目的:建立基于生物膜干涉（Biolayer interferometry,BLI）技术检测治疗性单抗与新生儿Fc受体（neonatal Fc receptor,FcRn）亲和力的方法。方法:链霉亲和素（streptavidin,SA）偶联传感器结合生物素标记FcRn后,使用稀释液（0.1%BSA/0.0...
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目的:建立基于生物膜干涉（Biolayer interferometry,BLI）技术检测治疗性单抗与新生儿Fc受体（neonatal Fc receptor,FcRn）亲和力的方法。方法:链霉亲和素（streptavidin,SA）偶联传感器结合生物素标记FcRn后,使用稀释液（0.1%BSA/0.05%Tween20/PBS,p H 6.0）封闭传感器后采用BLI方法检测,以稀释液1∶2系列稀释样品(浓度范围为125;6 000 nmol·L;),空白对照采用未结合FcRn的传感器检测上述系列稀释样品。结果采用Steady state analysis方式拟合,计算样品平衡常数（KD）值,计算样品各自的95%可信区间（confidence interval,CI）,对不同抗体与FcRn的亲和力进行比较。结果:Ig G-FcRn结合曲线呈现明显的快结合-快解离形态。应用建立的方法检测不同单抗与FcRn的亲和力结果:bevacizumab与FcRn的亲和力较trastuzumab高95%,存在显著性差异;bevacizumab生物类似药（similar biotherapeutic products,SBP）-1与FcRn亲和力较原研药（reference biotherapeutic products,RBP）有32%的升高,且有显著性差异。其他Cys-偶联药物前后、Lys-偶联药物前后、表达细胞系由SP2/0更换为CHO均未对Ig G-FcRn亲和力产生影响。结论:建立了优化的基于生物膜干涉技术检测Ig G抗体与FcRn亲和力测定方法,可用于单抗及抗体偶联药物与FcRn亲和力的评价。
近年来,基因检测的发展和普及给监管部门带来了巨大挑战。美国通过加强对实验室研发诊断试剂(laboratory developed test,LDT)的监管来应对基因检测带来的风险,其经验被世界卫生组织以及很多国家认可。美国的LDT监管体系涉及众多的法律...
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近年来,基因检测的发展和普及给监管部门带来了巨大挑战。美国通过加强对实验室研发诊断试剂(laboratory developed test,LDT)的监管来应对基因检测带来的风险,其经验被世界卫生组织以及很多国家认可。美国的LDT监管体系涉及众多的法律法规和监管机构。本文围绕美国LDT监管体系中的几个重要组成要素,逐一介绍《临床实验室改进修正案》的发展及其局限性、传统LDT和现代LDT的特点和差异、美国食品药品监督管理局发布的《LDT监督管理框架草案》及其争议和我国的基因检测监管现状。目的是全面将美国的LDT监管政策的发展历程和美国对基因检测的监管情况全面清晰地展现出来,为我国的基因检测体外诊断试剂相关的监管工作提供详尽准确的参考信息。
目的建立A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)质控参考品,并进行初步检测。方法从国家医学细菌保藏管理中心库存标准菌株中筛选出10株A群链球菌和10株非A群链球菌进行菌落形态、菌型、生物学特性及16s r RNA鉴定;并确定菌液浓度测定方法...
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目的建立A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)质控参考品,并进行初步检测。方法从国家医学细菌保藏管理中心库存标准菌株中筛选出10株A群链球菌和10株非A群链球菌进行菌落形态、菌型、生物学特性及16s r RNA鉴定;并确定菌液浓度测定方法。结果选择了10株不同来源的A群链球菌作为阳性参考菌株,10株同属不同群或寄生部位与A群链球菌相同的其他种属菌株作为阴性参考菌株。经16s r RNA基因序列比对,所选参比菌株与相应的模式株相似度均在99%以上。平板计数结果明显低于显微计数法,不同人员分别对32份菌液进行显微计数的结果差异无统计学意义(P=0.310)。结论建立了A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)质控参考菌株,并确立了显微计数法作为确定参考菌液浓度的方法,为今后相关参考品的制备奠定了基础。
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