检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学免疫学进展 2012年第6期40卷 20-24页

作者：赵慧李娟潘晖榕林玉香李少伟李长贵中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 厦门万泰沧海生物技术有限公司厦门361023 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361005

目的应用假病毒中和法建立检测血清HPV16/18中和抗体滴度检测方法并进行验证。方法分别采用不同批次假病毒以及不同代次细胞对不同滴度的HPV16/18阳性血清进行多次平行检测,考察这些因素对检验结果的影响;同时通过对抗HPV16/18双价阳性... 详细信息

目的应用假病毒中和法建立检测血清HPV16/18中和抗体滴度检测方法并进行验证。方法分别采用不同批次假病毒以及不同代次细胞对不同滴度的HPV16/18阳性血清进行多次平行检测,考察这些因素对检验结果的影响;同时通过对抗HPV16/18双价阳性血清、抗HPV16单价阳性血清和抗HPV18单价阳性血清的检测进一步评估中和抗体检测法的准确性、特异性及重复性。结果不同批次假病毒和不同代次细胞对检验结果的影响均在4倍范围内,此外该检测法的准确性、特异性、重复性均在可接受标准范围之内。结论建立的假病毒法可满足中和抗体效价检测的要求,可用于评价疫苗的免疫效果。

关键词： HPV16 18中和抗体假病毒方法验证

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4种国产和3种进口第4代HIV抗原抗体检测试剂的质量评价

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第9期31卷 847-850页

作者：李秀华许四宏宋爱京聂建辉王佑春中国食品药品检定研究院、卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的对4种国产和3种进口第4代HIV诊断试剂的质量进行评价。方法利用HIV抗体阴性样品库和核酸阳性样品库、BBI阳转血清盘样品等，对4种国产和3种进口第4代试剂的敏感性和特异性、检测HIV-1早期感染的能力进行分析。结果7种第4代试剂的敏... 详细信息

目的对4种国产和3种进口第4代HIV诊断试剂的质量进行评价。方法利用HIV抗体阴性样品库和核酸阳性样品库、BBI阳转血清盘样品等，对4种国产和3种进口第4代试剂的敏感性和特异性、检测HIV-1早期感染的能力进行分析。结果7种第4代试剂的敏感性均为100％（95％CI：99．86％～100％），且1份HIV-1感染窗口期样品均检测为阳性，其中1种进口试剂“δ＋”值较大（1．0δ92），其余6种试剂的“δ＋”值均比较小（0．0836～0．3003）。对阴性样品，7种试剂均存在不同程度的假阳性（特异性为97．80％～99．60％，“δ-”值为-1．3803-0．477δ）。对BBI阳转血清盘样品，国产试剂的阳转血清相对敏感性系数为-0．500～0，2种进口试剂则为-0．600和-0．700。结论7种试剂均具有较高的敏感性和特异性，第4代HIV试剂用于血液筛查可发现HIV感染窗口期样本，对减少HIV传播的风险有一定的意义。但进口第4代试剂检测HIV-1早期感染的能力强于国产第4代试剂。

关键词：第4代HIV诊断试剂 HIV抗体阴性样品库 HIV核酸阳性样品库 BBI阳转血清质量评价

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不同种类乙型肝炎表面抗原诱导小鼠早期细胞免疫应答的比较

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第11期31卷 984-988页

作者：胡忠玉何鹏方鑫邱少辉李河民梁争论中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的比较不同表达系统来源的乙型肝炎（乙肝）表面抗原（HBsAg）免疫小鼠诱导早期脾淋巴细胞抗原特异性细胞免疫应答的特点,探讨影响乙肝疫苗保护效果的因素.方法 3种HBsAg（汉逊酵母、CHO细胞和血源）分别皮下接种不同组小鼠（BALB/c,... 详细信息

目的比较不同表达系统来源的乙型肝炎（乙肝）表面抗原（HBsAg）免疫小鼠诱导早期脾淋巴细胞抗原特异性细胞免疫应答的特点,探讨影响乙肝疫苗保护效果的因素.方法 3种HBsAg（汉逊酵母、CHO细胞和血源）分别皮下接种不同组小鼠（BALB/c,H-2d）,每只3μg,于免疫后4d分离脾单个核细胞（MNC）,经细胞分选仪（MACs）分选后,获得纯度高于90％的CD4＋和CD8＋T细胞,应用ELISPOT测定MNC、CD4＋和CD8＋T细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-2斑点数（ SFC）.结果细胞分选后,汉逊抗原诱导CD8＋T细胞分泌IFN-γ的水平和CD4＋T细胞分泌IL-2水平均显著高于CHO抗原组（8/10、2/10,P=0.035;6/10、0/10,P=0.005）.汉逊抗原组与血源抗原组CD8＋T细胞经体外刺激诱导IFN-y全部阳转（10/10）,但分泌水平上汉逊抗原组显著高于血源抗原组（t=2.479,P=0.035）；汉逊抗原组诱导CD4＋T细胞IFN-γ阳转率及分泌水平均显著高于血源抗原组（10/10、4/10,P=0.005；t=3.967,P=0.003）.结论乙肝抗原免疫小鼠4d即可诱导细胞免疫应答,且汉逊酵母抗原早期诱导抗原特异性IFN-γ、IL-2的能力显著高于CHO和血源抗原,与其临床考核母婴传播阻断HBV保护率显著优于CHO和血源乙肝疫苗相一致,为及时接种乙肝疫苗的必要性和高危新生儿选择接种乙肝疫苗的类型提供依据.

关键词：乙型肝炎表面抗原细胞免疫应答酶联免疫斑点法(ELISPOT)

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痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：黄维金朱蓉赵晨燕李媛媛万延民齐影刘强王文波温智恒周艳孟淑芳王佑春俞永新中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室武汉生物制品研究所北京生物制品研究所复旦大学上海市公共卫生临床中心吉林大学生命科学学院

目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国5个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度平行5孔,计算... 详细信息

目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国5个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度平行5孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘病毒滴度进行赋值。对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测,并考核稳定性。结果利用CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品,分装重量精度为0.95%;装量检查合格:1ml/支;pH值为6.9;无菌试验合格。经过5个实验室的56次测定,各试验室间的结果差异有非常显著的统计学意义(F=34.55,P<0.01)。剔除异常实验室数据,计算病毒滴度的几何均数为6.48,标准差为0.09,总变异系数1.41%,95%的可信区间为:6.30-6.67。病毒滴度为3.05×106PFUml-1,95%可信区间为:2.00×106-4.65×106PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化,4℃可稳定放置10d,37℃稳定性差,1d即开始滴度明显下降。结论该痘病毒标准品符合要求,可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。

关键词：重组痘苗病毒蚀斑滴定标准品

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EV71疫苗诱导小鼠CD4^+ T细胞受体Vβ17基因家族克隆化改变

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中国病毒病杂志 2012年第5期2卷 360-365页

作者：高帆邵杰王一平李玫颖毛群颖姚昕邵强李凤祥梁争论王军志中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 河南师范大学生命科学院河南新乡453007 沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016

目的分析EV71疫苗诱导BALB/c小鼠CD4+TCR Vβ基因家族克隆化改变,探讨EV71疫苗免疫机制。方法采用TCR克隆化检测试剂盒和基因扫描技术对EV71疫苗诱导的BALB/c小鼠CD4+TCRVβ基因家族克隆化进行分析,并结合ELISPOT方法、Luminex技术和体... 详细信息

目的分析EV71疫苗诱导BALB/c小鼠CD4+TCR Vβ基因家族克隆化改变,探讨EV71疫苗免疫机制。方法采用TCR克隆化检测试剂盒和基因扫描技术对EV71疫苗诱导的BALB/c小鼠CD4+TCRVβ基因家族克隆化进行分析,并结合ELISPOT方法、Luminex技术和体外微量中和试验研究EV71疫苗诱导的细胞免疫和体液免疫应答情况,探讨EV71疫苗免疫机制。结果通过对小鼠CD4+TCR Vβ1-20克隆化检测,发现免疫组的Vβ17基因家族出现单克隆或寡克隆改变,对照组Vβ17为多克隆化,未见克隆化改变。免疫组小鼠脾MNC(去除CD8+)IFN-γ和IL-6的分泌水平较对照组显著增高(P均<0.01),血清EV71中和抗体应答均为阳性。进一步测序发现,免疫组Vβ17的CDR3区氨基酸序列为TASQNTLY。结论成功筛选出EV71疫苗诱导BALB/c小鼠CD4+TCR特异性改变的Vβ基因家族为Vβ17,与MHC-EV71抗原肽特异性结合的CDR3区氨基酸序列为TASQNTLY。

关键词： T细胞受体肠道病毒71型疫苗细胞免疫体液免疫

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重组人源化兔抗血管内皮生长因子单克隆抗体的抗原结合活性测定

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中国生物制品学杂志 2011年第9期24卷 1079-1080,1086页

作者：范文红毕华饶春明中国食品药品检定研究院重组技术产品室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的采用直接ELISA法测定重组人源化兔抗血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体的抗原结合活性。方法以VEGF-Fc为包被抗原,采用直接ELISA法测定不同浓度重组人源化兔抗vEGF单抗参考品和供试品与抗原的... 详细信息

目的采用直接ELISA法测定重组人源化兔抗血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体的抗原结合活性。方法以VEGF-Fc为包被抗原,采用直接ELISA法测定不同浓度重组人源化兔抗vEGF单抗参考品和供试品与抗原的结合活性,根据供试品及参考品的EC50值计算供试品的相对结合力,并分析该法的精密性。结果重组人源化兔抗VEGF单抗供试品及参考品的抗原结合均存在量效关系,且符合四参数方程。同一批次的供试品单抗原液的相对结合活性分别为参考品的(90.43±18.74)%、(123.56±18.40)%和(106.83±18.47)%,均值为(106.94±16.57)%。3次试验的变异系数分别为20.72%、14.89%和17.29%。同一批次的供试品成品的相对结合活性分别为(97.34±18.42)%、(123.30±11.08)%和(93.91±4.57)%,变异系数分别为18.93%、8.96%和4.87%。结论直接ELISA法精密性良好,操作简便,可用于重组人源化兔抗VEGF单抗抗原结合活性的常规检测。

关键词：血管内皮生长因子类抗体,单克隆抗原结合活性酶联免疫吸附测定

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痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

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2011年中国药学大会暨第11届中国药师周

作者：黄维金孟淑芳王佑春朱蓉赵晨燕李媛媛万延民刘强王文波温智恒周艳中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050 武汉生物制品研究所湖北武汉430060 北京生物制品研究所北京100024 复旦大学上海市公共卫生临床中心上海201508

目的：研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。　　方法：制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室，按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定，每次实验稀释2个稀释度，每个稀释度平行... 详细信息

目的：研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。
　　方法：制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室，按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定，每次实验稀释2个稀释度，每个稀释度平行5孔，对标准品中痘病毒滴度进行赋值，对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测，并考核稳定性。
　　结果：利用 CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品，分装重量精度为2.5％;装量检查合格：1ml/支;pH值为6.9;无菌试验合格;经过4个实验室的52次测定，病毒滴度的几何均数6.45，标准差为 0.27,总变异系数4.15%。95%的可信区间为：5.93-6.98。病毒滴度为2.82×106PFUml-1，95%可信区间为：8.51×105-9.55×106 PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化，2-8℃可稳定性放置10d， 37℃稳定性差，2d即开始滴度明显下降。
　　结论：该痘病毒标准品符合要求，可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。

关键词：重组痘苗病毒病毒滴度测定国家标准品稳定性结晶紫染色蚀斑法

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