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云南省、西藏自治区和新疆维吾尔自治区口岸和边境地区健康儿童肠道病毒监测分析

中国疫苗和免疫 2013年第3期19卷 199-203页

作者：汪海波汤晶晶甫尔哈提·吾守尔拉巴卓玛李晓嫘许文波温宁张丽芬彭立吉冶秀敏樊春祥刘波张勇郝利新罗会明梁晓峰中国疾病预防控制中心免疫规划中心北京100050 云南省疾病预防控制中心昆明650022 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心乌鲁木齐830002 西藏自治区疾病预防控制中心拉萨540100 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒学和病毒病重点实验室北京102206 中国疾病预防控制中心实验室管理处北京102206 中国疾病预防控制中心北京102206

目的了解新疆维吾尔自治区、西藏自治区和云南省口岸和边境地区,中国健康儿童和入境外籍儿童肠道病毒(Enterovirus,EV)携带情况。方法在三个省(自治区,下同)口岸和边境地区,邀请<15岁中国籍健康儿童和入境的<15岁外籍儿童参加研究... 详细信息

目的了解新疆维吾尔自治区、西藏自治区和云南省口岸和边境地区,中国健康儿童和入境外籍儿童肠道病毒(Enterovirus,EV)携带情况。方法在三个省(自治区,下同)口岸和边境地区,邀请<15岁中国籍健康儿童和入境的<15岁外籍儿童参加研究,经研究对象监护人知情同意后,由疾病预防控制中心专业人员调查研究对象的人口学特征、免疫史等信息,并采集粪便标本进行EV的分离和鉴定。结果采集312份外籍儿童粪便标本,非脊髓灰质炎(脊灰)(Non-polio)EV(NPEV)分离率为9.6%,三个省外籍儿童NPEV分离率差异有统计学意义(Χ2=12.71,P<0.01)。三个省共采集中国健康儿童粪便标本425份,分离出2株Ⅰ型脊灰疫苗株病毒和1株Ⅲ型疫苗衍生脊灰病毒,NPEV分离率为13.2%。结论动态监测健康儿童EV,作为急性弛缓性麻痹病例监测系统的有效补充,为维持无脊灰状态提供实验室依据。

关键词：口岸和边境地区 <15岁中国籍健康儿童 <15岁外籍儿童肠道病毒监测

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吉林省2012年风疹野病毒分离株的基因特征分析

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中国疫苗和免疫 2013年第6期19卷 523-525,540页

作者：王爽常新王吉丛宪玲周剑惠魏雷雷田鑫单元春朱贞吉林省疾病预防控制中心吉林省卫生厅病毒重点实验室长春130062 吉林大学白求恩第二医院长春130041 吉林大学中日联谊医院长春130033 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒学和病毒病重点实验室世界卫生组织西太平洋区麻疹参比实验室北京102206

目的了解致吉林省2012年多起风疹爆发及散发的风疹病毒(Rubella Virus,RV)的基因型和特征。方法对采集的患者咽拭子标本进行病毒分离,通过逆转录-聚合酶链反应及序列分析方法、利用生物信息学软件确定基因型。结果 30株RV核酸鉴定呈现阳... 详细信息

目的了解致吉林省2012年多起风疹爆发及散发的风疹病毒(Rubella Virus,RV)的基因型和特征。方法对采集的患者咽拭子标本进行病毒分离,通过逆转录-聚合酶链反应及序列分析方法、利用生物信息学软件确定基因型。结果 30株RV核酸鉴定呈现阳性,基因型鉴定均为1E基因型,与世界卫生组织RV 1E基因型参考株、中国RV编号为RVI Dezhou(德州)CHN(China,中国)02 1E的核苷酸同源性为97.9%~98.6%,氨基酸同源性100%。结论吉林省2012年多起风疹爆发及散发均由1E基因型的RV引起,为吉林省RV分子流行病学研究提供了基础资料。

关键词：风疹病毒基因特征序列分析

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中国2011～2012年麻疹野病毒血溶素基因特征分析

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中国疫苗和免疫 2013年第6期19卷 509-512页

作者：许松涛张燕王慧玲李崇山陈萌冯燕范丽霞田晓灵龚甜许文波中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒学和病毒病重点实验室世界卫生组织西太平洋区麻疹参比实验室北京102206 上海市疾病预防控制中心上海200336 北京市疾病预防控制中心北京100013 浙江省疾病预防控制中心杭州310051 青海省疾病预防控制中心西宁810007 内蒙古自治区疾病预防控制中心呼和浩特010020 江西省疾病预防控制中心南昌330046

目的分析中国2011～2012年麻疹野病毒株代表株血溶素（Fusion，F）基因的分子特征。方法从2011～2012年各省（自治区、直辖市）送检的麻疹野病毒中，选取7株代表株，使用逆转录-聚合酶链反应扩增病毒的F基因全长，并进行核苷酸序列测定... 详细信息

目的分析中国2011～2012年麻疹野病毒株代表株血溶素（Fusion，F）基因的分子特征。方法从2011～2012年各省（自治区、直辖市）送检的麻疹野病毒中，选取7株代表株，使用逆转录-聚合酶链反应扩增病毒的F基因全长，并进行核苷酸序列测定，同时与我国的疫苗株进行核苷酸、氨基酸同源性分析及序列比对。结果我国2011-2012年7株麻疹野病毒代表株中，核苷酸同源性为97．9％～99．9％，氨基酸同源性为98．7％～100．0％；与中国疫苗株（Shanghai191和Changchun47）相比，核苷酸同源性为95．0％～95．6％，氨基酸同源性为96．3％～97．2％。F基因的三个糖基化位点（第32、64、70位氨基酸），对病毒融合功能具有重要作用的第112位精氨酸（Arg）、第195位亮氨酸（Leu）未发生改变。但与疫苗株相比，有17个氨基酸位点发生较大改变。结论我国2011～2012年流行的麻疹野病毒F基因无明显变异，F基因上已知的重要功能位点保守。推测近年来中国流行的麻疹野病毒F蛋白结构和功能未发生明显改变，抗原性稳定。然而鉴于F蛋白是麻疹病毒的重要功能蛋白，对F蛋白的变异规律进行常规监测，对于了解麻疹病毒的变异规律和评价疫苗的保护效率具有重要意义。

关键词：麻疹病毒血溶素基因特征

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利用活体成像术对痘苗病毒小鼠体内生物分布和表达的研究

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中国病毒病杂志 2013年第4期3卷 274-279页

作者：刘强齐香荣朱蓉黄维金阮力李保卫邵荣光王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国医学科学院医药生物技术研究所北京100050

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(rTV)和非复制型天坛株痘苗病毒(NTV)不同途径感染小鼠后体内代谢和组织分布特点,为两种痘苗病毒载体疫苗的应用和改造提供参考。方法构建携带萤火虫荧光素酶基因的rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒,利用活体成像技... 详细信息

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(rTV)和非复制型天坛株痘苗病毒(NTV)不同途径感染小鼠后体内代谢和组织分布特点,为两种痘苗病毒载体疫苗的应用和改造提供参考。方法构建携带萤火虫荧光素酶基因的rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒,利用活体成像技术对两种病毒感染BALB/c小鼠后的蛋白表达水平和持续时间特点进行比较分析,并对rTV-Fluc多针感染中的抗病毒反应及其在BALB/c小鼠和裸鼠体内的分布和代谢特点进行比较。结果 rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒肌内和皮内途径感染BALB/c小鼠后局限分布于接种部位,且rTV-Fluc的表达水平显著性高于NTV-Fluc病毒(P=0.015);rTV-Fluc感染小鼠后诱导较高水平的中和抗体,并显著降低了肌内途径第2针感染后的蛋白表达水平(P<0.05);rTV-Fluc感染裸鼠后分布特点与BALB/c小鼠一致但表达周期明显延长(120d比10d)。结论两株痘苗病毒表现出局限的组织分布、较高的表达水平并诱导较强的免疫反应等特点,为预防性痘苗病毒载体疫苗的应用提供了参考数据。

关键词：痘苗病毒体内分布活体成像 BALB c小鼠裸鼠

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H7N9禽流感病毒可在雪貂间通过气溶胶传播

H7N9禽流感病毒可在雪貂间通过气溶胶传播

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第166场中国工程科技论坛——人兽共患病防控

作者：许黎黎鲍琳琳邓巍董丽波朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品雍伟东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心传染病预防控制国家重点实验室北京

人感染H7N9禽流感患者数量至今仍在继续攀升,尽早了解H7N9病毒对哺乳动物的致病性及通过气溶胶传播的可能性,对于应对2013年秋冬可能再次来袭的疫情、制定正确的防控策略,具有举足轻重的意义.利用已建立的各亚型流感雪貂模型,通过系统... 详细信息

人感染H7N9禽流感患者数量至今仍在继续攀升,尽早了解H7N9病毒对哺乳动物的致病性及通过气溶胶传播的可能性,对于应对2013年秋冬可能再次来袭的疫情、制定正确的防控策略,具有举足轻重的意义.利用已建立的各亚型流感雪貂模型,通过系统观察动物感染后的临床症状、死亡率、病毒组织分布,以及组织病理学分析,H7N9病毒对雪貂的致病性被证实低于高致病性禽流感H5N1,而与2009年pdmA(H1N1)相当.H7N9病毒可在感染雪貂的上下呼吸道、心脏、肝及嗅球中复制.值得注意的是,H7N9病毒在雪貂间可通过气溶胶进行低效率传播.对被传染上的雪貂携带的病毒进行分离并测序,相较于攻毒毒株,病毒出现了4处突变:PB2的D678Y、HA的R157K、NP的I109T,以及NA的T10I.H7N9病毒已具备在哺乳动物间通过气溶胶传播的能力,在秋冬季来临时应进一步提高监测力度,防止可能出现的人际传播事件.

关键词：雪貂禽流感病毒气溶胶传播致病性

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EV71小鼠适应株制备及体内外感染特点

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中国实验动物学报 2010年第5期18卷 383-389,I0004,I0005页

作者：朵建英王卫马春梅郝翊徐艳峰许文波董小平王健伟魏强秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100050 中国医学科学院病原生物学研究所北京100730

目的用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具。方法用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得... 详细信息

目的用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具。方法用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得到小鼠传代株。以一定浓度亲代株和传代株病毒分别接种RD、Vero、SY5Y、Caco-2四种细胞,定量方法检测各时间点不同毒株在四种细胞上的复制数量,CCK8方法测定各时间点细胞的存活率;同时,两毒株分别腹腔注射感染1日龄小鼠,定期安乐死动物,采集肺、小肠、骨骼肌、大脑四种器官组织,进行动物体内病毒半定量和定量分析,同时进行各器官组织病理学观察、免疫组织化学鉴定。结果与亲代毒株相比较,小鼠传代株(EV71-MMP4)表现出更强的肌肉来源细胞嗜性与毒性;同时,两毒株腹腔注射感染1日龄小鼠后,EV71-MMP4感染的小鼠体重增长较正常小鼠体重增长缓慢;半定量和定量RT-PCR显示,在小鼠肌肉中的病毒载量于感染后1d和5d达到高峰。EV71-MMP4感染组感染率较高、病毒组织分布较广、感染持续性较好、病毒载量较高,高剂量病毒感染后小鼠小肠、心肌和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化。免疫组织化学显示感染后小鼠骨骼肌有EV71病毒特异分布。结论阜阳EV71小鼠适应株表现出较亲代毒株更好的小鼠易感性、细胞毒性,所建立的动物模型可用于EV71病毒致病机制、感染特点的研究和病毒疫苗及药物的评价。

关键词： EV71小鼠适应株 ICR小鼠动物模型

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2005年四省、区的柯萨奇病毒A组16型血清流行病学研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2009年第2期23卷 103-105页

作者：杨朝辉祝双利朱晖安洪秋毛乃颖姬奕昕郭学斌尹少甫张宗久许文波兰州大学基础医学院 730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室卫生部医政司

目的了解2005年中国广东、黑龙江、新疆和云南四省、区1～5岁年龄儿童中的柯萨奇病毒A组16型（CVA16）抗体水平，为防控CVA16引起的手足口病的流行提供科学依据。方法随机挑取上述四省、区2005年1～5岁年龄儿童血清503份进行CVA16的微... 详细信息

目的了解2005年中国广东、黑龙江、新疆和云南四省、区1～5岁年龄儿童中的柯萨奇病毒A组16型（CVA16）抗体水平，为防控CVA16引起的手足口病的流行提供科学依据。方法随机挑取上述四省、区2005年1～5岁年龄儿童血清503份进行CVA16的微量中和实验。结果CVA16抗体阳性率在广东、黑龙江、新疆和云南分别为41．90％、9．40％、40．00％和34．40％。平均抗体滴度（GMT）均较低（平均为1：6．1），广东、黑龙江和云南各省内各年龄组间GMT差异无统计学意义（F值分别为0．97、0．40、1．06，P均〉0．05），而四省、区间比较，黑龙江与其他三个省、区GMT差异有统计学意义（F=10．61，P〈0．00）。结论2005年或以前CVA16已经在四省、区存在局部流行，但是不同省、区间的CVA16流行传播范围和程度不相同；1～5岁年龄段儿童是CVA16的易感人群。

关键词：肠道病毒B型人手足口病血清流行病学研究

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柯萨奇病毒A组16型

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中国疫苗和免疫 2009年第1期15卷 72-77页

作者：杨朝辉尹少甫张宗久许文波中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室北京100050 兰州大学基础医学院甘肃兰州730000 卫生部医政司北京100044

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A Group 16 Strain,CVA16)是手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD)的主要致病原之一,对其生物学特征、致病机理、临床表现、实验室诊断、流行病学和分子流行病学的认识,有助于提高HFMD及其它... 详细信息

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A Group 16 Strain,CVA16)是手足口病(Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD)的主要致病原之一,对其生物学特征、致病机理、临床表现、实验室诊断、流行病学和分子流行病学的认识,有助于提高HFMD及其它相关疾病的防治水平。研发CVA16的诊断方法和疫苗,建立健全CVA16的流行病学和实验室监测网络,可以对CVA16引起的HFMD的流行进行预测和预警,对预防CVA16引起的HFMD有重要的意义。

关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病实验室诊断分子流行病学

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昆虫细胞偏爱密码子优化的HPV16L1基因在昆虫和哺乳动物细胞中的表达

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中国病原生物学杂志 2007年第4期2卷 247-251页

作者：宋敬东王健伟王敏郭丽屈建国鲁茁壮韩金祥洪涛山东省病毒学研究所暨山东省医学病毒学重点实验室/卫生部生物技术药物重点实验室/山东省现代医用药物与技术重点实验室山东济南250062 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

目的获得有效表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的重组杆状病毒和腺病毒,为研究HPV的免疫保护机制提供材料。方法按照昆虫细胞密码子偏爱优化并合成HPV16L1基因,利用Bac-to-Bac昆虫表达系统获得表达HPV16L1基因的重组杆状病毒,利用AdE... 详细信息

目的获得有效表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的重组杆状病毒和腺病毒,为研究HPV的免疫保护机制提供材料。方法按照昆虫细胞密码子偏爱优化并合成HPV16L1基因,利用Bac-to-Bac昆虫表达系统获得表达HPV16L1基因的重组杆状病毒,利用AdEasy腺病毒载体系统获得表达HPV16L1基因的重组腺病毒载体。通过间接免疫荧光和Western blot对HPV16L1基因表达进行鉴定,利用负染电子显微镜观察病毒样颗粒(VLP)的形成。结果获得了稳定表达HPV16L1蛋白的重组杆状病毒和重组腺病毒载体,在Sf9细胞和293细胞中可有效表达能被抗HPV16L1单克隆抗体识别的L1蛋白,分子质量单位为56ku,在Sf9细胞中可观察到VLP的形成。结论按照昆虫细胞密码子偏爱进行优化的HPV16L1基因,在昆虫细胞和哺乳动物细胞内均可有效表达。

关键词：人乳头瘤病毒u 16型重组腺病毒重组杆状病毒表达密码子优化病毒样颗粒

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荧光定量RT-PCR在轮状病毒检测中的应用

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山东大学学报（医学版） 2006年第3期44卷 217-221页

作者：王志宇王健伟何深一孟红韩金祥洪涛山东大学医学院寄生虫学教研室山东济南250012 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 山东省医学科学院基础医学研究所山东济南250062 山东省病毒学研究所/山东省医学病毒学重点实验室暨卫生部生物技术药物重点实验室山东济南250062

目的:建立轮状病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,用于检测临床腹泻样本。方法:使用Taqman探针技术,建立轮状病毒VP6特异的荧光定量RT-PCR体系。与WHO推荐的轮状病毒检测方法ELISA平行检测,对该体系的检测范围、灵敏度、特异性等参数进行评... 详细信息

目的:建立轮状病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,用于检测临床腹泻样本。方法:使用Taqman探针技术,建立轮状病毒VP6特异的荧光定量RT-PCR体系。与WHO推荐的轮状病毒检测方法ELISA平行检测,对该体系的检测范围、灵敏度、特异性等参数进行评价。并将该体系用于临床腹泻样本。结果:该荧光定量RT-PCR体系具有高度灵敏度和特异性,线性范围宽,最低可检出1TCID50/ml。对113份临床腹泻样本的平行检测结果显示,该荧光定量RT-PCR体系与ELISA的检出率差异无统计学意义(χ2=0.41,P>0.5),可同样用于临床样本检测。结论:成功建立了轮状病毒荧光定量RT-PCR体系,该体系灵敏、特异、重复性好,可用于临床检测。

关键词：实时逆转录聚合酶链反应轮状病毒属聚合酶链反应

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