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第三届生态毒理学学术研讨会

作者：耿柠波王菲迪张海军陈吉平中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023

短链氯化石蜡(Short-chain chlorinated paraffins,SCCPs)是碳链长度为10-13,氯化度在30-70％的氯代正构烷烃,具有远距离环境迁移的能力、环境持久性、生物蓄积性等POPs特性.于2009年被斯德哥尔摩公约列为POPs候选物质.本研究在低于无... 详细信息

短链氯化石蜡(Short-chain chlorinated paraffins,SCCPs)是碳链长度为10-13,氯化度在30-70％的氯代正构烷烃,具有远距离环境迁移的能力、环境持久性、生物蓄积性等POPs特性.于2009年被斯德哥尔摩公约列为POPs候选物质.本研究在低于无可见作用剂量水平(10mg/kg/day)和最低可观察有害作用水平(100mg/kg/day)下观察了SCCPs连续28天暴露对SD大鼠的体重和脏器系数的影响。

关键词：短链氯化石蜡体重指数脏器系数毒性作用

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新型二维色谱-质谱系统的构建及应用

新型二维色谱-质谱系统的构建及应用

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2016全国生命分析化学学术大会

作者：石先哲王霜原许国旺中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连 116023

面对生命科学、医药、环境科学、食品安全等领域日益复杂的样品，复杂体系的分离分析面临着诸多新的挑战。由于复杂样品存在组成十分复杂且性质差异很大，单维色谱分析方法往往不能满足其分析需要。多维色谱具有峰容量大、分辨率高等优... 详细信息

面对生命科学、医药、环境科学、食品安全等领域日益复杂的样品，复杂体系的分离分析面临着诸多新的挑战。由于复杂样品存在组成十分复杂且性质差异很大，单维色谱分析方法往往不能满足其分析需要。多维色谱具有峰容量大、分辨率高等优势，在复杂样品分离分析领域得到广泛关注。

关键词：二维液相色谱脂质组学复杂样品

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新型纳米材料的研制及在低丰度代谢组学分析中应用

新型纳米材料的研制及在低丰度代谢组学分析中应用

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中国化学会第30届学术年会

作者：石先哲李华秦倩许国旺中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023

代谢组学致力于对生物样本中所有的小分子代谢物进行全面的分析.针对复杂生物样本中，内源性低丰度代谢物在质谱检测时存在基质干扰严重，检测覆盖度低等问题，我们研制了一系列新型纳米材料，并成功用于低丰度代谢组学分析.1.针对尿液... 详细信息

代谢组学致力于对生物样本中所有的小分子代谢物进行全面的分析.针对复杂生物样本中，内源性低丰度代谢物在质谱检测时存在基质干扰严重，检测覆盖度低等问题，我们研制了一系列新型纳米材料，并成功用于低丰度代谢组学分析.1. 针对尿液中低丰度的修饰核苷和核糖基代谢物检测覆盖度不足，发展了一种选择性富集并辅助鉴定的方法.利用合成的苯硼酸修饰聚乙烯亚胺杂化的磁性纳米粒子(Fe3O4@SiO2@PEI-FPBA)实现了对含有顺二羟基靶标代谢物的高选择性、高富集容量、快速的提取与释放.利用修饰核苷以及核糖基代谢物源内裂解产生中性丢失核糖的特点，完成对磁性纳米粒子从尿液中富集出的修饰核苷以及核糖基代谢物的辅助鉴定.通过简化制备步骤，制备了性能类似的磁性纳米粒子，并成功用于儿茶酚胺类神经递质的高灵敏分析.

关键词：纳米材料代谢组学低丰度代谢物选择性富集衍生化

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有血清培养条件下分泌蛋白和外泌体的分析新方法

有血清培养条件下分泌蛋白和外泌体的分析新方法

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中国化学会第30届学术年会

作者：翁叶靖随志刚张丽华张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大学

分泌组在细胞通讯、增殖和迁移等生物学过程中发挥了至关重要的作用。由于在细胞培养过程中加入的血清对分泌组的检测干扰非常严重,因此目前相关研究均在无血清培养条件下开展的。然而,细胞在缺乏营养条件下的分泌组有可能和其正常状态... 详细信息

分泌组在细胞通讯、增殖和迁移等生物学过程中发挥了至关重要的作用。由于在细胞培养过程中加入的血清对分泌组的检测干扰非常严重,因此目前相关研究均在无血清培养条件下开展的。然而,细胞在缺乏营养条件下的分泌组有可能和其正常状态生长状态下的不同。因此,近期我们发展了有血清培养条件下分泌蛋白和外泌体相关的样品预处理新方法,并开展了相关蛋白质组的定性和定量分析。针对分泌蛋白分析,我们采用SILAC标记的方法,区分培养液中的分泌蛋白和加入的血清蛋白;采用蛋白质均衡和液相分离技术,降低样品的复杂程度。基于液质联用,鉴定到HeLa细胞的534个分泌蛋白;从人肝癌高低转移细胞株中定量到1152个分泌蛋白,并发现了一些重要差异蛋白。针对外泌体分析,我们建立并优化了基于PEG的外泌体富集方法;具有操作简单、产率高和后续分析兼容等优点。此外,我们还开展了外泌体蛋白质组的分析。综上所述,我们发展的在有血清培养条件下分泌组的样品预处理新方法有望在生命科学、精准医疗等领域发挥重要作用。

关键词：分泌组学分泌蛋白外泌体蛋白质组定性定量分析

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细胞内蛋白质/多肽组原位捕获及纳米探针构建

细胞内蛋白质/多肽组原位捕获及纳米探针构建

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中国化学会第30届学术年会-第三十八分会：纳米生物效应与纳米药物化学

作者：吴仁安张轶彭佳喜徐桂菊李鑫秦洪强赵樑邹汉法国家色谱研究与分析中心中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所

生物体内的蛋白质、多肽、代谢分子等种类繁多且其含量、结构、修饰等处于动态变化中。具备时间、空间分辨能力的生物分子分布和作用网络等研究能够真实、全面地反映包内蛋白质等生理功能以及生物体的生理状态。组学技术对生物体内蛋白... 详细信息

生物体内的蛋白质、多肽、代谢分子等种类繁多且其含量、结构、修饰等处于动态变化中。具备时间、空间分辨能力的生物分子分布和作用网络等研究能够真实、全面地反映包内蛋白质等生理功能以及生物体的生理状态。组学技术对生物体内蛋白质、多肽、代谢物等进行系统性、原位、动态的研究,有望能够全面、真实地了解生物体内复杂的生理反应过程、蛋白质相互作用及细胞通讯网络等信息。但是,由于缺乏细胞内特别是活细胞内蛋白质组、多肽组等的原位提取方法,动态、原位研究活细胞内蛋白质/多肽组学仍面临巨大的挑战。报告将以蛋白质组、多肽组等复杂生物样品的分析为背景,介绍以纳米孔道结构材料如磁性微球、碳纳米管、介孔硅/碳材料为基础的内源性多肽组、修饰蛋白质组、寡糖组、核酸相关蛋白质组等生物分子群体的分析方法和技术;以纳米材料为表面辅助基质的激光解析电离串联飞行时间生物质谱方法;以具细胞内蛋白质选择性提取能力及细胞靶向作用能力的纳米载体为探针,发展针对细胞内蛋白质/多肽的原位获取的组学分析新方法学基础。

关键词：蛋白质多肽细胞纳米

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整体蛋白质稳定同位素标记策略及其在规模化定量分析中的应用

整体蛋白质稳定同位素标记策略及其在规模化定量分析中的应用

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中国化学会第30届学术年会-第二十三分会：复杂样品分离分析

作者：王方军刘哲益邹汉法中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱中心中国科学院大连化学物理研究所

稳定同位素标记策略在基于酶解肽段的蛋白质组学定量分析中得到了广泛应用,一次分析可对超过5000个蛋白质实现精确定量。基于肽段的蛋白质组学策略只能检测蛋白质的部分序列,无法对蛋白质的不同变体进行精确分析。近年来,针对完整蛋白... 详细信息

稳定同位素标记策略在基于酶解肽段的蛋白质组学定量分析中得到了广泛应用,一次分析可对超过5000个蛋白质实现精确定量。基于肽段的蛋白质组学策略只能检测蛋白质的部分序列,无法对蛋白质的不同变体进行精确分析。近年来,针对完整蛋白质的蛋白质组学策略得到了快速发展。然后,基于稳定同位素化学标记的复杂完整蛋白质样品定量分析策略至今鲜有报道。我们首次将伯胺基团还原二甲基化反应应用于整体蛋白质稳定同位素标记。使用吡啶硼烷为还原剂,甲醛或氘代甲醛为同位素标记试剂对细胞提取复杂蛋白质样品的标记效率>95%。标记后的整体蛋白质在同一张质谱图中出现一系列不同价态的同位素标记离子对。由于每一个伯胺基团同位素标记引入的质量差异为4.024 Da,两个同位素标记离子峰之间的质量差异就代表了整体蛋白质序列中的赖氨酸残基和蛋白质N端的数目,极大提高了整体蛋白质的鉴定可靠性(Fig.1)。利用该策略,我们已经实现在一次分析中对上千个蛋白质变体进行精确定量。

关键词：整体蛋白质稳定同位素化学标记蛋白质组学液相色谱-质谱联用

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基于GC-MS的血浆拟靶向代谢组学方法研究及其在膀胱癌中的应用

基于GC-MS的血浆拟靶向代谢组学方法研究及其在膀胱癌中的应用

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中国化学会第30届学术年会-第二十三分会：复杂样品分离分析

作者：周洋路鑫许国旺中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,发病原因复杂,诊疗困难且发病机制不明确。代谢组学在疾病分型、标志物发现等方面显示出很好的应用潜力,目前膀胱癌代谢组学研究多集中在基于尿样的标志物筛查。血浆相比于尿样受影响因素较少,相... 详细信息

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,发病原因复杂,诊疗困难且发病机制不明确。代谢组学在疾病分型、标志物发现等方面显示出很好的应用潜力,目前膀胱癌代谢组学研究多集中在基于尿样的标志物筛查。血浆相比于尿样受影响因素较少,相对稳定,但基于血浆代谢组学的膀胱癌研究较少。为此,本研究发展了基于GC-MS的血浆拟靶向代谢组学分析方法,并用于膀胱癌研究。采用质量控制样本对所建立的拟靶向与非靶向方法进行比较,重复性结果显示,拟靶向方法有89%的峰RSD<20%,而非靶向方法为70.3%;线性结果显示拟靶向方法有90.7%的峰皮尔森相关系数大于0.90,而非靶向方法为78.3%;采用拟靶向方法有91.3%和57.7%的峰的信噪比提高2倍和5倍。方法验证表明,所建立的方法具有良好的精密度、回收率及衍生产物稳定性。应用于膀胱癌研究中,发现在高级别膀胱癌中磷酸戊糖途径、核酸代谢及脂肪酸代谢上调,提示其可能通过激活磷酸戊糖途径来促进脂代谢、核酸合成及活性氧解毒进而调控肿瘤细胞增殖。

关键词： GC-MS 拟靶向血浆膀胱癌代谢组学

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基于强疏水基团修饰的蛋白质组N末端肽富集方法研究

基于强疏水基团修饰的蛋白质组N末端肽富集方法研究

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中国化学会第十一届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会

作者：单亦初陈玲凡张玉奎张丽华中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心大连化学物理研究所

蛋白质的N端对其生物学功能有着巨大的影响。例如,N末端的翻译后修饰与蛋白质的稳定性、合成、定位等1相关;N末端的剪切参与蛋白代谢、细胞凋亡、信号传导等生物过程,且与多种疾病发生密切相关2。基于生物质谱技术对蛋白质组末端肽进行... 详细信息

蛋白质的N端对其生物学功能有着巨大的影响。例如,N末端的翻译后修饰与蛋白质的稳定性、合成、定位等1相关;N末端的剪切参与蛋白代谢、细胞凋亡、信号传导等生物过程,且与多种疾病发生密切相关2。基于生物质谱技术对蛋白质组末端肽进行分析将会对蛋白质的鉴定和功能分析提供更有价值的信息。但是蛋白质酶解产物中大量的中间肽段对末端肽的质谱信号具有极大的干扰,

关键词：强疏水基团修饰蛋白质组 N末端肽

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基于强疏水基团修饰的蛋白质组N末端肽富集方法研究

基于强疏水基团修饰的蛋白质组N末端肽富集方法研究

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第11届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会

作者：单亦初陈玲凡张玉奎张丽华中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心大连化学物理研究所

蛋白质的N端对其生物学功能有着巨大的影响.例如,N末端的翻译后修饰与蛋白质的稳定性、合成、定位等1相关;N末端的剪切参与蛋白代谢、细胞凋亡、信号传导等生物过程,且与多种疾病发生密切相关2.基于生物质谱技术对蛋白质组末端肽进行分... 详细信息

蛋白质的N端对其生物学功能有着巨大的影响.例如,N末端的翻译后修饰与蛋白质的稳定性、合成、定位等1相关;N末端的剪切参与蛋白代谢、细胞凋亡、信号传导等生物过程,且与多种疾病发生密切相关2.基于生物质谱技术对蛋白质组末端肽进行分析将会对蛋白质的鉴定和功能分析提供更有价值的信息.但是蛋白质酶解产物中大量的中间肽段对末端肽的质谱信号具有极大的干扰,严重影响末端肽的鉴定效率.

关键词：强疏水基团修饰蛋白质组 N末端肽

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有机溶剂辅助封闭式电喷雾离子源的设计及其在痕量蛋白质组样品分析中的应用

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分析化学 2015年第10期43卷 1433-1438页

作者：朱旭东周愿梁振梁玉张丽华朱一心张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室中国科学院大学

将康达效应应用于电喷雾离子源,设计了气氛可调康达效应电喷雾离子源（Coanda effect electrospray ionization source,CEESI）。考察了不同饱和蒸气压、不同极性的有机溶剂对标准肽段在质谱上信号响应的影响。结果表明,辅助气中添加乙... 详细信息

将康达效应应用于电喷雾离子源,设计了气氛可调康达效应电喷雾离子源（Coanda effect electrospray ionization source,CEESI）。考察了不同饱和蒸气压、不同极性的有机溶剂对标准肽段在质谱上信号响应的影响。结果表明,辅助气中添加乙醇后,标准肽段质谱信号提高约1000倍,而且对于1 ng BSA酶解产物,蛋白序列覆盖率提高约10%。在最佳条件下,采用nano-HPLC-CEESI-LTQ XL MS系统,实现了6,10,20和50 ng He La细胞全提蛋白质酶解产物的定性分析,与常用的开放式nano-ESI相比,肽段和蛋白质的可鉴定数目分别提高20%;60%和20%;00%。本研究表明,采用CEESI源有利于痕量蛋白质组样品的高灵敏度分析。

关键词：康达效应电喷雾离子源蛋白质组痕量分析

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