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以裙带菜(Undaria pinnatifida)雌、雄配子体无性繁殖系为研究对象,利用丙酮提取色素,根据Jeffrey和Humphrey(1975)的公式,得出雌配子体的色素含量分别为:叶绿素a0.81mg/gDW、叶绿素c 0.04mg/gDW、类胡萝卜素0.52mg/gDW;雄配子体的色素...

以裙带菜(Undaria pinnatifida)雌、雄配子体无性繁殖系为研究对象,利用丙酮提取色素,根据Jeffrey和Humphrey(1975)的公式,得出雌配子体的色素含量分别为:叶绿素a0.81mg/gDW、叶绿素c 0.04mg/gDW、类胡萝卜素0.52mg/gDW;雄配子体的色素含量分别为:叶绿素a 1.39mg/gDW、叶绿素c 0.14mg/gDW、类胡萝卜素1.02mg/gDW。使用Beckman DU7500分别测定雌、雄配子体在丙酮中的连续吸收光谱,在435nm和664nm处有两个主要吸收峰,其中红光吸收峰较窄,蓝光吸收峰的长波长

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多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA

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生物工程学报 2000年第3期16卷 387-391页

作者：胡显文肖成祖李佐虎郭志霞高丽华张正光胥照平王菲军事医学科学院生物工程研究所北京100071 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,... 详细信息

在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,细胞密度可维持在 (1 3～ 2 6 )× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 90 %以上。在7 5L搅拌罐中培养细胞 ,利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术 ,可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响 ,在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在 6 7d连续换液培养中 ,细胞最高密度为 2 6 4× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 95 %以上。与稳压操作相比 ,利用周期变压刺激技术可提高产量 10 %～ 2 0 % ,且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率 ,利用 4步纯化工艺 ,从含u PA约 135g的 2 10 0L上清中获得约 80 gu PA(单链比例约为 90 % )。

关键词：动物细胞培养微载体更新 u-PA rCHO细胞

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正相和反相柱层析组合分离纯化紫杉醇

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生物工程学报 2000年第1期16卷 69-73页

作者：张志强苏志国大连理工大学生化工程研究所大连116012 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

采用正相氧化铝柱层析和反相C18柱层析从东北红豆杉培养细胞浸提物中分离纯化了紫杉醇。优化了氧化铝柱层析和反相柱层析的操作条件。实验发现,经过氧化铝柱层析后,测得的紫杉醇量大大增加。经两步层析,使紫杉醇的含量从小于10%提高到9... 详细信息

采用正相氧化铝柱层析和反相C18柱层析从东北红豆杉培养细胞浸提物中分离纯化了紫杉醇。优化了氧化铝柱层析和反相柱层析的操作条件。实验发现,经过氧化铝柱层析后,测得的紫杉醇量大大增加。经两步层析,使紫杉醇的含量从小于10%提高到95%,样品中微量杂质继以重结晶步骤除去,即可获得纯度超过98%的紫杉醇晶体。采用13CNMR对晶体分析,所得产物结构与文献上紫杉醇的结构一致。

关键词：紫杉醇分离纯化抗癌药物柱层析

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酵母胞内海藻糖的微波破细胞提取

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化工学报 2000年第6期51卷 810-813页

作者：刘传斌白凤武冯朴荪苗蔚荣苏志国大连理工大学生化工程研究所大连116012 大连理工大学精细化工国家重点实验室大连116012 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

引　言海藻糖是由两个葡萄糖分子结合而成的非还原性双糖 ,广泛存在于隐生生命的生物即脱水的动植物体内 ,并赋予这类生物抵御高温、干旱、脱水等不良环境胁迫的能力 .进一步研究发现 ,海藻糖具有在干燥条件下保持蛋白质、核酸等大分子... 详细信息

引　言海藻糖是由两个葡萄糖分子结合而成的非还原性双糖 ,广泛存在于隐生生命的生物即脱水的动植物体内 ,并赋予这类生物抵御高温、干旱、脱水等不良环境胁迫的能力 .进一步研究发现 ,海藻糖具有在干燥条件下保持蛋白质、核酸等大分子物质的结构和功能不受破坏的特异功效 .因此 ,作为一种生物制品活性保护剂和食品添加剂 ,海藻糖在蛋白质、酶类、疫苗、菌苗、基因工程药物以及食品、化妆品的生产中具有广阔的应用前景 .近年来 ,在世界范围内掀起了海藻糖生产与应用研究的热潮[1] .酿酒酵母特别是面包酵母胞内海藻糖含量丰富 ,为市售海藻糖产品的重要来源 .由于海藻糖水解酶———海藻糖酶与海藻糖共存于酵母细胞中 ,因此 ,酵母胞内海藻糖的提取必须抑制海藻糖酶的活性[2 ,3] .另外 ,从动力学角度考虑 ,酵母细胞壁和细胞膜的通透性是提取阻力的主要来源 ,在提取前打破细胞壁和细胞膜 ,将大大加速海藻糖的释放 .针对上述两个问题 ,本文利用微波加热的选择性、瞬时性和高效性[4 ,5] ,建立了微波破细胞提取技术 .酵母胞内不同部位的物质对微波能的吸收能力存在显著差别 ,导致微波场中的细胞局部受热 .富含自由水的部位 ,比如液胞 ,在...

关键词：海藻糖微波破碎细胞酵母提取工艺

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组织工程的一般考虑

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生物技术通报 2000年第4期16卷 15-20页

作者：胡显文肖成祖李佐虎军事医学科学院生物工程研究所北京100071 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

组织工程的最终目标是通过体外培养活细胞与其胞外环境相互作用而发育成具有生物活性的组织或器官替代物 ,替换、修复组织或器官 ,或强化其生物学功能。本文主要讨论细胞移植和组织重建的影响因素和可能的方法。

关键词：组织工程细胞来源体外培养

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微波能用于酵母中海藻糖高效液相色谱分析样品制备的研究

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分析化学 1999年第1期27卷 24-28页

作者：刘传斌李宁鲁济清苗蔚荣苏志国中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室大连116012 北京100080 大连理工大学生化工程研究所精细化工国家重点实验室

利用微波能提取酵母中的海藻糖,建立了一种海藻糖分析样品的快速制备方法.高效液相色谱分析结果表明,无论是提取选择性、还是提取时间消耗,用微波法提取均具有常规提取法所无法比拟的优越性.经20s微波处理后,海藻糖酶已失活,故有效防止... 详细信息

利用微波能提取酵母中的海藻糖,建立了一种海藻糖分析样品的快速制备方法.高效液相色谱分析结果表明,无论是提取选择性、还是提取时间消耗,用微波法提取均具有常规提取法所无法比拟的优越性.经20s微波处理后,海藻糖酶已失活,故有效防止了提取过程中海藻糖的降解.微波提取不失为一种良好的样品的制备方法,尤其适用于对酵母代谢的研究.

关键词：微波高效液相色谱样品制备海藻糖

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紫球藻的生物活性物质

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海洋通报 1999年第3期18卷 25-29页

作者：王长海温少红欧阳藩烟台大学海洋生化工程研究所烟台264005 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

对紫球藻细胞内的蛋白质、脂肪酸和多糖等主要生物活性物质的含量和分布进行了分析,同时对B-藻红蛋白进行了分离纯化,并获得了产量和纯度均较高的B-藻红蛋白.

关键词：紫球藻生物活性物质 B-藻红蛋白脂肪酸多糖

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紫球藻的载体培养研究

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应用与环境生物学报 1999年第5期5卷 496-500页

作者：王长海鞠宝温少红欧阳藩烟台大学海洋生化工程研究所烟台264005 中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

通过对紫球藻的载体培养进行的较详细研究，获得了适合于紫球藻培养的理想载体；采用载体培养条件的优化和流加营养物质、通气培养以及半连续培养等培养手段，显著提高了紫球藻细胞的质量浓度（ρｍａｘ＝５．５２ｇＬ－１）．实... 详细信息

通过对紫球藻的载体培养进行的较详细研究，获得了适合于紫球藻培养的理想载体；采用载体培养条件的优化和流加营养物质、通气培养以及半连续培养等培养手段，显著提高了紫球藻细胞的质量浓度（ρｍａｘ＝５．５２ｇＬ－１）．实验结果表明，利用载体法培养紫球藻不仅能有效地实现高密度培养，易于实现该微藻的连续或半连续培养。

关键词：紫球藻微藻载体培养

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