检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2016年第27期96卷 2182-2186页

作者：高智徐宏光张晓玲王弘马明明肖良刘祥皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科安徽省芜湖市241001 中国科学院上海生命科学院上海交通大学健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的探讨终板软骨细胞体外自然退变模型中转录因子（NF）-κB信号通路表达变化及意义。方法分离获取大鼠终板软骨细胞，体外培养建立终板软骨细胞自然退变模型。根据细胞传代次数分P2代细胞（空白对照组），P5代细胞（体外自然退变组）... 详细信息

目的探讨终板软骨细胞体外自然退变模型中转录因子（NF）-κB信号通路表达变化及意义。方法分离获取大鼠终板软骨细胞，体外培养建立终板软骨细胞自然退变模型。根据细胞传代次数分P2代细胞（空白对照组），P5代细胞（体外自然退变组）及NF—κB信号通路抑制组（细胞传代中加入Bay11-7082的P5代细胞）。观察细胞形态学变化，甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型，阿新蓝染色观察细胞外基质变化。实时聚合酶链反应检测各组细胞中SOX-9基因，Ⅱ型胶原，蛋白聚糖，人基质金属蛋白酶（MMP）13的表达情况，核质分离及免疫印迹检测胞核与胞质中NF—κB信号通路相关蛋白P65、p-P65、IκBα、P-IκBα表达变化。结果随着体外传代的进行终板软骨细胞表型逐渐丢失，阿新蓝染色可见细胞外基质减少，P5代细胞（体外自然退变组）较P2代细胞（空白对照组）SOX-9（P5／P2=0．488，P〈0．01）、蛋白聚糖（P5／P2=0．287，P〈0．01）、Ⅱ型胶原（P5／P2=0．182，P〈0．01）表达明显降低，NF—KB信号通路相关基因P65人核增加，胞质中p-IκBα增高，NF—κB信号通路相关基因MMP13（P5／P2=1．324，P〈0．05）表达明显上升，NF—KB信号通路抑制组较P5代细胞（体外自然传代组）核内p-P65减少，胞内p-IκBα降低，NF—κB信号通路相关基因MMP13（Bay11-7082／P5=0．611，P〈0．05）表达降低，信号通路抑制组中Ⅱ型胶原（Bay11-7082／P5=4．173，P〈0．01）、蛋白多糖（Bay11-7082／P5=2．732，P〈0．05）、SOX-9（Bay11-7082／P5=1．567，P〈0．05）等基因表达明显回升。结论NF—κB信号通路在终板软骨细胞体外退变中发挥重要的调节作用，调控NF—κB信号通路可能会改善椎间盘退变。

关键词： NF-κB信号通路终板软骨细胞细胞退变基质金属蛋白酶13

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AKT／mTOR信号通路在大鼠终板软骨细胞体外自然退变模型中的表达及意义

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中华医学杂志 2016年第5期96卷 375-379页

作者：张书丰王弘张涛徐宏光马明明张晓玲皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科安徽省芜湖市241000 中国科学院上海生命科学院上海交通大学健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的探讨AKT／mTOR信号通路在大鼠终板软骨细胞体外自然退变模型中的表达变化及其意义。方法分离、培养大鼠终板软骨细胞，建立大鼠终板软骨细胞体外自然传代退变模型。数字表法随机分为空白对照组（P2代细胞）、自然传代退变组（P5代... 详细信息

目的探讨AKT／mTOR信号通路在大鼠终板软骨细胞体外自然退变模型中的表达变化及其意义。方法分离、培养大鼠终板软骨细胞，建立大鼠终板软骨细胞体外自然传代退变模型。数字表法随机分为空白对照组（P2代细胞）、自然传代退变组（P5代细胞）、P5代AKT／mTOR信号通路抑制剂组、P5代AKT／mTOR信号通路激动剂组。倒置相差显微镜观察各组细胞的形态；甲苯胺蓝染色检测各组细胞蛋白聚糖的变化；免疫印迹法检测AKT及P—AKT蛋白的表达变化；实时聚合酶链反应检测各组细胞中Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9及AKT／mTOR信号通路中的关键基因mTOR基因表达变化。结果随着大鼠终板软骨细胞的体外自然传代退变的进行，大鼠终板软骨细胞的表型逐渐减少甚至丢失；在自然传代组中：Ⅱ型胶原（P5／P2=0．28，P=0．0427）、蛋白多糖（P5／P2=0．33，P=0．0263）、SOX9（P5／P2=0．40，P：0．0182）及mTOR（P5／P2=0．28，P=0．0381）的表达明显降低；在AKT／mTOR抑制剂组中：Ⅱ型胶原（P5／P2=0．19，P=0．0347）、蛋白多糖（PS／P2=0．25，P=0．023）、SOX9（P5／P2=0．31，P=0．0342）及mTOR（P5／P2=0．20，P=0．0241）的表达较自然传代组降低；在AKT／mTOR激动剂组中：及Ⅱ型胶原（P5／P2=0．41，P=0．0441）、蛋白多糖（P5／P2=0．53，P=0．0151）、SOX9（P5／P2=0．61．P=0．0197）roTOR（PS／P2=0．41，P=0．0381）的表达较自然传代退变及抑制剂组升高。结论AKT／mTOR信号通路可能在大鼠终板软骨细胞体外自然传代退变的过程中有具有十分重要的作用，人为添加AKT／mTOR信号通路的抑制剂（LY294002）或激动剂（IGF-1）可加速或抑制、减缓大鼠终板软骨细胞体外退变的发生。

关键词：椎间盘软骨细胞信号传递细胞衰老 AKT/mTOR

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星状皮瓣重建先天性并指(趾)指(趾)蹼

星状皮瓣重建先天性并指(趾)指(趾)蹼

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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会

作者：徐佳佳戴尅戎张晓玲上海市骨科内植物重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的探讨星状皮瓣重建指(趾)蹼治疗先天性并指(趾)的临床疗效。方法回顾分析2015年10月～2016年4月于本科室治疗的14例先天性并指(趾)患者14例。

关键词：先天性并指指蹼重建

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RhoA/ROCK信号通路在终板软骨细胞体外自然退变中的变化

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中华医学杂志 2015年第41期95卷 3373-3377页

作者：马明明徐宏光张晓玲王弘郑权徐佳佳沈祥张书丰皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科安徽省芜湖市241001 中国科学院上海生命科学研究院上海交通大学健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的探讨RhoA/ROCK信号通路在终板软骨细胞体外自然退变中的表达变化.方法提取大鼠终板软骨细胞并建立体外的终板软骨细胞自然退变模型,依次选取P2代细胞（空白对照组）至P5代细胞（自然退变组）,以及治疗组（P5代细胞加入ROCK信号通... 详细信息

目的探讨RhoA/ROCK信号通路在终板软骨细胞体外自然退变中的表达变化.方法提取大鼠终板软骨细胞并建立体外的终板软骨细胞自然退变模型,依次选取P2代细胞（空白对照组）至P5代细胞（自然退变组）,以及治疗组（P5代细胞加入ROCK信号通路抑制剂Y27632组）,倒置显微镜观察细胞形态,利用甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行观察及表型鉴定.激光共聚焦显微镜检测空白对照组和自然退变组的细胞骨架变化.RT-PCR方法检测各组细胞中Ⅱ型胶原、SOX9、蛋白聚糖基因及信号通路中ROCK-1、ROCK-2基因的表达变化;免疫印迹检测ROCK-1、ROCK-2蛋白表达变化及利用试剂盒检测RhoA蛋白活性表达变化.结果随着体外自然传代的发生终板软骨细胞表型基因表达逐渐丢失;细胞骨架在激光共聚焦显微镜观察下可见P5代终板软骨细胞较P2代细胞骨架明显变细.自然退变组（P5代）终板软骨细胞较空白对照组（P2代细胞）Ⅱ型胶原（P5/P2=0.248,P＜0.001）、蛋白多糖（P5/P2=0.172,P＜0.001）及SOX9（P5/P2 =0.499,P＜0.001）表达明显降低,RhoA/ROCK信号通路中关键基因ROCK-1（P5/P2=0.625,P＜0.001）表达降低、ROCK-2（PS/P2=2.527,P＜0.001）表达升高;而活性蛋白检测发现活性RhoA的量P5代较P2代明显增加.治疗组（P5代细胞中加入ROCK抑制剂Y27632）中抑制ROCK信号以后ROCK-1、ROCK-2表达较P5代细胞均明显降低,蛋白亦是如此.而治疗组中Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9等基因表达则明显回升.结论细胞体外自然传代从P2代细胞至P5代时,终板软骨细胞发生明显退变.并提示可通过调控RhoA/ROCK信号通路来保护终板软骨细胞退变.

关键词：椎间盘软骨细胞终板

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PH响应性可代谢非病毒基因载体PSI转染ChordinsiRNA促进人骨髓间充质干细胞成骨分化

PH响应性可代谢非病毒基因载体PSI转染ChordinsiRNA促进人骨髓间...

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中华医学会第十七届骨科学术会议暨第十届COA国际学术大会

作者：王传东金拓戴尅戎张晓玲上海交通大学医学院/中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室上海交通大学药学院上海交通大学医学院/中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室上海市骨科内植物重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科

目的：骨组织工程为骨折延迟愈合以及骨不连的治疗提供了一种可行的解决办法。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是重要的种子细胞。骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化受到多种细胞因子的调控，包括BMPs和BMP结合蛋白。通过分析骨不连病人骨髓... 详细信息

目的：骨组织工程为骨折延迟愈合以及骨不连的治疗提供了一种可行的解决办法。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是重要的种子细胞。骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化受到多种细胞因子的调控，包括BMPs和BMP结合蛋白。通过分析骨不连病人骨髓间充质干细胞BMPs与BMP结合蛋白的表达，寻找到抑制骨髓间间充质干细胞成骨分化的关键细胞因子。

关键词： Chordin PSI 骨髓间充质干细胞成骨分化

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Wnt／β-catenin 信号通路在终板软骨细胞体外自然退变模型中的表达

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中华医学杂志 2014年第31期94卷 2464-2467页

作者：郑权徐宏光张晓玲王弘汪景王传东宋俊兴熊寿良赵泉来皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科安徽省芜湖市241001 中国科学院上海生命科学院上海交通大学健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室芜湖市中医院骨七科

目的：探讨Wnt/β-联蛋白（ catenin ）信号通路中关键基因在终板软骨细胞自然退变中的表达变化及意义。方法分离培养大鼠终板软骨细胞，建立终板软骨细胞体外自然传代退变模型。分为空白对照组（ P2代细胞）、自然传代组（ P5代细胞）... 详细信息

目的：探讨Wnt/β-联蛋白（ catenin ）信号通路中关键基因在终板软骨细胞自然退变中的表达变化及意义。方法分离培养大鼠终板软骨细胞，建立终板软骨细胞体外自然传代退变模型。分为空白对照组（ P2代细胞）、自然传代组（ P5代细胞）及wnt信号通路抑制组，倒置显微镜观察细胞形态，HE染色及甲苯胺蓝染色检测终板软骨细胞表型改变。实时聚合酶链反应检测各组细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX-9基因及β-catenin的表达变化；免疫印迹检测β-catenin蛋白表达变化。激光共聚焦显微镜检测β-catenin在细胞内的表达与定位。结果随着自然传代的进行终板软骨细胞表型逐渐丢失；P5代终板软骨细胞较P2代细胞Ⅱ型胶原（P5/P2＝0.11，P＝0.0039）、蛋白多糖（P5/P2＝0.32，P＝0.0046）及SOX-9（P5/P2＝0.58，P＝0.0168）表达明显降低，而Wnt/β-catenin信号通路中关键基因β-catenin（P5/P2＝1.62，P＝0.0082）表达明显增高；抑制wnt 信号通路后β-catenin （XAV-939/P5＝0.23，P＝0.0017）表达降低，Ⅱ型胶原（XAV-939/P5＝2.60，P＝0.0180）、蛋白多糖（XAV-939/P5＝2.56，P＝0.0041）及SOX-9（XAV-939/P5＝1.47，P＝0.0382）表达增高。激光共聚焦显微镜观察可见P5代终板软骨细胞较P2代中β-catenin表达增高且明显入核，抑制wnt信号通路后β-catenin表达明显减少。结论β-catenin基因在终板板软骨细胞体外退变过程中具有重要的作用，调控Wnt/β-catenin信号通路有可能保护终板软骨的退变。

关键词：椎间盘软骨细胞信号传递细胞衰老

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大鼠关节软骨干细胞的分离培养及其特性的鉴定

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第8期32卷 1106-1110页

作者：童文学向晟楠张宁戴尅戎张晓玲上海交通大学医学院中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室上海200025 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科上海市骨科内植物重点实验室上海200011

目的分离培养大鼠关节软骨干细胞(ACSCs)并鉴定其特性。方法运用纤连蛋白黏附法从大鼠关节软骨细胞中分选出ACSCs,流式细胞技术分别鉴定干细胞阳性表面抗原(阳性标志物CD90与CD44)和阴性表面抗原(阴性标志物CD45、CD31与CD34)在ACSCs中... 详细信息

目的分离培养大鼠关节软骨干细胞(ACSCs)并鉴定其特性。方法运用纤连蛋白黏附法从大鼠关节软骨细胞中分选出ACSCs,流式细胞技术分别鉴定干细胞阳性表面抗原(阳性标志物CD90与CD44)和阴性表面抗原(阴性标志物CD45、CD31与CD34)在ACSCs中的表达水平,单克隆形成实验鉴定ACSCs的单克隆形成能力,成骨、成脂及成软骨诱导鉴定ACSCs的多向分化潜能。结果纤连蛋白可以特异性地分选出ACSCs。ACSCs高表达CD90与CD44,几乎不表达CD45、CD31与CD34。经过7d培养,单个ACSC可以形成大于32个细胞的单克隆细胞团。ACSCs具备很强的成骨、成脂和成软骨分化能力。结论大鼠关节软骨内存在ACSCs,ACSCs具有比较典型的干细胞特征。

关键词：关节软骨干细胞软骨纤连蛋白软骨再生

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Indian Hedgehog在牵张力促进成骨细胞增殖中的作用研究

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华西口腔医学杂志 2012年第3期30卷 234-238页

作者：韩磊张晓玲唐国华南京大学医学院附属口腔医院口腔正畸科南京210025 中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科上海市口腔医学重点实验室上海200011

目的观察Hedgehog(Hh)信号在牵张力调控成骨细胞增殖中的作用。方法体外分离和培养新生大鼠颅顶骨成骨细胞,应用Flexcell 4000TM加力系统施加3%和6%的2种牵张应变。用N端Hedgehog重组蛋白(N-Shh)、Hed-gehog通道抑制剂环巴胺(cy)和机械... 详细信息

目的观察Hedgehog(Hh)信号在牵张力调控成骨细胞增殖中的作用。方法体外分离和培养新生大鼠颅顶骨成骨细胞,应用Flexcell 4000TM加力系统施加3%和6%的2种牵张应变。用N端Hedgehog重组蛋白(N-Shh)、Hed-gehog通道抑制剂环巴胺(cy)和机械通道抑制剂三氯化钆(GdCl3)对成骨细胞进行干预。分别采用细胞计数、甲基噻唑基四唑(MTT)比色法和流式细胞仪检测成骨细胞的增殖。采用SAS 8.0软件包对结果进行统计分析。结果在成骨细胞体外培养过程中,牵张力促进了成骨细胞的增殖,以6%牵张应变更显著;牵张力仍能促进经cy处理后的成骨细胞的增殖,但这种促进作用能被GdCl3抑制。结论牵张力促进成骨细胞增殖的作用有一部分是通过上调Ihh的表达实现的。

关键词：成骨细胞 Hedgehog 牵张增殖

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牵张应力对Hedgehog通路相关基因和细胞增殖的影响研究

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口腔医学研究 2012年第9期28卷 853-856页

作者：韩磊张晓玲唐国华南京大学附属口腔医院口腔正畸科江苏南京210025 中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科.上海市口腔医学重点实验室

目的:观察牵张力下Hh通路相关基因的表达以及牵张力对成骨细胞增殖的影响,探索机械应力对成骨细胞的调控机制。方法:应用Flexcell 4000TM加力系统对大鼠成骨细胞施加0.5Hz,3%、6%和9%的张应变,作用时间4h、12h和24h。用机械通道抑制剂... 详细信息

目的:观察牵张力下Hh通路相关基因的表达以及牵张力对成骨细胞增殖的影响,探索机械应力对成骨细胞的调控机制。方法:应用Flexcell 4000TM加力系统对大鼠成骨细胞施加0.5Hz,3%、6%和9%的张应变,作用时间4h、12h和24h。用机械通道抑制剂三氯化钆(GdCl3)对成骨细胞进行干预。采用流式细胞技术测定细胞周期分布与细胞增殖变化,定量PCR检测Hedgehog通路相关基因Ihh、Shh、Ptch和Smo的表达。采用SAS8.0软件包对结果进行统计分析。结果:不同强度、不同作用时间的张应变对Ihh表达量的上调作用亦不相同,6%张应变作用24h的对Ihh表达量上调最为明显,其下游基因Ptch和Smo的表达变化与Ihh类似;上述上调Ihh表达的作用均可被GdCl3抑制。;6%同3%牵张力相比,更能促进成骨细胞的增殖。结论:Ihh基因对力学刺激敏感;Ihh基因表达量的变化与成骨细胞的增殖相关。

关键词：成骨细胞 Hedgehog 牵张力增殖

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大鼠终板软骨内源性转化生长因子β1与早期钙化相关基因表达的变化

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中华医学杂志 2011年第31期91卷 2181-2185页

作者：徐宏光张晓玲张小海王弘贾瑞平童文学童海骏皖南医学院附属弋矶山医院脊柱外科安徽省芜湖市241001 上海交通大学医学院中国科学院上海生命科学院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的建立大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型，探讨自然退变过程中内源性转化生长因子（TGF）-β1与钙化基因表达变化的关系。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞，酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞，选取P2代和P4代，在体... 详细信息

目的建立大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型，探讨自然退变过程中内源性转化生长因子（TGF）-β1与钙化基因表达变化的关系。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞，酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞，选取P2代和P4代，在体外均培养6d，观察细胞表型及利用茜素红染色，观察P2与P4代细胞的变化。用实时PCR检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、转录因子SOX-9及代谢相关基因蛋白多糖、基质金属蛋白酶（MMP）-13、含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS）4、5的变化，验证体外退变模型的建立，在此基础上，继续检测生长因子TGF．131及钙化相关基因（ANK）、胞外核苷酸焦磷酸酶（ENPP）、组织非特异性碱性磷酸酶（TNAP）的变化。结果相对于P2代细胞，P4代细胞形态上有梭形变趋势，茜素红染色无明显变化。P4代转录因子SOX-9表达明显低于P2代（P4／P2=0．0690，P=0．0489），Ⅱ型胶原（P4／P2=0．0535，P=0．009）及蛋白多糖（P4／P2=0．2672，P=0．0343）表达也均明显低于P2代，其他代谢相关基因无明显改变。P4代细胞TGF-131（P4／P2=0．5934，P=0．0482）、TNAP（P4／P2=0．0385，P=0．0139）和ANK（P4／P2=0．2121，P=0．0009）表达均明显低于P2代，ENPP表达无明显改变（P〉0．05）。结论终板软骨随着传代次数增多，从P2代到P4代，开始发生体外自然退变，Ⅱ型胶原、SOX-9及蛋白多糖明显下调。内源性TGF-β1与钙化相关基因表达均下调，钙化相关基因ANK下调可能由内源性TGF-β1下调引起，提示调节内源性TGF-β1在终板软骨中的表达有可能会阻止椎间盘的退变。

关键词：软骨细胞转化生长因子β 锚蛋白类

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