检索结果-内蒙古大学图书馆

超高效液相色谱-质谱法同时测定舒血宁注射剂中20种黄酮醇苷与萜类内酯成分

分析测试学报 2020年第1期39卷 115-121页

作者：金高娃宋春颖闫竞宇刘艳芳沈爱金郭志谋梁鑫淼中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连116023 中国科学院大连化学物理研究所-中国医药城生物医药创新研究院江苏泰州225300

建立了舒血宁注射剂中16种黄酮及4种萜类内酯同时定量的超高效液相色谱-质谱分析方法,并采用所建立的方法同时测定了不同厂家舒血宁注射剂产品中上述20种化合物的含量。注射剂样品经甲醇-水(体积比1∶1)稀释后,在Acquity UPLC BEH Shiel... 详细信息

建立了舒血宁注射剂中16种黄酮及4种萜类内酯同时定量的超高效液相色谱-质谱分析方法,并采用所建立的方法同时测定了不同厂家舒血宁注射剂产品中上述20种化合物的含量。注射剂样品经甲醇-水(体积比1∶1)稀释后,在Acquity UPLC BEH Shield RP18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱上分析,以0.1%(体积分数)甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,以电喷雾离子源负离子多反应监测(MRM)模式进行质谱监测。结果表明:20种化合物可在10 min内完成色谱分离分析,检出限和定量下限分别为0.02~1.59 ng/mL和0.07~5.30 ng/mL,16种黄酮及4种萜类内酯在各自的线性范围内线性关系良好,在低、中、高3个加标水平下的回收率为85.9%~109%。该方法前处理简单、快速高效、准确性高,为舒血宁注射剂的质量控制提供了参考。

关键词：舒血宁注射剂超高效液相色谱-串联质谱黄酮苷类萜类内酯同时定量分析

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蛋白质组学在环境毒理学中的研究进展

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生态毒理学报 2020年第4期15卷 88-98页

作者：耿柠波任晓倩张海军曹蓉宋肖垚罗云张保琴陈吉平中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023 中国科学院大学北京100049

蛋白质组学是系统生物学的重要组成部分,它以整体、动态和定量的原则来研究各种蛋白质的功能,系统地分析生物体内蛋白质表达,蛋白-蛋白相互作用和翻译后修饰等特征,已成为后基因组时代不可或缺的分析工具。蛋白质组学技术具有高通量的特... 详细信息

蛋白质组学是系统生物学的重要组成部分,它以整体、动态和定量的原则来研究各种蛋白质的功能,系统地分析生物体内蛋白质表达,蛋白-蛋白相互作用和翻译后修饰等特征,已成为后基因组时代不可或缺的分析工具。蛋白质组学技术具有高通量的特征,能实现对蛋白质的高效快捷的定量分析。将蛋白质组学技术应用于环境毒理学研究,可从蛋白水平上研究外源性化合物对机体的毒性作用机制,并从中筛选出具有较高特异型和高灵敏度的蛋白标志物,为污染物的健康风险评估提供新的技术手段。本文综述了蛋白质组学技术的主要研究方法、研究策略和在环境毒理学研究中的应用,重点讨论了蛋白质组学技术在重金属和有机化合物尤其是持久性有机污染物(POPs)毒性评估中的应用。

关键词：重金属有机污染物空气污染蛋白质组学环境毒理学

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新型锆离子固定化亲和磁纳米粒子的制备及在磷酸化肽高效捕获中的应用

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分析化学 2020年第2期48卷 233-239页

作者：赵艳艳张丽华张丽媛大连医科大学药学院中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所大连医科大学基础医学院

蛋白质磷酸化是最常见、最重要的翻译后修饰之一,在细胞信号传导、细胞凋亡等生物学过程中起关键的调控作用。但是,磷酸化蛋白/肽具有低丰度和负电荷的特点,在生物质谱常规的正离子模式下,易受到高丰度非磷酸化蛋白/肽的信号抑制,难以... 详细信息

蛋白质磷酸化是最常见、最重要的翻译后修饰之一,在细胞信号传导、细胞凋亡等生物学过程中起关键的调控作用。但是,磷酸化蛋白/肽具有低丰度和负电荷的特点,在生物质谱常规的正离子模式下,易受到高丰度非磷酸化蛋白/肽的信号抑制,难以直接对其进行直接分析。因此,有必要在质谱分析前对生物样品中的磷酸化蛋白/肽进行选择性富集。本研究基于三磷酸腺苷（ATP）配基,制备了新型锆离子固定化亲和磁纳米粒子(Zr;-ATP-MNP)。扫描电镜和元素分析的表征结果表明, Zr;-ATP-MNP制备成功。采用所制备的Zr;-ATP-MNP材料对磷酸化肽进行富集,以磷酸化蛋白β-酪蛋白（β-casein）的酶解液为选择性实验模式样品,采用质谱法可鉴定出9条磷酸化肽;以β-casein和非磷酸化蛋白牛血清白蛋白（BSA）酶解液（1∶100,n/n）混合物为干扰实验模式样品,采用质谱可鉴定出5条磷酸化肽。富集后,磷酸化肽的质谱信号强度显著提高,可有效去除非磷酸化肽。Zr;-ATP-MNP在牛奶酶解产物中的应用进一步表明,其对复杂生物样品中的单磷酸化肽和多磷酸化肽具有广谱性的捕获潜力。

关键词：固定化亲和磷酸化肽富集磁性

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羰基化蛋白质组学分析进展

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分析测试学报 2020年第1期39卷 82-88页

作者：周家华秦洪强叶明亮中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研发中心中国科学院分析化学分离科学重点实验室辽宁大连116023 中国科学院大学北京100049

蛋白质羰基化作为一种不可逆的翻译后修饰,与诸多疾病和衰老密切相关。有关蛋白质羰基化的各项研究受制于其低丰度、低电离效率及化学相对不稳定性而发展较慢。基于质谱的蛋白质组学分析技术的进步,使蛋白质羰基化的规模化研究成为可能... 详细信息

蛋白质羰基化作为一种不可逆的翻译后修饰,与诸多疾病和衰老密切相关。有关蛋白质羰基化的各项研究受制于其低丰度、低电离效率及化学相对不稳定性而发展较慢。基于质谱的蛋白质组学分析技术的进步,使蛋白质羰基化的规模化研究成为可能,进而为蛋白质羰基化的相关调控通路研究提供了数据支撑。该综述介绍了蛋白质羰基化的概念、途径、检测方式,并重点介绍了蛋白组学技术应用于蛋白质羰基化分析的进展。

关键词：氧化应激蛋白质羰基化蛋白质组学

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穿山甲色谱指纹谱的建立及其在基源鉴别和质量等级区分方面的应用

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色谱 2020年第12期38卷 1440-1448页

作者：乔亚丽刘喆沈爱金郭志谋刘艳芳陈相银徐青梁鑫淼中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连116023 中国科学院大学北京100049 北京三和药业有限公司北京100049

中药穿山甲为鳞鲤科动物穿山甲的鳞甲,常用于治疗乳汁不通、痈肿疮毒、风湿痹痛等症,饮片来源上经常存在基源不清、等级不明的问题。针对以上问题,目前已发展出了多种分析方法,包括薄层色谱、质谱和DNA检测,但由于特异性低、设备成本高... 详细信息

中药穿山甲为鳞鲤科动物穿山甲的鳞甲,常用于治疗乳汁不通、痈肿疮毒、风湿痹痛等症,饮片来源上经常存在基源不清、等级不明的问题。针对以上问题,目前已发展出了多种分析方法,包括薄层色谱、质谱和DNA检测,但由于特异性低、设备成本高、步骤繁琐等不足,以上方法均不适合作为穿山甲质量监测的常规手段,而色谱指纹谱技术恰好可以弥补以上不足。该文旨在建立穿山甲的色谱指纹谱,并探讨其在等级及基源鉴别方面的可行性。穿山甲粉末经1 mol/L HCl加热水解得供试液,色谱柱采用Waters Symmetry 300 C18,以0.1%(v/v)三氟乙酸/水、0.1%(v/v)三氟乙酸/乙腈为流动相,280 nm为检测波长,采用梯度洗脱获得穿山甲指纹谱。经考察,该方法的精密度、日内日间重复性及样品稳定性均表现良好(RSD<5%)。以12批中华穿山甲一等品的平均指纹谱为对照指纹谱,同时确认17个共有峰,继而以共有峰绝对峰面积为原始数据,计算样品指纹谱与对照指纹谱的相似度。结果表明,中华穿山甲与其他动物来源穿山甲的相似度不高于0.776,体现了相似度评价在基源鉴别上的有效性;但不同等级穿山甲之间交叉严重,表明相似度评价在等级鉴别上的局限性。以24批不同等级中华穿山甲为分析对象建立判别分析模型,经十折交叉验证,模型无偏差正确率为95.83%,说明该模型在等级区分上可行性很高。该文通过建立穿山甲的色谱指纹谱,并结合不同数据处理方法验证了其在基源鉴别和等级区分方面的可行性,为保证穿山甲临床用药的科学性、准确性提供新的思路。

关键词：中药穿山甲色谱指纹谱判别分析相似度评价质量等级基源

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体积排阻色谱法定量检测9种型别人乳头瘤病毒原液中病毒样颗粒

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色谱 2021年第4期39卷 424-429页

作者：龙珍李晓玉李秀玲柳军凯聂建辉李长坤李月琪黄涛宏黄维金岛津企业管理(中国)有限公司北京100020 中国食品药品检定研究院卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629 中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023

据统计,5%以上的人类癌症由人乳头瘤病毒(HPV)导致。HPV疫苗的使用,尤其是多价HPV疫苗的使用,可有效预防HPV感染和肿瘤的发生。例如,9价HPV疫苗可有效预防90%以上HPV相关癌前病变。人乳头瘤病毒样颗粒(VLP)是HPV疫苗的唯一抗原。VLP由36... 详细信息

据统计,5%以上的人类癌症由人乳头瘤病毒(HPV)导致。HPV疫苗的使用,尤其是多价HPV疫苗的使用,可有效预防HPV感染和肿瘤的发生。例如,9价HPV疫苗可有效预防90%以上HPV相关癌前病变。人乳头瘤病毒样颗粒(VLP)是HPV疫苗的唯一抗原。VLP由360份衣壳蛋白L1组成。VLP的含量测定对HPV原液和HPV疫苗的质量评价至关重要。该文发展了一种以体积排阻色谱(SEC)为基础的9种型别人乳头病毒样颗粒的定量方法。实验优化了包括色谱柱类型、色谱柱孔径、流动相离子强度和流动相pH值在内的色谱条件。经过考察,以SHIMSEN Ankylo SEC-300色谱柱(300 mm×7.8 mm,3μm)为固定相,以含有300 mmol/L NaCl和50 mmol/L磷酸盐(pH 7.0)的缓冲溶液为流动相时,VLP的色谱峰更窄,从而可获得更高的响应和更好的灵敏度,因此选择该色谱条件用于VLP与基质的分离。优化所得的方法具有较宽的线性范围,良好的重复性(峰面积的相对标准偏差不大于5.0%)和灵敏度(定量限为4.58~15.24μg/mL)。将方法用于HPV原液中VLP的含量测定,监测VLP的稳定性。结果显示,HPV原液中VLP颗粒不稳定,于4℃放置一周后,VLP含量与生产后立即测得的含量相比存在一定程度的降解。此外,方法还可用于疫苗上清液中游离蛋白质的分析,监测铝佐剂对VLP的吸附情况。被测厂家的铝佐剂可较好的吸附VLP,无明显残余蛋白质检出。与传统的蛋白质定量方法相比,如Folin-酚法(Lowry法),该法具有操作简单、自动化程度高、分析通量高等优点,可实现VLP含量的批量化分析。

关键词：体积排阻色谱定量人乳头瘤病毒病毒样颗粒疫苗

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抗原决定基印迹材料及其应用

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科学通报 2019年第13期64卷 1368-1379页

作者：杨开广李森武刘路宽陈玉宛周雯张丽华张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023

基于抗体-抗原原理的蛋白质印迹材料对蛋白质的分离纯化、药物转运和细胞成像等具有十分重要的意义.其中抗原决定基印迹材料具有模板易得、构象稳定、空间位阻小等优点受到越来越多的关注和得到广泛的应用.本文重点综述了抗原决定基印... 详细信息

基于抗体-抗原原理的蛋白质印迹材料对蛋白质的分离纯化、药物转运和细胞成像等具有十分重要的意义.其中抗原决定基印迹材料具有模板易得、构象稳定、空间位阻小等优点受到越来越多的关注和得到广泛的应用.本文重点综述了抗原决定基印迹材料的最新制备方法(包括抗原决定基本体印迹、抗原决定基接枝表面印迹、抗原决定基限域表面印迹、基于协同作用的抗原决定基表面印迹技术)以及在肽段、蛋白及细胞识别方面的应用.最后总结了抗原决定基印迹技术面临的主要问题和未来的发展方向.

关键词：分子印迹抗原决定基蛋白质肽段人工抗体

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基于代谢组学研究PM2.5对SD大鼠的毒性效应

基于代谢组学研究PM2.5对SD大鼠的毒性效应

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第七届全国生态毒理学大会

作者：耿柠波宋肖垚罗云张海军陈吉平中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023

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东北地区淡水产品中POPs的生物累积和健康风险

东北地区淡水产品中POPs的生物累积和健康风险

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第七届全国生态毒理学大会

作者：卢宪波傅磊谭君陈吉平中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所大连 116023

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固相萃取-超高效液相色谱法测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的含量

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色谱 2020年第5期38卷 547-553页

作者：宋春颖张华蓉郭志谋闫竞宇金高娃梁鑫淼中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连166023 中国科学院大学北京100049 中科院大化所中国医药城生物医药创新研究院江苏泰州225300

建立了固相萃取-超高效液相色谱测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的方法。人参药材经粉碎后通过水饱和正丁醇溶液进行超声提取,经过亲水作用固相萃取柱净化后,在ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)上分离... 详细信息

建立了固相萃取-超高效液相色谱测定人参中5种原人参二醇型人参皂苷的方法。人参药材经粉碎后通过水饱和正丁醇溶液进行超声提取,经过亲水作用固相萃取柱净化后,在ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)上分离,利用乙腈/水作为流动相进行梯度洗脱,采用光电二极管阵列检测器检测。结果表明,5种原人参二醇型人参皂苷在5~500μg/mL范围内具有很好的线性关系,相关系数均大于0.999。方法精密度的RSD值在0.95%~2.62%(n=6)之间,22 h内样品稳定性的RSD值在0.90%~2.15%(n=8)之间,日内和日间重复性的RSD值分别为5.35%~6.47%(n=6)和5.56%~6.34%(n=8)。方法的加标回收率在87.16%~101.92%之间,相对标准偏差在1.54%~4.01%(n=6)之间。所建立的方法采用亲水作用色谱模式的固相萃取材料,药材的提取液可直接作为固相萃取的上样溶液进行人参皂苷的富集和净化,并且超高效液相色谱大大缩短了分析时间。该方法简单快速、通量高、重现性好,适用于人参中5种原人参二醇型人参皂苷的定量分析。

关键词：亲水作用色谱固相萃取超高效液相色谱人参皂苷人参

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