检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2003年第4期21卷 276-278页

作者：曲梅阚飙祁国明刘延清北京大学生育健康研究所中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

到目前为止,已发生的7次霍乱世界大流行,都是由O1群霍乱弧菌引起的.1992年在印度、孟加拉等国引起暴发流行的O139群霍乱弧菌,是一种新出现的由非O1群霍乱弧菌引起的霍乱流行的病原体,能产生与O1群霍乱弧菌相同的霍乱毒素(CT),其所引起... 详细信息

到目前为止,已发生的7次霍乱世界大流行,都是由O1群霍乱弧菌引起的.1992年在印度、孟加拉等国引起暴发流行的O139群霍乱弧菌,是一种新出现的由非O1群霍乱弧菌引起的霍乱流行的病原体,能产生与O1群霍乱弧菌相同的霍乱毒素(CT),其所引起的霍乱在临床和流行病学上也与O1群所致的霍乱基本相同.近年来研究表明，与O1群霍乱弧菌相比，O139群霍乱弧菌具有独特的表型及分子特征。

关键词：霍乱毒素 O139群霍乱弧菌 CTX遗传单元基因分布特征

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黄连素和6种抗生素对大肠杆菌O157∶H7中国分离株产生志贺毒素的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第2期22卷 218-221页

作者：范光伟徐建国中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含... 详细信息

目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含量。结果　将大肠杆菌O15 7∶H7在环丙沙星、氨苄西林、庆大霉素、链霉素、青霉素、红霉素的亚抑制浓度中培养后 ,可增加大肠杆菌O15 7∶H7对Vero细胞的毒性 ,但不同菌株有差异。环丙沙星对大肠杆菌O15 7∶H7的最小抑制浓度很低 ,但其对Vero细胞毒性作用 ,随着药浓度的降低而增高。黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7没有抑制作用。和抗生素相比 ,黄连素对大肠杆菌O15 7∶H7产生和释放志贺毒素比较小。结论　黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7的生长抑制作用不明显 ,其刺激大肠杆菌O15

关键词：大肠杆菌O157:H7 志贺毒素抗生素黄连素出血性肠炎

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一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第1期22卷 1-5页

作者：邓训安高守一刘延清祁国明中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

目的　探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构。方法　从O139群霍乱弧菌菌株FJ9712 9上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,并进行电镜观察。从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA ,并进行链型分析。对pCTAK进行酶谱分析。... 详细信息

目的　探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构。方法　从O139群霍乱弧菌菌株FJ9712 9上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,并进行电镜观察。从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA ,并进行链型分析。对pCTAK进行酶谱分析。用ctxAB、zot引物对pCTAK进行PCR扩增检测 ,用RS1探针对pCTAK进行Southernblot检测 ;用pCTAK转化DH5α和IEM10 1得到DX2 9和 432 9,将pCTAK克隆于pUC18载体并转入DH5α得到UD2 9,用GM1 ELISA检测DX2 9、432 9、UD2 9的CT表达。对pCTAK的ctxAB、zot基因片段进行测序 ,并用DNASTAR软件和BLAST算法 ,在国际互联网上对测序结果进行序列分析。结果　发现和分离了一种编码霍乱毒素的质粒pCTAK ,它以稳定的高拷贝数存在于 1株天然的O139霍乱弧菌FJ9712 9中 ;酶谱分析发现其明显不同于CTX元件酶谱 ,在CTX元件中相当保守的酶切位点 :BglⅡ、EcoRⅤ、PstⅠ、EcoRⅠ ,在pCTAK中没有切点。ctxAB、zot引物对pCTAK的PCR扩增检测呈阳性 ,RS1探针杂交呈阳性 ;pCTAK的ctxAB、zot基因序列与已报道的序列有很高的同源性。pCTAK能直接或经载体转化DH5α和IEM10 1并表达CT。从FJ9712 9培养上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ ,电镜观察并计算其直径大小为 7nm左右。其全基因组大小为 8.5kb ,为?

关键词：霍乱弧菌霍乱毒素 CTX元素丝状噬菌体编码霍乱毒素细菌学

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O139霍乱弧菌CTAKΦ的基因水平转移的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第1期22卷 6-9页

作者：邓训安高守一刘延清祁国明中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

目的　探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移。方法　用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌 ,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况。在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的... 详细信息

目的　探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移。方法　用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌 ,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况。在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的方法 ,检查供体菌将CTAKΦ的ARKR抗性转移给受体菌的能力。结果　供体菌FJ9712 9、DX2 9能通过多种转移方式 ,以很高的频率将CTAKΦ的ARKR 抗性转移给受体菌HK42、XJ93172、GD3188、776 3、5 6 9B和 940 0 1;而受体菌IEM10 1对CTAKΦ有一定的抗感染能力。

关键词：霍乱弧菌霍乱霉素丝状噬菌体基因水平转移细菌学

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霍乱弧菌不携带毒素基因的溶原性噬菌体nct-CTXΦ基因组RS区具有复制与整合功能

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第4期22卷 435-438页

作者：阚飙刘延清祁国明章丽娟高守一中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

目的　研究霍乱弧菌中不携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌CTXΦ基因组 (nct CTXclassΦ)的RS区的复制与整合功能。方法　将这种噬菌体基因组的RS区克隆到不能在霍乱弧菌中复制的自杀质粒载体中 ,经接合转入含CTXΦ的整合位点attRS、但不含... 详细信息

目的　研究霍乱弧菌中不携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌CTXΦ基因组 (nct CTXclassΦ)的RS区的复制与整合功能。方法　将这种噬菌体基因组的RS区克隆到不能在霍乱弧菌中复制的自杀质粒载体中 ,经接合转入含CTXΦ的整合位点attRS、但不含CTXΦ基因组的O1群ElTor型和O139群菌株中 ,分析含RS的重组自杀质粒在这些被接合菌株中的存在形式。结果　克隆了RS区的重组自杀质粒高频接合入受体菌中 ,在这些被接合菌株中既发生了染色体整合 ,同时又以质粒的形式存在于菌细胞内。结论　霍乱弧菌不携带霍乱毒素基因的CTXΦ基因组的RS区仍具有整合与质粒复制功能 ,可介导该基因组的复制与染色体整合。

关键词：霍乱弧菌 CTXΦ基因溶原性噬菌体染色体整合质粒复制霍乱发病机制

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不携带霍乱毒素基因的CTXΦ类前噬菌体基因组克隆与分析

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微生物学报 2002年第5期42卷 573-581页

作者：阚飙刘延清祁国明章丽娟高守一中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

霍乱弧菌的霍乱毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码 ,由此携带毒素基因在产毒株与非产毒株间水平转移。从无ctxAB的ElTor型菌株中 ,发现不同时间、地点来源的部分菌株仍带有CTXΦ基因组的其它基因 ,在研究菌株染色体上呈双拷贝串... 详细信息

霍乱弧菌的霍乱毒素基因ctxAB由其溶原性噬菌体CTXΦ编码 ,由此携带毒素基因在产毒株与非产毒株间水平转移。从无ctxAB的ElTor型菌株中 ,发现不同时间、地点来源的部分菌株仍带有CTXΦ基因组的其它基因 ,在研究菌株染色体上呈双拷贝串联排列。克隆后测序发现基因组全长 5 70 8bp ,其抑制基因rstR却与古典型菌株来源CTXΦ的相同 ,因此从E1Tor菌株中发现整合有古典型来源的这类噬菌体。其它各基因与CTXΦ序列基本一致 ,但nct CTXΦ的zot基因末端及下游间隔区与CTXΦ的相差很大 ,进一步的序列测定与比较表明nct CTXΦ中无ctxAB应是其固有结构 ,而不是ctxAB丢失所形成的。将这种独特的前噬菌体命名为nct CTXclassΦ。研究菌株染色体上nct CTXΦ基因组上下游也各存在TLC因子和RTX毒力基因簇的同源序列 ,揭示它们与nct CTXΦ基因组有与CTXΦ相同的联系。从序列分析上认为nct CTXΦ与CTXΦ在遗传分化上有不同 ,可能是CTXΦ的前体形式 ,这对CTXΦ的来源。

关键词：霍乱毒素基因 CTXφ类前噬菌体基因组克隆溶原性噬菌体

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O139群霍乱弧菌染色体中整合两种CTXΦ前噬菌体基因组的多样性

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第3期22卷 239-242页

作者：陈爱平阚飙陈拱立陈亢川刘延清福建省卫生防疫站中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所.卫生部医学分子细菌学重点实验室

目的　研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法　Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因r... 详细信息

目的　研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法　Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因rstR基因片段 ,克隆并进行序列测定、分析。结果　此 3株菌染色体zot杂交条带多于ctxAB 2～ 5条 ,提示 1个菌株染色体上有编码ctxAB的CTXΦ以及不编码ctxAB的CTXΦ两种基因组。以保守区设计的引物扩增此 3株菌的rstR区 ,均得到 2条大小不同的条带 ,分别克隆后进行测序 ,经GenBank同源性检索 ,发现在此 3个菌株染色体中分别有来自ElTor型的CTXETΦ与不编码ctxAB的nct CTXO13 9Φ、来自加尔各答型的CTXcalcΦ与nct CTXO13 9Φ、以及CTXETΦ与新报道的一种具有独特rstR序列的CTXΦ类基因组两两共存于 1个菌株染色体上。这 3个菌株还具有不同的 16S核糖体基因杂交图谱。结论　不同rstR序列的CTXΦ基因组可以共存于 1个菌株染色体中 ,提示CTXΦ家族进化过程中的复杂分化 ,CTXΦ家族在不同霍乱菌株间的出现及传递。

关键词：噬菌体 CTXφ基因组基因多态性 O139群霍乱弧菌染色体

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霍乱弧菌与大肠杆菌recA基因的功能互补性分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第6期22卷 647-648页

作者：徐菁张达琳阚飙刘延清祁国明高守一中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206

细菌RecA蛋白具有蛋白不解酶活性，其作用除参与DNA重组之外，还参与DNA修复、突变和细胞分裂，是一种多功能蛋白。在许多革兰阳性和阴性细菌中存在功能相似的RecA样蛋白。曾发现RecA对霍乱毒素基因在霍乱孤菌染色体上的拷贝扩增起作用... 详细信息

细菌RecA蛋白具有蛋白不解酶活性，其作用除参与DNA重组之外，还参与DNA修复、突变和细胞分裂，是一种多功能蛋白。在许多革兰阳性和阴性细菌中存在功能相似的RecA样蛋白。曾发现RecA对霍乱毒素基因在霍乱孤菌染色体上的拷贝扩增起作用，使菌株的毒力增强。另外，霍乱孤菌recA突变株在研制遗传稳定和安全的活疫苗中可能具有实际意义。在本研究中，我们克隆了El Tor型霍乱孤菌的recA基因，检测了霍乱孤菌recA对recA突变的大肠杆菌工程受体菌株的功能到补性，并与其它一些能检索到的常见肠道感染病原菌属细菌的RecA氨基酸序列进行了比较分析。

关键词：霍乱弧菌大肠杆菌 recA基因功能互补性

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抑制差减杂交克隆E1 Tor霍乱弧菌流行株与非流行株基因组差异片段及其分析

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第5期18卷 573-577页

作者：张丽娟阚飙杨帆高守一刘延清祁国明中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部医学分子细菌学重点实验室北京102206 中国预防医学科学院病毒基因工程国家重点实验室北京100052

为了克隆与分析霍乱弧菌O1E1Tor流行株与非流行株两类菌株基因组差异片段 ,采用抑制差减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)分别以国内保留的流行株Wujiang 2及非流行株Js 32一株作为被检菌 ,另一株作为参考菌进行基... 详细信息

为了克隆与分析霍乱弧菌O1E1Tor流行株与非流行株两类菌株基因组差异片段 ,采用抑制差减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)分别以国内保留的流行株Wujiang 2及非流行株Js 32一株作为被检菌 ,另一株作为参考菌进行基因组差异研究 .在进行的差减杂交实验中 ,流行株Wujiang 2共检出 34个特异差异片段 ,经同源检索共代表 35个基因片段 ,其中包括许多重要的霍乱弧菌毒力相关基因如CTX遗传单元、TLC因子及可移动外来成分如霍乱弧菌整合子RVC序列及Tn10转位酶 .非流行株Js 32共检出 14个特异差异片段 ,经同源检索未能检出同源片段 ,可能代表新基因序列 .研究表明 ,霍乱弧菌流行株与非流行株基因组存在较多差异基因 ,表现在毒力、毒力相关基因。

关键词：抑制差减杂交 El Tor霍乱弧菌流行株非流行株基因组差异片段序列分析基因克隆

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对流行地区的*** O157∶H7病原学分析及研究

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中国公共卫生 2002年第8期18卷 970-971页

作者：杨晋川景怀琦万马权太淑逄波李洪卫赵广法徐建国江苏省徐州市卫生防疫站检测中心 221003 中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所卫生部分子医学细菌学重点实验室

目的　对流行地区O15 7∶H7进行病原学分析。方法　PCR方法对O15 7∶H7菌株毒力基因谱检测比较 ,同时用PFGE和RAPD方法对O15 7∶H7菌株的同源性分析比较。结果　流行地区分离的O15 7∶H7菌株 ,10 0 %携带Hly、eaeA基因 ,95 35 %携带SL... 详细信息

目的　对流行地区O15 7∶H7进行病原学分析。方法　PCR方法对O15 7∶H7菌株毒力基因谱检测比较 ,同时用PFGE和RAPD方法对O15 7∶H7菌株的同源性分析比较。结果　流行地区分离的O15 7∶H7菌株 ,10 0 %携带Hly、eaeA基因 ,95 35 %携带SLT2 基因 ,11 6 3%携带SLT1基因。PFGE图谱表明流行地区分离的O15 7∶H7菌株与日本分离的O15 7∶H7菌株有明显差异 ,为不相关菌株 ;与国内标准菌株 882 36 4为近似型 (相似 ,但不相同 )。流行地区病人分离菌株与外环境家畜家禽类便及昆虫肠道分离菌株的PFGE图谱完全相同。结论　携带O15 7∶H7菌株的家畜家禽可能是导致疫情发生的传染源。PFGE用于O15 7∶H7病原学分析 ,对流行病学研究有重要意义 ,但不适宜基层。RAPD方法用于O15 7∶H7病原学分析 ,技术简便、省时。

关键词：流行地区脉冲凝胶电泳聚合酶链反应志贺样毒素肠出血性大肠埃希氏菌 O157:H7 病原学

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