检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2022年第2期56卷 203-211页

作者：江洁许文波张燕朱贞毛乃颖国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所麻疹室北京102206

人副流感病毒(HPIVs)是引起儿童急性呼吸道感染的主要病原体之一,根据其血清学及基因组特征,可分为HPIV1~HPIV4四种血清型别。不同血清型HPIVs导致的临床疾病谱、流行特征和疾病负担都有所不同。基于病毒结构蛋白基因的核苷酸差异,HPIV... 详细信息

人副流感病毒(HPIVs)是引起儿童急性呼吸道感染的主要病原体之一,根据其血清学及基因组特征,可分为HPIV1~HPIV4四种血清型别。不同血清型HPIVs导致的临床疾病谱、流行特征和疾病负担都有所不同。基于病毒结构蛋白基因的核苷酸差异,HPIVs可进一步划分为具有不同时空分布特征的基因型和基因亚型。标准的分子分型方法有助于阐明HPIVs在人群传播过程中的基因进化和传播模式,然而,由于国内外至今未建立统一且标准化的分子分型方法,阻碍了对HPIVs分子流行病学的研究。因此,本研究就HPIVs的病毒特征、基因组结构、现有的基因分型方法及进化加以综述,并筛选出分子分型参考株,以完善对HPIVs基因特征以及分子分型的认识,为我国开展HPIVs分子流行病监测和研究提供重要的科学依据。

关键词：分子分型基因型进化人副流感病毒

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利用反向遗传技术产生表达外源基因的重组SA11轮状病毒

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中国人兽共患病学报 2024年第2期40卷 140-146页

作者：柴萨萨蔡昊刘夏飞赵静宋敬东李金松裴银辉李利利段招军华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000

目的利用反向遗传技术产生NSP1基因插入和表达外源基因的重组SA11轮状病毒,构建可表达外源基因的轮状病毒载体。方法本研究将轮状病毒SA11株的NSP1基因片段的223位(5端)至1388位的核苷酸删除,并直接插入连接了终止-再启动元件(P2A)的增... 详细信息

目的利用反向遗传技术产生NSP1基因插入和表达外源基因的重组SA11轮状病毒,构建可表达外源基因的轮状病毒载体。方法本研究将轮状病毒SA11株的NSP1基因片段的223位(5端)至1388位的核苷酸删除,并直接插入连接了终止-再启动元件(P2A)的增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因,采用已建立的“12质粒”轮状病毒反向遗传系统拯救NSP1基因插入和表达EGFP的重组SA11轮状病毒。通过观察细胞病变效应和插入基因(EGFP)的荧光表达初步确定重组病毒的成功拯救,再结合电镜的形态学观察、RT-PCR的测序结果及病毒基因组的检测结果,进一步证明重组轮状病毒的成功拯救和传代扩增。利用TCID 50法和qRT-PCR法,测定了rSA11和rSA11/NSP1-EGFP的病毒滴度并绘制了基因组复制动力曲线。结果基于“12质粒系统”成功拯救了重组轮状病毒rSA11/NSP1-EGFP,证明NSP1片段截短并插入外源基因后病毒仍可正常复制,且具有良好的遗传稳定性,但病毒滴度低于其亲本株。结论基于NSP1基因插入和表达EGFP的重组轮状病毒能够实现稳定遗传,为利用反向遗传学构建表达外源基因的轮状病毒载体的深入探索提供了基础。

关键词： A组轮状病毒反向遗传外源基因 NSP1基因

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一株罕见G4P-I5-A8基因型人轮状病毒全基因组序列分析

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国际病毒学杂志 2024年第1期31卷 17-21页

作者：车如意周杰英范佳欣唐晓苹董梦洁熊光萍孙晓曼王宏章青庞立丽孔翔羽李丹地传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 郴州市第一人民医院 423000

目的研究一株G4P[6]基因型A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)CZ079的全基因组特征及进化规律.方法利用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)对CZ079的VP7、VP4、VP6、NSP1节段分别进行RT-PCR扩增,通过在线RVA自动分型工具对其分型,采用DNAstar5.1和Mega 11.0软件对各节段进行同源性及遗传进化分析.结果CZ079毒株基因型为G4-P[6]-I5-R ***6为I5型,NSP1为A8型.CZ079与LLR^(TM)、RotaTeq^(TM)和Rotarix^(TM)三种疫苗株在VP7的抗原表位中7-1b区域均存在氨基酸差异;VP4蛋白裂解后的VP8*抗原表位中8-1、8-2、8-3、8-4、5-1区域存在较大差异.结论2022年RVA毒株CZ079为罕见的G4P[6]-I5-A8型,推测该基因型RVA是由越南等东南亚地区传入中国,与中国RVA发生重配产生的新型重配毒株.

关键词： A组轮状病毒基因型重配株全基因组抗原表位

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CpG联合铝佐剂增强RBD-Fc重组蛋白诱导小鼠免疫反应效果的研究

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病毒学报 2023年第6期39卷 1549-1560页

作者：任虎何远薇张亚楠李海郭晋源张燕祝双利冀天娇曹蕾许文波国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所世界卫生组织西太平洋地区麻疹/风疹参比实验室北京102206 北京中医药大学东直门医院北京102206

由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的2019冠状病毒病(Coronavirus disease 2019,COVID-19)大流行对全球健康和经济构成了严重威胁,SARS-CoV-2关切变异株(Variants of concern,VOCs)的出现更增加了疫苗研发的难度,因此,优化设计对突变株具有广谱免疫反应的疫苗显得尤为重要。本研究选取具有大量显性中和表位的受体结合域(Receptor-binding domain,RBD)蛋白作为目标抗原,在SARS-CoV-2经典株RBD序列的基础上引入多个VOCs的关键突变位点,将其与人IgG1 Fc片段融合表达,并结合CpG单佐剂、氢氧化铝单佐剂或CpG与氢氧化铝复合佐剂两剂次免疫小鼠,比较CpG联合铝佐剂相比单独使用铝或CpG佐剂诱导细胞免疫和体液免疫反应的增强作用,同时观察小鼠产生抗不同VOCs活病毒的交叉中和抗体滴度。结果显示,与单佐剂相比,RBD-Fc蛋白结合CpG与氢氧化铝复合佐剂免疫小鼠可产生最高的IgG结合抗体及高水平Th1偏向的细胞免疫应答。同时,小鼠血清还可以有效地中和SARS-CoV-2贝塔株(GMT:11143)、德尔塔株(GMT:4850)、经典株(GMT:3675),甚至是奥密克戎BA.1株(GMT:1393)和BA.5株(GMT:459)的感染。这些结果表明含有突变位点的SARS-CoV-2 RBD-Fc重组蛋白具有良好的潜力,联合使用CpG和铝佐剂可明显提高和平衡小鼠的细胞免疫反应,产生对不同SARS-CoV-2高滴度的交叉中和抗体,可作为一种广谱疫苗进一步研究和开发。

关键词： RBD-Fc 佐剂体液免疫细胞免疫交叉中和抗体

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G6P型牛轮状病毒BLL株全基因组遗传特征分析

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中国人兽共患病学报 2025年第1期41卷 8-14页

作者：张锦华刘夏飞余俊杰范佳欣王铭月熊光萍王怡鹏李丹地孙晓曼庞立丽段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 河南中医药大学第一临床医学院郑州450000

目的了解牛轮状病毒的基因组特征和遗传变异规律。方法对一株分离培养的G6P[1]型牛轮状病毒BLL株进行全基因组测序和分子特征分析。利用MEGA7.0、DNAMAN等软件进行序列同源性和基因分型分析,并构建全基因组进化树分析其遗传进化关系。结... 详细信息

目的了解牛轮状病毒的基因组特征和遗传变异规律。方法对一株分离培养的G6P[1]型牛轮状病毒BLL株进行全基因组测序和分子特征分析。利用MEGA7.0、DNAMAN等软件进行序列同源性和基因分型分析,并构建全基因组进化树分析其遗传进化关系。结果BLL株的全基因型为G6-P[1]-I2-R2-C2-M2-A3-N2-T6-E2-H3,BLL株的VP7基因与中国RVA/Cow-wt/HB01/China/2021株同源性最高,VP4基因与RVA/Human-tc/ISR/Ro8059/1995株处于同一分支。对不同型别的VP8*氨基酸序列比对分析,结果显示BLL株唾液酸受体结合区与P[1]型毒株相似,与其他型别毒株差异较大,但是189位残基只与Ro8059株相同,与其余株不同。结论BLL株具有潜在感染人的风险,有必要对该毒株进行持续监测和生物学特性的研究,这将为我国深入开展A组轮状病毒跨物种传播的研究提供更多资料和证据。

关键词：轮状病毒 G6P[1] 序列分析 VP8*蛋白遗传进化

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GII.4型人诺如病毒VP2蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第1期37卷 78-82页

作者：马亚林王金冬毛彤瑶章青孔翔羽段招军甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 潍坊医学院潍坊261000

目的原核表达GII.4基因型人诺如病毒(human norovirus, HuNoV)次要衣壳蛋白VP2并制备多克隆抗体。方法设计特异性引物扩增GII.4 HuNoV的VP2全基因, 酶切连接至原核表达载体pGEX-6P-1, 将鉴定正确的重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞。挑... 详细信息

目的原核表达GII.4基因型人诺如病毒(human norovirus, HuNoV)次要衣壳蛋白VP2并制备多克隆抗体。方法设计特异性引物扩增GII.4 HuNoV的VP2全基因, 酶切连接至原核表达载体pGEX-6P-1, 将鉴定正确的重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞。挑取单克隆摇菌, 加入IPTG诱导重组GST-VP2融合蛋白的表达, 经GST亲和层析纯化和酶切, 获得GII.4 HuNoV VP2蛋白。通过SDS-PAGE分析纯化后HuNoV VP2蛋白相对分子质量。将纯化的GII.4 HuNoV VP2蛋白(0.5 mg/ml)免疫BALB/c小鼠, 制备多克隆抗体。结果 GII.4 HuNoV VP2蛋白被成功表达和纯化, 相对分子质量(Mr.×103)约29。将GII.4 HuNoV VP2蛋白免疫BALB/c小鼠制备的多克隆抗体滴度高达1∶1 280 000。Western blot与间接ELISA分析显示该多克隆抗体能和GII.4 HuNoV VP2抗原特异性结合。结论利用原核表达系统成功表达了GII.4 HuNoV VP2蛋白, 并成功制备出高效价GII.4 HuNoV VP2多克隆抗体。

关键词：诺如病毒 VP2蛋白原核表达多克隆抗体

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2017-2019年河南省漯河市严重急性呼吸道感染病例人腺病毒基因特征分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第4期36卷 385-396页

作者：蔡建林徐瑾赵升张智博刘莹冯意江洁崔爱利张燕许文波朱贞毛乃颖中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 河南省疾病预防控制中心郑州450016 漯河市疾病预防控制中心漯河462000

目的了解我国河南省漯河市严重急性呼吸道感染(severe acute respiratory infection,SARI)病例人腺病毒(human adenovirus,HAdV)基因特征。方法对2017年10月至2019年2月SARI病例中鉴定的HAdV阳性标本进行病毒分离后,扩增并测定其Hexon... 详细信息

目的了解我国河南省漯河市严重急性呼吸道感染(severe acute respiratory infection,SARI)病例人腺病毒(human adenovirus,HAdV)基因特征。方法对2017年10月至2019年2月SARI病例中鉴定的HAdV阳性标本进行病毒分离后,扩增并测定其Hexon基因的Loop2区域,初步鉴定病毒分离株型别。然后根据初筛结果,分别使用HAdV各型特异性引物扩增病毒株3个靶基因(Penton base、Hexon和Fiber)的序列全长,并与各型原型株以及国内外相应型别代表株进行系统发育和序列同源性分析,以确定HAdV病毒株型别并了解其基因特征。结果从河南省漯河市783份SARI病例中鉴定的27份HAdV阳性咽拭子标本中,共分离获得18株病毒分离株,分子分型结果显示,这些毒株分属于B亚属(HAdV-3、HAdV-7和HAdV-55)、C亚属(HAdV-1、P1H2F2、Px1/Ps3H5F5、P89H5F5和HAdV-6)和E亚属(HAdV-4)。其中C亚属HAdV-1分离阳性率最高(33.3%),其次为B亚属HAdV-3(22.2%)和C亚属P1H2F2(11.1%)。本研究4种HAdV病毒株(HAdV-3、HAdV-4、HAdV-7和HAdV-55)基因组序列在时间和空间上具有显著的保守性和稳定性特点,而HAdV-C鉴定了3种基因重组模式(P1H2F2、Px1/Ps3H5F5和P89H5F5),其潜在的公共卫生意义需进一步研究证实。结论2017—2019年河南省漯河市SARI病例HAdV感染主要以C亚属为主,其次为B亚属和E亚属,该数据为当地腺病毒相关传染病的预防控制提供了科学依据。

关键词：严重急性呼吸道感染人腺病毒基因分型基因特征

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中国人乳头瘤病毒30型分布及型下分类研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2023年第3期37卷 315-319页

作者：李颖郭一帆王慧王娇张杰琼刘宏图中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国人民解放军总医院海南分院妇产科三亚572013

目的了解国内人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)30型(HPV30)的感染情况及型下系(lineage)分类。方法收集就诊于中国人民解放军总医院妇产科,并在30d内进行新柏氏薄层液基细胞学检测女性患者宫颈脱落细胞样品,从中提取DNA并进行HP... 详细信息

目的了解国内人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)30型(HPV30)的感染情况及型下系(lineage)分类。方法收集就诊于中国人民解放军总医院妇产科,并在30d内进行新柏氏薄层液基细胞学检测女性患者宫颈脱落细胞样品,从中提取DNA并进行HPV30型特异性聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)检测;对HPV30阳性样本进行病毒基因组全长PCR扩增和序列分析。结果1600例受试者中,共获得HPV30阳性样品9例(0.56%,9/1600),其中6例HPV30基因组全长PCR扩增成功;9例HPV30毒株在型下系分类上都属于A,其中A1占66.7%(6/9)、A4占22.2%(2/9)、A5占11.1%(1/9)。结论国内女性中存在HPV30感染,型下系分类上全部HPV30毒株都属于A。

关键词：宫颈癌人乳头瘤病毒30型分类

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人肠道类器官培养在诺如病毒和轮状病毒感染研究中的应用

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国际病毒学杂志 2024年第5期31卷 437-440页

作者：王怡鹏庞立丽段招军甘肃中医药大学公共卫生学院甘肃兰州730000 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)和轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染是引起人类急性胃肠炎的主要病因,为全球造成巨大的疾病负担.病毒的分离培养对研究病毒感染特性、与宿主免疫反应相互作用机制和制定防治策略至关重要.人肠道类器... 详细信息

人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)和轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染是引起人类急性胃肠炎的主要病因,为全球造成巨大的疾病负担.病毒的分离培养对研究病毒感染特性、与宿主免疫反应相互作用机制和制定防治策略至关重要.人肠道类器官(human intestinal enteroids,HIEs/human intesinal organoids,HIOs)体外三维培养体系的建立与发展为HuNoV和HRV的分子生物学机制研究提供了重要的平台.本文综述了HIEs/HIOs培养在HuNoV和HRV感染研究中的应用,为利用肠道类器官对胃肠炎病毒的深入研究提供参考.

关键词：肠道类器官诺如病毒轮状病毒

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SARS-CoV-2 Omicron变异株荧光定量PCR鉴别方法的建立及应用

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病毒学报 2023年第1期39卷 1-5页

作者：牛培华何雅青李晓燕马红霞朱琳郑宝璐魏欣仪李诗敏朱灿卢清菊孟君彭博王佶马学军中国疾病预防控制中心、病毒病预防控制所、国家卫生健康委员会、医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 深圳市疾病预防控制中心、病原生物研究所深圳518055 天津市疾病预防控制中心、病原生物检测室天津300011 河南省疾病预防控制中心、传染病预防控制所郑州450016 中国疾病预防控制中心、中国现场流行病学培训项目北京100050

开发和评价一种用于鉴别Omicron变异株的荧光定量PCR方法。我们针对Omicron变异株S基因的两个特异性突变位点开发了一种基于荧光定量PCR的Omicron变异株分型方法(Omicron RT-qPCR)。通过测试临床样本来评价方法的特异性,通过标准品评价... 详细信息

开发和评价一种用于鉴别Omicron变异株的荧光定量PCR方法。我们针对Omicron变异株S基因的两个特异性突变位点开发了一种基于荧光定量PCR的Omicron变异株分型方法(Omicron RT-qPCR)。通过测试临床样本来评价方法的特异性,通过标准品评价方法的灵敏度。Omicron RT-qPCR分型方法显示能够可靠地区分Omicron变异株和“野生型” SARS-CoV-2及Alpha、Beta、Delta变异株及甲型流感病毒。选取68例新冠疑似样本,全基因组测序(Whole genome sequencing,WGS)结果显示44例为Omicron变异株,Omicron RT-qPCR分型结果均为阳性;11例为Delta变异株,Omicron RT-qPCR分型结果均为阴性;另外,通过WGS分析未能成功分型的7例样本,通过Omicron RT-qPCR分型方法成功鉴定为Omicron BA.1和BA.2变异株。我们开发的Omicron RT-qPCR分型方法可以在普通的PCR检测实验室应用,为我国疾控系统和医疗机构及时监测SARS-CoV-2 Omicron变异株的传播提供可靠的技术支撑。

关键词： SARS-CoV-2 Omicron变异株基因分型检测方法

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