检索结果-内蒙古大学图书馆

多重聚合酶链式反应偶联核酸侵入反应用于多重人类乳头状瘤病毒可视化分型检测

分析化学 2023年第7期51卷 1132-1151页

作者：梁艳华周欣洁杜熙钦徐晓筱翁吉雪马雪萍初亚男邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室东部战区总医院临床药学科南方医科大学第一临床医学院南京大学医学院生命分析化学国家重点实验室

本研究针对不同亚型人类乳头状瘤病毒（HPV）-DNA L1基因区域的序列差异设计相应的特异性扩增引物及探针，在单管多重聚合酶链式反应（PCR）扩增后偶联核酸侵入反应及纳米金探针杂交显色，结合集约化的分管检测方案判读分型检测结果，... 详细信息

本研究针对不同亚型人类乳头状瘤病毒（HPV）-DNA L1基因区域的序列差异设计相应的特异性扩增引物及探针，在单管多重聚合酶链式反应（PCR）扩增后偶联核酸侵入反应及纳米金探针杂交显色，结合集约化的分管检测方案判读分型检测结果，同时考察方法的检测灵敏度和特异性，并应用于临床宫颈拭子样本的分型检测以评价方法的临床适用性，建立了一种通过6个检测管实现15种HPV亚型可视化分型检测的方法。本方法检测灵敏度高，3种亚型（HPV56、HPV66和HPV45）检测灵敏度可达1 copy/reaction, 7种亚型（HPV73、HPV59、HPV18、HPV39、HPV6、HPV58和HPV31）检测灵敏度为10 copy/reaction, 5种亚型（HPV68、HPV35、HPV51、HPV16和HPV11）的检测灵敏度为100 copy/reaction；检测特异性好，不同亚型分型检测时无交叉反应，不相互干扰。27例实际样本的分型结果与临床采用的HPV分型检测试剂盒（PCR-反向斑点杂交法）结果一致（27/27, 100%）。所建立的HPV多重可视化分型检测方法灵敏度高、特异性好，通过分型检测管的显色结果指示具体亚型，肉眼即可判读结果，无需特殊仪器，具有应用于临床HPV分型检测的潜力，可在宫颈癌及癌前病变的早期筛查诊断中提供指导，尤其适用于资源有限地区。

关键词：人类乳头瘤状病毒可视化检测核酸侵入反应多重聚合酶链式反应纳米金探针

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基于荧光素酶生物发光检测方法的研究及其应用进展

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中国药科大学学报 2023年第4期54卷 389-398页

作者：刘琳胡婷婷王梦灵聂耀张惟杰王琛邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 南京大学生命分析化学国家重点实验室南京210093 东部战区总医院临床药学科南京210002

生物发光现象广泛存在于自然界中,不管是在陆地或是海洋都有发光生物的踪迹。其中基于荧光素酶的生物发光系统被广泛研究,启发着人类在基因、表观遗传等方面进行探索,并且开发出一系列相关的检测方法,用于体内体外各方面研究。本文从生... 详细信息

生物发光现象广泛存在于自然界中,不管是在陆地或是海洋都有发光生物的踪迹。其中基于荧光素酶的生物发光系统被广泛研究,启发着人类在基因、表观遗传等方面进行探索,并且开发出一系列相关的检测方法,用于体内体外各方面研究。本文从生物发光系统、荧光素酶的种类以及荧光素酶生物发光检测方法的开发与应用这几个方面进行总结,简要概括近年来基于荧光素酶生物发光检测的研究进展。

关键词：生物发光反应荧光素荧光素酶检测方法进展

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新一代基因编辑工具研究进展

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中国药科大学学报 2022年第6期53卷 633-642页

作者：王瑞周欣洁杜熙钦郝翟王琛邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 南京大学生命分析化学国家重点实验室南京210093 东部战区总医院临床药学科南京210002

目前,以核酸酶为主要成分的基因编辑工具已经成功实现可编程地对哺乳动物基因组进行靶向突变或插入删除,从锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活子样效应子核酸酶(TALENs)、CRISPR/Cas系统发展到更安全更精准的Cas9融合蛋白基因编辑工具和其他核... 详细信息

目前,以核酸酶为主要成分的基因编辑工具已经成功实现可编程地对哺乳动物基因组进行靶向突变或插入删除,从锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活子样效应子核酸酶(TALENs)、CRISPR/Cas系统发展到更安全更精准的Cas9融合蛋白基因编辑工具和其他核酸酶基因编辑工具,本文系统阐述了基因编辑的发展演进历程、介绍了新一代基因编辑工具的开发与优化,针对基因编辑工具的临床应用与面临的挑战进行了展望。

关键词：基因编辑 CRISPR/Cas9 碱基编辑先导编辑 DNA双链断裂进展

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基于机器学习方法构建骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤排泄延迟预测模型

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中国医院药学杂志 2025年第8期45卷 908-913页

作者：史可睿尹琼张晏洁齐谢敏武海萍邹秉杰周国华南方医科大学药学院广东广州510515 东部战区总医院临床药学科江苏南京210002 南京大学生命分析化学国家重点实验室江苏南京210093 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室江苏南京210009

目的:基于机器学习方法构建骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤(high-dose methotrexate,HD-MTX)排泄延迟预测模型,并探索其相关危险因素。方法:回顾性收集2018年6月至2023年8月在东部战区总医院接受HD-MTX治疗并符合本研究纳入标准的80名骨肉瘤... 详细信息

目的:基于机器学习方法构建骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤(high-dose methotrexate,HD-MTX)排泄延迟预测模型,并探索其相关危险因素。方法:回顾性收集2018年6月至2023年8月在东部战区总医院接受HD-MTX治疗并符合本研究纳入标准的80名骨肉瘤患者共255个周期数据。采用最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)方法来筛选排泄延迟相关的患者特征,分别通过6种机器学习算法构建预测模型,并使用AUC、准确率、精确率等多个指标评估模型的性能。结果:LASSO回归分析确定了10个预测特征指标,包括肌酐清除率(creatinine clearance,CrCl)、给药剂量、ALT、BMI、输注速率、水化值、MTHFR C677T基因多态性、性别、年龄、双膦酸盐合并用药情况。比较6种机器学习算法建立的模型性能指标,其中随机森林模型的预测能力最强[AUC为0.95,平均精确度(AP)0.79,准确率89.61%,精确率83.33%,召回率41.67%,F1值55.56%]。结论:采用随机森林法建立的HD-MTX排泄延迟预测模型可提高临床使用HDMTX患者的用药安全性,预防相关药物不良事件的发生。

关键词：甲氨蝶呤骨肉瘤机器学习预测模型排泄延迟危险因素

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用于新型冠状病毒核酸检测的即时检测方法研究进展

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中国药科大学学报 2020年第6期51卷 635-645页

作者：鲍瑶菲薛茜茹武海萍邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 东部战区总医院临床药学科南京210002 南方医科大学药学院广州510515

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)在全世界范围内快速传播,截至2020年9月30日全球感染人数已达3300万人,造成100多万人死亡,给公众的生命健康造成严重威胁。基于实验室的标准化核... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)在全世界范围内快速传播,截至2020年9月30日全球感染人数已达3300万人,造成100多万人死亡,给公众的生命健康造成严重威胁。基于实验室的标准化核酸检测方法周转时间长、成本高,因此急需开发便捷检测新冠病毒的方法,实现在资源有限的情况下快速测试以及时控制疫情。本文从提取、扩增、检测3个方面总结了针对新型冠状病毒所开发的核酸即时检测方法(point-ofcare testing,POCT),并对整合了这3个步骤的商业化即时检测装置进行简要介绍,以期为COVID-19及其他新兴传染病的紧急应对和快速部署提供参考。

关键词：新型冠状病毒核酸检测即时检测进展

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玻璃化技术及其应用研究进展

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药物生物技术 2021年第3期28卷 284-290页

作者：邢思熙梁硕徐晓筱邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室江苏南京210009 中国人民解放军东部战区总医院临床药学科江苏南京210002 南方医科大学药学院广东广州510515

近年来关于玻璃化技术的介绍局限于辅助生殖领域,其在多门学科中的发展及应用未有阐述,文章将结合有关玻璃化技术的研究性论文等成果,讲述此技术的特点与应用,并为相关制品能够用于低成本的室温储存提供思路。玻璃化技术是将物质转变为... 详细信息

近年来关于玻璃化技术的介绍局限于辅助生殖领域,其在多门学科中的发展及应用未有阐述,文章将结合有关玻璃化技术的研究性论文等成果,讲述此技术的特点与应用,并为相关制品能够用于低成本的室温储存提供思路。玻璃化技术是将物质转变为玻璃样无定形体的过程,玻璃化制品的分子几乎无运动与扩散,这避免了受扩散控制的不良反应的发生,提高了生物制品的储存稳定性。文章对应用于各领域的玻璃化技术研究成果进行介绍。对于玻璃化制品,储存温度的要求低于或等于玻璃化转变温度,若将制品的玻璃化转变温度提高至室温以上时,则有望将制品于室温下稳定储存,这对于依靠冷链、储存期短、易失活的产品来说极大地改善了它们的存放条件,对降低生物制品到资源有限地区的运输条件方面也提供了新思路。文章对玻璃化技术及其特点进行了介绍,探讨了影响玻璃化技术的因素主要有冷冻保护剂的种类,玻璃化过程中降温速率、复温时升温速率,玻璃化载体等方面,并且在生物药物、辅助生殖、食品领域的应用进行了阐述和展望。玻璃化技术长时间以来应用广泛,对影响玻璃化过程的因素进行优化,可获得多种便于运输的玻璃态生物制品,且玻璃化技术有望用于生物制品的室温储存,有着十分良好的应用前景。

关键词：玻璃化技术冷冻保护剂降温速率生物药物酶类辅助生殖玻璃化保存

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Taq DNA聚合酶及Flap核酸内切酶的玻璃化室温储存方法研究

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药物生物技术 2020年第6期27卷 495-500页

作者：邢思熙阚俊虎王润元王启扉盛楠邹秉杰宋沁馨周国华中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室江苏南京210009 东部战区总医院临床药学科江苏南京210002 南方医科大学药学院广东广州510515

研究对商品化的Taq DNA聚合酶及自表达的重组Flap核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)进行玻璃化的方法,实现室温(25℃)条件下储存的目的。对购置的商品化的Taq DNA聚合酶使用海藻糖作为赋形剂,对实验室自表达的FEN1使用海藻糖及普... 详细信息

研究对商品化的Taq DNA聚合酶及自表达的重组Flap核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)进行玻璃化的方法,实现室温(25℃)条件下储存的目的。对购置的商品化的Taq DNA聚合酶使用海藻糖作为赋形剂,对实验室自表达的FEN1使用海藻糖及普鲁兰糖作为赋形剂,采用快速降温以及真空冷冻干燥除水的方法进行玻璃化制备。产品外部放置干燥剂并密封于室温条件下存放,分别对两种玻璃化酶进行时间储存稳定性的考察,对Taq DNA聚合酶采用考察扩增效率与扩增灵敏度的方式表征酶活,对FEN1采用已建立的方法测定酶活性的绝对数值。采用玻璃化产品相对对照品随时间变化有无显著性差异来预计储存时间。时间稳定性考察说明玻璃化Taq DNA聚合酶在室温下可稳定储存至少6个月,其相对于按照说明书中-30℃存放的对照品酶的扩增灵敏度在0 d至第6个月无显著性差异(P>0.05),1年出现后延产生显著性差异(P<0.01)。玻璃化FEN1在室温下可稳定储存至少1个月,其相对于-30℃存放的对照品酶,活性比值在0 d至30 d无显著性差异(P>0.05),第2个月出现下降(P<0.01)。本文建立的方法成功制备了两种玻璃化酶,可用于室温下储存较长时间,便于运输和使用。

关键词： Taq DNA聚合酶重组Flap核酸内切酶1 玻璃化赋形剂室温储存稳定性考察

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皮肤中转运蛋白对药物透皮吸收的作用

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医药导报 2018年第7期37卷 794-799页

作者：金琪雯张峻颖吴春勇康立峰中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国药科大学药物分析系南京210009 中国药科大学中药制剂教研室南京211198 悉尼大学药学院

经皮给药是临床避免药物首关效应、提高生物利用度的有效方法,具有口服和注射给药不可替代的优点。皮肤存在一系列转运蛋白,会影响药物的透皮吸收。研究皮肤中转运蛋白的分布、功能以及表达的调节对经皮给药和化妆品的研发具有重要意义... 详细信息

经皮给药是临床避免药物首关效应、提高生物利用度的有效方法,具有口服和注射给药不可替代的优点。皮肤存在一系列转运蛋白,会影响药物的透皮吸收。研究皮肤中转运蛋白的分布、功能以及表达的调节对经皮给药和化妆品的研发具有重要意义。人类转运蛋白可分为ATP结合盒(ABC)转运蛋白和溶质转运体(SLC)。这两种类型的转运蛋白在皮肤中均有表达,影响药物透皮吸收。该文综述皮肤各种转运蛋白的表达及其在经皮给药中的作用。

关键词：经皮给药皮肤转运蛋白

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大黄酸通过非活性氧依赖性内质网应激通路诱导L-02细胞凋亡

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中国药科大学学报 2016年第2期47卷 215-221页

作者：王丹丹阿罗那毛勇于锋中国药科大学临床药学教研室药物质量与安全预警教育部重点实验室南京211198

研究大黄酸对人正常肝细胞L-02的凋亡作用及探讨其机制。应用MTT法评价大黄酸对L-02细胞的活性抑制作用;流式细胞术检测大黄酸诱导L-02细胞的凋亡;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot... 详细信息

研究大黄酸对人正常肝细胞L-02的凋亡作用及探讨其机制。应用MTT法评价大黄酸对L-02细胞的活性抑制作用;流式细胞术检测大黄酸诱导L-02细胞的凋亡;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot技术检测细胞内质网应激相关基因和蛋白的表达变化;并探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网应激蛋白及caspase-4、caspase-3的影响。实验结果显示:大黄酸能够呈剂量和时间依赖性抑制L-02细胞活性,增加L-02细胞凋亡率;诱导细胞ROS水平增高,NAC预给药可显著降低其水平;大黄酸能显著上调L-02细胞内的葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、活化转录因子4(ATF-4)和C/EBP同源蛋白(CHOP)基因的mRNA水平;显著增加GRP 78,磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),CHOP蛋白表达;NAC不能抑制大黄酸诱导的GRP 78,p-JNK,CHOP蛋白表达上调,亦不能抑制大黄酸诱导的caspase-4及caspase-3活性增加。表明大黄酸能够诱导L-02细胞凋亡,其作用机制与非活性氧依赖性的内质网应激通路有关。

关键词：大黄酸 L-02细胞细胞凋亡内质网应激活性氧

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新加坡国立大学和中国药科大学药物分析本科教学的比较

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医药导报 2017年第5期36卷 468-472页

作者：吴春勇柳文媛肖莹何志磊康立峰中国药科大学药物分析系南京210009 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国药科大学分析化学教研室南京210009 新加坡国立大学药学系新加坡117543

对新加坡国立大学和中国药科大学本科药学专业的药物分析课程进行比较性研究,从课程设置、教学方式、评价模式和实验教学等方面进行概述,为药物分析的教学改革和课程建设提供参考。

关键词：药物分析本科教学新加坡国立大学中国药科大学

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