检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2024年第3期38卷 319-325页

作者：张小山马晶郝彦哲杨靖侯美伶李红霞刘京端孟号迪曹玉玺张晓光中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室北京100052 北京润博福得生物科技发展有限公司北京101111

目的本研究旨在开发一种快速、准确的流感病毒一体化核酸检测方法。方法设计了针对近年来国内流感病毒主要流行株的特异性引物和探针,将其与提取、扩增试剂和即时检测(point of care test,POCT)系统整合,实现针对流感病毒的核酸提取、... 详细信息

目的本研究旨在开发一种快速、准确的流感病毒一体化核酸检测方法。方法设计了针对近年来国内流感病毒主要流行株的特异性引物和探针,将其与提取、扩增试剂和即时检测(point of care test,POCT)系统整合,实现针对流感病毒的核酸提取、反应体系配制、扩增反应和结果判读功能的快速一体化病毒核酸检测流程。使用培养的流感病毒对检测体系进行检测下限测试,并对检测体系进行特异性测试。结果成功设计了甲型和乙型流感病毒的二重扩增引物和探针,实现了500拷贝/ml的检测下限,并通过特异性测试验证了检测试剂对腺病毒、呼吸道合胞病毒等其他呼吸道病原体无交叉反应。本研究建立的基于POCT技术的流感病毒核酸快速检测方法,可以实现在50 min内完成核酸提取、扩增和结果判读检测全流程,同时可以实现检测数据的实时上传。结论开发的基于POCT技术的流感病毒快速检测试剂盒,实现了"样品进、结果出"的便捷操作,适合在基层医疗机构中快速检测流感病毒,具有重要的临床应用价值。

关键词：流感病毒核酸检测即时检测技术

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2004-2021年云南省肾综合征出血热流行特征分析

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疾病监测 2023年第11期38卷 1357-1362页

作者：杜珊珊邓雪飞黄晓霞李阿茜王芹李川冯云李建东中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 云南省地方病防治所云南大理671000

目的对2004—2021年云南省肾综合征出血热(HFRS)报告病例进行流行病学分析,了解HFRS流行特征。方法从国家法定传染病监测系统获得了2004—2021年云南省HFRS报告病例数据,采用描述性流行病学方法对全省2004—2021年HFRS时间、地区和人群... 详细信息

目的对2004—2021年云南省肾综合征出血热(HFRS)报告病例进行流行病学分析,了解HFRS流行特征。方法从国家法定传染病监测系统获得了2004—2021年云南省HFRS报告病例数据,采用描述性流行病学方法对全省2004—2021年HFRS时间、地区和人群分布和诊断类别资料进行统计分析,并以县级为单位进行空间聚集分析。结果2004—2021年全省共报告HFRS病例2556例,年均发病率为0.30/10万,死亡病例17例,病死率为0.67%;每年主要以3—8月(春夏季)为发病高峰,70.81%患者为男性,16~60岁患者占76.72%,77.11%病例为农民;全局空间自相关分析Moran’s I系数0.010~0.319,仅2011—2021年有相关性(P<0.05),高-高聚集区主要集中在大理白族自治州、楚雄彝族自治州和丽江市,实验室确诊病例和病死率存在较强的负相关(r=-0.720,P=0.019),疑似病例和病死率存在较强的正相关(r=0.649,P=0.042),报告病例数少的地区病死率高。结论云南省HFRS在2012—2021年间处于相对高发期,波及地理范围有扩大趋势,但仍呈现明显的时空聚集特征,累及人群逐渐向高龄人群偏移,应推动高发地区落实综合防控措施,提高病例诊断与实验室检测能力。

关键词：肾综合征出血热流行特征疾病监测汉坦病毒

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人冠状病毒229E体外感染与复制特征研究

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病毒学报 2025年第2期41卷 383-394页

作者：刘冠雅吴依依刘士元王梦微张越李兆卿高尚卿叶飞陆柔剑黄保英谭文杰包头医学院公共卫生学院包头014040 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

本研究旨在明确HCoV-229E在多种细胞中的感染特征与复制动力学。首先比较了33℃和37℃下HCoV-229E在MRC-5中的致细胞病变效应、核酸增殖与感染活性等特征,确定病毒培养温度;通过RT-PCR(Real-time reverse transcription,rRT-PCR)比较了H... 详细信息

本研究旨在明确HCoV-229E在多种细胞中的感染特征与复制动力学。首先比较了33℃和37℃下HCoV-229E在MRC-5中的致细胞病变效应、核酸增殖与感染活性等特征,确定病毒培养温度;通过RT-PCR(Real-time reverse transcription,rRT-PCR)比较了HCoV-229E在不同种属与组织来源的13种细胞系(Huh7.5、HeLa、MRC-5、A549、RD、Hep-2、Calu3、HaCat-WT、Vero、LLC-MK2、MDCK、BHK-21、Mv1Lu)中的病毒RNA复制水平,评估了上述细胞对病毒的易感性;进一步探究其在易感细胞系中的致细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE)、半数组织感染剂量(50%of tissue culture infectious dose,TCID_(50))复制动力学和噬斑形成特性。研究发现,HCoV-229E以同等MOI感染MRC-5后,病毒RNA与TCID_(50)的复制增殖均表现为33℃优于37℃。病毒RNA复制动力学结果显示,13种细胞中的6种人源细胞(Huh7.5、HeLa、MRC-5、RD、A549、Hep-2)对HCoV-229E易感,但在Hep-2中的复制较差。CPE结果表明,Huh7.5与HeLa均在感染后48h观察到CPE,并于72h出现细胞变圆脱落,与MRC-5趋势一致;而A549和RD分别于72h和96h观察到CPE,但细胞脱落死亡情况较轻。病毒活性复制动力学显示,0.01与0.001MOI感染剂量下,HCoV-229E在Huh7.5中分别于24h和48h达到复制高峰(106.96 TCID_(50)/mL和10^(6.65) TCID_(50)/mL,P<0.05);在HeLa中分别于48h与72h达到复制高峰(106.8 TCID_(50)/mL和10^(6.56) TCID_(50)/mL,P<0.05);在A549中均在96h到达复制高峰(约10^(6.3) TCID_(50)/mL,P>0.05);在RD细胞中均在72h到达复制高峰(106.58 TCID_(50)/mL和10^(6.65) TCID_(50)/mL,P>0.05)。HCoV-229E可在Huh7.5、HeLa、A549、RD细胞中产生不同形态的空斑,其中HeLa细胞时间短(96h)、噬斑清晰易于计数,是HCoV-229E空斑实验的良好选择。本研究通过RT-PCR、CPE、病毒活性和噬斑特性系统展示了HCoV-229E在13种细胞中表现出不同感染特征与复制动力学,为深入研究HCoV-229E病原生物学和抗病毒药物筛选等提供了参考。

关键词：人冠状病毒229E 易感细胞系复制致病变效应噬斑

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乙肝病毒感染者HBV基因突变与疾病进展的关系研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第1期38卷 21-28页

作者：韩素雅张爽唐林苏秋东王富珍王锋郑徽邱丰李红艺王宇沈立萍中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国疾病预防控制中心免疫规划中心北京100050 首都医科大学附属北京友谊医院北京100050

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者在不同疾病进展阶段的HBV全基因序列以及关键位点突变情况, 了解HBV基因特征与疾病进展的关系。方法收集无症状HBV携带者、慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者以及原发性肝细胞癌患者四种乙肝感染者的血清样... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者在不同疾病进展阶段的HBV全基因序列以及关键位点突变情况, 了解HBV基因特征与疾病进展的关系。方法收集无症状HBV携带者、慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者以及原发性肝细胞癌患者四种乙肝感染者的血清样本和基本信息, 采用巢式PCR法扩增样本获得HBV全基因序列, 构建系统发育树确定样本基因型别, 结合各型别参考序列分析样本的基因突变情况。结果成功扩增256份样本, 包括无症状HBV携带组68例、CHB组118例、LC组15例和HCC组55例, 检出B、C、D、I和C/D重组型5种基因型。结果发现有56个核苷酸位点突变率在四组之间有统计学差异(P<0.05);除发现C105T、A1762T/G1764A、G1899A等一些既往报导的关键位点突变以外, 还发现HCC组的T791A、C1485T、C1023T等位点突变率显著高于其他组;无症状HBV携带组的T2150G、T2151C显著高于其他组;发生缺失突变的序列共计24条, 分布在前S区和前C区, HCC组的缺失突变率显著高于其他组。结论本研究发现T791A、C1485T、C1023T等核苷酸位点置换突变可能与HBV疾病进展密切相关, HCC患者较非HCC患者更容易发生HBV基因缺失, 研究结果为了解病毒变异与HBV感染相关疾病进展的关系提供参考。

关键词：乙型肝炎病毒基因突变基因型

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诺如病毒消毒灭活方法研究进展

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中国公共卫生 2024年第6期40卷 754-758页

作者：姜苏芮李慧莹段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

诺如病毒是全球范围内导致人患急性胃肠炎的主要病原体之一,具有感染剂量低、排毒量大、环境抗性强和传播途径多样等特点,难以预防和控制,至今尚无针对性的疫苗和药物等特异性治疗和防控手段,给全球公共卫生带来了极大的挑战和威胁。因... 详细信息

诺如病毒是全球范围内导致人患急性胃肠炎的主要病原体之一,具有感染剂量低、排毒量大、环境抗性强和传播途径多样等特点,难以预防和控制,至今尚无针对性的疫苗和药物等特异性治疗和防控手段,给全球公共卫生带来了极大的挑战和威胁。因此,快速高效的杀灭病毒、有效切断病原体传播途径对成功防控诺如病毒的感染和流行具有重要意义。本文就2000—2023年有关诺如病毒消毒灭活方法及其应用情况进行综述,为采取科学、有效的阻断措施降低人群感染诺如病毒的风险提供参考。

关键词：诺如病毒传播途径灭活方法消杀方式

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经禽CELO病毒fiber替换构建靶向型第三代腺病毒载体

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病毒学报 2025年第2期41卷 437-445页

作者：李润茁程莉侯文哲郭小娟黄文荣鲁茁壮中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国人民解放军总医院第五医学中心血液病医学部北京100039

第三代腺病毒载体较第一、第二代具有优势,本研究拟建立一种第三代腺病毒载体靶向性改造的技术方案。扩增纯化辅助病毒H14,制备其基因组DNA;PCR扩增含有质粒骨架的DNA片段,二者通过Gibson组装得到含有H14基因组的质粒pKH14。再利用前期... 详细信息

第三代腺病毒载体较第一、第二代具有优势,本研究拟建立一种第三代腺病毒载体靶向性改造的技术方案。扩增纯化辅助病毒H14,制备其基因组DNA;PCR扩增含有质粒骨架的DNA片段,二者通过Gibson组装得到含有H14基因组的质粒pKH14。再利用前期建立的限制性酶切-组装(Restriction-assembly)方法,将pKH14质粒中的人5型腺病毒(HAdV-5)fiber knob编码序列替换为禽1型腺病毒CELO的fiber1对应序列,得到腺病毒质粒pKH14-CF1K。PacI酶切线性化pKH14-CF1K,转染293细胞,拯救、扩增并纯化新的辅助病毒H14-CF1K。PacI酶切线性化第三代腺病毒载体质粒pK4HSU-GFP,转染293Cre4细胞,在转染后5 h,添加H14-CF1K辅助病毒,拯救获得第三代腺病毒载体CF1K-GFP。利用H14-CF1K辅助病毒和293Cre4包装细胞,传代扩增CF1K-GFP,采用氯化铯密度梯度离心法进行纯化。对纯化的CF1K-GFP进行了鉴定,并检测了其对禽LMH细胞和人293细胞的基因转导能力。本研究建立了第三代腺病毒载体靶向性改造的技术平台,并获得能够有效转导禽LMH细胞的第三代腺病毒载体。

关键词：第三代腺病毒载体 Gibson DNA组装病毒拯救

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咖啡酸苯乙酯对朊病毒体外复制、扩增和纤维形成的抑制作用研究

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 1011-1019页

作者：晁志悦贾筱溪曾嘉锋武月章肖康高利萍石琦董小平陈操传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国疾病预防控制中心-中国科学院武汉病毒研究所新发传染病与生物安全联合研究中心、中国科学院生物安全大科学研究中心武汉430071

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利... 详细信息

目的探究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利用蛋白质免疫印迹方法分析CAPE处理前后细胞内PrPSc的含量变化。利用蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)技术和蛋白质免疫印迹方法检测CAPE处理前后扩增产物中PrP^(Sc)的含量变化。利用实时震动蛋白诱导扩增(RT-QuIC)技术检测CAPE处理前后朊蛋白纤维形成的变化情况。通过分子相互作用检测CAPE与小鼠重组全长朊蛋白的结合能力。结果 CCK8细胞活力实验结果显示:1 μmol/L CAPE处理细胞3、7 d时细胞存活率与对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05),当CAPE浓度超过1 μmol/L时,CAPE处理细胞3、7 d细胞存活率降低,与对照组之间差异均存在统计学意义(均P<0.05),因此1 μmol/L为CAPE处理SMB-S15细胞的最大安全浓度。蛋白质免疫印迹实验结果显示:CAPE处理3、7 d均可检测到SMB-S15细胞中PrPSc含量的降低(均P<0.05)。PMCA实验产物通过蛋白质免疫印迹方法检测结果显示:经CAPE处理后,适应株SMB-S15、139A、ME7的PMCA扩增产物中PrPSc含量(相对灰度值)降低,与对照组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。RT-QuIC实验结果显示:CAPE处理后139A、ME7、SMB-S15小鼠适应株和朊病毒感染细胞SMB-S15在反应中形成朊蛋白纤维(ThT峰值)均降低,且CAPE对不同种子朊蛋白纤维的抑制程度差异有统计学意义(均P<0.05),其中对ME7的抑制作用更明显。分子相互作用结果显示:CAPE与鼠源重组朊蛋白存在明显的分子结合,平衡解离常数KD为(2.92±0.41)×10^(-6) mol/L。结论 CAPE对PrPSc体外复制、扩增和纤维形成均具有抑制作用,可能与CAPE和朊蛋白特异性结合有关。

关键词：咖啡酸苯乙酯朊病毒朊蛋白

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应用气-液两相呼吸道类器官从中国临床住院患儿中分离鉴定人副流感病毒1/2/3

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病毒学报 2024年第2期40卷 274-282页

作者：余玙璠吴伟波牛培华宋敬东霍威邦胡月超刘俊彤魏岚邓瑶杨扬朱娜谭文杰中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室北京100052 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 深圳市病原微生物与免疫重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心深圳市第三人民医院深圳518112

人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器... 详细信息

人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器官(Air-liquid interface human airway epithelial organoid,HAE),从深圳市第三人民医院2016~2017年住院患儿hPIVs阳性咽拭子标本中分离获得hPIV1/2/3,分别命名为hPIV1/C-Tan/SZ01/2016、hPIV2/C-Tan/SZ01/2017、hPIV3/C-Tan/SZ01/2017。通过逆转录荧光定量PCR (Reversetranscriptionquantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测病毒核酸扩增、免疫荧光检测病毒蛋白在HAE的表达、负染及超薄切片透射电镜观察病毒形态和细胞定位,并对传代过程中病毒的活性、遗传稳定性和基因组特征进行分析。结果表明基于HAE分离hPIVs可以高效获得hPIVs临床分离株,所获毒株具有典型的病毒形态特征。三种hPIVs在HAE中复制良好且遗传稳定,病毒滴度均可达到约107 TCID50/100μL。对分离获得的hPIV1/2/3临床分离株进行全基因组及HN基因进行序列测定,结果表明:hPIV1全长为15568bp,属于hPIV1 C亚型;hPIV2全长15694bp,属于hPIV2 A3亚型;hPIV3全长15443bp,属于hPIV3 C3亚型,提示3株临床分离株与我国普遍流行的基因型相一致。综上,本研究应用HAE从近期住院患儿临床样本中成功分离获得生物学特性和基因组背景清晰且遗传稳定的hPIV1/2/3毒株。这些临床流行毒株资源的分离鉴定,为hPIVs的感染特点和致病机制的深入研究及抗病毒药物筛选和疫苗研发奠定了基础。

关键词：人副流感病毒病毒分离鉴定人呼吸道上皮类器官

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2021-2022年中国12省5岁以下人星状病毒分子流行病学特征研究

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病毒学报 2025年第1期41卷 107-116页

作者：董梦洁熊光萍范佳欣车如意唐晓苹张无敌庞立丽章青孔翔羽李希希王宏李丹地传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000

为了解2021-2022年我国5岁以下儿童中病毒性急性胃肠炎患者HAstV的分子特征及遗传进化规律。对1236份5岁以下急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本采用实时荧光法筛查HAstV,在HAstV阳性样本中随机选择30例用RT-PCR法扩增并送公司测序,测序... 详细信息

为了解2021-2022年我国5岁以下儿童中病毒性急性胃肠炎患者HAstV的分子特征及遗传进化规律。对1236份5岁以下急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本采用实时荧光法筛查HAstV,在HAstV阳性样本中随机选择30例用RT-PCR法扩增并送公司测序,测序成功的HAstV序列利用生物信息学分析软件GenBank、BioAider、MEGA11.0、DNASTAR和BEAST软件对其进行基因分型、遗传进化及贝叶斯分析。2021-2022年我国HAstV阳性率为4.05%(50/1236),测序获得24条基因序列,鉴定结果显示,HAstV-1为主要基因型(66.67%),其次为HAstV-4(20.83%),HAstV-5(8.33%)和HAstV-2(4.16%)。HAstV-1平均进化率约为6.3×10^(-4)(HPD95%2.2×10^(-4)~1.1×10^(-3))替换/位点/年;HAstV-4平均进化率约为7.5×10^(-4)(HPD95%4.9×10^(-4)~1.0×10^(-3))替换/位点/年。本研究显示,2021-2022年我国HAstV基因型别多样,HAstV-1和HAstV-4占比较高且进化速率低。本研究了解我国HAstV的遗传变异情况,为今后病毒防控和疫苗的研发提供一定的基础数据。

关键词：星状病毒分子特征基因型平均进化率

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人呼吸道合胞病毒疫苗的临床研究进展

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中华预防医学杂志 2023年第1期57卷 70-77页

作者：姜明月徐韵韶许松涛冯录召中国医学科学院北京协和医学院群医学及公共卫生学院北京100730 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

人呼吸道合胞病毒(HRSV)是引起婴幼儿和老年人严重急性下呼吸道感染的主要病原体之一,其发病率和病死率在全球范围内均较高。疫苗是预防HRSV感染、传播、重症的重要手段之一,但全球尚未有正式获批的HRSV预防性疫苗。本文对当前HRSV疫苗... 详细信息

人呼吸道合胞病毒(HRSV)是引起婴幼儿和老年人严重急性下呼吸道感染的主要病原体之一,其发病率和病死率在全球范围内均较高。疫苗是预防HRSV感染、传播、重症的重要手段之一,但全球尚未有正式获批的HRSV预防性疫苗。本文对当前HRSV疫苗的研发进展进行梳理和分析,概述不同类型HRSV预防性疫苗的设计路线并讨论在疫苗研发中面临的困难挑战,以期为我国HRSV疫苗的研发和临床试验的开展提供参考。

关键词：呼吸道合胞体病毒,人疫苗研究进展

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