检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 2020年第11期65卷 973-990页

作者：方凯伦杨辉中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所神经科学国家重点实验室中国科学院灵长类神经生物学重点实验室中国科学院脑科学卓越创新中心上海脑科学与类脑研究中心上海200031

CRISPR/Cas系统是细菌、古菌抵抗外源DNA或RNA入侵的免疫系统,细菌和古菌通过crRNA和Cas蛋白识别靶标DNA或RNA,并切割这些外源入侵核酸.目前,CRISPR/Cas系统已广泛应用于基因编辑领域,多种Cas蛋白的发现扩宽了CRISPR/Cas编辑基因的范围.... 详细信息

CRISPR/Cas系统是细菌、古菌抵抗外源DNA或RNA入侵的免疫系统,细菌和古菌通过crRNA和Cas蛋白识别靶标DNA或RNA,并切割这些外源入侵核酸.目前,CRISPR/Cas系统已广泛应用于基因编辑领域,多种Cas蛋白的发现扩宽了CRISPR/Cas编辑基因的范围.如Cas9和Cas12可在基因组上靶向插入或删除DNA序列;Cas13和RCas9可靶向切割RNA.另外,多种Cas衍生工具的开发让CRISPR/Cas系统发挥更多的功能.如基因编辑方面,通过base editor可进行DNA单碱基编辑,通过prime editor可进行DNA单碱基编辑和小片段插入缺失;如基因表达调控方面,通过CRISPRa和CRISPRi可以激活或抑制基因RNA表达.同时,CRISPR/Cas系统还广泛应用于功能基因遗传筛选、基因检测、活体成像、细胞谱系示踪等多个领域.随着CRISPR/Cas基因编辑工具的不断开发,将不断促进科学研究进展,并有望通过CRISPR/Cas介导的基因治疗为患者带来福音.

关键词：基因编辑基因治疗 CRISPR/Cas Cas9

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不同固定方式对贴壁细胞形态和超微结构的影响

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电子显微学报 2020年第1期39卷 79-85页

作者：王旭孔妤杨侃王玲玲张宾中国科学院神经科学研究所神经科学国家重点实验室电镜技术平台

为探索和优化贴壁细胞透射电镜制样方法,本试验以鼠肾细胞系HEK293和小鼠成纤维细胞系3T3的贴壁培养细胞为材料,采用三种不同的固定方法,分别为先固定后刮取细胞、先刮取细胞后固定和胰蛋白酶消化后固定,对细胞进行固定和收集,于光学显... 详细信息

为探索和优化贴壁细胞透射电镜制样方法,本试验以鼠肾细胞系HEK293和小鼠成纤维细胞系3T3的贴壁培养细胞为材料,采用三种不同的固定方法,分别为先固定后刮取细胞、先刮取细胞后固定和胰蛋白酶消化后固定,对细胞进行固定和收集,于光学显微镜下观察细胞形态变化并进行电镜样品的制备,比较不同固定方式下细胞形态和超微结构的差异。结果表明,先固定后刮取法能较好保持贴壁细胞原始形态特征,而先刮取后固定法和胰酶消化法都会明显改变贴壁细胞形态,使悬浮起的细胞呈近似球形。在电镜下,三种方法都可以得到良好的超微结构,先固定后刮取的细胞形态更贴近于生理状态,但是其长条形或梭形的形态特征也给细胞超微结构的观察带来一定困难;先刮取后固定法和胰蛋白酶消化法得到的细胞呈圆球形,观察更为方便,但细胞的形态与贴壁时的生理状态不符。本试验为贴壁细胞电镜制样的基础方法研究,为不同的细胞学实验选择适当的前固定处理方式提供了科学的依据。

关键词：贴壁细胞固定细胞刮取细胞形态超微结构

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非人灵长类基因修饰模型研究进展

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生物工程学报 2017年第10期33卷 1665-1673页

作者：刘真蔡毅君孙强中国科学院神经科学研究所中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心神经生物学国家重点实验室中国科学院灵长类神经生物学重点实验室

非人灵长类动物在生命科学基础研究和生物医药研究领域具有非常重要的地位。近年来随着慢病毒载体转染及靶向核酸酶(ZFN,TALEN,CRISPR/Cas9)等基因操作技术的出现,科学家们成功地获得了外源基因过表达的转基因猴和目的基因定点切割的基... 详细信息

非人灵长类动物在生命科学基础研究和生物医药研究领域具有非常重要的地位。近年来随着慢病毒载体转染及靶向核酸酶(ZFN,TALEN,CRISPR/Cas9)等基因操作技术的出现,科学家们成功地获得了外源基因过表达的转基因猴和目的基因定点切割的基因编辑猴。文中对目前利用慢病毒载体获得转基因猴和利用靶向核酸酶获得基因编辑猴的研究进展进行了综述,并讨论了基因修饰猴的嵌合体现象、脱靶现象及非人灵长类动物较长性成熟时间这几个影响非人灵长类基因修饰模型推广应用的因素,最后展望了非人灵长类基因修饰模型构建技术的研究热点及发展趋势。

关键词：非人灵长类基因修饰慢病毒载体靶向核酸酶

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今年的主题是“超越”——孙强：“希望一直都在，但你要去争取”

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环球财经 2018年第2期 177-181页

作者：孙强刘洋中国科学院神经科学研究所非人灵长类研究平台《环球财经》编辑部

北京时间2018年1月25日，国际权威学术期刊《细胞》以封面文章在线发表了中国科学院神经科学研究所非人灵长类研究平台成功培育全球首个体细胞克隆猴这一世界级成果。《细胞》主编Emilie Marcus盛赞：“这是全世界科学家花了20年时间才... 详细信息

北京时间2018年1月25日，国际权威学术期刊《细胞》以封面文章在线发表了中国科学院神经科学研究所非人灵长类研究平台成功培育全球首个体细胞克隆猴这一世界级成果。《细胞》主编Emilie Marcus盛赞：“这是全世界科学家花了20年时间才达到的技术里程碑。”

关键词： “超越” 《细胞》体细胞克隆科学研究所中国科学院研究平台封面文章学术期刊

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一种显著提高实验用斑马鱼繁殖效率和使用寿命的优化养殖方案

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实验动物与比较医学 2023年第3期43卷 297-306页

作者：金仕容华叶訾化星杜旭飞卜纪雯中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(原中国科学院上海生命科学院神经科学研究所) 全脑介观神经联接图谱研究平台(斑马鱼)上海200031 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(原中国科学院上海生命科学院神经科学研究所) 感觉整合与行为研究组上海200031

目的解决实验用斑马鱼出现的生长发育滞后、产卵量不足等问题,以提高实验用斑马鱼的繁殖效率和使用寿命。方法取受精后2月龄的斑马鱼,以投喂商品化的观赏鱼专用颗粒饲料或冰冻成体卤虫为实验组,以投喂活的幼体卤虫为对照组。不同饵料投... 详细信息

目的解决实验用斑马鱼出现的生长发育滞后、产卵量不足等问题,以提高实验用斑马鱼的繁殖效率和使用寿命。方法取受精后2月龄的斑马鱼,以投喂商品化的观赏鱼专用颗粒饲料或冰冻成体卤虫为实验组,以投喂活的幼体卤虫为对照组。不同饵料投喂70 d内,通过测量体长和体重评估斑马鱼生长性能,通过统计产卵量和产卵率等评估斑马鱼繁殖性能。对甲状腺肿大病症明显的斑马鱼投喂颗粒饲料,通过测量其甲状腺肿大病灶直径大小变化评估颗粒饲料对该病症的抑制效果。将3种饲料配合使用,对饲养方案进行优化,通过繁殖性能测试验证其用于斑马鱼饲养的实际效果。结果从60 dpf开始投喂颗粒饲料直到111 dpf,颗粒饲料组的体长、体重均日渐优于对照组(P<0.0001)。从60 dpf开始投喂成体卤虫直到96 dpf,成体卤虫组的体长增长趋势与对照组基本相同,而75~82 dpf时成体卤虫组的雌鱼体重极明显高于对照组的雌鱼(P<0.0001)。成体卤虫组斑马鱼相比于对照组,雌雄间体色差异显著,在75 dpf时,已可以通过体色差异准确区分性别,而且成体卤虫组斑马鱼3月龄时产卵率显著高于对照组(94.44%vs 27.78%,P<0.05)。另外,投喂颗粒饲料130 d后,所有实验用斑马鱼的甲状腺肿大病灶均消失。根据以上结果,将3种饲料组合,优化大于2月龄的斑马鱼饲养方案为上午保持喂食幼体卤虫,下午用颗粒饲料和成体卤虫交替投喂,直至12月龄斑马鱼的产卵率可以保持70%,产卵量达到(233.6±3.95)颗,受精率和孵化率分别为97.47%和90.24%,均显著高于原方案饲养组(P<0.001或P=0.01)。结论相比幼体卤虫饵料,商品化的颗粒饲料能显著提升斑马鱼的生长性能,并对甲状腺肿大病症有治疗作用,而成体卤虫饵料能显著提高斑马鱼的早期繁殖性能。优化后的饲养方案成功提高了斑马鱼的产卵效率,并延长其繁殖使用寿命,能更好地保障相关科学研究的开展。

关键词：斑马鱼饲养方案繁殖性能生长性能

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基于基因编辑技术的非人灵长类动物模型构建

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生命科学 2022年第10期34卷 1240-1249页

作者：陈红玉刘真孙强中国科学院神经科学研究所中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心神经生物学国家重点实验室中国科学院灵长类神经生物学重点实验室

非人灵长类疾病模型在生命科学和生物医药领域具有非常重要的地位。近年来，随着经典的靶向核酸酶(ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9)基因编辑技术的出现，科学家已经成功获得了多种人类疾病相关的非人灵长类模型。该文首先介绍了经典基因编... 详细信息

非人灵长类疾病模型在生命科学和生物医药领域具有非常重要的地位。近年来，随着经典的靶向核酸酶(ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9)基因编辑技术的出现，科学家已经成功获得了多种人类疾病相关的非人灵长类模型。该文首先介绍了经典基因编辑技术和以此为基础开发的单碱基编辑(base editing, BE)以及先导编辑(prime editing, PE)技术的研究进展，随后对近年来通过不同基因编辑技术获得的非人灵长类疾病模型进行了综述，最后对目前已获得的和正在构建的非人灵长类模型的管理、保种以及动物伦理和福利等方面进行了展望。

关键词：非人灵长类动物模型基因编辑 CRISPR/Cas9 单碱基编辑(BE) 先导编辑(PE)

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神经元单层细胞电镜原位包埋方法的探讨

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中国细胞生物学学报 2016年第12期38卷 1512-1517页

作者：潘立君何苗张宾张芳吴亮亮孔妤中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所神经科学国家重点实验室电镜技术平台上海200031

为探究神经元单层细胞电镜原位包埋方法,该研究以体外培养的大鼠皮层神经元单层细胞为材料,采用了三种不同的方法进行样品制备。结果表明,常规悬浮离心包埋法容易对细胞造成机械损伤,且无法保持原位性;培养在玻璃盖玻片上的细胞,虽能保... 详细信息

为探究神经元单层细胞电镜原位包埋方法,该研究以体外培养的大鼠皮层神经元单层细胞为材料,采用了三种不同的方法进行样品制备。结果表明,常规悬浮离心包埋法容易对细胞造成机械损伤,且无法保持原位性;培养在玻璃盖玻片上的细胞,虽能保持较好的原位性,但其超薄切片表层易破碎,遇水溶解,且在透射电镜下可见细胞整体衬度弱和超微结构不完整;而培养在Thermanox塑料薄膜盖玻片上的细胞,可容易观察到相邻细胞间的紧密连接,超微结构清晰,衬度较前组样品好,三维重构之后可很好地显示神经元细胞之间的毗邻关系。因此,相比前两种细胞制样方式,Thermanox塑料薄膜上单层细胞处理过程简便,成功率高。该结果为神经元细胞超微结构的形态学研究进一步提供技术新思路,并有望推动神经元细胞超微结构观察中三维重构技术和光镜/电镜联用技术的开发应用。

关键词：神经元单层细胞原位包埋塑料薄膜盖玻片电镜三维重构

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塞克肽类(Sactipeptide)天然产物的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2020年第10期47卷 1032-1045页

作者：陈允亮李国权杨云鹏贾卫东施爱平张琪江苏大学农业装备工程学院镇江212013 江苏大学食品与生物工程学院镇江212013 中国科学院神经科学研究所实验动物平台上海200031 复旦大学化学系上海200433

塞克肽是一类重要的核糖体肽天然产物,具有多种生物活性,它们的共同特征是存在由半胱氨酸巯基与受体氨基的α-碳原子连接的分子内硫醚键.本篇综述总结了近年来塞克肽的发现、活性、生物合成、作用机制等多方面的工作,详细讨论了由SAM自... 详细信息

塞克肽是一类重要的核糖体肽天然产物,具有多种生物活性,它们的共同特征是存在由半胱氨酸巯基与受体氨基的α-碳原子连接的分子内硫醚键.本篇综述总结了近年来塞克肽的发现、活性、生物合成、作用机制等多方面的工作,详细讨论了由SAM自由基酶介导的硫醚键形成机制.

关键词：塞克肽核糖体肽硫醚键 SAM自由基酶

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非人灵长类基因修饰模型构建技术研究进展

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生命科学 2018年第9期30卷 950-954页

作者：刘真廖兆蒂孙强中国科学院神经科学研究所中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心神经生物学国家重点实验室中国科学院灵长类神经生物学重点实验室

随着以CRISPR-Cas9为代表的新型基因编辑技术的出现及发展应用,科学家们在构建非人灵长类基因修饰模型方面取得了很多重要进展。然而,首建动物嵌合、复杂基因修饰低效、传代周期长以及遗传背景复杂等多方面因素极大地限制了非人灵长类... 详细信息

随着以CRISPR-Cas9为代表的新型基因编辑技术的出现及发展应用,科学家们在构建非人灵长类基因修饰模型方面取得了很多重要进展。然而,首建动物嵌合、复杂基因修饰低效、传代周期长以及遗传背景复杂等多方面因素极大地限制了非人灵长类基因修饰模型的开发和应用。现对目前非人灵长类基因编辑模型构建的进展进行综述,并重点对基因编辑技术结合体细胞核移植、精原干细胞、胚胎干细胞及单倍体干细胞等技术手段在非人灵长类基因修饰模型构建中的进展进行综述和展望。

关键词：基因编辑非人灵长类体细胞核移植干细胞

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非人灵长类动物模型在生物节律研究中的应用

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生命科学 2020年第7期32卷 683-691页

作者：张洪钧中国科学院神经科学研究所神经生物学国家重点实验室中国科学院灵长类神经生物学重点实验室中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心上海200031 上海脑科学与类脑研究中心上海201210

生物钟是机体统筹并协调行为、生理,及生化等过程,确保机体符合每天24小时日夜循环规律的计时机制。外界环境与机体内部生物钟的不同步与失调经常会对健康造成有害的后果。许多动物模型的验证指出生物钟打乱会导致肿瘤、代谢疾病,以及... 详细信息

生物钟是机体统筹并协调行为、生理,及生化等过程,确保机体符合每天24小时日夜循环规律的计时机制。外界环境与机体内部生物钟的不同步与失调经常会对健康造成有害的后果。许多动物模型的验证指出生物钟打乱会导致肿瘤、代谢疾病,以及神经退行性疾病的发生。生物钟紊乱与衰老慢病的显著关联提示了生物节律相关干预对多种疾病极具应用潜力,而这些转化应用与发展在老龄化人口快速增长的同时显得更为迫切。由于小鼠与人在代谢速率与认知行为等方面存在极大差异,发展并研究昼行性的非人灵长类模型对节律紊乱相关慢病的干预与临床转化极为重要,同时有助于对时间生物学的进一步理解。

关键词：生物钟生物钟紊乱衰老相关慢病非人灵长类模型

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