检索结果-内蒙古大学图书馆

检验医学 2019年第5期34卷 457-462页

作者：于婷沈敏曲守方黄杰中国食品药品检定研究院非传染病诊断试剂室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 美康生物参考实验室浙江宁波315104

目的研制锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品,并评价其性能,促进锂、钠、钾、镁、钙、氯电解质测定的标准化。方法收集含不同浓度锂、钠、钾、镁、钙、氯离子的无溶血、脂血和黄疸血清,经多重过滤、除菌后分装,制备... 详细信息

目的研制锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品,并评价其性能,促进锂、钠、钾、镁、钙、氯电解质测定的标准化。方法收集含不同浓度锂、钠、钾、镁、钙、氯离子的无溶血、脂血和黄疸血清,经多重过滤、除菌后分装,制备成3个水平的候选品,-70℃保存。以钾离子作为均匀性评价的特性量,采用单因素方差分析评价候选品的均匀性。以钾、钠、氯离子作为稳定性评价的特性量,采用线性回归分析评价候选品的稳定性。采用参考方法或经验证的方法定值,并计算不确定度。评估候选品、新鲜血清样本在参考方法或经验证的方法与4个常规检测系统间的互通性。结果3个水平侯选品中,钾离子的均匀性检验F值分别为1.6301、1.4986和1.0208,均标准品候选品均匀性、稳定性好,钠、钾、镁、钙和氯离子侯选品互通性良好,定值准确可靠,可作为国家标准品使用。

关键词：锂钠钾镁钙氯冰冻人血清国家标准品

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不同品牌胎牛血清用于肺炎链球菌调理吞噬作用的比较

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微生物学免疫学进展 2019年第5期47卷 22-26页

作者：黄洋徐潇李康李江姣杜慧竟郑锐孙文媛叶强中国食品药品检定研究院呼吸道细菌疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室中国医学细菌保藏管理中心

目的比较不同品牌的胎牛血清用于HL-60细胞分化,以及配制成调理缓冲液后对肺炎链球菌调理吞噬杀菌力的影响。方法采用5个不同品牌(品牌1~5)的胎牛血清用于HL-60细胞分化培养液和调理缓冲液的配制,计算分化后细胞活力,并进行肺炎链球... 详细信息

目的比较不同品牌的胎牛血清用于HL-60细胞分化,以及配制成调理缓冲液后对肺炎链球菌调理吞噬杀菌力的影响。方法采用5个不同品牌(品牌1~5)的胎牛血清用于HL-60细胞分化培养液和调理缓冲液的配制,计算分化后细胞活力,并进行肺炎链球菌调理吞噬杀菌试验,比较对照孔菌数和质控血清的调理指数。结果与品牌1胎牛血清分化细胞的活力相比较,品牌5分化的细胞活力差异具有统计学意义(P=0.023,P<0.05),而品牌2、3、4分化细胞的活力差异均不具有统计学意义(P=0.129、0.186、0.440,P>0.05);使用品牌5分化的细胞,对3、6A、7F、9V、14、18C、19A、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。使用品牌5配制的调理缓冲液,对3、9V、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。结论为保障肺炎链球菌调理吞噬试验的稳定性,建议对试验过程中使用的胎牛血清进行筛选。

关键词：肺炎链球菌调理吞噬胎牛血清

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重组人表皮生长因子与其衍生物功能和结构对比分析

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中国生物制品学杂志 2018年第7期31卷 732-736页

作者：刘兰韩春梅于雷秦玺史新昌饶春明中国食品药品检定研究院重组药物室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的对比分析重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rh EGF)与重组人表皮生长因子衍生物(rhEGF derivative,rhEGFd)的比活性和结构。方法采用《中国药典》三部(2015版)通则中3T3细胞/MTT显色法检测rhEGF和rhEGFd的生物学活性,新建的凝胶色谱法检测成品中主药蛋白质含量。计算比活性并分析结构与功能的关系。结果 rhEGFd的比活性明显高于rhEGF(P<0.05),约为rhEGF的1.48倍。结论对比分析了rhEGF和rhEGFd的比活性和结构,为其质量标准的完善提供了支持。

关键词：重组人表皮生长因子重组人表皮生长因子衍生物生物学活性蛋白质含量比活性分子结构

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一种新的抗肿瘤靶点-CD47

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药物分析杂志 2018年第7期38卷 1099-1105页

作者：郭莎于传飞张峰刘春雨李萌王文波付志浩俞小娟王兰中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050

肿瘤细胞可以通过多种途径逃避机体免疫系统的识别和清除,如诱导免疫抑制的肿瘤微环境,降低肿瘤细胞的免疫原性等;其中,肿瘤细胞逃避天然免疫系统如巨噬细胞等吞噬细胞清除的机制之一是上调细胞表面"别吃我"(don’t eat me)... 详细信息

肿瘤细胞可以通过多种途径逃避机体免疫系统的识别和清除,如诱导免疫抑制的肿瘤微环境,降低肿瘤细胞的免疫原性等;其中,肿瘤细胞逃避天然免疫系统如巨噬细胞等吞噬细胞清除的机制之一是上调细胞表面"别吃我"(don’t eat me)信号的表达。整合素相关蛋白(IAP,即CD47)便是一种重要的自我信号,它通过与巨噬细胞上的配体信号调节蛋白α(SIRPα)结合,进而抑制巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬;此外,在天然免疫细胞如树突状细胞等向适应性免疫T细胞提呈抗原的过程中,CD47也发挥着抑制作用。因此,CD47在肿瘤免疫中发挥着重要的调节作用,靶向CD47是一个潜在的抗肿瘤方向。本文对CD47的抗肿瘤作用进行了详述,包括分子结构、信号转导、调节吞噬与促凋亡作用及成药性考虑等。

关键词：整合素相关蛋白信号调节蛋白α 凝血酶致敏蛋白1 免疫治疗吞噬作用抗原提呈联合用药

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液质联用对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白中的制品相关蛋白进行定性定量分析

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药物分析杂志 2018年第11期38卷 1899-1904页

作者：陶磊刘周阳韩春梅史新昌聂爱英范文红饶春明中国食品药品检定研究院、卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 沃特世科技有限公司上海201206

目的：对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白（rGLP-1-Fc）的制品相关蛋白进行定性及定量分析。方法：利用液质联用法,对r GLP-1-Fc原液中制品相关蛋白的修饰类型进行鉴定;通过胰蛋白酶酶切液质肽图的方法,对修饰位点进行鉴定;采用反相超... 详细信息

目的：对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白（rGLP-1-Fc）的制品相关蛋白进行定性及定量分析。方法：利用液质联用法,对r GLP-1-Fc原液中制品相关蛋白的修饰类型进行鉴定;通过胰蛋白酶酶切液质肽图的方法,对修饰位点进行鉴定;采用反相超高效液相色谱法,测定3批原液中制品相关蛋白的比例。结果：该蛋白原液中主要存在3种制品相关蛋白;液质联用检测结果显示：1种为氧化及糖化的修饰产物,另外2种为一条二硫键解链导致的变异体;液质肽图分析发现氧化及糖化发生在第28位赖氨酸残基;对3批原液进行了检测,3种制品相关蛋白的平均含量分别为（2.37±0.04）%、（9.07±0.20）%和（4.03±0.07）%。结论：利用液质联用技术对rGLP-1-Fc原液中的制品相关蛋白进行了初步的定性、定量分析,测定结果可为同类产品的制品相关蛋白分析提供技术支持。

关键词：重组胰高血糖素样肽-1-Fc 融合蛋白制品相关蛋白糖化修饰液相色谱-质谱联用

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ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品的制备

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中国生物制品学杂志 2018年第9期31卷 977-981页

作者：沈舒马秋平田亚宾石大伟张春涛中国食品药品检定研究院传染病诊断二室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的研制检测ABO反定型试剂特异性项目的血清国家参考品。方法收集健康献血员A_1、B、A_1B、O型4种型别血清,经确证实验及8家实验室联合标定,对其进行特异性、效价、不规则抗体、冷凝集抗体及稳定性考核。结果4种血清无冷凝集抗体及不... 详细信息

目的研制检测ABO反定型试剂特异性项目的血清国家参考品。方法收集健康献血员A_1、B、A_1B、O型4种型别血清,经确证实验及8家实验室联合标定,对其进行特异性、效价、不规则抗体、冷凝集抗体及稳定性考核。结果4种血清无冷凝集抗体及不规则抗体,其中A_1、B、O型血清效价均≥1∶8。根据实验结果特异性质量标准制定为A_1型血清与A_1、A_2、O型反定型红细胞反应为阴性,与B、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;B型血清与B、O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;A_1B型血清与A_1、A_2、A_2B、B、O型反定型红细胞反应均为阴性;O型血清与O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B、B型反定型红细胞反应均为阳性。本参考品开瓶12 d及25℃放置3 d、4℃5个月、-20℃半年,保存稳定性均良好,但不能反复冻融。结论已成功制备可用于多种血清免疫方法学的ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品。

关键词： ABO血型反定型试剂特异性参考品

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双波长分子排阻色谱测定半胱氨酸偶联一甲基澳瑞他汀E抗体药物偶联物的药物抗体偶联比

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药物分析杂志 2018年第8期38卷 1432-1436页

作者：王文波武刚崔永菲于传飞王兰中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050

目的:建立双波长分子排阻色谱(SEC)测定抗体药物偶联物(ADC)的药物抗体偶联比(DAR)的方法。方法:采用凝胶色谱柱,柱温25℃,以0.1 mol·L^(-1)磷酸盐-0.1 mol·L^(-1)氯化钠缓冲液为流动相对100μg样品进行等度洗脱,流速1.0 mL&#... 详细信息

目的:建立双波长分子排阻色谱(SEC)测定抗体药物偶联物(ADC)的药物抗体偶联比(DAR)的方法。方法:采用凝胶色谱柱,柱温25℃,以0.1 mol·L^(-1)磷酸盐-0.1 mol·L^(-1)氯化钠缓冲液为流动相对100μg样品进行等度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),在248 nm及280 nm双波长下分别对ADC的小分子药物和抗体进行检测;采用紫外分光光度计在248 nm及280 nm处进行吸收度测量。结果:双波长SEC可准确地对ADC的DAR进行测定,测得的DAR为4.17,RSD为0.24%;紫外分光光度(UV)法测得的DAR为3.97,RSD为2.8%。结论:双波长SEC检测可用于ADC样品的DAR测定,同时可对样品的大小异构体进行分析。SEC及UV 2种方法测得的DAR结果相似,都可用于ADC的药物抗体偶联比分析。

关键词：抗体药物偶联物半胱氨酸澳瑞他汀药物抗体偶联比分子排阻色谱紫外分光光度法

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小鼠品系、性别和被毛对可视化假病毒感染模型的影响

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实验动物与比较医学 2019年第6期39卷 423-428页

作者：雷山刘强黄维金王佑春中国食品药品检足研究院艾滋病性病病毒疫苗室卫生部生物技术产品检定方法与标准化重点实验室北京102629 国药中生生物技术研究院有限公司北京100176

目的探索小鼠品系、性别和被毛对利用活体成像技术所建立可视化假病毒感染模型的影响。方法将携带Fluc报告基因的马尔堡假病毒(pMARV-Fluc)经腹腔分别感染C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠,利用活体成像技术分析脱毛前后活体化学发光水平的差... 详细信息

目的探索小鼠品系、性别和被毛对利用活体成像技术所建立可视化假病毒感染模型的影响。方法将携带Fluc报告基因的马尔堡假病毒(pMARV-Fluc)经腹腔分别感染C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠,利用活体成像技术分析脱毛前后活体化学发光水平的差异。同时,利用埃博拉假病毒(pEBOV-Fluc)经腹腔途径感染不同性别的C57BL/6J小鼠和BALB/c小鼠,并对峰值发光水平和动态变化过程进行比较分析。结果 BALB/c小鼠的白色被毛对发光水平的遮挡比例为32%, C57BL/6J小鼠的黑色被毛对发光水平的遮挡比例达到82%,差异具有统计学意义(P<0.001)。相比雌性动物而言,雄性动物活体发光水平更强且一致性更好(P<0.05)。BALB/c小鼠发光峰值水平显著高于C57BL/6J(P<0.05),并表现出不同的动态变化过程,峰值时间点分别为4 d和6 d。结论小鼠品系、性别和被毛均对假病毒感染模型有影响。

关键词： BALB/c小鼠 C57BL/6J小鼠小鼠性别被毛颜色活体成像假病毒

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糖基化基因修饰对重组蛋白表达及活性的影响

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中国生物制品学杂志 2018年第9期31卷 1029-1035,1039页

作者：周小菊纳涛马宁宁袁宝珠沈阳药科大学无涯学院辽宁沈阳110016 中国食品药品检定研究院生物制品检定所细胞保藏研究中心卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

蛋白质翻译后修饰是蛋白质结构及功能成熟过程中的重要组成部分,其中的一种重要的翻译后修饰为蛋白质糖基化。许多影响细胞、组织、器官乃至生命的内源性蛋白或外源性重组蛋白(如治疗性重组蛋白或单克隆抗体),在细胞内成熟过程中几乎均... 详细信息

蛋白质翻译后修饰是蛋白质结构及功能成熟过程中的重要组成部分,其中的一种重要的翻译后修饰为蛋白质糖基化。许多影响细胞、组织、器官乃至生命的内源性蛋白或外源性重组蛋白(如治疗性重组蛋白或单克隆抗体),在细胞内成熟过程中几乎均会发生蛋白质糖基化修饰,而糖基化修饰的质和量的差异,可能会影响相关蛋白的表达水平、结构及功能。随着治疗性重组蛋白的需求和应用的不断发展,已出现了以改造治疗性重组蛋白为目的的蛋白质糖基化工程技术。该技术主要通过改变用于表达重组蛋白的宿主细胞中参与糖基化修饰的关键酶蛋白(糖苷酶及糖基转移酶),来影响重组蛋白的糖基化,从而改变重组蛋白的表达水平、结构及功能。本文介绍了重组蛋白糖基化修饰的类型及其生物学作用,重组蛋白糖基化修饰改造的策略,其中重点介绍了改变糖基化相关酶蛋白基因的活性的策略,经证明目前该糖基化工程策略是影响重组蛋白的表达及活性十分有效的方式。

关键词：重组蛋白翻译后修饰糖基化修饰活性

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壳聚糖介导甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC DNA疫苗的构建及其免疫效果

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中国生物制品学杂志 2018年第10期31卷 1055-1060页

作者：梁昊宇任慧梅张影董思国王斌曾明中国食品药品检定研究院肠道细菌疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京102629 国家食品药品监督管理总局药品审评中心北京100022

目的构建壳聚糖(chitosan,CS)介导的甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC的DNA疫苗,并探讨该疫苗的免疫效果。方法按哺乳动物的密码子偏好性对nmpC和pagC的基因序列进行优化,并将优化后的序列克隆至真核表达载体provax中,构建provax-nmpC和prova... 详细信息

目的构建壳聚糖(chitosan,CS)介导的甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC的DNA疫苗,并探讨该疫苗的免疫效果。方法按哺乳动物的密码子偏好性对nmpC和pagC的基因序列进行优化,并将优化后的序列克隆至真核表达载体provax中,构建provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗。采用复凝聚法制备载DNA疫苗的CS纳米粒,并对CS/DNA纳米粒的特性进行检测。将provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗及其相应的CS纳米粒体外转染BHK细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达。采用活体电击法分别用不同组分的蛋白免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体水平及抗体类型。结果 provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗经双酶切鉴定,构建正确。疫苗可与CS发生有效结合,纳米粒形似球形,粒径均一,包封率均达90%以上,且CS可防止DNA被DNaseⅠ酶降解。provax-nmpC及CS/provax-nmpC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,两组间差异无统计学意义(P>0.05);provax-pagC与CS/provaxpagC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,且provax-pagC组的抗体水平明显高于CS/provax-pagC(P<0.05)。provax-nmpC和provax-pagC组的IgG1及IgG2a抗体水平均高于相应的CS组(P<0.05),且IgG1和IgG2a间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DNA疫苗provax-nmpC和provax-pagC均可诱导有效的免疫反应;载基因CS纳米粒并未增强DNA疫苗的免疫效果;CS未改变DNA疫苗的免疫应答类型,但具有调节Th1和Th2平衡的作用。

关键词：壳聚糖甲型副伤寒沙门菌 nmpC pagC DNA疫苗

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