检索结果-内蒙古大学图书馆

园艺学报 2025年第1期52卷 123-135页

作者：张子鑫陈淑婷周伟欣张意涵鲁倩李中义吴昕扬徐沛中国计量大学生命科学学院浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室杭州310018

2022年10—11月,在浙江省杭州市钱塘区观察到疑似病毒侵染的菜豆植株,病毒组测序和PCR技术检测出豇豆轻斑驳病毒(cowpea mild mottle virus,CPMMV)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和紫云英矮缩病毒(milk vetch dwarf virus,M... 详细信息

2022年10—11月,在浙江省杭州市钱塘区观察到疑似病毒侵染的菜豆植株,病毒组测序和PCR技术检测出豇豆轻斑驳病毒(cowpea mild mottle virus,CPMMV)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和紫云英矮缩病毒(milk vetch dwarf virus,MDV),并将CPMMV命名为CPMMV-ZJ(GenBank:OR667247)。利用病毒鉴定、全基因组序列扩增、系统发育分析及亚细胞定位等方法,明确了CPMMV-ZJ的全基因组序列特征、病毒演化及其病毒三联蛋白(triple gene block protein,TGB)的亚细胞定位。结果表明,CPMMV-ZJ的基因组全长为8226 bp,包含6个开放阅读框。3′和5′区域分别有1个147 bp和75 bp的非编码区(untranslated regions,UTR)。序列分析结果表明,CPMMV浙江分离物与CPMMV安徽分离物的全基因组序列一致性最高(98.03%),并与国内分离物共同聚类在一个小分支上,但与国外分离物(美国、印度、巴西等地)序列一致性较低(63.71%~82.49%),提示病毒变异与地理因素密切相关。对浙江分离物与江苏分离物TGB蛋白的亚细胞定位比较分析发现,二者无明显差异,但TGB2浙江分离物在叶片中的表达导致明显的叶绿体核周聚集现象,推测与植物防御反应有关。

关键词：菜豆豇豆轻斑驳病毒序列分析亚细胞定位叶绿体核周聚集

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电化学促进的甘氨酸衍生物酯交换反应

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有机化学 2025年第4期 1360-1368页

作者：尤晓琴黄克金庄诗怡刘晨江金伟伟中国计量大学生命科学学院浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室新疆大学化学学院

报道了一例电化学促进的甘氨酸衍生物的酯交换反应.在未分隔的电解池中,以溴化钠作为电解质、廉价易得的镍板与石墨板作为电极材料,甘氨酸衍生物能够与醇类溶剂发生酯交换反应,进一步合成结构更加多样化的甘氨酸酯衍生物,收率最高可达8... 详细信息

报道了一例电化学促进的甘氨酸衍生物的酯交换反应.在未分隔的电解池中,以溴化钠作为电解质、廉价易得的镍板与石墨板作为电极材料,甘氨酸衍生物能够与醇类溶剂发生酯交换反应,进一步合成结构更加多样化的甘氨酸酯衍生物,收率最高可达88%.该反应条件温和,无需过渡金属、酸和碱等催化剂参与,符合绿色化学理念.此外,在克级规模实验中,该反应可获得1.32 g酯交换产物,表明其在有机电合成领域具有潜在的应用价值.

关键词：电化学甘氨酸衍生物酯交换反应

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乳鸽早期肠道发育及其营养调控研究进展

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中国畜牧杂志 2025年第4期61卷 13-22页

作者：凌天量吕梦绮徐倩倩中国计量大学生命科学学院食品营养与质量安全研究所特色农产品品质与危害物控制技术浙江省重点实验室浙江杭州310018

乳鸽是优质特色畜产品的重要代表,人们对乳鸽的需求逐年增加。促进乳鸽健康生长是提高肉鸽养殖业经济效益的关键,而肠道发育是决定乳鸽生长的重要因素。本文介绍了乳鸽早期肠道发育的特点,包括形态发育、功能发育以及肠道菌群的演变,综... 详细信息

乳鸽是优质特色畜产品的重要代表,人们对乳鸽的需求逐年增加。促进乳鸽健康生长是提高肉鸽养殖业经济效益的关键,而肠道发育是决定乳鸽生长的重要因素。本文介绍了乳鸽早期肠道发育的特点,包括形态发育、功能发育以及肠道菌群的演变,综述了通过胚蛋给养、母源饲粮补给和人工鸽乳优化等方式营养调控乳鸽肠道发育的研究进展,为营养调控乳鸽早期肠道健康以促进其快速生长提供理论依据,从而实现肉鸽养殖业的高效发展。

关键词：乳鸽营养调控胚蛋给养母源饲粮补给人工鸽乳

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基于RPA-LFD法的多黏菌素耐药基因mcr-1可视化快速检测方法建立与应用

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食品工业科技 2023年第18期44卷 209-216页

作者：焦雪董羽织王靖雯吕晨泽方结红蒋晗中国计量大学生命科学学院浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室浙江杭州310018

目的:建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法,为其基层检测的展开提供依据和便利。方法:利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flo... 详细信息

目的:建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法,为其基层检测的展开提供依据和便利。方法:利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick,RPA-LFD),辅以手持式胶体金读数仪;根据mcr-1基因保守序列设计合成一对特异性RPA引物,通过对反应条件和体系的优化,以及特异性试验、灵敏度试验、模拟食样试验和实际样品试验,成功建立了可视化定量检测细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD方法。结果:在引物浓度400 nmol/L,引物比例1:1时,该方法最佳反应条件为Mg^(2+)浓度14.0 mmol/L,反应温度37℃,反应时间20 min;灵敏度好,标准曲线方程为y=0.117x+0.051,定量限为10^(1)~108 copies/μL,检出限为10^(1)copies/μL,比PCR法低一个数量级且模拟样品检出结果与PCR法一致。利用建立的RPA-LFD法对猪肉样品、鸡肉样品、生猪养殖场环境样品、肉鸡养殖场环境样品、大肠杆菌分离株和弯曲肠杆菌分离株各15份中多黏菌素耐药基因mcr-1携带情况进行分析;RPA-LFD法与常规PCR法阳性样本检出率一致,共检出9份mcr-1基因阳性样品。RPA-LFD定量分析显示,阳性样品中mcr-1基因浓度在4.5×10^(2)~8.6×10^(4)copies/μL之间。结论:本研究建立的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD检测法特异性强、灵敏性高、操作简单,可广泛应用于基层检验。

关键词：多黏菌素耐药基因 mcr-1 重组酶聚合酶扩增技术胶体金侧向流试纸条快速检测可视化定量

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电子束辐照对鲈鱼小清蛋白生化性质及抗原性的影响

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核农学报 2023年第11期37卷 2196-2205页

作者：洪天畅朱恒杏邵孟茹潘家荣中国计量大学生命科学学院浙江省特色农产品品质与危害物控制技术重点实验室浙江杭州310018

为研究辐照对鲈鱼过敏原生化性质、抗原性及二级结构的影响,本试验采用0、3、5、7、9 kGy剂量电子束辐照鲈鱼小清蛋白溶液及冻干粉,测定其浓度、浊度、疏水性、分子量和抗原性的变化,以及二级结构的含量。结果表明,随着辐照剂量增大,小... 详细信息

为研究辐照对鲈鱼过敏原生化性质、抗原性及二级结构的影响,本试验采用0、3、5、7、9 kGy剂量电子束辐照鲈鱼小清蛋白溶液及冻干粉,测定其浓度、浊度、疏水性、分子量和抗原性的变化,以及二级结构的含量。结果表明,随着辐照剂量增大,小清蛋白冻干粉及溶液的浓度降低,疏水性提高,浊度增加,过敏条带变浅,免疫印迹条带变浅,小清蛋白与抗体的结合能力减弱,抗原性降低;α-螺旋及无规则卷曲比例升高,β-折叠及β-转角变化不明显,二级结构被破坏。综上,电子束辐照使小清蛋白生化性质及结构发生了变化,有效降低了小清蛋白的抗原性,同时发现液态小清蛋白较固态对辐照更敏感。本研究结果为鲈鱼及其制品辐照消敏研究提供了理论依据。

关键词：鲈鱼小清蛋白辐照生化性质抗原性

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开化龙顶绿茶对高脂小鼠肝脂肪变性AMPK信号通路和肠道菌群的影响

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中国食品学报 2024年第7期24卷 157-171页

作者：张一帆袁懿炜徐倩倩龚明秀叶江成赵进马崭阳中国计量大学生命科学学院食品营养与质量安全研究所杭州310018 特色农产品品质与危害物控制技术浙江省重点实验室杭州310018

目的:探究开化龙顶绿茶水提物对高脂饮食小鼠肝脂肪变性AMPK信号通路和肠道菌群紊乱的干预效果。方法:检测开化龙顶绿茶加工环节茶样主要功能成分动态变化趋势。适应性饲养30只小鼠1周后,随机将其分为正常组、高脂组和龙顶绿茶组,各10只... 详细信息

目的:探究开化龙顶绿茶水提物对高脂饮食小鼠肝脂肪变性AMPK信号通路和肠道菌群紊乱的干预效果。方法:检测开化龙顶绿茶加工环节茶样主要功能成分动态变化趋势。适应性饲养30只小鼠1周后,随机将其分为正常组、高脂组和龙顶绿茶组,各10只,连续口服灌胃8周(正常组和高脂组灌胃生理盐水,龙顶绿茶组灌胃300 mg/kg bw的茶汤水提物),记录并分析小鼠体质量、Lee's指数、血糖水平、血脂、肝组织病理切片、肝组织AMPK信号通路和肠道菌群的变化。结果:在加工过程中,开化龙顶绿茶的主要功能成分均发生一定程度改变。与鲜叶相比,提香中茶多酚、游离氨基酸、咖啡碱和水分的含量分别降低了7.90%,6.20%,0.47%以及71.05 g/100 g,而可溶性糖和水浸出物的含量分别升高了0.01%和0.10%;与高脂组相比,龙顶绿茶组小鼠的体质量为26.67 g,Lee's指数为3.13,血糖曲线下面积为1505.25 mmol·min/L,血清生化指标如总胆固醇(TC)和总甘油三酯(TG)的含量分别为4.23 mmol/L和0.76 mmol/L,均表现出明显差异(P<0.05)。并且,开化龙顶绿茶水提物还能显著降低肝组织AMPK信号通路基因转录和蛋白表达水平(P<0.05);开化龙顶绿茶水提物可显著降低高脂小鼠肠道菌群中厚壁菌门与拟杆菌门的比值(P<0.05),并增加理研菌科、布劳特氏菌属和另枝菌属等有益菌种的相对丰度。结论:开化龙顶绿茶水提物干预高脂饮食小鼠肝脂肪变性AMPK信号通路和肠道菌群紊乱的效果明显。

关键词：开化龙顶绿茶高脂饮食肝脂肪变性 AMPK信号通路肠道菌群紊乱

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基于拉曼光谱结合CNN-LSTM深度学习方法的铁皮石斛总黄酮含量快速检测研究

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光谱学与光谱分析 2024年第4期44卷 1018-1024页

作者：刘宗溢张彩虹蒋健康沈斌国丁艳菲张雷蕾朱诚中国计量大学生命科学学院浙江杭州310018 浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室浙江杭州310018 浙江凤凰源生物科技股份有限公司浙江台州318000

铁皮石斛具有很高的商业价值和营养价值,将云南文山、广西金秀、安徽霍山、浙江台州四个产地共130个样品作为研究样本,在785 nm激光下利用便携式拉曼光谱仪获得了铁皮石斛拉曼光谱,采用NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH比色法测定铁皮石斛... 详细信息

铁皮石斛具有很高的商业价值和营养价值,将云南文山、广西金秀、安徽霍山、浙江台州四个产地共130个样品作为研究样本,在785 nm激光下利用便携式拉曼光谱仪获得了铁皮石斛拉曼光谱,采用NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)-NaOH比色法测定铁皮石斛总黄酮含量。以每条经过归一化后的拉曼光谱数据作为输入,利用Savitzky-Golay卷积平滑(SG平滑)、标准正态变量变换(SNV)、多元散射校正(MSC)等不同预处理方法对光谱数据进行处理,以偏最小二乘(PLS)、支持向量机(SVM)和卷积神经网络-长短期记忆神经网络(CNN-LSTM)模型作为比较,竞争自适应重加权采样(CARS)作为波长选择方法,对不同的机器学习模型进行比较研究。采用以下预测质量指标:校正集、测试集相关系数(R_(c)、R_(p)),校正集、测试集均方根误差(RMSEC、RMSEP),评价铁皮石斛总黄酮含量预测模型的性能。结果表明:光谱在经过SNV预处理之后,CNN-LSTM方法预测铁皮石斛总黄酮含量准确率最高,R_(c)、R_(p)分别为0.983和0.964,RMSEC、RMSEP分别为0.032和0.047 mg·g^(-1)。结合拉曼光谱建立的SNV-CNN-LSTM深度学习模型准确可靠,具有很强的鲁棒性,优于传统的机器学习模型(PLS、SVM)。利用拉曼光谱结合CNN-LSTM模型对铁皮石斛总黄酮含量进行预测,克服了传统的理化鉴别法的缺陷,具有快速无损的特点。该方法能对铁皮石斛的品质进行区分,并加快药食同源植物市场铁皮石斛产业化,构建自主品牌并增加其影响力,同时此项技术也可应用于消费者和市场监管部门。

关键词：铁皮石斛拉曼光谱卷积神经网络-长短期记忆神经网络总黄酮含量快速检测

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硼促进甘氨酸衍生物的电化学C(sp^(2))—H溴化反应

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有机化学 2024年第3期44卷 989-996页

作者：黄克金蔡金博王瑞革张永红王斌夏昱金伟伟李新勇刘晨江新疆大学化学学院乌鲁木齐830017 中国计量大学生命科学学院、浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室杭州310018 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司天津300457

报道了一种室温条件下甘氨酸衍生物的电化学芳烃C(sp^(2))—H键溴化方法.在温和反应条件下,以四丁基溴化铵或四丁基三溴化铵为溴源和电解质,顺利地合成了一系列C(sp^(2))—H键溴化的甘氨酰胺、甘氨酸酯和二肽类化合物,收率最高可达95%.... 详细信息

报道了一种室温条件下甘氨酸衍生物的电化学芳烃C(sp^(2))—H键溴化方法.在温和反应条件下,以四丁基溴化铵或四丁基三溴化铵为溴源和电解质,顺利地合成了一系列C(sp^(2))—H键溴化的甘氨酰胺、甘氨酸酯和二肽类化合物,收率最高可达95%.与传统方法相比,该方法具有底物范围广泛、官能团兼容性好、操作方便、无需外加氧化剂和金属催化剂等特点,更加符合绿色化学和环境保护的要求.

关键词：甘氨酸衍生物有机电合成 C—H活化溴化反应

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拟南芥色氨酸氨基转移酶1的原核表达、纯化及活性分析

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农业生物技术学报 2022年第11期30卷 2119-2127页

作者：李小芳方萍萍王卓毅徐沛中国计量大学生命科学学院/浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室

表达获得有活性的纯化蛋白是开展蛋白特异性抑制剂筛选的前提。本研究对拟南芥色氨酸氨基转移酶1 (tryptophan aminotransferase of Arabidopsis 1, TAA1)进行了原核表达、纯化及活性分析。首先，通过GenBank查找拟南芥TAA1蛋白编码序... 详细信息

表达获得有活性的纯化蛋白是开展蛋白特异性抑制剂筛选的前提。本研究对拟南芥色氨酸氨基转移酶1 (tryptophan aminotransferase of Arabidopsis 1, TAA1)进行了原核表达、纯化及活性分析。首先，通过GenBank查找拟南芥TAA1蛋白编码序列，根据大肠杆菌(Escherichia coli)密码子偏好性进行优化后，将目的序列合成并插入带有His标签的原核表达载体pET24a中，构建原核表达载体pET24a-GST-EKHis-TAA1。转化大肠杆菌BL21(DE3)后，分别给予不同诱导方式(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-thiogalactoside, IPTG)诱导/TB培养基, IPTG诱导/LB培养基,自诱导)进行诱导和培养，诱导产物经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定，发现利用自诱导表达系统、37℃条件下诱导表达16 h表达量最高，并且表达的融合蛋白主要为可溶性形式。选取此最优的表达方式进行放大表达和纯化，得到的融合蛋白经肠激酶(enterokinase, EK)酶解后进行镍离子亲和层柱纯化，最终得到大小正确的单一蛋白条带，纯度达78.7%，蛋白量达0.5 mg，说明His-TAA1蛋白被成功表达并纯化回收。体外酶活检测证明此蛋白具有转氨酶活性。该融合蛋白可用于下一步基于分子互作的TAA1蛋白特异性结合小分子化合物的筛选。

关键词：拟南芥色氨酸氨基转移酶1 (TAA1) 密码子优化原核表达蛋白纯化

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水稻TFⅡB相关因子OsBRF1的功能探析

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农业生物技术学报 2024年第8期32卷 1729-1741页

作者：陈歆惠陈广娜宁鹤陈家洛王思怡朱诚杨素中国计量大学生命科学学院/浙江省特色农产品品质及危害物控制技术重点实验室

在大多数真核细胞中，TFⅡB (transcription factorⅡB)是DNA转录合成RNA过程中RNA聚合酶Ⅱ的通用转录因子。TFⅡB相关因子(TFⅡB-related factor 1, BRF1)是RNA聚合酶Ⅲ的通用转录因子，负责合成tRNA和5S rRNA。拟南芥(Arabidopsis thaliana)中AtBRF1和AtBRF2以功能冗余的方式参与生殖生长。作为重要粮食作物及单子叶模式植物，水稻(Oryza sativa)中BRF1基因的功能尚未见报道。本研究构建了OsBRF1基因启动子驱动的β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase, GUS)表达载体，GUS染色结果显示，OsBRF1在根、叶、叶鞘、柱头、成熟根、成熟叶、圆锥花序、花粉、胚乳和花药中均有较高表达，在颖壳中不表达。将OsBRF1与GFP的融合表达载体经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转入本氏烟草(Nicotiana benthamiana)叶片，发现OsBRF1蛋白主要定位于细胞核。利用CRISPR/Cas9基因编辑手段无法获得纯合移码突变植株，表明OsBRF1基因纯合致死；进一步利用RNAi植株进行表型观察，发现OsBRF1的RNAi植株花粉活性和结实率显著下降(P<0.05)，表明该基因可能通过调控花粉活性而影响水稻结实率。酵母双杂交和双分子荧光互补结果显示，OsBRF1与OsTBP1～3 (TBP:TATA结合蛋白,TATA-binding protein)存在蛋白互作，表明其可能仍然作为通用转录因子行使重要功能。本研究为深入探究OsBRF1基因功能及调控机制提供基础资料。

关键词：水稻 TFⅡB(transcription factorⅡB)家族表达分析功能分析蛋白互作

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