检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2012年第10期28卷 1352-1355页

作者：陈欢王睿睿郑永唐中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

药物治疗是目前唯一有效治疗艾滋病的手段,而我国至今尚无自主知识产权的抗HIV药物上市,药物研发的任务紧迫且艰巨。药物的临床前药效学评价对后续的临床实验具有重要的指导意义。该文以Etravirine为例,介绍和讨论FDA抗HIV药物的临床前... 详细信息

药物治疗是目前唯一有效治疗艾滋病的手段,而我国至今尚无自主知识产权的抗HIV药物上市,药物研发的任务紧迫且艰巨。药物的临床前药效学评价对后续的临床实验具有重要的指导意义。该文以Etravirine为例,介绍和讨论FDA抗HIV药物的临床前药效学评价指导原则,分析了抗HIV药物临床前药效学研究部分的实验要点和重点,希望为完善符合我国国情的抗HIV药物临床前研究标准提出参考。

关键词： FDA 指导原则抗HIV药物临床前药效学 Etravirine

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肝癌组织及细胞系总RNA抽提逆转及基因克隆方法的改进与比较

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Zoological Research 2009年第5期30卷 520-526页

作者：易濒常宏曹毅中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

该文建立了高效肝组织及细胞总RNA抽提、反转录以进行基因克隆和实时定量PCR(q-RT-PCR)的方法。比较了2种反转录酶(M-MLV和SuperScriptII)、2种cDNA合成引物(OligodT和random 6 primer)对总RNA反转录效率的影响,与4种DNA聚合酶(Taq聚合... 详细信息

该文建立了高效肝组织及细胞总RNA抽提、反转录以进行基因克隆和实时定量PCR(q-RT-PCR)的方法。比较了2种反转录酶(M-MLV和SuperScriptII)、2种cDNA合成引物(OligodT和random 6 primer)对总RNA反转录效率的影响,与4种DNA聚合酶(Taq聚合酶、Pfu聚合酶、LAtaq聚合酶、Prime Star聚合酶)进行长片段基因克隆的能力及效率;同时,该研究比较了不同质量总RNA对有效进行q-RT-PCR与长片段分子克隆的影响。新建立的RNA提取方法使得RNA完整性和均一性提高。RNA的完整性及均一性对长片段cDNA的克隆至关重要。部分降解的组织RNA及细胞RNA仅适合于q-RT-PCR检测mRNA的表达水平,而不适合于cDNA的克隆。

关键词：肝癌组织及细胞系总RNA抽提反转录 q-RT-PCR 长片段基因克隆

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HIV-1 C亚型密码子优化gp120负载人DC疫苗的构建及体外功能

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免疫学杂志 2010年第9期26卷 741-746页

作者：白雪夏厚军戴正喜马建平李少遊郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室 650223 中国科学院研究生院 100049

目的构建HIV-1C亚型gp120负载人树突状细胞(dentriti ccell,DC)疫苗,并对其体外功能进行初步检测。方法利用Amaxa细胞核转染技术将pcDNA3.1-gp120质粒转染至人成熟DC,以Western blot检测gp120的表达。通过流式细胞仪检测DC表面共刺激分... 详细信息

目的构建HIV-1C亚型gp120负载人树突状细胞(dentriti ccell,DC)疫苗,并对其体外功能进行初步检测。方法利用Amaxa细胞核转染技术将pcDNA3.1-gp120质粒转染至人成熟DC,以Western blot检测gp120的表达。通过流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的变化、混合淋巴细胞反应、CD8+T细胞表面活化分子CD25的表达及其分泌IFN-γ的变化。结果通过Western blot检测,gp120在DC中得到了正确表达。经流式细胞仪检测,DC表面分子CD80表达率由刺激前的33.34%上升至43.20%,CD86表达率由刺激前的60.08%上升至90.34%;负载gp120DC刺激淋巴细胞增殖率为86.72%;CD8+T细胞表面分子CD25表达率由刺激前的5.27%上升至74.21%,IFN-γ的表达率达37%。结论负载了HIV-1gp120的人树突状细胞能够显著刺激淋巴细胞的增殖、增强CD8+T细胞表面活化分子CD25表达以及促进CD8+T细胞分泌IFN-γ,为下一步DC治疗性疫苗的体内研究奠定基础。

关键词： HIV-1 C亚型密码子优化 gp120 树突状细胞

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链脲佐菌素诱导树鼩2型糖尿病

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Zoological Research 2013年第2期34卷 108-115页

作者：吴晓云李昀海常青张林强廖莎莎梁斌中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院昆明灵长类研究中心云南昆明650223 中国科学院树鼩繁殖基地云南昆明650223

链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)是链球菌产生的天然化合物,对哺乳动物的胰岛B细胞有特异毒性,被广泛用于诱导1型和2型糖尿病。该研究通过多次小剂量注射STZ来建立树鼩2型糖尿病动物模型。24只树鼩被分为对照组以及60、70和80mg/kg剂量... 详细信息

链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)是链球菌产生的天然化合物,对哺乳动物的胰岛B细胞有特异毒性,被广泛用于诱导1型和2型糖尿病。该研究通过多次小剂量注射STZ来建立树鼩2型糖尿病动物模型。24只树鼩被分为对照组以及60、70和80mg/kg剂量STZ诱导组。注射STZ后,成模树鼩出现明显的多饮、多食和多尿症状,平均体重未减轻,高血糖症状持续8～16周,尿糖显著阳性,肾功能及糖耐受明显受损,糖脂代谢紊乱,但未出现糖尿病乳酸中毒和高血糖高渗等并发症。该结果表明,多次小剂量STZ注射可诱导树鼩出现类似2型糖尿病症状和糖尿病肾脏损伤,且综合考虑STZ注射次数、成模率以及成模稳定性,两次注射80mg/kg剂量的STZ较适合用于创建树鼩2型糖尿病模型。

关键词：树鼩 2型糖尿病链脲佐菌素

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我国中药来源的抗HIV天然化合物研究进展

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药学学报 2010年第2期45卷 141-153页

作者：张旋黄宁郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039 昆明医学院药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650031

由于迄今仍无艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)疫苗问世,抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)药物仍然是艾滋病治疗的主要手段。传统中药和药用植物来源的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源... 详细信息

由于迄今仍无艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)疫苗问世,抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)药物仍然是艾滋病治疗的主要手段。传统中药和药用植物来源的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源广泛等特点,因而在防治艾滋病方面有着独特的优势和巨大的潜力。研究者已经对天然化合物抗HIV作用进行了大量研究,并取得了可喜的成绩,发现了一些生物碱、香豆素、木脂素、黄酮类、萜类、鞣质类、多糖类、蛋白质和多肽类等天然化合物具有抗HIV的活性。然而,多数研究都是在体外试验完成的,大多数天然化合物体外抗HIV活性偏低,而且抗HIV的靶点仍不十分清楚。本文结合笔者实验室研究工作,重点介绍近年来我国传统中药来源的抗HIV活性较强的天然化合物研究进展。

关键词：艾滋病人类免疫缺陷病毒天然化合物中药抗HIV活性

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Characterization of spontaneous breast tumor in tree shrews(Tupaia belangeri chinenesis)

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Zoological Research 2012年第1期33卷 55-59页

作者：夏厚军王春艳张海林何保丽角建林陈策实中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100039 昆明医学院云南昆明650031

Breast cancer is a common malignant *** is essential to develop suitable animal models for discovering novel preventive and therapeutic *** shrews（Tupaia belangeri chinensis） have a closer evolutionary relationship with humans than do rodents,which have been widely used in laboratory *** breast tumors were identified in tree shrews in 1960s;however,no detailed studies about tree shrew breast tumors have been conducted to ***,we characterized a spontaneous breast tumor from tree shrews by Haematoxylin Eosin（HE） *** tumor was identified as a papillary *** staining（IHC） for progesterone receptor（PR）,Ki-67 and cleaved caspase-3 showed that tumor cells were positive for PR,highly proliferative,and less apoptotic compared to normal breast epithelial ***,the spontaneous tumor of tree shrew is very close to human papillary tumors in terms of morphology and pathology and we concluded that tree shrew may be a suitable animal model for breast cancer research.

关键词： Spontaneous breast cancer Tree shrew Immunohistochemistry

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Genetic diversity and matrilineal structure in Chinese tree shrews inhabiting Kunming,China

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Zoological Research 2011年第1期32卷 17-23页

作者：陈仕毅许凌吕龙宝姚永刚中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国科学院研究生院北京100049 中国科学院昆明动物研究所实验动物中心云南昆明650223

Due to their special phylogenetic position in the Euarchontoglires and close affinity to primates,tree shrews have been proposed as an alternative experimental animal to primates in biomedical ***,the population genetic structure of tree shrews has largely remained unknown and this has hindered the development of tree shrew breeding and *** we sampled 80 Chinese tree shrews（Tupaia belangeri chinensis） in Kunming,China,and analyzed partial mtDNA control region sequence *** on our samples and two published sequences from northern tree shrews（***）,we identified 29 substitutions in the mtDNA control region fragment（～ 604 bp） across 82 individuals and defined 13 *** samples were selected for sequencing of the cytochrome b（Cyt b;1134 bp） gene based on control region sequence variation and were analyzed in combination with 34 published sequences to solidify the phylogenetic pattern obtained from control region ***,tree shrews from Kunming have high genetic diversity and present a remarkable long genetic distance to the two reported northern tree shrews outside *** results provide some caution when using tree shrews to establish animal models because of this apparent genetic *** addition,the high genetic diversity of Chinese tree shrews inhabiting Kunming suggests that systematic genetic investigations should be conducted before establishing an inbred strain for medical and biological research.

关键词： Chinese tree shrews mtDNA Control region Cytochorme b Genetic diversity

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VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV-1药物的条件优化及应用

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中国药理学通报 2016年第3期32卷 433-438页

作者：王萍陈欢罗荣华卿晨张高红郑永唐昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500 中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中国科学院大学北京100039

目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进... 详细信息

目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进一步验证了该模型的可行性与有效性。最后,应用该系统对特定靶点化合物进行筛选,并与HIV-1_(ⅢB)病毒筛选体系所得结果进行比较。结果 VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对CRFK细胞的感染力最强,报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1_(ⅢB)所得EC_(50)基本一致。结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒的抗HIV药物筛选系统。

关键词： VSVG/HIV-1NL4-3Luc HIV 药物筛选阳性药物优化应用

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大动物生物安全三级实验室的生物安全隐患与对策

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环境与健康杂志 2010年第10期27卷 918-919页

作者：韩建保张高红郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

生物安全即避免危险生物因子所造成的实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施川。随着近些年科学技术的迅速发展及新发传染病（如SARS、禽流感、甲型H1N1流感等）的不断暴发和流行，各国对生物安全实验室安全重要性的认识... 详细信息

生物安全即避免危险生物因子所造成的实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施川。随着近些年科学技术的迅速发展及新发传染病（如SARS、禽流感、甲型H1N1流感等）的不断暴发和流行，各国对生物安全实验室安全重要性的认识不断提高。虽然目前已经出台针对实验动物生物安全管理、实验操作规范等系统性、专业性指导文件，

关键词：动物生物安全三级实验室生物安全隐患对策

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HIV-1整合酶抑制剂体外筛选方法研究进展

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中国药理学通报 2013年第1期29卷 14-17页

作者：张旋杨柳萌郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 昆明医学院药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650031 中国科学院大学北京100039

整合酶是HIV基因表达和复制所必需的酶,而且宿主细胞内不存在该酶的类似物。因此,HIV-1整合酶已成为设计、筛选抗HIV药物的理想靶点。迄今为止,Raltegravir仍是唯一上市的HIV整合酶抑制剂,而且临床上也已经出现耐药问题。研发新一代整... 详细信息

整合酶是HIV基因表达和复制所必需的酶,而且宿主细胞内不存在该酶的类似物。因此,HIV-1整合酶已成为设计、筛选抗HIV药物的理想靶点。迄今为止,Raltegravir仍是唯一上市的HIV整合酶抑制剂,而且临床上也已经出现耐药问题。研发新一代整合酶抑制剂非常必要。高通量、高灵敏度、简单易行的筛选方法是研究开发新一代HIV-1整合酶抑制剂的关键。目前,HIV-1整合酶抑制剂筛选方法有多种,各有优缺点,该文将对文献报道的整合酶抑制剂体外筛选方法的最新进展做一介绍。

关键词： HIV 整合酶抑制剂酶联免疫吸附时间分辨荧光法 AlphaScreen 荧光共振能量转移表面等离子共振实时荧光定量PCR 虚拟筛选

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