检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学院院刊 2006年第2期21卷 169-169页

作者：计算生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院计算生物学研究所

随着各类生物数据的加速增长，运用理论模型和数值计算研究生命科学的计算生物学和牛物信息学已经成为最吸引人的新兴学科，是当今生命科学和自然科学的核心领域和最具活力的前沿领域之一。根据国际科技发展趋势和中国计算生物学的现状... 详细信息

随着各类生物数据的加速增长，运用理论模型和数值计算研究生命科学的计算生物学和牛物信息学已经成为最吸引人的新兴学科，是当今生命科学和自然科学的核心领域和最具活力的前沿领域之一。根据国际科技发展趋势和中国计算生物学的现状，中科院与德国马普学会于2004年5月共同签署了合作建设计算生物学伙伴研究所的合作意向书。2005年10月13日，中科院上海生命科学研究院计算生物学研究所（中科院一马普学会计算生物学伙伴研究所）正式揭牌。该所作为中国科学院下属的非法人研究单元，纳入中国科学院上海生命科学研究院管理序列。

关键词：中国科学院上海生命科学研究院计算生物学研究所

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江浙蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶的分离纯化及其性质鉴定

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生物化学与生物物理学报 2002年第3期34卷 305-310页

作者：刘杰武柴敏强杜晓燕宋建国周元聪中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化?

从江浙蝮蛇粗毒中经SephadexG 15 0凝胶过滤、DEAE SepharoseCL 6B以及FPLCSuperose 12分离出一种蛋白质。该蛋白质经SDS PAGE测定在非还原和还原条件下分子量均为 5 7kD左右 ,等电聚焦测得其等电点约为 4.9。生物活性测定表明该蛋白质... 详细信息

从江浙蝮蛇粗毒中经SephadexG 15 0凝胶过滤、DEAE SepharoseCL 6B以及FPLCSuperose 12分离出一种蛋白质。该蛋白质经SDS PAGE测定在非还原和还原条件下分子量均为 5 7kD左右 ,等电聚焦测得其等电点约为 4.9。生物活性测定表明该蛋白质具有L 氨基酸氧化酶活性 ,能够抑制由ADP和胶原所引起的血小板聚集 ,具有抑制革兰氏阴性菌的作用 ;并且具有细胞毒性 ,能够诱导细胞凋亡

关键词： L-氨基酸氧化酶(LAO) 江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas) 血小板聚集抑菌作用细胞凋亡

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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的体内体外抗人肝细胞癌的作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第9期22卷 65-70页

作者：郭本昌徐永华中国 200031 中国科学院上海生命科学研究院上海生物化学和细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院上海生物化学和细胞生物学研究所上海

目的:研究Bcl-2蛋白的过表达对Trail诱导肝癌细胞凋亡的影响,以及Trail蛋白体内和体外对人肝癌细胞的杀伤作用。方法:克隆Trail基因并在大肠杆菌中表达Trail重组蛋白。检测Trail重组蛋白在体内和体外对肿瘤的杀伤作用。用台盼蓝拒染法... 详细信息

目的:研究Bcl-2蛋白的过表达对Trail诱导肝癌细胞凋亡的影响,以及Trail蛋白体内和体外对人肝癌细胞的杀伤作用。方法:克隆Trail基因并在大肠杆菌中表达Trail重组蛋白。检测Trail重组蛋白在体内和体外对肿瘤的杀伤作用。用台盼蓝拒染法检测细胞的凋亡率。将真核细胞表达质粒pcDNA3-Bcl-2转染到人肝癌细胞BEL-7404细胞中,并通过G418400mg/L筛选得到Bcl-2蛋白稳定表达的细胞株。结果:重组蛋白Trail能够有效地杀死人肝癌细胞(包括BEL-7404,SMMC-7721,和BEL-7402等细胞)。在体外,过量表达的Bcl-2蛋白能抑制Trail重组蛋白对人肝癌细胞BEL-7404的杀伤作用。重组蛋白Trail能够有效地抑制人肝癌细胞BEL-7404在裸鼠中形成实体瘤。结论:在体内和体外,Trail重组蛋白能够杀死肝癌细胞。Bcl-2蛋白过表达可以抑制Trail重组蛋白对肝癌细胞BEL-7404的杀伤作用。Trail蛋白是一种潜在的肝癌治疗剂。

关键词：细胞凋亡 bcl-2基因肿瘤坏死因子膜糖蛋白类肝细胞癌分子克隆逆转录聚合酶链反应

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GL-7ACA酰化酶(C130)β亚基N端氨基酸残基的突变及功能

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生物化学与生物物理学报 2001年第6期33卷 671-676页

作者：张霓丁晓明黄曦王恩多杨蕴刘赵国屏姜卫红中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所

戊二酰 7 氨基头孢烷酸酰化酶 (即GL 7ACA酰化酶 ,EC .3.5 .1.11)的催化中心通常在 β亚基N端的第一个氨基酸 ,底物亲和标记的研究亦显示N端存在着结合靶点 ,因而该区域的结构可能与酶的功能密切相关。对C130 β亚基N端的 2～ 8位氨基... 详细信息

戊二酰 7 氨基头孢烷酸酰化酶 (即GL 7ACA酰化酶 ,EC .3.5 .1.11)的催化中心通常在 β亚基N端的第一个氨基酸 ,底物亲和标记的研究亦显示N端存在着结合靶点 ,因而该区域的结构可能与酶的功能密切相关。对C130 β亚基N端的 2～ 8位氨基酸残基分别进行了肽段置换和定点突变研究。将N端前 8位肽段置换为来源于Arthrobacterviscosus的青霉素G酰化酶 (PAC)的对应序列后 ,C130酰化酶活力丧失 ;而置换为来源于E .coli的青霉素G酰化酶 (PGA)的对应序列后 ,酰化酶活力仍然保留 ,但Km 值从 0 .44× 10 -3 mol·L-1增大为 0 .5 5× 10 -3mol·L-1,kcat值由 4.92s-1降低为 1.6 4s-1。另对C130 β亚基N端 2～ 4位氨基酸残基作了单点突变 :第 4位的Trp为可能的底物类似物结合位点 ,被变为Tyr后 ,它对底物GL 7ACA的结合能力略为减弱 ,kcat则降低为 2 .2 9s-1;而变为Leu后 ,Km 为 0 .34× 10 -3 mol·L-1,kcat为 3.15s-1;第 3位的Ser变为Met、Ala及Cys后 ,随着Km值逐渐降低 ,kcat也有所降低 ,而S3 M、S3 A突变体的kcat/Km 值比野生型的分别增加了 2 2 .3%和 39.3% ;将活性中心Ser(β1)邻位的Asn(β2 )变为Gln后 ,C130酶活大幅度下降 ,kcat减为 0 .47s-1。上述结果表明 ,C130 β亚基N端的前几个氨基酸残基均可对酶的功能

关键词： GL-7ACA酰化酶定点突变催化中心

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人α-半乳糖苷酶的表达抑制NIH 3T3细胞主要异种抗原表位Galα(1,3)Gal的生成(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第10期24卷 35-40+110-111页

作者：闫景莲余路阳朱丽华郭礼和中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海 200031 中国

目的:检测人α-半乳糖苷酶在NIH3T3细胞系中对Gal抗原表位生成的抑制作用。方法:流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平,Western blot检测G抗原糖蛋白的表达。四唑盐(MTT)比色试验检测NIH3T3细胞在人血清介导的... 详细信息

目的:检测人α-半乳糖苷酶在NIH3T3细胞系中对Gal抗原表位生成的抑制作用。方法:流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平,Western blot检测G抗原糖蛋白的表达。四唑盐(MTT)比色试验检测NIH3T3细胞在人血清介导的裂解作用下的活力。结果:克隆了人α-半乳糖苷酶并在NIH3T3细胞上建立了永久细胞系,Western blot结果表明,在表达人α-半乳糖苷酶的NIH3T3细胞中,人的天然抗体与细胞表面糖蛋白的结合能力显著降低,甚至完全消失,同时凝集素Gs-IB4结合分析也进一步证明人α半乳糖苷酶的稳定表达能有效地抑制NIH3T3细胞上Gal抗原表位的生成,流式细胞检测结果则表明,由Gal抗原表位与人IgG,IgM和3C3c介导的异种反应性分别降低了73.4％,22.3％和47.9％,随后发生的细胞裂解反应也被显著抑制。结论:人α-半乳糖苷酶能够有效抑制鼠成纤维细胞NIH 3T3细胞表面Gal抗原表位的生成以及Gal抗原表位与人天然抗体共同介导的免疫排斥。

关键词：人α-半乳糖苷酶 Gal表位异种移植 NIH3T3细胞

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广泛表达人Fas配体的转基因小鼠发生轻微类移植物抗宿主疾病(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第4期22卷 25-33页

作者：马映华费俭胡佳华周筱刚夏国宏郭礼和中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所上海中国 200031

目的:建立Fas配体(FasL/CD95L)转基因小鼠并研究FasL广泛表达的生理效应。方法:原核显微注射法产生转基因小鼠,巢式PCR和Southern-blot鉴定转基因的整合及其完整性,半定量RT-PCR分析FasL mRNA水平,免疫荧光检测FasL蛋白质的表达,组织切... 详细信息

目的:建立Fas配体(FasL/CD95L)转基因小鼠并研究FasL广泛表达的生理效应。方法:原核显微注射法产生转基因小鼠,巢式PCR和Southern-blot鉴定转基因的整合及其完整性,半定量RT-PCR分析FasL mRNA水平,免疫荧光检测FasL蛋白质的表达,组织切片染色检查形态学变化,流式细胞仪检测脾脏αβT细胞百分比。结果:获得2只含置于CMV启动子控制下人FasL cDNA的建立者小鼠。F1代杂合体小鼠的大部分组织可检测到人FasL中等程度的表达。转基因小鼠发育正常,但脾、睾丸、肺和肝局部区域形态异常,具有轻微类移植物抗宿主疾病特征。与野生型对照相比,来源于二个建立者的转基因小鼠αβT细胞在脾脏的百分比分别减少了约32％和24％。结论:广泛表达FasL可导致轻微类移植物抗宿主疾病。

关键词： Fas配体移植物抗宿主病转基因小鼠流式细胞术逆转录聚合酶链反应反义DNA 荧光抗体技术

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人α半乳糖苷酶和α1,2岩藻糖基转移酶协同抑制NIH3T3细胞与人血清的异种免疫反应(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第9期24卷 40-46+111页

作者：闫景莲余路阳郭礼和中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所上海 200031 中国

目的:研究人α半乳糖苷酶和人α1,2岩藻糖基转移酶在NIH3T3细胞上协同性地抑制Gal抗原表位的表达和相关异种反应性。方法:流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平,蛋白质印迹检测G抗原糖蛋白的表达,四唑盐(MTT)比... 详细信息

目的:研究人α半乳糖苷酶和人α1,2岩藻糖基转移酶在NIH3T3细胞上协同性地抑制Gal抗原表位的表达和相关异种反应性。方法:流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平,蛋白质印迹检测G抗原糖蛋白的表达,四唑盐(MTT)比色试验检测NIH3T3细胞在人血清介导的裂解作用下的活力。结果:转染人α半乳糖苷酶和人α1,2岩藻糖基转移酶的NIH3T3细胞中G抗原的表达及其与人天然抗体(IgG和IgM)的结合能力都显著下降,其抗人血清介导的细胞裂解反应能力有效提高。结论:人α半乳糖苷酶和α1,2岩藻糖基转移酶能够相互协同抑制Gal抗原表位表达和相关异种排斥反应。

关键词： α半乳糖苷酶 α-L-岩藻糖基转移酶 Gal alpha 1,3 Gal NIH3T3细胞异种移植免疫球蛋白M 免疫球蛋白G 补体

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CCTβ在大鼠脑内的分布及在昆虫细胞中的表达(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第4期23卷 63-68页

作者：徐侃彦熊缨谢值勤边玮景乃禾杜雨苍 200031中国中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海

目的:考察大鼠CTP:磷酸胆碱胞苷转移酶β(CCTβ)在脑内的分布及在昆虫细胞中的表达以研究其活性和特征.方法:用地高辛标记CCTβ探针对大鼠脑切片进行原位杂交;利用杆状病毒表达系统在粉纹夜蛾细胞中表达CCTβ;利用酶测活实验和代谢标记... 详细信息

目的:考察大鼠CTP:磷酸胆碱胞苷转移酶β(CCTβ)在脑内的分布及在昆虫细胞中的表达以研究其活性和特征.方法:用地高辛标记CCTβ探针对大鼠脑切片进行原位杂交;利用杆状病毒表达系统在粉纹夜蛾细胞中表达CCTβ;利用酶测活实验和代谢标记实验,研究表达蛋白的活性和特征,及对细胞磷脂酰胆碱(PC)合成的影响.结果:(1)CCTβ在海马的齿状回、CA1、CA2和CA4区有明显分布.(2)Tn细胞中表达的CCTβ含量是天然脑内的1×10~4倍,它的表达加快了细胞的PC合成.(3)软脂酰磷酸胆碱以及一些离子会抑制CCTβ活性;dCTP是CCTβ另一最适底物.结论:CCTβ在大鼠脑内有与精氨酸加压素片段(4—8)相似的分布.

关键词： CTP 磷酸胆碱胞苷转移酶精氨酸加压素原位杂交海马软脂酰磷酸胆碱杆状病毒

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过量表达GABA转运蛋白-1的转基因小鼠对药物诱发癫痫易感(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第10期24卷 41-45+111页

作者：赵文娟马映华费俭梅镇彤郭礼和中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海 200031 中国中国科学院上海生理学研究所

目的:应用过量表达GABA转运蛋白Ⅰ(GAT-1)的转基因小鼠研究GAT-1在癫痫发生中的作用。方法:采用腹腔注射戊四唑(PTZ),印防己毒素(PIC)或红藻氨酸(KA)诱导的癫痫发作为模型,比较GAT-1转基因小鼠和C57BL/6J对照小鼠阵挛性发作和强直性痉... 详细信息

目的:应用过量表达GABA转运蛋白Ⅰ(GAT-1)的转基因小鼠研究GAT-1在癫痫发生中的作用。方法:采用腹腔注射戊四唑(PTZ),印防己毒素(PIC)或红藻氨酸(KA)诱导的癫痫发作为模型,比较GAT-1转基因小鼠和C57BL/6J对照小鼠阵挛性发作和强直性痉挛发生的百分率及潜伏期.结果:GAT-1转基因小鼠不但对不同剂量GABAA受体抑制剂PTZ,PIC,也对谷氨酸受体激动剂KA诱导的癫痫易感.GAT-1抑制剂ethyl nipecotate可明显减轻PTZ诱导的癫痫发作。结论:GAT-1转基因小鼠对癫痫易感证明GABA系统参与了癫痫发生,并且该转基因小鼠模型可作为研究癫痫发生的有用动物模型。

关键词：神经递质转运体载体蛋白质类癫痫 GABA 戊四唑印防己毒素红藻氨酸 ethyl nipecotate 转基因小鼠

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反义猪α(1,3)半乳糖转移酶转基因小鼠的人鼠异种反应性降低(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第3期22卷 41-48页

作者：马映华周筱刚胡佳华费俭夏国宏郭礼和中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学和细胞生物学研究所上海中国 200031

目的:研究体内α(1,3)半乳糖转移酶α(1,3)GT反义抑制降低Galα(1,3)Gal(Gal表位)异种抗原的作用。方法:原核显微注射法产生转基因小鼠,PCR和Southern-blot鉴定转基因的整合,RT-PCR检测小鼠α(1,3)GT的表达,组织学染色检查脾脏形态,免... 详细信息

目的:研究体内α(1,3)半乳糖转移酶α(1,3)GT反义抑制降低Galα(1,3)Gal(Gal表位)异种抗原的作用。方法:原核显微注射法产生转基因小鼠,PCR和Southern-blot鉴定转基因的整合,RT-PCR检测小鼠α(1,3)GT的表达,组织学染色检查脾脏形态,免疫荧光检测Gal表位,流式细胞仪分析人血清中异种天然抗体(IgM和IgG)和补体(C3c)对鼠源细胞的结合。结果:猪反义α(1,3)半乳糖转移酶转基因小鼠发育正常,但部分杂合体小鼠脾脏有细胞坏死特征。转基因小鼠细胞表面Gal表位数量明显减少。与野生型对照相比,转基因小鼠多种组织的细胞对人血清异种天然抗体的结合降低30％-60％,对补体的结合降低40％-50％。结论:通过反义基因抑制α(1,3)半乳糖转移酶的表达能有效降低人异种反应性。

关键词：表位半乳糖转移酶类异种移植荧光抗体技术反义DNA 逆转录聚合酶链反应 DNA印迹法猪

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