检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药生物技术 2017年第5期12卷 397-401页

作者：谭亚军王丽婵卫辰张华捷侯启明张庶民马霄北京中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室/卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室 100050

目的对肺炎链球菌表面蛋白C(PspC)进行全基因合成、重组表达、纯化制备和鉴定。方法根据Gen Bank中Psp C的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得目的蛋白基因,构建无标签、高效重组表达菌株,建立重组蛋白的纯化... 详细信息

目的对肺炎链球菌表面蛋白C(PspC)进行全基因合成、重组表达、纯化制备和鉴定。方法根据Gen Bank中Psp C的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得目的蛋白基因,构建无标签、高效重组表达菌株,建立重组蛋白的纯化制备方法,并进行抗原鉴定及免疫原性检测分析。结果人工合成的Psp C基因序列经鉴定与预期一致,目的蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量在30%以上,经两步纯化后纯度达到95%。重组蛋白能与肺炎链球菌阳性血清产生特异性抗原抗体反应,免疫小鼠后可诱导产生较高水平的蛋白特异性抗体。结论获得了重组肺炎链球菌蛋白Psp C,其具有与天然抗原相似的抗原性和免疫原性,为今后开展疫苗研制、载体蛋白应用等研究奠定基础。

关键词：肺炎链球菌重组蛋白质类肺炎链球菌表面蛋白C

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首批百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品的制备和标定

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微生物学免疫学进展 2017年第4期45卷 17-20页

作者：王丽婵骆鹏卫辰晁哲潘殊南张霖阳邓新田奇叶晓珂肖詹容朱涛马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京天坛生物制品股份有限公司菌苗室北京100176 天津康希诺生物技术有限公司理化检测室天津300450

目的制备和标定百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品。方法按《中华人民共和国药典》2015版(三部)(简称《中国药典》)相关要求,制备候选百日咳杆菌鼠源抗血清参考品(简称候选参考品),以WHO百日咳杆菌鼠源抗血清标准品(编号97/642)为标准,组... 详细信息

目的制备和标定百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品。方法按《中华人民共和国药典》2015版(三部)(简称《中国药典》)相关要求,制备候选百日咳杆菌鼠源抗血清参考品(简称候选参考品),以WHO百日咳杆菌鼠源抗血清标准品(编号97/642)为标准,组织3家单位进行协作标定,并采用热加速试验对候选参考品进行稳定性观察。结果共制备合格候选参考品300支,其外观、水分、分装精度均符合《中国药典》的相关要求;协作标定结果显示,室内和室间几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)均低于20%;经统计学分析,最终确定候选参考品中含PT-Ig G、FHA-Ig G、PRN-Ig G分别为95 IU/m L、917 IU/m L、102 IU/m L,95%可信区间分别为91.7~103.7 IU/m L、900.2~944.5 IU/m L、99.4~106.1 IU/m L;每支安瓿分别含PT-Ig G 19 IU、FHA-Ig G 183 IU、PRN-Ig G21 IU;候选参考品于-20℃放置15个月及37℃放置7 d、14 d、21 d和28 d后,各种百日咳组分抗体的酶标单位值均变化不大,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论首批百日咳杆菌鼠源抗血清国家参考品均符合《中国药典》的各项要求,且一致性、稳定性良好,可用于百日咳组分疫苗小鼠效力血清学方法的质量控制评价。

关键词：百日咳杆菌百日咳组分疫苗鼠源抗血清国家参考品

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国内外破伤风相关疫苗的质量参数比较

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中国药学杂志 2015年第8期50卷 714-717页

作者：董国霞田霖谭亚军侯启明马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的了解基础免疫阶段在我国市场上主要使用的国内外破伤风相关疫苗的关键质量参数及其水平。方法以国内外各厂家分别生产的10批次产品为依据,对其质量数据进行统计、分析和比较。结果国产产品和进口产品各有其优势所在,同时也均有需进... 详细信息

目的了解基础免疫阶段在我国市场上主要使用的国内外破伤风相关疫苗的关键质量参数及其水平。方法以国内外各厂家分别生产的10批次产品为依据,对其质量数据进行统计、分析和比较。结果国产产品和进口产品各有其优势所在,同时也均有需进一步提升的空间。结论期望更多国内外疫苗厂家能针对自身产品特点,进一步提高产品质量,在未来制造出更安全、有效且使用便捷的新型疫苗。

关键词：破伤风相关疫苗质量参数比较

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肺炎链球菌表面蛋白A的制备与鉴定

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中国医药生物技术 2015年第4期10卷 335-339页

作者：王丽婵谭亚军卫辰骆鹏张庶民侯启明马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室/卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的通过基因合成法获取3种不同分支肺炎链球菌表面蛋白A(Psp A)的目的基因,制备重组蛋白。方法根据Gen Bank中Psp A相应分支菌株的基因序列、氨基酸序列,通过密码子优化合成目的基因,并与表达载体连接且转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3... 详细信息

目的通过基因合成法获取3种不同分支肺炎链球菌表面蛋白A(Psp A)的目的基因,制备重组蛋白。方法根据Gen Bank中Psp A相应分支菌株的基因序列、氨基酸序列,通过密码子优化合成目的基因,并与表达载体连接且转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中诱导表达。表达产物经不同步骤层析纯化获得目的蛋白,对其进行免疫原性鉴定。结果人工合成3株菌株的Psp A基因序列经鉴定与Gen Bank的基因序列一致。3种蛋白在大肠杆菌中均以可溶形式表达,表达量在30%以上,经多步骤纯化其纯度达到90%。3种蛋白均能与阳性血清产生特异性抗原抗体反应。结论成功制备3种无标签Psp A蛋白,且具备与天然抗原相似的抗原性,为后续研究奠定基础。

关键词：肺炎链球菌基因表达纯化

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吸附无细胞百白破联合疫苗成品内毒素含量检测

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中国生物制品学杂志 2015年第4期28卷 385-389页

作者：卫辰裴宇盛晁哲骆鹏谭亚军王丽婵马霄侯启明中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 中国食品药品检定研究院药理室北京100050

目的对氢氧化铝佐剂吸附的无细胞百白破联合疫苗（diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,adsorbed,DTaP）成品中内毒素含量进行测定,确定将内毒素检查方法纳入2015版《中国药典》中百白破类疫苗质量标准的可... 详细信息

目的对氢氧化铝佐剂吸附的无细胞百白破联合疫苗（diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,adsorbed,DTaP）成品中内毒素含量进行测定,确定将内毒素检查方法纳入2015版《中国药典》中百白破类疫苗质量标准的可行性和必要性。方法参考《中国药典》三部（2010版）附录狱E建立动态浊度法,测定解吸附前后DTaP中细菌内毒素含量,并进行标准曲线的可靠性及干扰试验验证。结果该方法在0.005-10 EU/ml范围内线性较好,r=-0.997 1。干扰试验样品回收率在50%-200%。实测样品内毒素值从低于检测限至433 EU/ml。不同厂家及同一厂家不同批次产品解吸附前后的内毒素测定值差异显著,CV值在36.9%-89.0%之间。结论该方法可靠性、线性、回收率、灵敏度均符合要求,为进一步制定DTaP相关质量标准提供参考。现有热原检测方法不能全面反映DTaP成品中内毒素水平,有必要将内毒素检测纳入DTaP质量标准,以更好地控制疫苗安全性。

关键词：无细胞百白破联合疫苗内毒素含量

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吸附破伤风疫苗效价测定方法比较及发展趋势分析

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中国药学杂志 2013年第13期48卷 1041-1044页

作者：董国霞马霄田霖谭亚军侯启明中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的了解目前吸附破伤风疫苗效价测定采用的方法、最新的研究进展及其发展趋势。方法主要以中国、欧洲、英国、日本和印度药典、WHO百白破疫苗质量控制指南、美国采用的方法及国内外该领域的文献为依据,进行归纳、总结和分析。结果与... 详细信息

目的了解目前吸附破伤风疫苗效价测定采用的方法、最新的研究进展及其发展趋势。方法主要以中国、欧洲、英国、日本和印度药典、WHO百白破疫苗质量控制指南、美国采用的方法及国内外该领域的文献为依据,进行归纳、总结和分析。结果与结论吸附破伤风疫苗效价测定方法在不久的将来可能以完全体外检测代替体内检测,进行相关方面的研究已经成为当务之急。

关键词：吸附破伤风疫苗效价测定方法比较发展趋势分析

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肺炎链球菌致病因子及其疫苗的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第6期33卷 474-480页

作者：王丽婵侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

肺炎链球菌为革兰氏阳性菌，是人体鼻咽部寄居的正常菌群之一，是儿童及老年人群社区获得性肺炎，菌血症、细菌性脑膜炎、鼻窦炎、急性中耳炎、急性下呼吸道感染的重要病原体。在高达5％～50％的成人和儿童中能分离到该菌。只有当机体... 详细信息

肺炎链球菌为革兰氏阳性菌，是人体鼻咽部寄居的正常菌群之一，是儿童及老年人群社区获得性肺炎，菌血症、细菌性脑膜炎、鼻窦炎、急性中耳炎、急性下呼吸道感染的重要病原体。在高达5％～50％的成人和儿童中能分离到该菌。只有当机体抵抗力下降时该菌群才转变为致病菌。据估计，全球5岁以下儿童中每年因肺炎而死亡人数达到160万之多。在过去几十年中，青霉素能有效治疗肺炎链球菌感染，但是20世纪70年代以来，肺炎链球菌青霉素耐药菌株及其他抗生素耐药菌株的出现，导致了抗生素应用的局限性，也致使治疗耐药肺炎链球菌感染成为难题。肺炎链球菌疫苗的出现使肺炎链球菌疾病的预防成为可能。本研究将主要介绍肺炎链球菌的致病因素及肺炎链球菌疫苗的发展历程。

关键词：肺炎链球菌感染肺炎链球菌疫苗致病因子急性下呼吸道感染社区获得性肺炎革兰氏阳性菌细菌性脑膜炎耐药菌株

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百日咳细胞免疫的研究进展

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中国生物制品学杂志 2013年第7期26卷 1029-1033,1039页

作者：张平徐颖华侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

近年来,随着研究的深入,特异性细胞免疫在百日咳感染和疫苗诱导的免疫保护等方面的作用越来越引起人们的重视。本文就百日咳杆菌主要毒力因子在诱导细胞免疫及免疫调节中的作用、百日咳感染及疫苗免疫接种后诱导产生的细胞免疫应答等方... 详细信息

近年来,随着研究的深入,特异性细胞免疫在百日咳感染和疫苗诱导的免疫保护等方面的作用越来越引起人们的重视。本文就百日咳杆菌主要毒力因子在诱导细胞免疫及免疫调节中的作用、百日咳感染及疫苗免疫接种后诱导产生的细胞免疫应答等方面的研究进展作一综述。

关键词：百日咳细胞免疫免疫调节

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百日咳鲍特菌分子进化与分型的研究进展

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中华预防医学杂志 2013年第4期47卷 375-377页

作者：徐颖华侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

随着基因测序技术的迅猛发展，数千种微生物已经完成了全基因组测定，人类从而能够更加深入地认识和了解各种微生物，尤其是百日咳鲍特菌这种基因组高度保守的单形病原菌。

关键词：百日咳鲍特菌分子进化分型基因测序技术全基因组微生物病原菌

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无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1322-1324页

作者：马霄卫辰谭亚军徐颖华侯启明中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果该方法的最低... 详细信息

目的建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果该方法的最低检测限为1ng;最低定量检测限为8ng,线性范围为8～400ng/ml,区间内线性系数为0.999;用建立的方法对同一份样品平行测定10次,变异系数小于10%;该方法的回收率为94.9%;联合疫苗中的其他主要成分,如丝状血凝素（filamentous hemagglutinin,FHA）、黏附素（pertactin,PRN）、白喉类毒素（diphtheria toxoid,DT）、破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）对检测结果无明显干扰。结论建立了无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法,该方法有望替代现行的动物检查法,可加强我国百白破联合疫苗的质量控制,提高疫苗的质量。

关键词：无细胞百日咳疫苗毒性检测高效液相色谱法

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