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中华中医药学会防治艾滋病分会2006年防治艾滋病学术研讨会

作者：王云华王睿睿杨柳萌李健峰徐维明郑永唐中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室分子免疫药理学实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039 中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室分子免疫药理学实验室云南昆明650223 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650231

在抗HIV治疗中,逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和进入抑制剂的使用提高了艾滋病患者的存活率。NCp7含有两个高度保守的CCHC型锌指结构(Cys-X2-Cys-X4-His- X4-Cys),锌指结构中氨基酸的突变或功能受抑制将导致HIV感染能力急剧下降.NCp7抑... 详细信息

在抗HIV治疗中,逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和进入抑制剂的使用提高了艾滋病患者的存活率。NCp7含有两个高度保守的CCHC型锌指结构(Cys-X2-Cys-X4-His- X4-Cys),锌指结构中氨基酸的突变或功能受抑制将导致HIV感染能力急剧下降.NCp7抑制剂可能是下一代有效而不容易产生耐药性的抗HIV药物,是一个很有前景的治疗靶点。本文研究了从pBRU2/ADP202质粒经PCR扩增得到HIV-1 NCp7编码序列,克隆到pet28a 质粒中构建HIV-1 NCp7表达载体。阳性克隆转染E. coli BL21 DE3,以IPTG诱导表达,细胞裂解液经Q sepherose H.P.纯化后超滤更换缓冲体系,再经SP sephrose H.P.纯化后纯度达到90％以上。将具有锌离子逐出活性的H2O2和AT-2与NCp7作用,用锌离子特异荧光染料TSQ [N-(6-methoxy-8- quinolyl)-p-toluenesulfonamide, N-(6-甲氧基-8-喹啉基)-p-甲基磺酰胺]检测化合物的锌离子逐出活性,结果表明该方法可以用于NCp7抑制剂的筛选。经该方法筛选检测,KIZ-CM 10,18,19等化合物具有一定的锌离子逐出活性,值得进行深入研究。

关键词：艾滋病表达纯化抑制剂筛选方法

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SARS-CoV-2 δ突变株S蛋白诱导的细胞不完全自噬与细胞融合相关

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国际免疫学杂志 2024年第5期47卷 463-470页

作者：郝振平庞伟路莹蔡雨俊杨玉玲郑永唐田仁荣中国科学技术大学生命科学学院合肥230026 中国科学院昆明动物研究所、中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223 大理大学药学院大理671000

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)突变株刺突蛋白(Spike,S)蛋白对自噬的影响及其作用机制。方法用多种SASR-CoV-2毒株S蛋白表达载体转染293T,通过中和抗体JS016、抗HR121中和抗体以及巴佛洛霉素A1处理,观察细胞融合情况;细胞免疫荧光检测自噬流;荧光定量PCR和蛋白印迹分别检测LC3的mRNA和蛋白水平,探讨S蛋白对自噬的影响及作用机制。结果δ突变株S蛋白能引起LC3蛋白显著积累,但是其仅增加自噬体的数量,并不影响自噬溶酶体的数量;巴佛洛霉素A1处理不影响δ突变株S蛋白诱导的LC3累积;δ突变株S蛋白过表达并未使LC3的mRNA水平升高;抗HR121中和抗体处理可阻断δ突变株S蛋白诱导的细胞融合,相应的LC3蛋白量减少,而JS016中和抗体处理后细胞融合增加,同时伴随细胞内LC3蛋白量增加;HR2结构域缺陷的δ突变株S蛋白不诱导细胞融合,也不诱导LC3的累积及自噬流的改变。结论δ突变株S蛋白诱导胞内的不完全自噬导致LC3蛋白积累与细胞融合相关,提示作用于细胞自噬的药物可能抑制新型冠状病毒的感染。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 S蛋白 LC3 自噬细胞融合

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分子对接技术筛选抗HIV-1逆转录酶活性化合物

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广州中医药大学学报 2015年第4期32卷 725-728,781页

作者：冀树伸黄新安罗荣华杨柳萌郑永唐符林春广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405 中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

【目的】通过分子模拟和活性测试筛选非核苷类抗人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)逆转录酶活性化合物。【方法】采用Tripos SYBYL软件Surflex-Dock分子对接模块,模拟SPECS数据库中22 000个化合物与HIV-1逆转录酶活性口袋的结合,根据模拟结果... 详细信息

【目的】通过分子模拟和活性测试筛选非核苷类抗人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)逆转录酶活性化合物。【方法】采用Tripos SYBYL软件Surflex-Dock分子对接模块,模拟SPECS数据库中22 000个化合物与HIV-1逆转录酶活性口袋的结合,根据模拟结果分析化合物与HIV-1逆转录酶晶体结构的相互作用模式。对于打分较高与结合模式较优的化合物,采用体外抗HIV-1活性测试方法检测其生物活性。【结果】虚拟筛选结果显示化合物1-(4-fluorophenyl)-3-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]thiourea对接构象与晶体结构中内嵌配体非常接近,它与HIV-1逆转录酶结合口袋重要残基Lys101形成氢键、与保守残基Trp229和芳香残基Tyr181分别形成π-π堆积作用。体外抗HIV-1活性测试结果显示其抑制HIV-1IIIB病毒感染的C8166淋巴细胞合胞体形成50%时的浓度即EC50值为5.45μg/m L。【结论】分子对接技术能缩小活性化合物筛选范围,并可用于预测化合物与蛋白质的相互作用模式,本研究利用该技术筛选出活性化合物。

关键词：分子对接 HIV-1逆转录酶虚拟筛选

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乳腺癌的靶向治疗研究进展

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中国生化药物杂志 2016年第1期36卷 7-11页

作者：曾佳佳杨润祥刘蓉昆明医科大学附属第三医院云南省肿瘤医院内二科云南昆明650118 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

作为严重危害女性身心健康的恶性肿瘤,乳腺癌的发病率在我国女性恶性肿瘤中居首位。针对乳腺癌发生、发展有关的信号通路进行靶向药物的开发与临床应用成为乳腺癌治疗研究的新热点。本文主要介绍了目前针对各种分子分型的乳腺癌进行的... 详细信息

作为严重危害女性身心健康的恶性肿瘤,乳腺癌的发病率在我国女性恶性肿瘤中居首位。针对乳腺癌发生、发展有关的信号通路进行靶向药物的开发与临床应用成为乳腺癌治疗研究的新热点。本文主要介绍了目前针对各种分子分型的乳腺癌进行的临床靶向治疗和正在开展的靶向药物研发,同时对乳腺癌干细胞靶向治疗的最新进展进行综述。

关键词：乳腺癌靶向治疗乳腺癌干细胞

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几种药物对吗啡相关的条件位置偏好影响的研究进展

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现代生物医学进展 2014年第1期14卷 187-189页

作者：潘姿娇王建红何敏昆明医科大学生理系云南昆明650031 中国科学院昆明动物研究所灵长类认知实验室动物模型和人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

条件化位置偏好(conditioned place preference,CPP),常用于研究药物成瘾的相关记忆。这里主要综述了一些药物对CPP的影响。神经肽S,神经肽FF,肌肽,孤啡肽,α-2受体激动剂,L-左旋千金藤啶碱,东莨菪碱,丙戊酸钠,巴氯芬对吗啡CPP有抑制效... 详细信息

条件化位置偏好(conditioned place preference,CPP),常用于研究药物成瘾的相关记忆。这里主要综述了一些药物对CPP的影响。神经肽S,神经肽FF,肌肽,孤啡肽,α-2受体激动剂,L-左旋千金藤啶碱,东莨菪碱,丙戊酸钠,巴氯芬对吗啡CPP有抑制效应;聚肌胞苷酸,氟伏沙明和金刚烷胺能增强吗啡CPP;阿坎酸能抑制乙醇和某些类别的滥用药物的条件化奖赏效应,但不影响吗啡引起的条件化奖赏效应;褪黑激素逆转吗啡诱导的奖赏效应;人重组干扰素-α导致吗啡CPP的恢复。

关键词：药物吗啡条件位置偏好

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电加热蒸汽发生器常见问题分析与解决

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医疗卫生装备 2019年第4期40卷 105-108页

作者：韩建保李明华冯小丽杨丽梅郑永唐中国科学院昆明动物研究所生物安全三级实验室昆明650223 国家昆明高等级生物安全灵长类动物实验中心昆明650107 中国科学院昆明动物研究所条件保障处昆明650223 中国科学院昆明动物研究所中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223

简要分析了电加热蒸汽发生器在高等级生物安全实验室中的重要性,介绍了电加热蒸汽发生器的组成、分类及特点,重点阐述了其在运行过程中出现的7个常见问题及其解决方案,最后指出了实现维护保养常态化对于保证电加热蒸汽发生器安全运行的... 详细信息

简要分析了电加热蒸汽发生器在高等级生物安全实验室中的重要性,介绍了电加热蒸汽发生器的组成、分类及特点,重点阐述了其在运行过程中出现的7个常见问题及其解决方案,最后指出了实现维护保养常态化对于保证电加热蒸汽发生器安全运行的重要性,对保证高等级生物安全实验室的安全运行意义重大。

关键词：电加热蒸汽发生器生物安全实验室液位计水锤效应解决方案

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中国猕猴与人类表达上皮细胞连接分子和粘蛋白的比较研究

中国猕猴与人类表达上皮细胞连接分子和粘蛋白的比较研究

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首届昆明灵长类动物模型学术论坛

作者：张虹雨常宏张葵东于璐曹毅中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明 650223 中国科学院研究生院北京 100049 昆明市第一人民医院消化内科云南昆明650011 中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明 650223 中国科学院研究生院北京 100049 昆明市第一人民医院病理科云南昆明650011 中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明 650223

上皮细胞连接分子和粘蛋白构成了胃肠粘膜屏障的重要成分,粘膜屏障的破坏和多种疾病如胃炎、胃溃疡、胃癌等有密切关系.关于人体组织细胞连接和粘蛋白的研究很多,而对于这些分子在非人灵长类动物的表达研究尚属罕见.

关键词：猕猴细胞连接粘蛋白胃肠上皮

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人精液凝固蛋白SgⅠ-52的表达与抗菌活性研究

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动物学研究 2008年第2期29卷 139-144页

作者：赵晖刘孝东高振华张建华李虹张云李文辉申吉泓中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 昆明医学院第一附属医院云南昆明650032 四川大学华西医院泌尿外科四川成都610041

以人精囊腺cDNA为模板，用嵌套式PCR技术扩增出编码成熟人精液凝固蛋白Ⅰ（semenogelinⅠ，SgⅠ）第85—136位氨基酸（SgⅠ-52）的核苷酸序列并将其插入载体pMAL—p2X中，成功构建的表达载体pMAL-p2X／SgⅠ-52转化大肠杆菌DH5a后，重组... 详细信息

以人精囊腺cDNA为模板，用嵌套式PCR技术扩增出编码成熟人精液凝固蛋白Ⅰ（semenogelinⅠ，SgⅠ）第85—136位氨基酸（SgⅠ-52）的核苷酸序列并将其插入载体pMAL—p2X中，成功构建的表达载体pMAL-p2X／SgⅠ-52转化大肠杆菌DH5a后，重组融合蛋白诱导表达于大肠杆菌周质中。经第X因子剪切及超滤处理，得到表达的重组SgⅠ-52。质谱分析结果证明重组SgⅠ-52为目的肽。重组人SgⅠ-52对大肠杆菌ATCC 25922标准株以及耐氨苄标准株ML-35P的最低抑制浓度MIC分别为32．45以及46．30μg／mL。我们的结果及相关研究提示在人精液液化过程中人精液凝固蛋白Ⅰ的不同降解产物可能行使不同的生物学功能，值得进行深入研究。

关键词：人精液凝固蛋白Ⅰ 表达抗菌

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艾滋病功能性治愈策略研究进展

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微生物学免疫学进展 2018年第4期46卷 69-75页

作者：李婷(综述) 郑永唐(审校) 田仁荣(审校) 昆明理工大学基础医学院云南昆明650500 中国科学院昆明动物研究所中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室国家昆明高等级生物安全灵长类动物实验中心云南昆明650223

高效抗逆转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy,HAART)的广泛应用,显著延长了人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者的寿命,使艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)由一种致死性疾病转变为可控的慢性疾病。但是,由于病毒潜伏库及病毒库在HIV感染后快速形成、持续存在且难以清除,因此现有治疗策略无法实现AIDS的彻底治愈。目前,已经成功提出功能性治愈的概念,即通过改善现有的治疗策略实现长期抑制HIV复制,维持CD4+T细胞数量和机体免疫功能正常,尤其是在停药后能够长期控制病毒复制。因此,功能性治愈的成功实施可有效改善患者机体免疫功能紊乱,减轻长期应用HAART方案引起的严重的药物毒副作用及不良反应,有效提高患者的生活质量。现就AIDS功能性治愈的相关策略,包括HAART的早期治疗、激活并杀灭策略、基因治疗、免疫治疗和永久沉默等作一概述。

关键词：人类免疫缺陷病毒艾滋病潜伏病毒库功能性治愈

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肺癌消减杂交文库中共同基因的分析及验证

肺癌消减杂交文库中共同基因的分析及验证

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第十六届中国科协年会——分3环境污染及职业暴露与人类癌症学术研讨会

作者：吴明松曹毅遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所

抑制性消减杂交(SSH)技术因操作简单、筛选效率高、假阳性率低等优点,被广泛用于生物、医学领域。本文拟找出SSH所建立的肺癌消减杂交文库中的共同存在的差异表达基因,并就这些基因进行生物信息学分析。结果显示,这些基因参与了多条信... 详细信息

抑制性消减杂交(SSH)技术因操作简单、筛选效率高、假阳性率低等优点,被广泛用于生物、医学领域。本文拟找出SSH所建立的肺癌消减杂交文库中的共同存在的差异表达基因,并就这些基因进行生物信息学分析。结果显示,这些基因参与了多条信号通路改变,列出了最可能参与的10条信号通路。选择这些基因中的TIMP3、GPX3、HSP90B1、CD9,用Q-PCR验证,结果显示,SSH文库中基因的上调和下调趋势具有较好的特异性。

关键词：肺癌抑制性消减杂交生物信息学

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