轮状病毒(Rotaviruses,RVs)是引起人和动物病毒性腹泻的重要病原,本文旨在研究猪C组轮状病毒(Group C rotaviruses,RVCs)VP8*蛋白的受体结合特征。本研究合成一株P[5]型猪C组轮状病毒(Por2011)的VP8*基因,经体外原核表达,采用亲和层析...
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轮状病毒(Rotaviruses,RVs)是引起人和动物病毒性腹泻的重要病原,本文旨在研究猪C组轮状病毒(Group C rotaviruses,RVCs)VP8*蛋白的受体结合特征。本研究合成一株P[5]型猪C组轮状病毒(Por2011)的VP8*基因,经体外原核表达,采用亲和层析纯化获得VP8*目的蛋白,利用糖点阵实验、寡糖结合实验研究其寡糖结合特征,再通过序列比对和突变分析确定其潜在受体结合位点。结果显示猪C组轮状病毒Por2011 VP8*蛋白与P1抗原特异性结合,但第108位氨基酸突变后的蛋白则不能与P1抗原结合。本研究表明猪C组轮状病毒的某些型别可能以P1抗原为潜在受体,该受体结合位点与人C组轮状病毒的受体结合位点较为接近,这为猪C组轮状病毒感染机制的研究提供了一定的依据和基础。
诺如病毒(Noroviruses,NoVs)是引起非菌型胃肠炎暴发流行的主要病原体之一。为了解我国GII.3型NoVs毒株的变异以及受体结合模式,本研究对来自2015年一起中国广州NoVs胃肠炎暴发的GII.3型毒株GZ31597株进行聚合酶区和完整VP1区基因扩增、序列测定和序列分析,并表达VP1突出区蛋白(P蛋白),通过P蛋白与不同血型唾液样本的酶免疫分析法(EIA)测定实验确定其组织血型抗原(Histo-blood group antigens,HBGAs)结合模式。GZ31597株聚合酶和VP1基因系统进化分析表明,GZ31597株为GII.P12/GII.3-SubD基因型(聚合酶/衣壳区),该毒株较先前的GII.3毒株相比,在既是抗原表位又是HBGAs受体结合位点的氨基酸385残基发生了氨基酸转换。根据Western Blotting结果,证实P蛋白成功表达。唾液结合分析结果显示,该毒株P蛋白与A、B、AB、O型分泌型以及O型非分泌型唾液均可以结合,但结合值相对低。本研究表明该GII.P12/GII.3-SubD亚型的GII.3毒株在长期的流行过程中,通过氨基酸的转换,改变抗原性和受体结合活性,使GII.3型毒株在人群中继续流行。通过探索GII.3型NoVs在人群中长期广泛流行的原因,为GII.3型诺如病毒性胃肠炎的预防和控制提供重要依据。
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