检索结果-内蒙古大学图书馆

中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会

作者：王方军陈津刘哲益邹汉法中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所

液相色谱-质谱联用（LC-MS）是当今分析生物样品的核心工具[1]。LC-MS系统已经广泛应用于多肽样品和代谢物样品的高通量、高效分离分析。然而,由于整体蛋白质分子量大,溶解度低,电喷雾离子化（ESI）及二级质谱碎裂效率低[2],在LC-MS分... 详细信息

液相色谱-质谱联用（LC-MS）是当今分析生物样品的核心工具[1]。LC-MS系统已经广泛应用于多肽样品和代谢物样品的高通量、高效分离分析。然而,由于整体蛋白质分子量大,溶解度低,电喷雾离子化（ESI）及二级质谱碎裂效率低[2],在LC-MS分析中色谱分离分辨率和质谱检测灵敏度都较低。三氟乙酸（TFA）是一种理想的液相色谱流动相添加剂,能有效改善整体蛋白质的色谱分离选择性、分离度和峰型[3]。但是由于TFA负离子与分析物离子形成离子对产物严重抑制其质谱信号强度[4],TFA至今仍然无法应用于LC-MS系统。我们使用CEESI封闭型离子源[5]（浙江好创生物技术有限公司,图1）,采用酸性气体（甲酸、乙酸或丙酸）辅助电喷雾离子化的策略消除了流动相中TFA负离子引起的离子抑制效应,显著提升了整体蛋白质LC-MS分析性能。与甲酸作为流动相添加剂相比,实现了整体蛋白质色谱分离度提高3倍,半峰宽降低33%;与不采用酸性气体辅助电喷雾离子化（TFA体系）相比,质谱检测型号强度提高了10倍（图1）。进一步将该策略应用于大肠杆菌提取整体蛋白质样品分析,整体蛋白质有效质谱信号数目提高了96%。

关键词：酸性气氛辅助电喷雾离子化整体蛋白质分析三氟乙酸,液相色谱-质谱联用

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高效二甲基化同位素标记用于整体蛋白质定量分析

高效二甲基化同位素标记用于整体蛋白质定量分析

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中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会

作者：刘哲益王方军邹汉法中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所

以整体蛋白质为目标分析物的自上而下蛋白质组学(Top-Down Proteomics)在近年来受到越来越多的关注1,2。然而,与之相应的整体蛋白质同位素标记定量方法还鲜有报道。还原二甲基化是一种针对伯胺基团的高效化学标记方法,已经广泛应用于以... 详细信息

以整体蛋白质为目标分析物的自上而下蛋白质组学(Top-Down Proteomics)在近年来受到越来越多的关注1,2。然而,与之相应的整体蛋白质同位素标记定量方法还鲜有报道。还原二甲基化是一种针对伯胺基团的高效化学标记方法,已经广泛应用于以酶解多肽为目标分析物的自下而上蛋白质组学(Bottom-Up Proteomics)定量分析中。基于其标记效率高,定量结果可靠,操作便捷,成本低廉等特点,本文首次将该方法用于整体蛋白质的同位素标记定量3-5。对于整体蛋白质的二甲基化标记,主要考虑以下几个关键因素:1、常用的还原剂氰基硼氢化钠在标记过程中会产生CN-,影响蛋白质的标记效率;2、甲醛作为一种常见的蛋白质交联剂,在标记过程中会发生较多副反应。针对以上问题,本工作采用吡啶硼烷代替氰基硼氢化钠,同时考察了不同还原剂浓度,甲醛浓度以及反应p H和反应中甲醇含量等条件,优化了标记效率和反应回收率,最终实现了标准蛋白近100%的标记效率和回收率。进一步将该方法用于He La提取蛋白质样品二甲基化标记,标记效率依然可以保持在95%以上。我们将该方法应用于整体蛋白的同位素标记定量,虽然蛋白质离子在质谱中呈现复杂同位素分布和电荷分布,但仍然可以得到准确的定量结果。

关键词：整体蛋白质还原二甲基化同位素标记定量

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在线分析水中VOCs的光电离源内螺旋膜进样质谱方法的研究

在线分析水中VOCs的光电离源内螺旋膜进样质谱方法的研究

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中国化学会第十二届全国分析化学年会

作者：侯可勇苏明扬陈平李海洋中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所大连116023

引言:国内水源污染严重,十大河流中Ⅳ～劣Ⅴ类水占28.3％.华北平原地下水中挥发性有机物(VOCs）检出率为24.62％,其中浅层地下水26 种VOCs 检出率高达29.40％.

关键词：

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基于96孔板预处理的快梯度高通量检测方法及其应用

基于96孔板预处理的快梯度高通量检测方法及其应用

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中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会

作者：欧阳瑒罗萍王晓琳尹沛源许国旺中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连 116023

代谢组学是系统生物学的重要研究平台之一，它的特点是对复杂生物的整体代谢通路的表征，已在病理学和疾病诊断标志物等众多生命科学研究中发挥着重要的作用[1]。大规模临床样品的分析和实时信息反馈的需求对代谢组学方法在通量和稳定... 详细信息

代谢组学是系统生物学的重要研究平台之一，它的特点是对复杂生物的整体代谢通路的表征，已在病理学和疾病诊断标志物等众多生命科学研究中发挥着重要的作用[1]。大规模临床样品的分析和实时信息反馈的需求对代谢组学方法在通量和稳定性方面提出了更高要求和挑战[2]。

关键词：代谢组学血样 96孔板短色谱柱快速梯度高通量

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亲水作用色谱固定相的发展及应用

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化学进展 2014年第1期26卷 10-18页

作者：沈爱金郭志谋梁鑫淼中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所大连116023

亲水作用色谱作为一种高效液相色谱技术,在强极性和离子型化合物如氨基酸、碳水化合物和多肽等的分离分析中发挥着重要作用。作为色谱技术的核心,亲水作用色谱材料的发展直接影响着色谱分离的选择性和分离效率,制约着亲水作用色谱的应... 详细信息

亲水作用色谱作为一种高效液相色谱技术,在强极性和离子型化合物如氨基酸、碳水化合物和多肽等的分离分析中发挥着重要作用。作为色谱技术的核心,亲水作用色谱材料的发展直接影响着色谱分离的选择性和分离效率,制约着亲水作用色谱的应用和推广。目前商品化和学术报道的亲水作用色谱材料种类繁多,键合相结构丰富。本文从色谱材料结构出发,综述了近5年内基于硅胶基质的亲水作用色谱固定相,包括纯硅胶、氨基、氰基、二醇基、酰胺型、聚(琥珀酰亚胺)型、糖型和两性离子型键合相的发展及其在极性药物、蛋白质组学、代谢组学等方面的典型应用。同时简要介绍了近年来亲水作用色谱的色谱评价研究。

关键词：亲水作用色谱固定相极性药物蛋白质组学代谢组学

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生物体系中小分子富集、分离的新材料研究

生物体系中小分子富集、分离的新材料研究

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中国化学会第十二届全国分析化学年会

作者：许国旺李华乔丽珍秦倩石先哲中国科学院大连化学物理研究所分离分析化学重点实验室大连116023

生物体系中的小分子包含有很多关于生命过程活体的状态和功能的信息,与基因表达和生活方式、饮食等引起的变化密切相关.他们中的许多在生物功能方面显示了高度的重要性,也可指示个体正常/异常的状态.但问题是,它们在生物体系中种类众多...

生物体系中的小分子包含有很多关于生命过程活体的状态和功能的信息,与基因表达和生活方式、饮食等引起的变化密切相关.他们中的许多在生物功能方面显示了高度的重要性,也可指示个体正常/异常的状态.但问题是,它们在生物体系中种类众多,化学性质各异,浓度分布范围广,严重的基体效应等给分析带来了难度.

关键词：

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基于等重二甲基化标记的多重蛋白质组定量方法

基于等重二甲基化标记的多重蛋白质组定量方法

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中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会

作者：刘健慧周愿单亦初张丽华张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离与分析化学重点实验室国家色谱中心

稳定同位素标记结合质谱分析已经成为蛋白质组定量分析的主流方法。定量的依据可以分为基于一级谱峰面积和二级谱离子强度两类。前者虽可以实现多重样品的分析,但存在灵敏度低且一级谱图复杂度增加不利于蛋白质的定性等不足;基于二级谱... 详细信息

稳定同位素标记结合质谱分析已经成为蛋白质组定量分析的主流方法。定量的依据可以分为基于一级谱峰面积和二级谱离子强度两类。前者虽可以实现多重样品的分析,但存在灵敏度低且一级谱图复杂度增加不利于蛋白质的定性等不足;基于二级谱离子强度的定量方法中基于报告离子的方法优势在于,不增加一级谱复杂度的情况下,实现多重样品的同时分析,但是该方法定量准确度差的问题仍是制约其发展的瓶颈问题。因而亟需发展实现多重样品准确定量的新方法,以满足蛋白质组高通量分析和时空变化分析的需求。近期,本课题组发展了基于准等重二甲基化标记的蛋白质组定量方法,实现了动态范围高达四个数量级的准确定量[1]。基于此,我们利用二甲基化标记在酸性/碱性条件下反应选择性不同的特点,结合准等重二甲基化标记[2],实现了六重样品的标记定量分析。蛋白质经Lys-C酶解后,通过甲醛、氰基硼氢化钠及其同位素的有机组合,先后进行酸性和碱性条件下的肽段二甲基化标记,以实现其N端和C端赖氨酸的交叉标记,从而实现六重标记。标记后,六重样品在一级谱具有相同的质荷比,而二级谱每种碎片离子都存在质荷比差异,利用二级谱碎片离子进行六重定量。该方法肽段标记效率和标记选择性均在95%以上。当六重样品以1:1:1:1:1:1的比例混合时,得到的定量结果为1:1.02:1.05:1.04:1.04:1.01,两针以上重复的定量结果的RSD值均低于11%,体现出较好的定量准确度和精密度。进一步增加样品混合的比值,当比值为1:5:10:20时,定量结果为1:5.08:10.24:19.95,RSD值均低于15%,体现了该方法在宽动态范围定量结果的准确性。综上,我们发展了一种基于等重二甲基化标记的六重蛋白质组定量方法,该方法具有定量准确度高,精密度好和动态范围宽的优势,有望用于蛋白质在细胞内动态变化的准确分析。

关键词：多重定量方法定量蛋白质组学等重标记生物质谱

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发展评价亲水作用色谱固定相的亲水差减模型

发展评价亲水作用色谱固定相的亲水差减模型

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第二十届全国色谱学术报告会

作者：王纪霞张秀莉郭志谋沈爱金于龙肖远胜薛兴亚梁鑫淼中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连116023

亲水作用液相色谱(HILIC)是分离极性化合物的常用色谱模式,在蛋白组学、代谢组学、糖组学和本草物质组的复杂样品的分离中起到十分关键的作用,了解HILIC 固定相的性质对于分离过程中合理选择色谱柱具有十分重要的意义[1].

关键词：亲水差减模型亲水作用色谱固定相选择性

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修饰蛋白质组学分析新技术新方法

修饰蛋白质组学分析新技术新方法

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第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：邹汉法叶明亮王方军中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心中国科学院大连化学物理研究所

＜正＞蛋白质是生命活动的主要执行者,而翻译后修饰是蛋白功能的主要调控方式。蛋白质翻译后修饰调控着生物体几乎所有的生命活动。因此,对蛋白质翻译后修饰的高效分析检测对研究各种关键生物学过程和重大疾病的发生、发展机制及相应的...

＜正＞蛋白质是生命活动的主要执行者,而翻译后修饰是蛋白功能的主要调控方式。蛋白质翻译后修饰调控着生物体几乎所有的生命活动。因此,对蛋白质翻译后修饰的高效分析检测对研究各种关键生物学过程和重大疾病的发生、发展机制及相应的诊断、治疗意义重大。应用蛋白质组学的技术对蛋白质翻译后修饰进行规模化组学研究是近年来国际上的研究热点,现在已经能够在一次实验分析中实现对上万个蛋白质翻译后修饰位点的分析鉴定,如对蛋白质磷酸化的分析。我们实验室发展了

关键词：

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基于毛细管电泳-质谱联用的肝癌代谢组学研究

基于毛细管电泳-质谱联用的肝癌代谢组学研究

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第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：曾珺尹沛源胡春秀路鑫许国旺中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室

作为系统研究生物体内代谢小分子的工具,代谢组学研究在疾病标志物发现、疗效判断和病理研究中发挥着积极的作用。核磁共振(NMR)与气相色谱质谱联用(GC-MS)、液相色谱质谱联用(LC-MS)技术是当前代谢组学研究的主要手段,这些分析方法的... 详细信息

作为系统研究生物体内代谢小分子的工具,代谢组学研究在疾病标志物发现、疗效判断和病理研究中发挥着积极的作用。核磁共振(NMR)与气相色谱质谱联用(GC-MS)、液相色谱质谱联用(LC-MS)技术是当前代谢组学研究的主要手段,这些分析方法的运用为我们提供了代谢变化的丰富信息。但是,这些常用的分析手段对于极性代谢物(氨基酸、磷酸糖、有机酸、核苷酸等)的全面覆盖能力仍然有限。而值得注意的是,近年来体内的极性代谢物在肿瘤生成及抑制方面的关键调控作用越来

关键词：代谢组学毛细管电泳质谱肝癌

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