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Zoological Research 2011年第4期32卷 379-385页

作者：余果宇向阳张红芸江萍李文辉张云张勇中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明医学院生物化学教研室中国科学院研究生院北京100049 昆明医学院第一附属医院妇产科

大蹼铃蟾三叶因子Bm-TFF2具有较人TFF2更强的促细胞迁移和抗凋亡活性。该研究利用RT-PCR方法扩增得到野生型Bm-TFF2的基因,然后分别构建N端、C端和分子中两个精氨酸突变的突变体,最后连接表达载体产生pET32a(+)/Bm-TFF2突变型重组质粒,... 详细信息

大蹼铃蟾三叶因子Bm-TFF2具有较人TFF2更强的促细胞迁移和抗凋亡活性。该研究利用RT-PCR方法扩增得到野生型Bm-TFF2的基因,然后分别构建N端、C端和分子中两个精氨酸突变的突变体,最后连接表达载体产生pET32a(+)/Bm-TFF2突变型重组质粒,转入大肠杆菌中,经37℃培养,IPTG诱导,其融合蛋白主要存在于包涵体中,用组氨酸标签的亲合柱纯化溶解后的包涵体上清,进一步用RP-HPLC纯化得到硫氧还蛋白(TRX)/Bm-TFF2突变型融合蛋白。通过SDS-PAGE和Westernblotting检测分析其纯度和特异性。最终,从1L培养基中得到20mg纯度为95%的三种重组突变型融合蛋白。三种突变型重组蛋白都具有剂量依赖性的促细胞迁移活性,并且其活性无显著差异。该研究为进一步研究Bm-TFF2结构和功能的关系以及揭示其作用的分子机制奠定了基础。

关键词： Bm-TFF2 突变体表达纯化细胞迁移

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熊猴存在TRIM5/TRIMCyp杂合子基因型

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Zoological Research 2011年第1期32卷 40-49页

作者：曹光佴文惠刘丰亮况轶群王金焕苏伟婷郑永唐中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049 遗传资源与进化国家重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院昆明灵长类研究中心中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223

缺乏合适的动物模型是制约艾滋病研究取得重大突破的关键瓶颈之一。细胞内的抗病毒蛋白被称为限制因子。研究不同灵长类动物抗HIV-1宿主限制因子的存在形式及作用机制对建立合适AIDS灵长类动物模型有十分重要的意义。TRIM5α是哺乳动物... 详细信息

缺乏合适的动物模型是制约艾滋病研究取得重大突破的关键瓶颈之一。细胞内的抗病毒蛋白被称为限制因子。研究不同灵长类动物抗HIV-1宿主限制因子的存在形式及作用机制对建立合适AIDS灵长类动物模型有十分重要的意义。TRIM5α是哺乳动物细胞中一种重要和关键的限制因子,它以物种依赖的方式限制包括HIV-1在内的逆转录病毒的感染。TRIM5-CypA融合基因是存在于新大陆猴与旧大陆猴中的一种独特的TRIM5基因形式。为了研究不同灵长类动物TRIM5基因的存在方式,该文对熊猴、藏酋猴、红面猴及中国恒河猴4个物种共110只灵长类动物进行了TRIM5-CypA融合模式的研究。首次发现熊猴也存在TRIM5-CypA基因融合现象。熊猴TRIMCyp融合基因形成模式类似于北平顶猴TRIMCyp融合基因模式,即CypA假基因的cDNA序列通过逆转座方式插入到TRIM5基因的3'-UTR区域。基因序列分析表明,该基因与北平顶猴相应基因序列高度相似;并且其TRIM5内含子6的3'-剪接位点也相应存在G-to-T突变现象(G/T)。这提示熊猴也极有可能像北平顶猴一样表达TRIM5-CypA融合蛋白,从而导致熊猴可能跟北平顶猴一样可能被HIV-1感染。因此,熊猴极有希望成为一种新的HIV/AIDS灵长类动物模型。

关键词：熊猴限制因子 TRIM5α TRIM5-CypA融合基因杂合子基因型 HIV 动物模型

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蛋白酶激活受体

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生命的化学 2011年第3期31卷 425-428页

作者：余果宇张勇江萍张云中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223 昆明医学院生物化学教研室昆明650500

蛋白酶激活受体(protease-activated receptor,PAR)属于G蛋白偶联受体家族,包括4个成员,除PAR2为胰蛋白酶受体外,其他三个都是凝血酶受体,PAR通过形成或暴露新的N末端被激活。PAR广泛表达于全身各组织,尤其在消化系统表现出多种功能;通... 详细信息

蛋白酶激活受体(protease-activated receptor,PAR)属于G蛋白偶联受体家族,包括4个成员,除PAR2为胰蛋白酶受体外,其他三个都是凝血酶受体,PAR通过形成或暴露新的N末端被激活。PAR广泛表达于全身各组织,尤其在消化系统表现出多种功能;通过促进细胞增殖、迁移、浸润、血管生成以及组织重构(通过促进细胞增殖、迁移、浸润和血管生成),同时抑制细胞的分化和凋亡等因素参与肿瘤的发生和发展,这为临床诊治和预后评判提供了有力的手段。

关键词：蛋白酶激活受体激活消化系统肿瘤

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中药有效部位复方奇士乐体外抗HIV-1活性研究

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中国药理学通报 2011年第4期27卷 566-571页

作者：杨柳萌王睿睿张高红张兴杰陈纪军郑永唐中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源可持续利用国家重点实验室云南昆明650204 中国科学院研究生院北京100049

目的评价有效部位复方奇士乐(QSL)的体外抗HIV-1药效学。方法通过合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护、HIV-1 p24抗原测定等方法检测急性感染中QSL对HIV-1实验株、临床分离株、耐药株的抑制作用和对慢性感染细胞中病毒复制的影响;通过ELISA... 详细信息

目的评价有效部位复方奇士乐(QSL)的体外抗HIV-1药效学。方法通过合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护、HIV-1 p24抗原测定等方法检测急性感染中QSL对HIV-1实验株、临床分离株、耐药株的抑制作用和对慢性感染细胞中病毒复制的影响;通过ELISA方法和荧光法分别检测了QSL体外抑制HIV-1逆转录酶和蛋白酶活性作用。结果有效部位复方制剂QSL能有效地抑制HIV-1ⅢB诱导淋巴细胞病变、保护HIV-1ⅢB感染MT-4细胞死亡、阻断HIV-1ⅢB慢性感染H9细胞与C8166细胞间融合的作用。QSL对HIV-1实验株HIV-1ⅢB、临床分离株HIV-1KM018、耐药株HIV-174V的病毒复制也有较好的抑制作用。QSL抑制HIV活性的作用机制可能为多靶点,主要是抑制HIV逆转录酶、蛋白酶和病毒进入细胞。结论 QSL是具有较好体外抗HIV-1活性的中药有效部位复方。

关键词：中药有效部分复方奇士乐艾滋病 HIV-1 抗HIV-1

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中缅树鼩自然感染六种病毒的血清流行病学

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Zoological Research 2011年第1期32卷 11-16页

作者：韩建保张高红段勇马建平张喜鹤罗荣华吕龙宝郑永唐中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 昆明医学院第一附属医院检验科云南昆明650032 中国科学院研究生院北京100049 中国科学院昆明灵长类研究中心中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223

中缅树鼩作为一种新型实验动物,在医学生物学上,尤其是病毒学方面的应用受到越来越多的重视。实验动物自身病毒感染会影响动物健康和干扰实验结果,甚至危害实验人员生命安全。所以,实验动物病毒检测一直是动物质量控制的重要部分。中缅... 详细信息

中缅树鼩作为一种新型实验动物,在医学生物学上,尤其是病毒学方面的应用受到越来越多的重视。实验动物自身病毒感染会影响动物健康和干扰实验结果,甚至危害实验人员生命安全。所以,实验动物病毒检测一直是动物质量控制的重要部分。中缅树鼩研究迄今缺乏清晰的病毒自然感染资料。为调查中缅树鼩的病毒感染状况,采集野生俘获和人工繁殖的中缅树鼩血清样本272份,全部血清样本通过ELISA方法对乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原,丙型肝炎病毒(HCV)总抗体,以及戊型肝炎病毒(HEV)、腺病毒(ADV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)的IgG抗体进行了检测。结果表明,ELISA初筛HBV表面抗原有3份阳性样本,但通过乙型肝炎两对半定量检测进一步确认为阴性;抗HCV抗体和抗HEV、ADV、HSV-1IgG抗体检测均为阴性;抗HSV-2IgG检测有1份阳性样本。提示仅抗原或抗体血清学指标检测树鼩肝炎结果并不能反应个体携带病毒的状态,应该再进行病毒学指标确认。同时建议中缅树鼩繁殖群应进行HSV-2的筛选,以便杜绝和控制该病毒的感染。

关键词：中缅树鼩树鼩自然感染病毒血清流行病学

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野生和人工繁育树鼩部分生理指标检测与比较

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Zoological Research 2011年第1期32卷 4-10页

作者：马旭通李福林蒋宏君李文辉张云杜廷义中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049 云南省第一人民医院检验科云南昆明650032

比较野生和人工繁育树鼩的部分生理指标,为人类疾病的动物模型创制提供基本参数。血液采自昆明地区54只野生树鼩(被捕获后人工饲养1—2月)和54只子一代人工繁育树鼩。该研究首次报道在两组动物中,肌酸激酶、肌钙蛋白I、总胆汁酸、果糖... 详细信息

比较野生和人工繁育树鼩的部分生理指标,为人类疾病的动物模型创制提供基本参数。血液采自昆明地区54只野生树鼩(被捕获后人工饲养1—2月)和54只子一代人工繁育树鼩。该研究首次报道在两组动物中,肌酸激酶、肌钙蛋白I、总胆汁酸、果糖胺、低密度脂蛋白胆固醇等在性别间差异无显著性;这些指标在人工繁育树鼩中的中位数(四分位数间距)依次为:1449(956)U/L、5.94(7.23)μg/L、15.6(19.7)μmol/L、393.5(80.8)μmol/L和0.36(0.32)mmol/L;在野生树鼩中依次为:986(564)U/L、4.01(4.10)μg/L、20.0(20.6)μmol/L、379.0(104.0)μmol/L和0.46(0.23)mmol/L。人工繁育树鼩生理指标表现出个体间离散程度降低趋势,但个别反映肝脏功能及心肌情况的指标表现出平均值上升,个体离散程度扩大的现象。这些生理指标为人类疾病的树鼩模型创制打下了基础。

关键词：野生树鼩人工繁育树鼩血液样本生理指标比较

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利用假病毒技术研究抗HIV-1药物的作用机制

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微生物学通报 2011年第10期38卷 1507-1517页

作者：李艳丽郑永唐肖伟烈孙汉董王嵬刘利新中国科学院研究生院生命科学学院北京100049 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中科院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650204

采用假病毒系统对5种具有抗HIV-1活性的天然化合物的作用机制进行研究,建立了一种可在普通实验室进行抗HIV-1作用机理研究的实验平台。通过构建假病毒系统,利用定量PCR实验分析感染细胞内病毒生命周期早期的特异性DNA产物,发现5种化合... 详细信息

采用假病毒系统对5种具有抗HIV-1活性的天然化合物的作用机制进行研究,建立了一种可在普通实验室进行抗HIV-1作用机理研究的实验平台。通过构建假病毒系统,利用定量PCR实验分析感染细胞内病毒生命周期早期的特异性DNA产物,发现5种化合物可通过不同的作用机制在早期抑制HIV-1复制。部分化合物表现出新的作用机制,如LC-1、LC-2可抑制HIV-1的入核。通过分析药物对2种不同的逆转录病毒(HIV-1和MLV)的感染性,发现LC-1可特异地阻断HIV-1的复制,而对MLV无影响。同时为了检测药物是否也会在病毒的生命周期晚期有作用,利用直接转染前病毒质粒的方式进行了验证。利用以上方法,初步确定了这几种药物的作用靶点,构建了一个有效的抗HIV-1药物作用机理的研究平台。

关键词：假病毒系统 HIV-1 入核病毒特异性

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三叶因子的研究进展

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山西医科大学学报 2011年第1期42卷 87-90页

作者：余果宇张勇张云中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机制重点实验室昆明650223 昆明医学院生物化学教研室

三叶因子（trefoil factor,TFFs）是一类含一个或几个三叶因子结构域的分泌蛋白,该结构域是一段38或39个氨基酸的多肽,其中的6个半胱氨基以1-5,2-4,3-6配对的构型方式生成三对二硫键,从而形成典型的三叶状结构,此结构赋予TFFs家族蛋白... 详细信息

三叶因子（trefoil factor,TFFs）是一类含一个或几个三叶因子结构域的分泌蛋白,该结构域是一段38或39个氨基酸的多肽,其中的6个半胱氨基以1-5,2-4,3-6配对的构型方式生成三对二硫键,从而形成典型的三叶状结构,此结构赋予TFFs家族蛋白耐酸、耐碱和耐蛋白酶水解的性质,同时也是其行使功能所必需的。

关键词：三叶因子组织分布黏膜修复肿瘤

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非人灵长类肿瘤模型研究进展(英文)

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动物学研究 2011年第1期32卷 70-80页

作者：夏厚军陈策实中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室/中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223

癌症是人类第二大致死的疾病。将体外细胞模型获得的癌症研究结果向临床转化过程中,动物活体实验是必不可少的一个环节。现在的肿瘤活体实验绝大部分采用啮齿类实验动物如小鼠和大鼠,这是因为它们具有个体小、繁殖迅速、遗传背景清楚、... 详细信息

癌症是人类第二大致死的疾病。将体外细胞模型获得的癌症研究结果向临床转化过程中,动物活体实验是必不可少的一个环节。现在的肿瘤活体实验绝大部分采用啮齿类实验动物如小鼠和大鼠,这是因为它们具有个体小、繁殖迅速、遗传背景清楚、转基因技术成熟等优势。但是啮齿类和人的亲缘关系比较远,许多从啮齿类动物模型获得的研究结果不能在人体重现。非人灵长类动物在遗传进化、免疫、生理和代谢等诸多方面与人类高度近似,理论上更加适合癌症研究。本文对现有的非人灵长类肿瘤研究做一综述,主要集中介绍用化学和生物致癌剂在不同的非人灵长类动物诱导肿瘤的研究,为将来用非人灵长类动物研究人类癌症奠定基础。

关键词：动物实验繁殖疾病模型动物近亲灵长目啮齿目生物转化肿瘤大鼠动物人类小鼠

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线粒体DNA突变与Leber遗传性视神经病变

线粒体DNA突变与Leber遗传性视神经病变

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第三届中国眼科学基础研究大会暨研究生导师论坛

作者：姚永刚中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所

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