检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2023年第6期37卷 643-649页

作者：赵颖苏韫曦章青李慧莹李丹地李金松孙晓曼段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的表达和纯化人A组G1P[8]轮状病毒VP7蛋白(G1 VP7);制备VP7多克隆抗体并进行抗体功能鉴定。方法利用杆状病毒系统表达G1 VP7蛋白,通过亲和层析法进行蛋白纯化。将纯化后的G1 VP7蛋白免疫新西兰大白兔制备兔多抗血清,纯化得到G1 VP7兔... 详细信息

目的表达和纯化人A组G1P[8]轮状病毒VP7蛋白(G1 VP7);制备VP7多克隆抗体并进行抗体功能鉴定。方法利用杆状病毒系统表达G1 VP7蛋白,通过亲和层析法进行蛋白纯化。将纯化后的G1 VP7蛋白免疫新西兰大白兔制备兔多抗血清,纯化得到G1 VP7兔多抗。通过免疫印迹(Western blot,WB)、酶联免疫吸附(ELISA)和免疫荧光试验进行多抗功能验证。结果利用杆状病毒表达系统获得人A组G1P[8]轮状病毒可溶VP7蛋白,并且G1 VP7蛋白主要以三聚体形式存在;制备得到G1 VP7多抗,ELISA结果显示VP7多抗具有较高的效价;WB和ELISA实验表明VP7多抗能够识别多个G型轮状病毒的VP7;免疫荧光试验结果进一步显示G1 VP7多抗可以结合不同A组轮状病毒,包括Wa株(基因型G1P[8])、DS-1(基因型G2P[4])、SA11(基因型G3P[2])、人G9P[8]株。此外,双夹心ELISA初步结果显示包被VP7多抗可以检测到轮状病毒临床样本。结论本研究成功得到可溶G1 VP7蛋白并制备VP7多抗;G1 VP7多抗可以结合多种G型轮状病毒,为不同G型轮状病毒检测方法的建立奠定基础。

关键词：轮状病毒 VP7蛋白杆状病毒表达系统多克隆抗体

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RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对儿童轮状病毒胃肠炎保护效果和安全性的Meta分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第1期37卷 106-111页

作者：魏宇航彭蕊王萌璇毛彤瑶王明雯范佳欣吴铮孙晓曼李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的为探求RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对轮状病毒胃肠炎(rotavirus gastroenteritis,RVGE)患儿的保护效果及安全性,以更好指导RotaTeq疫苗的使用。方法通过检索2006年2月至2021年12月有关RotaTeq疫苗高死亡率地区公开发表的文献,根... 详细信息

目的为探求RotaTeq疫苗在全球高死亡率地区对轮状病毒胃肠炎(rotavirus gastroenteritis,RVGE)患儿的保护效果及安全性,以更好指导RotaTeq疫苗的使用。方法通过检索2006年2月至2021年12月有关RotaTeq疫苗高死亡率地区公开发表的文献,根据排除纳入标准进行筛选和数据整理,运用RevMan 5.3、Stata 14.0和SPSS 26.0软件进行数据分析。结果共纳入文献5篇,研究对象共包含63974名,其中疫苗组32092名研究对象,安慰剂组31882名研究对象。在高死亡率地区,RotaTeq对RVGE、严重轮状病毒胃肠炎(severe RVGE,SRVGE)、非常严重轮状病毒胃肠炎(very severe RVGE,VSRVGE)的保护率分别为VERVGE=35%(95%CI:28%~41%)、VESRVGE=51%(95%CI:33%~65%)、VEVSRVGE=64%(95%CI:41%~78%)。亚洲、非洲高死亡率地区SRVGE的保护率分别为VESRVGE=43%(95%CI:28%~55%)、VESRVGE=57%(95%CI:17%~77%)。RotaTeq严重不良反应事件(serious adverse events,SAEs)发生率在疫苗组与安慰剂组间差异无统计学意义(χ^(2)=2.05,P=0.152)。结论RotaTeq疫苗在高死亡率地区对重症以上RVGE有一定的保护作用,并且具有较好的安全性。

关键词：轮状病毒胃肠炎疫苗保护率安全性

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16条甲型肝炎病毒流行株基因型及全基因组特征分析

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病毒学报 2022年第6期38卷 1397-1404页

作者：杜凤雪周文亭邱丰尹文娇曹经瑗毕胜利国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

为分析具有相同VP1-2A区基因序列的甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)流行株全基因组序列特征,收集我国6个省市不同年份同一起或不同起甲型肝炎(甲肝)暴发中,部分甲肝病例急性期血清标本,提取HAV RNA,进行VP1-2A区基因分型,RT-PCR分... 详细信息

为分析具有相同VP1-2A区基因序列的甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)流行株全基因组序列特征,收集我国6个省市不同年份同一起或不同起甲型肝炎(甲肝)暴发中,部分甲肝病例急性期血清标本,提取HAV RNA,进行VP1-2A区基因分型,RT-PCR分段扩增HAV近全基因组序列,构建系统进化树,分析基因组特征。本研究获得16条HAV近全基因组序列,均属于基因IA亚型,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为95.81%~100%和99.23%~100%。与GenBank中HAV序列比较,15条序列与Man12-001(蒙古国株)最接近,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为97.87%~99.81%和99.55%~99.95%;1条序列与HAJEF-K12(日本株)最接近,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.37%和99.91%。本文中VP1-2A区序列完全相同的HAV流行株,来源于同一起甲肝暴发时,HAV近全基因组核苷酸序列差异为0%~0.03%;来源于不同起暴发时,核苷酸序列差异为0.18%~0.99%。16条HAV序列在已发表的中和抗原表位未发现变异,编码区氨基酸序列处于负向选择压力,16条序列间及与参考序列间未发现基因重组。本研究表明我国存在多株HAV流行株,主要为基因IA亚型;VP1-2A区序列完全相同的HAV流行株,来源于同一起甲肝暴发的HAV全基因组核苷酸序列同源性高于不同起暴发的HAV序列同源性。HAV基因分型及全基因序列分析与现场流行病学调查结果相结合,更有利于HAV溯源分析。

关键词：甲型肝炎病毒基因分型全基因组序列

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SFTSV感染周期和抗病毒药物的研究进展

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第4期36卷 475-480页

作者：刘铁柱梁米芳王世文中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)是一种蜱传的新型布尼亚病毒,在中国大别山地区被首次发现,临床上可以引起严重发热、血小板减少等症状,致死率可达10%~30%。目前,SFTSV的致病机... 详细信息

发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)是一种蜱传的新型布尼亚病毒,在中国大别山地区被首次发现,临床上可以引起严重发热、血小板减少等症状,致死率可达10%~30%。目前,SFTSV的致病机理和感染机制尚不清楚,还没有针对该病毒的特效药物和疫苗。本文对SFTSV的入胞机制、膜融合、复制、装配和出芽过程进行了综述,总结了目前SFTSV相关的治疗性抗体和抗病毒药物的研究进展,以期为我国SFTSV的疫苗和抗病毒药物的研发提供参考。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒感染周期抗病毒药物

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2018—2024年北京市某儿童医院普通外科住院疾病谱分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2025年第1期39卷 51-55页

作者：王雪琪王世文刘铁柱李颀首都儿科研究所附属儿童医院普通外科北京100020 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的通过分析2018年1月至2024年6月北京某儿童医院普通外科住院病人的疾病谱和构成情况,了解新冠疫情对儿童医院住院患儿数量和病种构成造成的影响,为医院能力建设和疫情出现后的医疗应对提供科学证据。方法通过收集该儿童医院2018年1月... 详细信息

目的通过分析2018年1月至2024年6月北京某儿童医院普通外科住院病人的疾病谱和构成情况,了解新冠疫情对儿童医院住院患儿数量和病种构成造成的影响,为医院能力建设和疫情出现后的医疗应对提供科学证据。方法通过收集该儿童医院2018年1月1日至2024年6月30日普通外科病房患儿的住院病案资料,使用SPSS 22.0软件和EXCEL工具,从不同年份、不同性别、不同年龄组三个维度分析医院普通外科疾病顺位和构成情况,同时按照省份统计该院患儿的来源地。结果总体上,2020年开始住院患儿总量出现明显下降,此后缓慢回升;急性阑尾炎、腹股沟斜疝和胆总管囊肿在每年的疾病顺位中分列前三位;从性别维度,男性患儿中腹股沟斜疝、急性阑尾炎,女性患儿中急性阑尾炎、胆总管囊肿的数量最多;从年龄维度,1~岁组腹股沟斜疝患儿数量排在首位,而5~岁组和10~18岁组中,急性阑尾炎数量排在首位;2020—2024年上半年与2018—2019年相比,腹股沟斜疝住院患儿数量骤降,第一顺位疾病由的腹股沟斜疝变为急性阑尾炎。结论本研究分析了该儿童医院在新冠疫情前后的疾病谱和构成情况,对儿童医院能力建设、资源分配和疫情应对具有重要参考价值。

关键词：儿童疾病疾病谱疾病顺位

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我国诺如病毒GII.6[P7]重组株基因组进化分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第5期36卷 501-507页

作者：韦杏燕朱曦章青孔翔羽王萌璇杨艳辉靳淼段招军国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052

目的明确我国诺如病毒暴发GII.6[P7]基因组进化特征和关键位点变异情况。方法对2018—2021年来自中国诺如病毒暴发监测网络(CaliciNet China)监测获得的46个GII.6[P7]阳性样本进行基因组扩增和测序,同时整合GenBank数据库中的所有ORF1(G... 详细信息

目的明确我国诺如病毒暴发GII.6[P7]基因组进化特征和关键位点变异情况。方法对2018—2021年来自中国诺如病毒暴发监测网络(CaliciNet China)监测获得的46个GII.6[P7]阳性样本进行基因组扩增和测序,同时整合GenBank数据库中的所有ORF1(GII.P7)和ORF2(GII.6)序列,进行贝叶斯进化分析,并利用Simplot软件进行重组分析。结果根据贝叶斯进化分析,GII.P7聚合酶具有时间进化特性,平均碱基替换速率为2.067×10^(-3)核苷酸替换/位点/年,与4种不同的VP1基因型发生重组(GII.6、GII.7、GII.14和GII.20)。GII.6型诺如病毒在衣壳区进一步分为GII.6a、GII.6b和GII.6c亚型。本研究46个毒株属于GII.6a亚型,与2015年中国GII.6[P7]参考株NHBGR59为一簇。Simplot分析确定本研究GII.6[P7]毒株重组位点在ORF1-2连接处。VP1氨基酸位点变异主要发生在P1.1末端以及P2区域,与GII.6a亚型参考株相比,受体结合位点均未发生变异。结论我国2018—2021年诺如病毒暴发的GII.6[P7]重组株均属于GII.6a[P7]亚型。

关键词：诺如病毒急性胃肠炎暴发基因型进化

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利用限制性酶切-组装方法构建携带双报告基因的猴1型腺病毒载体

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病毒学报 2023年第3期39卷 791-799页

作者：陈娟邹小辉郭小娟王晓晖鲁茁壮内蒙古科技大学包头医学院公共卫生学院包头014040 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京100052

限制性酶切-组装是构建和改造腺病毒载体的一种简便方法,本研究用该方法构建同时携带GFP和萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase, Fluc)报告基因的猴1型腺病毒(Simian Adenovirus 1, SAdV-1)载体。PCR分别扩增GFP和Fluc基因,重叠延伸PCR... 详细信息

限制性酶切-组装是构建和改造腺病毒载体的一种简便方法,本研究用该方法构建同时携带GFP和萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase, Fluc)报告基因的猴1型腺病毒(Simian Adenovirus 1, SAdV-1)载体。PCR分别扩增GFP和Fluc基因,重叠延伸PCR将两个目的基因通过T2A短肽编码序列串联得到融合基因GFluc。限制性内切酶Spe I酶切腺病毒质粒pKSAV1-EG,去除原有的外源基因,将载体片段与GFluc片段进行限制性酶切-组装,产物转化大肠杆菌感受态细胞,获得腺病毒质粒pKSAV1-GFluc。通过限制性内切酶酶切分析、PCR产物测序证实质粒构建正确。pKSAV1-GFluc质粒经Swa I酶切线性化后转染SAdV-1包装细胞系293SE13,4 d后GFP+细胞形成荧光灶,并持续增大,表明重组病毒拯救成功;对重组病毒基因组进行了限制性酶切鉴定。扩增病毒并进行纯化,在细胞水平和动物模型中检测到目的蛋白GFP和Fluc的表达。本研究成功构建同时携带GFP和Fluc报告基因的SAdV-1载体,显示了限制性酶切-组装方法的易用性和可靠性,并为研究SAdV-1载体在小鼠模型的组织分布奠定基础。

关键词：报告基因限制性酶切-组装猴1型腺病毒载体

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一株Wa-like中国G3P-I5-A8基因型轮状病毒重配株全基因组特征分析

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国际病毒学杂志 2025年第1期32卷 12-16页

作者：唐晓苹熊光萍车如意董梦洁刘颂张无敌王宏章青孔翔羽庞立丽李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 青岛市疾病预防控制中心病毒性疾病检验所 266000

目的研究一株Wa-like中国G3P[8]-I5-A8基因型RVA重配株全基因组特征,并分析与RVA疫苗株的抗原表位之间差异。方法采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2023年中国青岛采集的一份G3P[8]基因型RVA标本进行全序列扩增。利用在线RVA自... 详细信息

目的研究一株Wa-like中国G3P[8]-I5-A8基因型RVA重配株全基因组特征,并分析与RVA疫苗株的抗原表位之间差异。方法采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2023年中国青岛采集的一份G3P[8]基因型RVA标本进行全序列扩增。利用在线RVA自动分型工具(http://***)对测序结果进行分型,应用MEGA 11.0、Geneious Prime 2023.2.1、Geneious 9.0.2和DNASTAR 5.1等软件对RVA毒株进行全序列遗传变异和进化分析。结果成功获取一株G3P[8]基因型RVA(QD01)的全基因组序列,该毒株具有独特的类似Wa-like的基因型:G3-P[8]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1。与RVA疫苗株RotaTeq^(TM)(G3)、LLR和Rotarix的VP7中和抗原表位对比有4~13个差异且均在抗原表位的关键位置7-1 b差异较大。结论本研究RVA毒株QD01为G3-P[8]-I5-A8基因型,遗传进化分析推测该毒株可能是亚洲地区猪源RVA和人源RVA毒株间发生重配产生的新型毒株,QD01与RVA疫苗株在抗原表位的关键位置差异较大。

关键词：轮状病毒 G3P[8]基因型分子特征全基因组抗原位点

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中国两株罕见G9P⁃N1基因型轮状病毒重配株全基因组序列分析

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病毒学报 2025年第2期41卷 462-472页

作者：唐晓苹范佳欣熊光萍魏宇航董梦洁车如意张无敌李楚楚沙比热木·托合塔木王宏章青孔翔羽庞立丽李丹地甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 江苏省疾病预防控制中心南京210000 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心病原检定所乌鲁木齐830002 北京市通州区卫生健康监督所北京101100

为研究中国两株罕见G9P[4]-N1型RVA重配株的全基因组特征,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,对2022年收集的两份G9P[4]-N1型RVA标本进行全基因组扩增。应用MEGA11.0、Geneious Prime2023.2.1、Geneious9.0.2和DNASTAR等软件对RVA毒株进行全序列及遗传变异和进化分析,成功获取两株G9P[4]-N1型RVA的全基因组序列。结果显示两株RVA毒株的全基因组基因型均为G9-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N1-T2-E2-H2,两株RVA毒株所有节段核苷酸序列的相似性为:98.5%~99.5%。系统进化树显示VP7、VP4和NSP2基因分别为G9-Ⅲ、P[4]-Ⅴ、NSP2-N1。中国两株G9P[4]型RVA毒株为罕见的G9-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N1-T2-E2-H2型,VP7、VP4、NSP2等关键基因节段与美国、俄罗斯、捷克等国外G9P[4]型RVA相似度高,且与本国G9型流行株亲缘关系相对较远,推测该罕见G9P[4]-N1型RVA重配株可能由境外输入。中国两株G9P[4]基因型JS97、XJ1109毒株与疫苗株RotaTeq^(TM)(G1~G4、P[8])和疫苗株Rotarix^(TM)、疫苗Rotavac原始株116E及LLR原始毒株核苷酸相似性为81.2%~91.3%,在关键中和抗原表位存在较多氨基酸位点差异,该差异是否会影响疫苗针对中国G9P[4]-N1基因型的保护效果需要进一步研究。

关键词：轮状病毒 G9P[4]基因型分子特征全基因组

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表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建

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中国人兽共患病学报 2023年第6期39卷 515-522页

作者：马亚林柴鹏弟王金冬毛彤瑶张鹏李慧莹段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 潍坊医学院潍坊261000

目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表... 详细信息

目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表达载体pcDNA3.1(+)上插入具有不同突变位点的HRSV F蛋白编码序列,利用融合前F蛋白单克隆抗体AM14和D25筛选HRSV F蛋白突变体;通过同源重组将筛选出的前构象F蛋白突变体编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,在HEK293细胞中进行重组病毒的包装和扩增,经氯化铯密度梯度法获得纯化的重组病毒;应用夹心ELISA法和Western blot鉴定F蛋白的表达及构象。结果通过AM14和D25单克隆抗体筛选出了2个稳定维持在融和前构象的HRSV F蛋白序列(SC-3M和SC-5M)。将SC-3M和SC-5M编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,对两种重组人5型腺病毒(pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M)和空载体(pAd5-vector)纯化,病毒滴度分别达到2.016×10^(10),2.52×10^(10)和2.948×10^(11)IU/mL。pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M感染HEK293后均能高效表达HRSV融合前构象的F蛋白并维持三聚体结构,且pAd5-SC-5M感染细胞中F蛋白表达量高于pAd5-SC-3M。结论成功在体外传代细胞中获得可高效表达A型HRSV融合前F蛋白的重组人5型腺病毒,为进一步通过动物试验评价该HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。

关键词：人5型腺病毒载体人呼吸道合胞病毒融合前F蛋白 HEK293细胞

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