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色谱 2015年第9期33卷 922-928页

作者：赵艳艳李秀玲郭志谋梁鑫淼大连医科大学药学院辽宁大连116044 中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023

亲水作用液相色谱(HILIC)近年来引起了越来越多的关注,然而用于亲水液相色谱的固定相种类仍然有限,需要开发更多的固定相和分离分析方法。我们课题组开发和评价了基于硅胶基质的叠氮基固定相。首先,采用核苷作为测试样品对固定相的保留... 详细信息

亲水作用液相色谱(HILIC)近年来引起了越来越多的关注,然而用于亲水液相色谱的固定相种类仍然有限,需要开发更多的固定相和分离分析方法。我们课题组开发和评价了基于硅胶基质的叠氮基固定相。首先,采用核苷作为测试样品对固定相的保留性质进行了评价,结果表明核苷在叠氮基固定相上的保留符合亲水液相色谱的典型特征。其次,比较了亲水模式下流动相中两种缓冲盐(碳酸氢铵和甲酸铵)和酸添加剂对叠氮基固定相糖肽富集选择性的影响。结果表明当流动相中不加缓冲盐并且调成酸性时,糖肽富集选择性更高,在优化富集条件后,从辣根过氧化物酶(HRP)中富集得到9条糖肽信号,所开发的叠氮基固定相具有在HILIC模式下使用的广阔前景。

关键词：亲水液相色谱叠氮基修饰的硅胶固定相糖肽富集

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用于重组蛋白质纯化的新材料

用于重组蛋白质纯化的新材料

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中国化学会第30届学术年会

作者：李森武杨开广刘路宽张丽华张玉奎中国科学院大连化学物理研究所中科院分离分析化学重点实验室国家色谱研究分析中心辽宁省大连市中山路457号116023

重组蛋白技术在蛋白质结晶、蛋白质药物、蛋白质相互作用及结构蛋白质组学研究中具有非常重要的作用。当前对重组蛋白的纯化，目前常采用固定化金属离子亲和色谱(IMAC)技术，即通过IMAC材料上的金属离子与组氨酸标签之间的螯合作用实现... 详细信息

重组蛋白技术在蛋白质结晶、蛋白质药物、蛋白质相互作用及结构蛋白质组学研究中具有非常重要的作用。当前对重组蛋白的纯化，目前常采用固定化金属离子亲和色谱(IMAC)技术，即通过IMAC材料上的金属离子与组氨酸标签之间的螯合作用实现带组氨酸标签的重组蛋白的纯化，但是由于IMAC材料上金属离子暴露在材料表面，任何能与金属离子产生螯合作用的蛋白质均被捕获在IMAC上，如表面富含组氨酸、半胱氨酸、赖氨酸的蛋白质、以及含有金属离子的蛋白质。

关键词：重组蛋白质纯化 IMAC 分子印迹活性可控自由基聚合

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基于纳米粒子的糖蛋白/糖肽分离富集方法

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化学进展 2015年第11期27卷 1628-1639页

作者：丁鹏陈掀李秀玲卿光焱孙涛垒梁鑫淼武汉理工大学材料复合新技术国家重点实验室武汉430070 中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023 武汉理工大学化学化工与生命科学学院武汉430070

蛋白质糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,糖基化对蛋白质的结构和功能有着非常重要的影响。在血清或者组织提取液中,一些低浓度的糖蛋白/糖肽是具有高度临床灵敏性和特异性的生物标记物,这些生物分子可能对疾病发生机理探讨、疾... 详细信息

蛋白质糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,糖基化对蛋白质的结构和功能有着非常重要的影响。在血清或者组织提取液中,一些低浓度的糖蛋白/糖肽是具有高度临床灵敏性和特异性的生物标记物,这些生物分子可能对疾病发生机理探讨、疾病标记物发现及蛋白类新药开发提供重要信息。由于糖蛋白/糖肽的丰度低,从复杂的生物样品中高选择性富集糖蛋白/糖肽一直是糖蛋白组学的难点和重点。纳米结构的材料因其大比表面积、丰富的活性亲和位点和特殊结构,已经广泛应用于糖蛋白/糖肽的分离富集中。本文对基于金、Si O2、Ti O2、Fe3O4、金刚石和聚合物纳米粒子为载体的糖蛋白/糖肽分离富集方法的研究进展作了简要概述,并且阐明了糖蛋白/糖肽分离富集方法所面临的挑战,最后,对其未来发展方向做了展望。

关键词：糖蛋白质组学糖蛋白糖肽纳米粒子富集

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超高效液相色谱-质谱联用技术在药物肝损伤代谢组学研究中的应用

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色谱 2015年第7期33卷 683-690页

作者：刘晓燕刘艳秋程孟春肖红斌中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室辽宁大连116023 大连医科大学中西医结合学院(研究院) 辽宁大连116044 北京中医药大学北京100029

药物引起的肝损伤是全世界关注的健康问题,药源性肝损伤的早期诊断仍然是临床治疗肝损伤的一大难题。本研究中,首先利用对乙酰氨基酚、四氯化碳、大黄素、雷公藤甲素和马兜铃酸构建不同类型的肝细胞损伤模型,利用超高效液相色谱-质谱联... 详细信息

药物引起的肝损伤是全世界关注的健康问题,药源性肝损伤的早期诊断仍然是临床治疗肝损伤的一大难题。本研究中,首先利用对乙酰氨基酚、四氯化碳、大黄素、雷公藤甲素和马兜铃酸构建不同类型的肝细胞损伤模型,利用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS)分别得到正常组和损伤组的细胞代谢轮廓谱。然后利用模式识别构建分类模型,筛选肝损伤相关的差异代谢物。结果显示,不同类型肝损伤在肝细胞代谢谱上可以被区分开,最终鉴定出14种差异代谢物。损伤组肝细胞经保肝阳性药联苯双酯干预后,差异代谢物水平均趋向于正常组,在一定程度上验证了差异标志物与肝损伤的相关性。实验结果表明细胞代谢组学是研究药物肝损伤的有效工具之一。

关键词：超高效液相色谱-质谱代谢组学肝损伤

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慢性乙型肝炎患者血清脂质组学研究

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实用肝脏病杂志 2016年第6期19卷 657-662页

作者：杨蕊旭胡春秀陈国凤孙长贵孙婉璐陈光榆潘勤沈峰许国旺范建高上海交通大学医学院附属新华医院消化内科暨脂肪肝诊治中心上海市200092 中国科学院大连化学物理研究所/中国科学院分离分析化学重点实验室解放军第302医院肝纤维化诊疗中心江苏省昆山市锦溪人民医院

目的通过血清脂质组学分析,研究CHB患者脂质代谢特征。方法在健康人(n=23)和肝活检证实的CHB患者(n=17),采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定血清脂质组学代谢产物;构建正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型,结合单因素分析筛... 详细信息

目的通过血清脂质组学分析,研究CHB患者脂质代谢特征。方法在健康人(n=23)和肝活检证实的CHB患者(n=17),采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定血清脂质组学代谢产物;构建正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型,结合单因素分析筛选差异脂质。结果 CHB组与健康人脂质代谢轮廓有显著性差异[OPLS-DA:R2=0.775,Q2=0.518,P(CV-ANOVA)=2.81×10-4],筛选出64种显著改变的脂质(VIP>1,P<0.05)。其中包括游离脂肪酸(FFA)、二酰甘油(DAG)、三酰甘油(TAG)、胆固醇酯(CE)、神经酰胺(Cer)、鞘磷脂(SM)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、缩醛磷脂酰乙醇胺(Pls Etn)等;CHB组DAG、CE、LPC、PlsE tn、Cer显著降低(均值较健康人降低百分比分别为18%、17%、10%、32%和29%,P<0.05);TAG中含高碳原子数目、多不饱和键脂肪酸的TAG降低(P<0.05);饱和以及单不饱和键的PC升高,含多不饱和键的PC下降(P<0.05);CHB组游离单不饱和脂肪酸(F-MUFA)较健康人升高36%(P<0.05),且与METAVIR肝组织炎症活动和纤维化评分呈正相关(Spearman相关性分析:活动性r=0.527,P<0.05,纤维化r=0.540,P<0.05)。结论 CHB患者脂质代谢与正常人有显著差异,脂质组学分析可能为评价肝脏炎症活动和纤维化程度提供无创诊断依据。

关键词：慢性乙型肝炎脂质组学超高效液相色谱串联质谱

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亲水作用色谱-电雾式检测用于5种抗病毒药物的定量分析

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色谱 2015年第9期33卷 938-942页

作者：龙珍金燕刘晓达郭志谋沈爱金胡兴娟吴宁鹏赛默飞世尔(中国)科技有限公司北京100080 中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所辽宁大连116023 河南省兽药饲料监察所河南郑州450008

抗病毒药物具有广泛的应用，对人类和动物的健康有着重要的作用。但抗病毒药物紫外吸收差异大、极性分布广，要实现该类药物的同时分析较为困难。本实验以Click TE-Cys为固定相，结合电雾式检测（ CAD），建立了多种抗病毒药物同时分离... 详细信息

抗病毒药物具有广泛的应用，对人类和动物的健康有着重要的作用。但抗病毒药物紫外吸收差异大、极性分布广，要实现该类药物的同时分析较为困难。本实验以Click TE-Cys为固定相，结合电雾式检测（ CAD），建立了多种抗病毒药物同时分离分析的方法。考察了不同的检测器、色谱模式、色谱柱和流动相对抗病毒药物峰形、分离选择性及检测信号响应的影响。在优化的条件下定量分析了5种抗病毒药物，结果证明该方法具有较好的日内重复性（ RSD≤3.06％）和日间重复性（ RSD≤5.38％）。同时，该方法还具有较宽的线性范围（0.07～2.28 mg／mL）和较高的灵敏度（ LOQ≤0.04 mg／mL），可用于相关药物的定量、定性分析。

关键词：亲水作用色谱电雾式检测抗病毒药物定量分析

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改性介孔材料制备及其对低分子量蛋白质的在线选择富集研究

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分析试验室 2015年第2期34卷 199-203页

作者：祁艳霞赵前程李智博李伟张付云关亚风大连海洋大学食品科学与工程学院大连116023 中国科学院大连化学物理研究所分离分析化学重点实验室大连116023

制备了3种内外表面修饰不同官能团的硅基介孔材料,采用傅立叶变换红外光谱对修饰后材料的官能团进行了表征,并采用高效液相色谱对材料选择性富集低分子量蛋白质的能力进行了考查。3种材料对低分子量蛋白质和小肽均具有选择性富集能力,... 详细信息

制备了3种内外表面修饰不同官能团的硅基介孔材料,采用傅立叶变换红外光谱对修饰后材料的官能团进行了表征,并采用高效液相色谱对材料选择性富集低分子量蛋白质的能力进行了考查。3种材料对低分子量蛋白质和小肽均具有选择性富集能力,其中乙烯-二醇材料的富集能力最好。采用乙烯-二醇介孔材料装填预柱,考察了其对低分子量蛋白质的在线富集能力。高分子量蛋白质(卵清蛋白,分子量43000Da)在该预柱上没有保留,在死时间里直接流出柱外,而低分子量蛋白质(胰岛素,分子量5700Da)在该预柱上得到了较好的选择性萃取。保留在柱上的低分子量样品通过提高流动相中的有机相含量进行洗脱。研究工作对低分子量蛋白质和小肽的在线富集提供了一种新技术。

关键词：介孔材料表面修饰在线富集选择性萃取

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非酒精性脂肪性肝病与慢性乙型肝炎患者的血清脂质组学分析

非酒精性脂肪性肝病与慢性乙型肝炎患者的血清脂质组学分析

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2016中华医学会肝病学分会全国肝病学术年会暨青年委员会第三届青年论坛、第六届中国-印度尼西亚联合肝病峰会

作者：杨蕊旭胡春秀孙长贵宓余强孙婉璐陈光榆潘勤沈峰许国旺范建高上海交通大学医学院附属新华医院消化内科中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室江苏昆山锦溪人民医院天津市第二人民医院中西医结合二科

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糖蛋白糖链的纯化制备与结构分析

糖蛋白糖链的纯化制备与结构分析

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第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：梁鑫淼于龙付冬梅曹翠岩卢俊中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室

＜正＞随着近年来糖生物学研究的逐步深入,越来越多的证据表明糖链作为第四类生物大分子在几乎所有的生物调控通路中都发挥着一般性或特异性的作用。糖链所介导的生物学功能,一般需要通过糖链与糖结合蛋白之间的相互作用来实现。国际上... 详细信息

＜正＞随着近年来糖生物学研究的逐步深入,越来越多的证据表明糖链作为第四类生物大分子在几乎所有的生物调控通路中都发挥着一般性或特异性的作用。糖链所介导的生物学功能,一般需要通过糖链与糖结合蛋白之间的相互作用来实现。国际上通行的研究糖链与糖结合蛋白相互作用的方法是糖芯片法,而目前在主流糖芯片上所使用糖链数量仅有数百种,远远小于生物体中糖链的实际数量。

关键词：糖蛋白糖链纯化制备样品库质谱分析

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热解析-气相色谱或气相色谱-质谱法分析大气可吸入颗粒物中的半挥发性有机化合物

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分析化学 2014年第7期42卷 931-936页

作者：孟虎赵景红段春凤郝亮关亚风中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院大连化学物理研究所仪器分析化学研究室中国科学院大学

研制了一种热解析装置,并与气相色谱或气相色谱-质谱联用,定性定量分析了大气可吸入颗粒物中的半挥发性有机物。装置为直热式加热,升温速率快;直接安装在色谱进样器上方,无需冷阱聚焦。将热解析装置与气相色谱联用,优化了样品承载体材... 详细信息

研制了一种热解析装置,并与气相色谱或气相色谱-质谱联用,定性定量分析了大气可吸入颗粒物中的半挥发性有机物。装置为直热式加热,升温速率快;直接安装在色谱进样器上方,无需冷阱聚焦。将热解析装置与气相色谱联用,优化了样品承载体材质、热解析条件和进样模式,并用于16种多环芳烃和9种正构烷烃的检测。结果表明,热解析-气相色谱方法对多环芳烃和正构烷烃的检出限分别为0.014~0.093 ng和0.016~0.026 ng,线性相关系数大于0.9975;用于3个城市PM10中的痕量多环芳烃和正构烷烃的定量测定,回收率分别在95%~135%(多环芳烃)和95%~115%(正构烷烃)之间。将热解析装置与气相色谱-质谱联用,比较了3个城市7种粒径分布的PMx(x=10,5,2,1,0.5,0.25,0.1)中的多环芳烃和正构烷烃,结果表明,不同粒径颗粒物均含有正构烷烃和PAHs,但含量相差很大。

关键词：大气颗粒物半挥发性有机化合物热解析 PM2.5

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