检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2021年第10期41卷 1206-1213页

作者：刘剑刚寇娜熊双丰加涛董国菊史大卓梁鑫淼国家中医心血管病临床医学研究中心中国中医科学院心血管病研究所中国中医科学院西苑医院心血管病中心北京100091 北京中医药大学研究生院北京100029 中国科学院大连化学物理研究所分离分析化学重点实验室辽宁116023

目的对冠心Ⅱ号进行提取工艺改进并观察其对急性心肌梗死(AMI)大鼠心脏功能的影响。方法将冠心Ⅱ号提取工艺进行改进和优化得到精制过滤液和纯化洗脱液,并采用高效液相色谱仪进行主要成分分析。采用左冠状动脉前降支下结扎法制备AMI模型... 详细信息

目的对冠心Ⅱ号进行提取工艺改进并观察其对急性心肌梗死(AMI)大鼠心脏功能的影响。方法将冠心Ⅱ号提取工艺进行改进和优化得到精制过滤液和纯化洗脱液,并采用高效液相色谱仪进行主要成分分析。采用左冠状动脉前降支下结扎法制备AMI模型,造模成功的50只大鼠按随机数字表法分为模型组、尼可地尔片组(2.7 mg/kg体重)、复方川丹颗粒组(川丹颗粒,4.60 g生药/kg体重)、冠心Ⅱ号精制组(4.60 g生药/kg体重)、冠心Ⅱ号纯化组(4.60 g生药/kg体重)组,每组10只。另设10只穿线不结扎为假手术组。术后第2天开始灌胃给药,连续4周,假手术组、模型组灌胃等容积纯净水。采用高频超声心动图检测各项心脏形态学和功能指标。ELSIA法检测心肌钙蛋白T(cTnT)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)水平。TTC法染色测量心肌梗死面积,HE染色观察心肌病理形态和炎症细胞浸润状态。结果丹酚酸B和芍药苷外标含量分别为川丹颗粒0.767%、0.418%,冠心Ⅱ号精制组4.247%、1.546%,冠心Ⅱ号纯化组32.758%、12.150%。与假手术组比较,模型组ET-1、TXB2升高(P<0.05,P<0.01),心脏超声学检测指标改善(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,冠心Ⅱ号方两组和尼可地尔片组心脏超声学检测指标改善(P<0.05,P<0.01),大鼠心重指数、梗死面积比值、cTnT、ET-1和TXB2水平亦降低(P<0.05,P<0.01);川丹颗粒组部分心脏超声学检测指标改善(P<0.05,P<0.01),大鼠心重指数、cTnT、ET-1和TXB2降低(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠心肌缺血区的心肌细胞炎症浸润和细胞形态不同程度改善。结论冠心Ⅱ号提取工艺改进的主要有效成分丹酚酸B和芍药苷含量有较大提高,可提高AMI后大鼠心脏的射血分数、抑制心室重构及改善心功能,部分指标优于川丹颗粒。

关键词：冠心Ⅱ号精制冠心颗粒急性心肌梗死心室重构二次开发

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联-质谱技术的蛋白质复合体新方法研究

联-质谱技术的蛋白质复合体新方法研究

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第十一届全国化学生物学学术会议

作者：赵丽丽安雨馨高航赵群张丽华张玉奎国家色谱研究分析中心中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所

蛋白质作为生物体生命活动的主要执行者,通过与其它蛋白质相互作用形成大的复合体,精密、有序地调控各项生命过程。对复杂体系中蛋白质复合体进行规模化分析,绘制蛋白质构象折叠变化及蛋白质之间相互作用网络,对于理解复杂的生物系统、... 详细信息

蛋白质作为生物体生命活动的主要执行者,通过与其它蛋白质相互作用形成大的复合体,精密、有序地调控各项生命过程。对复杂体系中蛋白质复合体进行规模化分析,绘制蛋白质构象折叠变化及蛋白质之间相互作用网络,对于理解复杂的生物系统、揭示疾病发生发展机制、筛选疾病相关的生物标志物,以及寻找药物的靶标具有重大意义。传统的X射线、冷冻电镜、免疫共沉淀等技术已成功地应用于蛋白质复合体的解析。但上述方法对蛋白质样品的分析均是在离体环境中进行,缺乏蛋白质构象维持和相互作用发生的细胞微环境,并且对蛋白质表达纯化的要求较高,分析通量较低。近年发展起来的化学交联-质谱技术,可以提供蛋白质在低分辨率水平上的结构信息以及蛋白质相互作用信息,实现蛋白质复合体组成、作用界面信息的鉴定,其具有对样品的纯度要求低、分析通量高、灵敏度高的优势,是上述研究技术的重要补充。但是,该技术目前存在着交联肽段丰度低、交联信息解析覆盖度低,以及数据解析效率低且准确度差的问题,严重制约了蛋白质复合物组成和位点的解析效率。针对上述科学问题,我们研究团队开展了一系列研究工作:研制具有可富集基团的新型化学交联剂,并建立高效的蛋白质复合物交联和富集方法,提高对其结构和相互作用位点的鉴定精准度;发展基于联合酶切的蛋白质复合物预处理技术,提高了对交联位点解析的覆盖度;发展无损化的细胞内原位的蛋白质化学交联技术,为蛋白质复合物的动态解析、易解离的蛋白质相互作用分析、信号传导蛋白质在不同亚细胞器中的动态穿梭并相互作用解析等结构生物学和分子生物学的分析提供了解决方案和技术支持。

关键词：化学交联-质谱技术多功能型交联剂富集精准解析原位

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生物质谱在修饰酶底物筛选及动力学常数测定中的应用

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中国科学：生命科学 2018年第2期48卷 151-159页

作者：邓真真王 叶明亮中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心大连116023 中国科学院大学化学科学学院北京100049

揭示酶与底物之间的对应关系是理解修饰酶相关信号调控网络的重要基础.生物质谱可以实现对大量丰度不同的底物进行定性及定量监测,在复杂体系的酶促动力学的研究中具有重要地位.本文简要综述了生物质谱技术在修饰性酶底物筛选及动力学... 详细信息

揭示酶与底物之间的对应关系是理解修饰酶相关信号调控网络的重要基础.生物质谱可以实现对大量丰度不同的底物进行定性及定量监测,在复杂体系的酶促动力学的研究中具有重要地位.本文简要综述了生物质谱技术在修饰性酶底物筛选及动力学常数测定中的应用,主要内容包括基于蛋白库和肽段库的体外底物筛选、细胞体内底物筛选以及动力学常数通量化测定4个方面.此外,还对生物质谱在该领域中的发展进行了展望.

关键词：质谱定量蛋白质组学翻译后修饰修饰性酶酶促动力学酶促反应

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基于二辛基化标记的蛋白质组N末端肽富集方法

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中国科学：生命科学 2018年第2期48卷 215-223页

作者：陈玲凡单亦初张丽华张玉奎范润龙中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心大连116023 中国地质科学院地质研究所北京离子探针中心北京102206 福建医科大学福建省新药安全性评价中心福州350108

蛋白质末端的研究不仅对于蛋白质的结构和功能注释十分必要,还能够为蛋白酶作用机理的揭示提供重要信息.针对传统蛋白质组N末端肽富集需要采用大量去除材料导致N末端肽回收率低,以及步骤繁琐、样品损失等问题,本文发展了一种基于二辛基... 详细信息

蛋白质末端的研究不仅对于蛋白质的结构和功能注释十分必要,还能够为蛋白酶作用机理的揭示提供重要信息.针对传统蛋白质组N末端肽富集需要采用大量去除材料导致N末端肽回收率低,以及步骤繁琐、样品损失等问题,本文发展了一种基于二辛基化标记的蛋白质组N末端肽反向富集方法,可以在单次反相色谱分离中实现非N末端肽的去除.以酵母蛋白质酶解产物为样品对方法进行考察,结果表明,该方法具备较高的二辛基化标记效率(93%),且非N末端肽经二辛基化标记后能够显著偏移至强保留区.将其应用于酵母蛋白质N末端组的分析,共鉴定到237条蛋白原始N末端肽和133 neo-N末端肽,较富集前分别提高了2.1和3.3倍.此外,将该方法结合多种酶切方式,使N末端肽和neo-N末端肽的鉴定数目进一步提高37%和60%,促进了蛋白质N末端组鉴定覆盖度的提高.

关键词：蛋白质N末端组学 N末端肽富集二辛基化标记反相色谱蛋白质水解

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利用高效液相色谱-串联质谱追踪酸奶发酵过程中的酪蛋白磷酸肽

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色谱 2017年第6期35卷 587-593页

作者：董浩于洋晏嘉泽靳艳中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心辽宁大连116023 中国科学院大学北京100049

酪蛋白磷酸肽(CPPs)是酪蛋白被磷酸化的片段,具有促进矿物元素吸收、抗氧化、预防龋齿等多种生物功能。该文利用高效液相色谱-串联质谱研究牛奶经嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus debrueckii ***... 详细信息

酪蛋白磷酸肽(CPPs)是酪蛋白被磷酸化的片段,具有促进矿物元素吸收、抗氧化、预防龋齿等多种生物功能。该文利用高效液相色谱-串联质谱研究牛奶经嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus debrueckii ***)发酵后CPPs的释放规律。结果表明,在内源性蛋白酶的作用下牛奶含内源性CPPs,内源性CPPs主要来源于高丰度酪蛋白αs1-CN和β-CN。经乳酸菌发酵后,在乳酸菌蛋白酶的作用下更多酪蛋白的磷酸化位点暴露而产生大量CPPs,其中含SpSpSpEE特征结构的CPPs也在酸奶中检测到,CPPs的释放与酪蛋白结构密切相关。研究结果表明,牛奶经乳酸菌发酵后释放大量含特征结构SpSpSpEE的CPPs,可提高结合矿物元素的能力,从而增强其促进人体健康的生物功能。

关键词：高效液相色谱-串联质谱酪蛋白磷酸肽乳酸菌酸奶

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氧化锆纳米层包覆硅胶微球表面修饰及其在亲水作用色谱中的应用

氧化锆纳米层包覆硅胶微球表面修饰及其在亲水作用色谱中的应用

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NCEC2019第十届全国环境化学大会

作者：宋志花李盛红杨刚强李金花陈令新烟台大学药学院新型制剂与生物技术药物研究山东省高校协同创新中心分子药理和药物评价教育部重点实验室药学国家级实验教学示范中心山东烟台264005 中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连116023 中国科学院烟台海岸带研究所山东烟台264003

苯酚类及苯甲酸类化合物具有较强的极性，是重要的环境污染物。针对传统商品化填料对其分离不佳的问题，最近，本课题组发展了氧化锆纳米层包覆多孔硅胶微球的制备方法，所得材料表面存在大量的路易斯酸性位点[1]。

关键词：氧化锆纳米层包覆多孔硅胶苯甲酸类化合物苯酚类化合物

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多级孔道杂化整体材料的制备及磷酸化肽的富集应用

多级孔道杂化整体材料的制备及磷酸化肽的富集应用

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第十二届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会

作者：欧俊杰张海洋马淑娟卫引茂叶明亮中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心辽宁大连 116023 中国科学院分离分析化学重点实验室大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心辽宁大连 116023 西北大学化学与材料科学学院西安710069 西北大学化学与材料科学学院西安710069

针对采用自由基聚合反应所制备的整体材料通常缺少介孔或微孔结构，比表面积较低的问题，本文主要以含有八个乙烯基官能团的POSS(vinylPOSS)作为交联剂，乙烯基磷酸(VPA)作为功能单体，并在聚合体系中添加了可降解的聚环己内酯(PCL)，... 详细信息

针对采用自由基聚合反应所制备的整体材料通常缺少介孔或微孔结构，比表面积较低的问题，本文主要以含有八个乙烯基官能团的POSS(vinylPOSS)作为交联剂，乙烯基磷酸(VPA)作为功能单体，并在聚合体系中添加了可降解的聚环己内酯(PCL)，制备了一种同时含有微孔、介孔和大孔孔道结构的磷酸功能化多级孔杂化整体材料(HPHM)，然后螯合了钛离子(Ti4+)，其比表面积达473 m2/g.

关键词：有机-硅胶杂化多面体寡聚倍半硅烷多级孔道材料磷酸化肽富集溶胶-凝胶

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高能紫外激光解离-质谱系统搭建及应用

高能紫外激光解离-质谱系统搭建及应用

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2018年中国质谱学术大会（CMSC 2018）

作者：刘哲益王志鹏郑凯李杲肖春雷杨学明王方军中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所分子反应动力学国家重点实验室中国科学院大连化学物理研究所金催化中心

我们成功搭建了紫外激光解离-Exactive Plus EMR质谱分析测量系统,在质谱HCD解离阱中实现了193nm紫外激光解离生物分子和无机金属团簇分子,解离碎片在Orbitrap高分辨检测器中实现了高通量、高灵敏度分析检测。研究结果表明,高能紫外激... 详细信息

我们成功搭建了紫外激光解离-Exactive Plus EMR质谱分析测量系统,在质谱HCD解离阱中实现了193nm紫外激光解离生物分子和无机金属团簇分子,解离碎片在Orbitrap高分辨检测器中实现了高通量、高灵敏度分析检测。研究结果表明,高能紫外激光可以通过单光子直接激发肌红蛋白骨架,产生丰富的a-, x-, b-, y-,c-,z-系列离子碎片,与传统HCD解离方法相比极大提高了蛋白质的解离效率和序列覆盖率(图1)。此外,高能紫外激光还可以实现无机金属团簇如Au25(PPh3)10(SPh)5Cl2的高效解离,在实现外周保护配体的高效剥离后产生一系列裸露的金团簇碎片离子(Au1-Au20)。不同原子数的金团簇碎片离子的强度分布符合价电子配对规则。我们进一步在HCD解离阱中通入了Co等反应气体,可以通过吸附中间体的检测实现高通量测定不同金团簇碎片离子的化学反应活性。

关键词：质谱高能紫外激光蛋白质解离金属团簇解离

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高能紫外激光解离-质谱系统搭建及应用

高能紫外激光解离-质谱系统搭建及应用

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2018年中国质谱学术大会

作者：刘哲益王志鹏郑凯李杲肖春雷杨学明王方军中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023 中国科学院大连化学物理研究所分子反应动力学国家重点实验室大连市116023 中国科学院大连化学物理研究所金催化中心大连市116023

我们成功搭建了紫外激光解离-Exactive Plus EMR质谱分析测量系统，在质谱HCD解离阱中实现了193nm紫外激光解离生物分子和无机金属团簇分子，解离碎片在Orbitrap高分辨检测器中实现了高通量、高灵敏度分析检测。

关键词：质谱高能紫外激光蛋白质解离金属团簇解离

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基于高分辨质谱技术的婴幼儿食品中过敏原蛋白质的高灵敏检测

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色谱 2017年第10期35卷 1037-1041页

作者：吴慈陈溪刘健慧张晓林薛伟锋梁振刘梦遥崔妍黄大亮张丽华大连出入境检验检疫局检验检疫技术中心辽宁大连116100 中国科学院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023 中国科学院大学北京100049

基于高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,选择稳定性好、灵敏度高的特征肽段,利用平行反应监测(PRM)技术,实现了多类过敏原蛋白质的高灵敏度同时检测,并成功应用于婴幼儿食品中过敏原成分的分析。对于婴幼儿食品中蛋白质的提取,与传... 详细信息

基于高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,选择稳定性好、灵敏度高的特征肽段,利用平行反应监测(PRM)技术,实现了多类过敏原蛋白质的高灵敏度同时检测,并成功应用于婴幼儿食品中过敏原成分的分析。对于婴幼儿食品中蛋白质的提取,与传统的丙酮沉淀法比,采用膜上原位样品预处理方法(i-FASP)可实现更高的蛋白质提取效率和抗干扰能力。所检测的过敏原蛋白质的定量限(LOQ)最小可达到0.028 mg/L,其线性范围最宽可跨越4个数量级,且线性关系良好(相关系数R^2≥0.99)。该方法为食品中过敏原蛋白质组学快速分析提供了一种可靠的分析方法。

关键词：平行反应监测液相色谱-串联质谱过敏原蛋白质婴幼儿食品

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