,S)蛋白的变异直接影响病毒的生物学功能。2020年下半年至今,全球多个国家和地区监测发现SARS-Co... 详细信息

截至2021年5月11日,基于Pango命名法,依据新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的基因组变异变迁将其划分为1281种亚型或分支。而SARS-CoV-2刺突(spike,S)蛋白的变异直接影响病毒的生物学功能。2020年下半年至今,全球多个国家和地区监测发现SARS-CoV-2的S蛋白发生氨基酸突变,特别是受体结合区或单克隆抗体结合位点氨基酸突变引起病毒的传播力和致病力改变以及部分免疫逃逸等。世界卫生组织将重要变异株划分为"关切变异株(variant of concern,VOC)"和"关注变异株(variant of interest,VOI)"。其中,VOC有4个,分别是VOC202012/01、501Y.V2、P.1和B.1.617;VOI有6个,分别是CAL.20C、P.2、B.1.526、B.1.525、B.1.616和P.3。一些氨基酸突变在多个VOC和VOI病毒株中交叉出现或同时出现,E484K/Q等重要氨基酸突变引起的部分免疫逃逸导致全球现有疫苗免疫效力下降,但现有新冠疫苗对VOC和VOI变异株仍然有效。本文通过对SARS-CoV-2变异株流行概况及S蛋白重要氨基酸突变特征进行归纳分析,为新冠病毒变异株的监测、防控和二代疫苗的研制策略提供科学参考。

关键词：新型冠状病毒肺炎(COVID-19) 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 刺突蛋白关切变异株关注变异株

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GII.8和GII.9型诺如病毒P蛋白糖结合特征研究

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国际病毒学杂志 2023年第1期30卷 5-9页

作者：吴铮苏韫曦丛鑫魏宇航孔翔羽靳淼李丹地李金松孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730020 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的了解GII.8和GII.9型诺如病毒P蛋白的糖结合特征。方法利用大肠杆菌系统获得GII.8和GII.9诺如病毒P颗粒蛋白,通过寡糖和唾液结合实验,研究P颗粒蛋白与组织血型抗原等糖的相互作用,再采用序列比对和结构比较,分析GII.8和GII.9糖结合... 详细信息

目的了解GII.8和GII.9型诺如病毒P蛋白的糖结合特征。方法利用大肠杆菌系统获得GII.8和GII.9诺如病毒P颗粒蛋白,通过寡糖和唾液结合实验,研究P颗粒蛋白与组织血型抗原等糖的相互作用,再采用序列比对和结构比较,分析GII.8和GII.9糖结合位点的序列和结构特征。结果GII.8 P蛋白与所检测的寡糖无明显结合,与部分人A/B/O型别唾液样本有结合。GII.9 P蛋白结合H双糖,与人A/B/O型别唾液有很好结合。序列和结构分析均显示GII.8 P蛋白具有与GIII.9相似的潜在糖受体结合位点,其位点与流行株GII.4等型别的糖受体区区相近。结论非流行株GII.8和GII.9 P蛋白与不同组织血型抗原的结合能力不同,提示可能会造成流行的差异,需要对非流行株开展持续的分子监测。

关键词：诺如病毒 P颗粒蛋白组织血型抗原寡糖结合唾液结合

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高效分离1型单纯疱疹病毒感染细胞外泌体的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2021年第6期35卷 619-625页

作者：张莉王娇王湛李颖王慧宋敬东刘宏图中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 中国科学院生物安全大科学研究中心武汉430071 中国疾病预防控制中心-中国科学院武汉研究所新发传染病与生物安全联合研究中心武汉430071 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的建立并优化1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染HEp-2细胞外泌体的分离方案。方法收集HSV-1感染HEp-2的细胞培养上清,经差速离心和滤膜过滤对上清液进行预处理,使用外泌体提取试剂(total exosome isolation,TEI... 详细信息

目的建立并优化1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染HEp-2细胞外泌体的分离方案。方法收集HSV-1感染HEp-2的细胞培养上清,经差速离心和滤膜过滤对上清液进行预处理,使用外泌体提取试剂(total exosome isolation,TEI)结合尺寸排除色谱法(size-exclusion chromatography,SEC)的组合方案对粗提的外泌体进行分离和纯化,最后经超滤浓缩,获得高纯度外泌体。使用3种检测方法对纯化的外泌体进行表征鉴定。结果Western blot结果显示,HSV-1感染或未感染HEp-2细胞外泌体均含有外泌体标志蛋白TSG101和CD9,另外,HSV-1感染细胞外泌体含有gB、VP16和ICP5等3种病毒蛋白。透射电镜观察显示,纯化的外泌体近似圆形,具有膜结构,直径50~150 nm,未发现典型HSV-1病毒颗粒。NTA结果显示,纯化的外泌体峰值粒径均为112.2 nm;单纯HEp-2细胞来源的粒子峰值浓度为3.4×10^(9)个粒子/ml,HSV-1感染细胞来源的粒子峰值浓度为4.1×10^(9)个粒子/ml。结论本研究建立了高效优化的HSV-1感染细胞外泌体分离纯化方案。

关键词： 1型单纯疱疹病毒 HEp-2细胞外泌体分离纯化

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新型冠状病毒全球主要流行株基因组变异变迁分析

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疾病监测 2021年第10期36卷 990-995页

作者：冯晔囡夏影陈操许文波中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国科学院生物安全大科学研究中心湖北武汉430071

基于Pango命名法,全球曾经或正在流行的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)亚型或分支已有1379个(截至2021年9月20日)。由于传播力、免疫逃逸能力更强的变异株逐渐成为绝对优势流行株,很多基因型别已经消失或接近消失。世界卫生组织定义了4种关... 详细信息

基于Pango命名法,全球曾经或正在流行的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)亚型或分支已有1379个(截至2021年9月20日)。由于传播力、免疫逃逸能力更强的变异株逐渐成为绝对优势流行株,很多基因型别已经消失或接近消失。世界卫生组织定义了4种关切变异株、5种关注变异株和11种需进一步监测的变异株。目前,Delta变异株取代Alpha变异株成为全球优势流行毒株,也是近期我国输入病例和导致输入关联本土疫情的主要毒株。同时,在南美洲部分国家流行的Gamma和Lambda变异株,在南美洲和北美洲部分国家流行的Mu变异株,以及在南非流行的C.1.2变异株,同样引起全球的高度关注。本研究对SARS-CoV-2基因组的变异变迁、重要变异株的研究进展进行综述,并结合SARS-CoV-2变异株的流行现状提出了下一步科学研究关注的要点。

关键词：新型冠状病毒关切变异株关注变异株传播力致病力免疫逃逸

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人冠状病毒229E体外感染与复制特征研究

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病毒学报 2025年第2期41卷 383-394页

作者：刘冠雅吴依依刘士元王梦微张越李兆卿高尚卿叶飞陆柔剑黄保英谭文杰包头医学院公共卫生学院传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

本研究旨在明确HCoV-229E在多种细胞中的感染特征与复制动力学。首先比较了33℃和37℃下HCoV-229E在MRC-5中的致细胞病变效应、核酸增殖与感染活性等特征，确定病毒培养温度；通过RT-PCR（Real-time reverse transcription,rRT-PCR）比... 详细信息

本研究旨在明确HCoV-229E在多种细胞中的感染特征与复制动力学。首先比较了33℃和37℃下HCoV-229E在MRC-5中的致细胞病变效应、核酸增殖与感染活性等特征，确定病毒培养温度；通过RT-PCR（Real-time reverse transcription,rRT-PCR）比较了HCo -229E在不同种属与组织来源的13种细胞系（Huh7.5、He La、MRC-5、A549、RD、Hep-2、Calu3、Ha Cat-WT、Vero、LLC-MK2、MDCK、BHK-21、Mv1Lu）中的病毒RNA复制水平，评估了上述细胞对病毒的易感性；进一步探究其在易感细胞系中的致细胞病变效应（Cytopathic effect,CPE）、半数组织感染剂量(50%of tissue culture infectious dose,TCID50)复制动力学和噬斑形成特性。研究发现，HCoV-229E以同等MOI感染MRC-5后，病毒RNA与TCID50的复制增殖均表现为33℃优于37℃。病毒RNA复制动力学结果显示，13种细胞中的6种人源细胞（Huh7.5、HeLa、MRC-5、RD、A549、Hep-2）对HCo V-229E易感，但在Hep-2中的复制较差。CPE结果表明，Huh7.5与He La均在感染后48h观察到CPE，并于72h出现细胞变圆脱落，与MRC-5趋势一致；而A549和RD分别于72h和96h观察到CPE，但细胞脱落死亡情况较轻。病毒活性复制动力学显示，0.01与0.001MOI感染剂量下，HCo V-229E在Huh7.5中分别于24h和48h达到复制高峰(106.96TCID50/m L和106.65TCID50/mL,P<0.05)；在HeLa中分别于48h与72h达到复制高峰(106.8TCID50/mL和106.56TCID50/mL,P<0.05)；在A549中均在96h到达复制高峰(约106.3TCID50/mL,P>0.05)；在RD细胞中均在72h到达复制高峰(106.58TCID50/m L和106.65TCID50/mL,P>0.05)。HCoV-229E可在Huh7.5、HeLa、A549、RD细胞中产生不同形态的空斑，其中He La细胞时间短（96h）、噬斑清晰易于计数，是HCoV-229E空斑实验的良好选择。本研究通过RT-PCR、CPE、病毒活性和噬斑特性系统展示了HCoV-229E在13种细胞中表现出不同感染特征与复制动力学，为深入研究HCoV-229E病原生物学和抗病毒药物筛选等提供了参考。

关键词：人冠状病毒229E 易感细胞系复制致病变效应噬斑

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新型冠状病毒Omicron BA.4/5变异株RBD-Fc蛋白的表达及其免疫效果的评价

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病毒学报 2023年第3期39卷 620-630页

作者：时雨晴李海宋洋任虎祝双利冀天娇胡宏俏曹蕾赵建楠郭宏黄星湖江洁张燕李栋许文波山东第一医科大学(山东省医学科学院) 济南250117 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室世界卫生组织西太平洋地区脊髓灰质炎参比实验室北京102206 安徽理工大学医学院淮南232001

本研究针对新冠病毒Omicron BA.4/5的受体结合域(Receptor binding domain, RBD)构建一个连接Fc受体的二聚体蛋白BA.4/5-RBD-Fc(BRF)并评价其免疫原性。结果显示,两种佐剂组小鼠的二免后血清均可产生高滴度的IgG抗体且显著高于一免后血... 详细信息

本研究针对新冠病毒Omicron BA.4/5的受体结合域(Receptor binding domain, RBD)构建一个连接Fc受体的二聚体蛋白BA.4/5-RBD-Fc(BRF)并评价其免疫原性。结果显示,两种佐剂组小鼠的二免后血清均可产生高滴度的IgG抗体且显著高于一免后血清(P<0.0001),BRF+AlOH/CpG组小鼠血清产生较为平衡的IgG1和IgG2a抗体应答,而BRF+BFA03组小鼠血清能产生更多的偏向Th2应答的IgG1抗体,且IgG1/IgG2a比值显著高于BRF+AlOH/CpG组(P<0.0001)。BRF+AlOH/CpG组产生的Th1应答的细胞因子干扰素γ(Interferon-γ,IFN-γ)高于BRF+BFA03组(P<0.01),而产生的Th2应答细胞因子白介素4(Interleukin-4,IL-4)IL-4显著低于BRF+BFA03组(P<0.01)。BRF蛋白结合不同佐剂两次免疫小鼠后的血清均可以有效中和目前Omicron主要的流行亚型BA.2与BA.4活病毒,产生高达19 334 598和17 224 096的中和抗体滴度。因此,BRF蛋白诱导小鼠血清产生的中和抗体针对Omicron系列变异株具有一定的广谱性,AlOH/CpG佐剂可以使BRF蛋白产生偏向Th1的免疫应答反应,而BFA03佐剂产生明显偏向Th2的免疫应答反应。本研究为新冠Omicron变异株亚单位疫苗的研发提供有效的科学依据。

关键词：新型冠状病毒 RBD蛋白 Fc受体佐剂免疫效果

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人呼吸道合胞病毒G蛋白在大肠杆菌中的表达及联合不同新型佐剂免疫效果的研究

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病毒学报 2023年第3期39卷 691-701页

作者：黄星湖宋洋胡宏俏李海任虎宋晶晶郭宏赵建楠江洁时雨晴张燕许文波安徽理工大学医学院淮南232001 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室世界卫生组织西太平洋地区脊髓灰质炎参比实验室北京102206 山东第一医科大学(山东省医学科学院) 济南250117

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus, hRSV)是导致5岁以下儿童和老人住院和死亡的主要原因。hRSV囊膜表面的融合蛋白F(Fusion protein, F)和吸附蛋白G(Attachment protein, G)均能诱导产生保护性中和抗体,但目前临床... 详细信息

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus, hRSV)是导致5岁以下儿童和老人住院和死亡的主要原因。hRSV囊膜表面的融合蛋白F(Fusion protein, F)和吸附蛋白G(Attachment protein, G)均能诱导产生保护性中和抗体,但目前临床研究主要集中于F蛋白的亚单位疫苗及保护性单抗的研发,对G蛋白的研究较少。虽然G蛋白的高度糖基化导致其免疫原性较差,但使用佐剂能改善G蛋白的免疫效果。本研究利用大肠杆菌成功表达了hRSVA-Long株G蛋白膜外区67~298氨基酸(命名为REG),并探索了REG与四种不同组合形式的新型佐剂联合免疫BALB/c小鼠的免疫效果:BFA03佐剂、B型CpG OND混合磷酸铝佐剂组合、C型CpG OND混合磷酸铝佐剂组合、BALB/c小鼠CD4+T细胞表位肽混合C型CpG OND和磷酸铝佐剂组合。对每只小鼠大腿肌肉多点注射100μL免疫原,初次免疫后第28天进行加强免疫。实验结果表明,接种REG联合新型BFA03佐剂的小鼠体内诱导产生结合抗体的能力最强,且其与接种REG蛋白联合B型CpG OND混合磷酸铝佐剂的小鼠均产生了最高的中和抗体,并且能有效降低小鼠攻毒后的肺病毒载量。然而,REG与4种形式的佐剂组在降低hRSV攻毒后的肺病理损伤方面与对照组相比未见差异。本研究提示,在选用G蛋白研发hRSV疫苗并筛选高效价中和抗体的同时,还应进一步探索降低肺病理损伤的方法。

关键词：人呼吸道合胞病毒新型佐剂 G蛋白

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2019年我国5岁以下腹泻住院患儿星状病毒感染的流行特征分析

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国际病毒学杂志 2022年第2期29卷 109-112页

作者：王明雯高升辉孙晓曼李静欣李金松李丹地段招军中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的了解2019年我国5岁以下腹泻住院患儿星状病毒(Astrovirus,AstV)感染的流行特点,为AstV腹泻防控提供参考。方法收集2019年各监测哨点医院的5岁以下腹泻住院患儿粪便样本及临床信息。采用RT-PCR检测AstV,描述AstV感染的流行特征。结... 详细信息

目的了解2019年我国5岁以下腹泻住院患儿星状病毒(Astrovirus,AstV)感染的流行特点,为AstV腹泻防控提供参考。方法收集2019年各监测哨点医院的5岁以下腹泻住院患儿粪便样本及临床信息。采用RT-PCR检测AstV,描述AstV感染的流行特征。结果采集5岁以下腹泻住院患儿粪便标本共4918份,检测4531份,AstV阳性检出率为5.30%,四川省AstV阳性检出率最低(1.23%),甘肃省AstV阳性检出率最高(14.36%);AstV在男性患儿和女性患儿中阳性检出率分别为5.14%和4.52%,无明显性别差异(P>0.05);AstV感染无明显年龄、城乡差别和季节特征(P>0.05);AstV阳性病例中,常见临床表现为腹泻伴呕吐等症状,腹泻次数多为0~2次,粪便性状常为水样便。结论AstV是我国5岁以下腹泻住院患儿的主要病原之一,临床诊疗时须予以考虑,需持续开展监测。

关键词：病毒性腹泻星状病毒流行特征

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人呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展

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中国生物制品学杂志 2022年第10期35卷 1261-1267,1273页

作者：李海任虎(综述) 张燕许文波(审校) 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室北京102206 中国科学院生物安全大科学研究中心湖北武汉430000

人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因之一,据统计全球每年因hRSV感染产生的经济负担超过800亿美元。自20世纪50年代hRSV被发现以来,国内外科研人员对hRSV疫苗进行... 详细信息

人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因之一,据统计全球每年因hRSV感染产生的经济负担超过800亿美元。自20世纪50年代hRSV被发现以来,国内外科研人员对hRSV疫苗进行了大量的研发,至今尚无被批准使用的hRSV疫苗。hRSV疫苗一直面临安全性不足或免疫原性弱等巨大挑战,已有多种进入临床试验阶段的hRSV疫苗宣布“失败”。2013年,融合前F蛋白(prefusion F protein,Pre-F)构象成功解析后,以Pre-F为基础的hRSV疫苗展现出良好的应用前景,目前已有14种疫苗处于临床试验阶段,包括减毒活疫苗、病毒载体疫苗、亚单位疫苗和颗粒疫苗等。本文就hRSV疫苗研发面临的挑战以及最新研究进展作一综述。

关键词：人呼吸道合胞病毒疫苗融合前F蛋白

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人呼吸道合胞病毒F蛋白多肽免疫原性的初步研究

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病毒学报 2023年第2期39卷 344-353页

作者：胡宏俏李海黄星湖任虎江洁张亚楠宋晶晶郭宏时雨晴赵建楠张燕宋洋许文波安徽理工大学医学院淮南232001 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室世界卫生组织西太平洋区脊髓灰质炎参比实验室北京102206 北京中医药大学北京102206 山东第一医科大学泰安271000

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,hRSV)是引起全球婴幼儿下呼吸道感染的最主要病原体。hRSV融合蛋白(Fusion protein,F)高度保守,是激发机体产生保护性抗体的主要靶向蛋白。目前,多种基于F蛋白设计的hRSV疫苗处于... 详细信息

人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,hRSV)是引起全球婴幼儿下呼吸道感染的最主要病原体。hRSV融合蛋白(Fusion protein,F)高度保守,是激发机体产生保护性抗体的主要靶向蛋白。目前,多种基于F蛋白设计的hRSV疫苗处于三期临床试验阶段,但尚未批准上市。本研究基于hRSV F蛋白设计的2条多肽PA(F蛋白,aa216-244)、PB(F蛋白,aa110-136),及其不同组合形式PM(PA和PB等量混合)、PL(PA和PB通过Linker连接),分别通过肌肉注射和滴鼻免疫BALB/c小鼠,评价多肽在小鼠体内的免疫效果。每只小鼠多肽的免疫剂量为25μg,分别于第0、14、28 d等剂量(加强)免疫一次。实验结果显示,与铝佐剂和CpG混合,多肽PA、PB、PM和PL肌肉注射均能诱导小鼠产生高滴度结合抗体,降低肺脏病毒载量,其中PB免疫组小鼠在hRSV活病毒攻毒后,体重恢复时间及肺病毒载量降低程度优于PM和PL免疫组和对照组;将多肽PM和PL通过不同途径免疫小鼠,滴鼻免疫组小鼠体重恢复时间和肺脏病理损伤程度优于肌肉注射免疫组。结果证明单独一条肽免疫对小鼠产生的保护效果优于混合肽或串联肽,且滴鼻免疫产生的保护效果优于肌肉注射免疫。因此有必要深入开展hRSV多肽疫苗临床前研究,为多肽疫苗研制奠定基础。

关键词：人呼吸道合胞病毒融合蛋白多肽疫苗

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