检索结果-内蒙古大学图书馆

高效液相尺寸排阻色谱-多角度激光散射定量检测灭活禽流感病毒抗原中完整病毒颗粒

生物工程学报 2023年第10期39卷 4295-4307页

作者：郝建敏刘幽燕苏志国张松平李正军广西大学化学化工学院广西南宁530004 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

本研究旨在建立一种灭活禽流感病毒原料液中完整病毒颗粒准确定量的方法。针对直接采用高效液相尺寸排阻色谱法(high performance size exclusion chromatography,HPSEC)检测灭活禽流感病毒原液存在杂质干扰的问题,首先以H5N8型抗原为对... 详细信息

本研究旨在建立一种灭活禽流感病毒原料液中完整病毒颗粒准确定量的方法。针对直接采用高效液相尺寸排阻色谱法(high performance size exclusion chromatography,HPSEC)检测灭活禽流感病毒原液存在杂质干扰的问题,首先以H5N8型抗原为对象,分别考察了聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)沉淀和离子交换色谱法(ion exchange chromatography,IEC)进行预处理。在优化条件下,经DEAE FF阴离子交换层析纯化预处理,杂蛋白去除率为86.87%,病毒血凝回收率为100%。HPSEC分析预处理后的样品,8.5–10.0 min处色谱峰样品电泳检测显示主要为H5N8病毒蛋白,动态光散射分析平均粒径为127.7nm,推测为完整病毒特征峰;在IEC预处理后的样品中加入抗体进行HPSEC检测,8.5-10.0 min处特征峰消失,显示IEC预处理有效去除了杂质干扰。通过将HPSEC与多角度激光散射技术(multi-angle laser scattering technique,MALLS)联用,可以准确获得样品中完整病毒颗粒的数量,且病毒颗粒数与色谱峰面积具有良好线性关系(R2=0.997)。建立的IEC预处理-HPSEC-MALLS检测方法应用于其他亚型(H7N9)、批次和浓度的病毒原液中完整病毒颗粒数的准确检测,均具有良好适用性,且重复性好,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)<5%,n=3。

关键词：灭活禽流感病毒颗粒定量检测离子交换层析尺寸排阻色谱

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发酵枸杞酒沉淀物成分鉴定及稳定性提升研究

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食品工业科技 2023年第2期44卷 41-50页

作者：李娜任杰王丽卫蹇艾君王春光张柏林王晓楠北京林业大学生物科学与技术学院食品科学系林业食品加工与安全北京市重点实验室北京100083 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

发酵枸杞酒营养丰富,风味独特,市场前景广阔,但在货架期内易出现沉淀,影响消费者的偏爱。本研究以发酵枸杞酒及其沉淀物作为研究对象,采用物理化学方法对枸杞酒沉淀物进行定性、定量研究,探究了添加不同澄清剂(皂土、明胶、蛋清粉和蛋... 详细信息

发酵枸杞酒营养丰富,风味独特,市场前景广阔,但在货架期内易出现沉淀,影响消费者的偏爱。本研究以发酵枸杞酒及其沉淀物作为研究对象,采用物理化学方法对枸杞酒沉淀物进行定性、定量研究,探究了添加不同澄清剂(皂土、明胶、蛋清粉和蛋白酶等)对枸杞酒化学组成及稳定性的影响。结果表明,发酵枸杞酒沉淀物主要包括蛋白质、有机酸、多糖、多酚和金属元素等,其中,蛋白质占24%~34%,有机酸占22%~28%,多糖占15%~23%。添加不同种类的澄清剂对枸杞酒沉淀组分的影响不同,皂土类能够降低蛋白含量,其中皂土NC处理后的枸杞酒与对照组相比蛋白含量降低了28.13%。而明胶类能降低有机酸和多糖含量,其中明胶W处理后的枸杞酒多糖含量下降为初始对照的53.84%。添加明胶类澄清剂效果较好,可以减少枸杞酒的沉淀量,提高枸杞酒的稳定性。

关键词：发酵枸杞酒沉淀物澄清剂稳定性

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静电耦合亲和层析纯化人血清白蛋白的研究

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过程工程学报 2023年第11期23卷 1599-1607页

作者：王思栋王留洋冯雪张松平张万忠罗坚沈阳化工大学制药与生物工程学院辽宁沈阳110142 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是人血清中含量最丰富的蛋白,约占血清总蛋白含量的40%~60%。商品化的白蛋白亲和介质(Cibacron Blue F3GA)的配基毒性大、易脱落、载量低,纯化白蛋白回收率较低。本研究制备了一种新型静电耦合亲... 详细信息

人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是人血清中含量最丰富的蛋白,约占血清总蛋白含量的40%~60%。商品化的白蛋白亲和介质(Cibacron Blue F3GA)的配基毒性大、易脱落、载量低,纯化白蛋白回收率较低。本研究制备了一种新型静电耦合亲和介质(DASA-Sepharose,3,5-Diaminobenzoic Acid n-Octyl Succinic Anhydride-Sepharose),并通过一步层析从人血清中高效纯化白蛋白。DASA-Sepharose介质采用3,5-二氨基苯甲酸间隔臂将正辛基琥珀酸酐亲和配体偶联于琼脂糖微球。DASA-Sepharose间隔臂上的羧基通过静电作用吸附白蛋白,进而与正辛基琥珀酸酐亲和配基协同作用实现静电耦合亲和吸附,在保持亲和吸附高特异性的同时大大提高了吸附载量。采用牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)为模型蛋白考察了Na Cl浓度和溶液pH对介质静态吸附载量(Qm)的影响,NaCl浓度为0.025~0.06 mol/L时Qm几乎不受影响,而NaCl浓度在0.1 mol/L及以上时Qm显著下降,在pH=5.00的20 mmol/L PBS缓冲体系中,Qm为75.43 mg/mL介质。相比商品化的白蛋白亲和介质Cibacron Blue F3GA的Qm(20 mg/mL介质)提高了约2.7倍。DASA-Sepharose介质能通过一步层析法以较高的收率(94.34%)和纯度(98.20%)从人血清中直接提取白蛋白。圆二色光谱和华法林钠法测定纯化白蛋白的二级结构和小分子药物结合活性,与标准人血清白蛋白基本一致。采用DASA-Sepharose介质可以实现人血清白蛋白的高效分离,本工作为人血清白蛋白的分离纯化提供了新方法。

关键词：人血清白蛋白静电耦合亲和层析 3 5-二氨基苯甲酸正辛基琥珀酸酐间隔臂静电吸附

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异原子配位结构碳基单原子电催化剂结构与性能相关性的研究进展

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高等学校化学学报 2022年第5期43卷 62-82页

作者：夏天万家炜于然波北京科技大学冶金与生态工程学院北京100083 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190 中国科学院大学北京100049

单原子催化剂是一类以相互孤立的单个金属原子作为催化活性中心的、具有高原子经济性及高活性的负载型催化剂,被广泛应用于能源电催化领域.近年来,通过使用两种或两种以上原子与活性中心金属原子配位,构建具有异原子配位结构的单原子材... 详细信息

单原子催化剂是一类以相互孤立的单个金属原子作为催化活性中心的、具有高原子经济性及高活性的负载型催化剂,被广泛应用于能源电催化领域.近年来,通过使用两种或两种以上原子与活性中心金属原子配位,构建具有异原子配位结构的单原子材料,展现了优异的电催化性能.研究发现,这种不对称的配位结构有效调控了中心金属原子的电子结构,优化了催化反应的吸附和脱附能量,提高了电催化的性能.本文综合评述了具有异原子配位结构碳基单原子电催化剂的合成策略、表征技术与方法,以及在前沿能源电催化应用中的催化剂性能与结构之间的构效关系,并展望了异原子配位结构碳基单原子电催化剂的研究前景.

关键词：异原子配位结构单原子催化剂电催化电子结构传质

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Ti_(3)C_(2)系MXene原位制备方法的研究及其二维膜的结构调控

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化工新型材料 2024年第1期52卷 161-165,177页

作者：渠深圳刘峤王青范茏董强徐农合肥学院能源材料与化工学院合肥230601 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

作为具有代表性的二维纳米材料之一,MXene通过层层堆叠可以构建具有分子筛分通道的新型二维分离膜。利用氟化锂/盐酸原位生成氢氟酸的方法,系统地研究了刻蚀液浓度对碳化钛(Ti_(3)C_(2))系MXene纳米片结构的影响,并利用热处理探究了MXen... 详细信息

作为具有代表性的二维纳米材料之一,MXene通过层层堆叠可以构建具有分子筛分通道的新型二维分离膜。利用氟化锂/盐酸原位生成氢氟酸的方法,系统地研究了刻蚀液浓度对碳化钛(Ti_(3)C_(2))系MXene纳米片结构的影响,并利用热处理探究了MXene二维膜的结构演变。结果表明,当刻蚀剂中F^(-)的摩尔质量是Al^(3+)的7倍及以上时,能获得较好的单层MXene,且纳米片层之间的层间距随着刻蚀剂中F^(-)浓度的提高而增大;利用热自交联反应,可以在增强纳米片层与片层之间作用力的同时,改变纳米片的层间距。

关键词： MXene 结构演变层间距热自交联

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多孔PLGA微球作为新型冠状病毒疫苗佐剂的研究

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过程工程学报 2024年第3期24卷 360-370页

作者：邹龄娇张瑜岳华马光辉群马大学理工学部分子科学部日本群马376-8515 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190 中国科学院大学化学工程学院北京100049

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳/微颗粒已被证明具有良好的疫苗佐剂效果。现有研究中,对于PLGA疫苗递送微球的研究主要集中在抗原装载/吸附效率的提升或多佐剂共递送以增强免疫效果上。然而,对于微球结构本身的多样性在免疫效果... 详细信息

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳/微颗粒已被证明具有良好的疫苗佐剂效果。现有研究中,对于PLGA疫苗递送微球的研究主要集中在抗原装载/吸附效率的提升或多佐剂共递送以增强免疫效果上。然而,对于微球结构本身的多样性在免疫效果提升方面的探索仍较为匮乏。通过对微球结构进行合理化设计,制备出多孔微球将抗原“后装载”到微球内部的方法或可实现抗原的无损装载与延长递送,从而开发出高效的新型冠状病毒疫苗递送佐剂。本工作以乳液法制备了PLGA多孔微球与实心微球,二者除了多孔微球具有内部空腔和表面小孔的独特结构外,在微球粒径、表面电势上均无显著区别。由于PLGA多孔微球内孔大、外孔小的特征,抗原投入浓度5.71 mg/mL时,包埋率达到10.81%。在延长抗原体内滞留时间上,相对于游离抗原3天的滞留终点和实心微球混合抗原5天的滞留终点,装载于多孔微球中的抗原的体内滞留时间延长至15天。在体液免疫效果的提升上,与新冠抗原混合实心微球疫苗组相比,装载新冠抗原的多孔微球疫苗组的IgG滴度上升速度最大值V_(max)是其1.73倍,响应水平更高;达到V_(max)的时间t比其提前了2.8天,起效时间更早;疫苗接种后6~16周期间,IgG抗体滴度均高于实心微球组,具有更优维持抗体滴度的潜力。

关键词： PLGA微球多孔微球抗原装载新冠疫苗佐剂

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表面改性PET网状纤维支架材料制备及其生物安全性评价

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过程工程学报 2024年第1期24卷 79-86页

作者：李阳高建萍张扬彭青高毅张贵锋中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190 中国科学院大学化学工程学院北京100049 南方医科大学珠江医院再生医学研究所广东广州510282

以氨气作为等离子体气体,对合成高分子聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)支架材料表面进行低温等离子体处理,获得了一种亲水性和生物相容性得到改善的网状纤维支架材料PET-LTPT。通过XPS光电子能谱仪、水接触角、电镜、BET比表面积测定对材料... 详细信息

以氨气作为等离子体气体,对合成高分子聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)支架材料表面进行低温等离子体处理,获得了一种亲水性和生物相容性得到改善的网状纤维支架材料PET-LTPT。通过XPS光电子能谱仪、水接触角、电镜、BET比表面积测定对材料进行物理化学表征,同时培养肝细胞测定其生物相容性,并对其开展体外细胞毒性、皮内反应试验以及皮肤致敏试验以评估其生物安全性。结果表明,低温等离子体处理后,PET材料引入了N元素,含量为2.38wt%,亲水性得到了显著改善(P<0.001),比表面积为0.37 m^(2)/g。PET-LTPT生物安全性良好,人肝癌细胞C3A细胞在处理后的PET-LTPT材料上实现黏附和增殖,证明了表面改性PET网状纤维支架材料用于生物人工肝用肝组织化三维培养具有可行性。

关键词： PET 低温等离子体生物安全性评价人工肝三维培养支架材料

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烯丙基活化制备大孔强阳离子交换介质及其在蛋白分离中的应用

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分析化学 2024年第12期52卷 1896-1903页

作者：薛彦晓侯恒扬公丕胜靳海波赵岚何广湘张荣月北京石油化工学院新材料与化工学院燃料清洁化及高效催化减排技术北京市重点实验室北京 102617 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京 100190

强阳离子交换介质广泛应用于蛋白的分离与纯化.本研究以甲基丙烯酸缩水甘油酯和乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚大孔微球为基质,经烯丙基活化偶联小分子配体,制备了聚合物基质的强阳离子交换介质.系统考察了各反应因素对配基密度的影响,制备... 详细信息

强阳离子交换介质广泛应用于蛋白的分离与纯化.本研究以甲基丙烯酸缩水甘油酯和乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚大孔微球为基质,经烯丙基活化偶联小分子配体,制备了聚合物基质的强阳离子交换介质.系统考察了各反应因素对配基密度的影响,制备得到配基密度在0.126～0.370 mol/L范围内的介质,并对其吸附性能进行了评价.以溶菌酶为模型蛋白,测得其静态载量范围为37.0～81.0 g/L,动态载量为37.7 g/L,溶菌酶的最高回收率达到98.97%.此介质具有较低的非特性吸附,并且对溶菌酶有良好的分离效果,在快速蛋白纯化方面有良好的应用前景.

关键词：强阳离子交换层析介质烯丙基活化配基密度吸附性能分离纯化

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离子液体中铝的电沉积及精炼

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过程工程学报 2023年第3期23卷 396-410页

作者：杨晓晴郑勇王倩杨倩李玉李涛任保增中国科学院过程工程研究所绿色过程与工程重点实验室多相复杂系统国家重点实验室离子液体清洁过程北京市重点实验室北京100190 郑州大学化工学院河南郑州450001 安阳工学院化学与环境工程学院河南安阳455000

国家的“双碳”目标对铝冶炼工业提出了新要求。针对传统Hall-héroult法生产铝存在高能耗、高排放的问题,我国将严守电解铝4500万吨“天花板”,积极开发铝再生技术,2025年实现再生铝产量由2020年的690万吨增至1150万吨。不论是电... 详细信息

国家的“双碳”目标对铝冶炼工业提出了新要求。针对传统Hall-héroult法生产铝存在高能耗、高排放的问题,我国将严守电解铝4500万吨“天花板”,积极开发铝再生技术,2025年实现再生铝产量由2020年的690万吨增至1150万吨。不论是电解制铝还是铝的再生精炼都需要在高温下进行,亟需低碳节能新技术的开发。离子液体中铝的电沉积能在<100℃下进行,能耗大大降低,且没有二氧化碳以及其他污染气体的排放,有望发展成为铝工业生产的一种新型绿色工艺。本综述按照阳离子结构对用于铝电沉积的离子液体体系进行分类,分别论述了相关研究进展,总结了以不同铝基材料作为阳极在离子液体中电解精炼铝的研究。最后,概括了铝电沉积用离子液体电解质体系的特性,并指出了存在的一些问题。

关键词：离子液体铝电沉积精炼节能减排

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O型口蹄疫病毒衣壳蛋白VP1的可溶表达及抗原活性鉴定

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过程工程学报 2023年第3期23卷 472-479页

作者：王闰年张纯吴佳奇张耀张宇翔张路瑶余蓉刘永东四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室四川成都610041 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

口蹄疫(Foot-and-mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth Disease Virus,FMDV)引起的急性、高度传染性疾病,一旦大规模爆发会给畜牧业造成巨大的经济损失。接种灭活病毒疫苗是目前防控口蹄疫的最有效手段,但传统灭活疫苗存... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth Disease Virus,FMDV)引起的急性、高度传染性疾病,一旦大规模爆发会给畜牧业造成巨大的经济损失。接种灭活病毒疫苗是目前防控口蹄疫的最有效手段,但传统灭活疫苗存在病毒逃逸、生产成本高等诸多局限。重组亚单位蛋白疫苗免疫原性好且安全性高,是发展新型口蹄疫疫苗的重要方向。口蹄疫病毒结构蛋白VP1因含主要抗原表位,而成为口蹄疫亚单位疫苗及诊断试剂的开发热点。与真核系统相比,原核表达系统生产周期短、易于放大生产、成本低廉,更适于动物疫苗的开发,但VP1采用原核系统表达会形成无活性的不溶包涵体。本工作中首次同时融合小分子泛素相关修饰物(Small Ubiquitin-related Modifier,SUMO)和RNA作用结构域(RNA-interacting Domain,RID)两种助溶标签来实现FMDV VP1(O型/MYA/98)在原核系统中的高效可溶表达。首先采用PCR(聚合酶链反应)重叠技术,以p ET-28a(+)为载体构建了RID-SUMO-VP1重组质粒,将重组质粒转化至*** BL21(DE3),在18℃下通过1 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导4 h后,融合蛋白RID-SUMO-VP1高效表达,可溶表达比例达79%,而融合SUMO或RID单一标签的VP1仍主要表达为不溶的包涵体。然后采用硫酸铵两步沉淀法对工程菌的破碎上清进行纯化,得到纯度为93%的RID-SUMO-VP1,酶联免疫吸附测定(ELISA)实验表明其能够与O型FMDV阳性小鼠血清反应。研究结果表明,采用RID及SUMO双标签融合策略能极大提高VP1在原核系统中的可溶表达效率,且表达的VP1具备良好的抗原性,这为开发新型FMDV免疫诊断试剂和安全高效的亚单位疫苗奠定了良好基础。

关键词： O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1 小分子泛素相关修饰物(SUMO) RNA作用结构域(RID) 可溶表达免疫反应

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