检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病毒病杂志 2016年第1期6卷 72-77页

作者：刘东来张春涛中国食品药品检定研究院体外诊断试剂二室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

传染病是人类健康的重要威胁之一,及时准确地鉴定病原微生物,对流行病和突发疫情的防控具有重要意义。近年来,传染病诊断领域正面临新的技术革命,主角正是＂下一代测序（next-generation sequencing,NGS）＂技术,又称＂大规模平行测序（... 详细信息

传染病是人类健康的重要威胁之一,及时准确地鉴定病原微生物,对流行病和突发疫情的防控具有重要意义。近年来,传染病诊断领域正面临新的技术革命,主角正是＂下一代测序（next-generation sequencing,NGS）＂技术,又称＂大规模平行测序（massively parallel sequencing,MPS）＂或＂高通量测序（high-throughput sequencing,HTS）＂技术[1-2]。与＂上一代＂测序（如Sanger测序）最大的不同在于,

关键词：下一代测序传染病病原微生物监管

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毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白含量

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中国生物制品学杂志 2016年第7期29卷 740-743,747页

作者：李茂光武琳琳米健秋毛琦琦李亚南杨英李健峰叶强中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 江苏省(泰州)疫苗工程技术研究中心江苏泰州225312 安捷伦科技(中国)有限公司北京100102 北京放射与辐射医学研究所北京100850

目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效... 详细信息

目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效柱长为104 cm),以40 mmol/L硼酸盐-SDS缓冲液(p H 9.30)为电泳介质,电压为30 k V,在200 nm紫外波长条件下进行检测。对方法的专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、准确性、定量限进行验证,并用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量。结果该方法专属性、精密度、重复性、稳定性、准确性良好,TT在10~35μg/ml范围内与色谱峰相对内标峰面积比值呈良好的线性关系,r^2=0.995,游离蛋白的定量限为7μg/ml。用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量均小于10μg/ml。结论建立的毛细管电泳法操作简便、准确,可用于检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中的游离蛋白含量。

关键词：胶束电动毛细管电泳法 Y群脑膜炎球菌结合物 W135群脑膜炎球菌结合物游离蛋白

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2015年医疗器械检测机构促甲状腺素定量检测能力比对实验分析报告

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中国医药导报 2016年第21期13卷 95-98页

作者：于婷曲守方中国食品药品检定研究院体外诊断试剂一室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的了解我国医疗器械检验机构检测能力,以促进检测水平的整体提高。方法中国食品药品检定研究院在2015年组织全国医疗器械检验机构促甲状腺素定量检测能力比对实验,统一向各参加检测机构提供比对试验样本和促甲状腺素酶联免疫吸附测定... 详细信息

目的了解我国医疗器械检验机构检测能力,以促进检测水平的整体提高。方法中国食品药品检定研究院在2015年组织全国医疗器械检验机构促甲状腺素定量检测能力比对实验,统一向各参加检测机构提供比对试验样本和促甲状腺素酶联免疫吸附测定试剂盒,通过比较检测结果是否落在(指定值±3SD)范围内进行结果判定。结果 16家(94.1%)检测结果满意,1家检测机构2个样本检测结果未在范围内。结论大部分检测机构比对实验数据准确、可靠,个别检测机构在质量体系管理中存在漏洞,影响了检验质量。

关键词：促甲状腺素酶联免疫吸附测定医疗器械检测能力

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第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品的建立

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中国病毒病杂志 2016年第1期6卷 45-49页

作者：周海卫沈舒石大伟刘艳田亚宾张春涛中国食品药品检定研究院体外诊断试剂二室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品并制定其质量标准,为相应试剂的质量控制和评价提供依据。方法收集甲型H1N1流感病毒阳性及阴性菌毒株,对其进行组织细胞半数感染量(TCID50)测定及HA基因测序,经不同甲型H1N1流感病毒... 详细信息

目的建立第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品并制定其质量标准,为相应试剂的质量控制和评价提供依据。方法收集甲型H1N1流感病毒阳性及阴性菌毒株,对其进行组织细胞半数感染量(TCID50)测定及HA基因测序,经不同甲型H1N1流感病毒核酸诊断试剂筛查检测后,选择合适样本进行冻干组成参考品;使用不同试剂对参考品进行协作标定,并考察其稳定性。结果甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品由17份样本组成,包括阳性参考品5份、阴性参考品10份、精密性参考品1份及最低检出限参考品1份;稳定性考核结果表明25℃放置24h及反复冻融3次均不影响参考品的稳定性。结论建立了第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品并制定了质量标准。

关键词：甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒参考品

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狂犬病病毒弱毒克隆株的毒力和免疫原性研究

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中国病毒病杂志 2016年第2期6卷 134-139页

作者：邹剑石磊泰俞永新李玉华四川省食品药品检验检测院成都610097 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的对狂犬病病毒CTN-181弱毒株经豚鼠颌下腺传代和空斑纯化而获得的3株弱毒株病毒（CTN-1-3,CTN-1-16和CTN-1-19）进行全面的致病性、免疫性研究和遗传稳定性研究。方法分别对3株病毒用10、14和21日龄小鼠脑内接种,观察小鼠的发病死亡... 详细信息

目的对狂犬病病毒CTN-181弱毒株经豚鼠颌下腺传代和空斑纯化而获得的3株弱毒株病毒（CTN-1-3,CTN-1-16和CTN-1-19）进行全面的致病性、免疫性研究和遗传稳定性研究。方法分别对3株病毒用10、14和21日龄小鼠脑内接种,观察小鼠的发病死亡情况进行致病性研究;分别对3株病毒用3周龄小鼠进行肌内免疫和口腔免疫,测定小鼠中和抗体阳转率和中和抗体水平;将3株病毒在乳鼠脑内连续传代或豚鼠颌下腺传代,传代后病毒以小鼠脑内接种观察有无致病性进行遗传稳定性研究。结果在致病性方面：3株病毒均对3周龄小白鼠脑内接种无致病性,其中CTN-1-3和CTN-1-19对14日龄乳鼠约半数存活,而CTN-1-16株则大部分死亡。对10日龄乳鼠只有CTN-1-3株不完全致死。在免疫性方面：3株病毒以≥5.5lg PFU病毒肌内免疫或≥6.5lg PFU口腔免疫的3周龄小鼠,30d后的中和抗体阳转率均为100%,GMT分别为7.0～16.1IU/ml和7.9～39.5IU/ml。在遗传稳定性方面,3株病毒经1～3日龄乳鼠脑内连续传5代或豚鼠颌下腺传1代,传代增殖后的病毒滴度虽高达6.5或8.0lg PFU/ml,对小鼠脑内接种仍保留无致病力的弱毒特性。结论结果表明3株病毒的毒力已高度减弱,免疫效力良好,诱生的抗体水平很高,遗传稳定性十分稳定,是研发兽用狂犬病口服活疫苗和狂犬病暴露后人体免疫用减毒活疫苗的良好候选株。

关键词：狂犬病减毒克隆株致病力免疫原性遗传稳定性

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寨卡病毒的传播进化史及实验室检测

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中国病毒病杂志 2016年第2期6卷 154-158页

作者：刘东来张春涛王佑春中国食品药品检定研究院体外诊断试剂二室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）是一种主要通过蚊虫进行传播的蚊媒病毒,属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属（Flavivirus）[1]。寨卡病毒基因组为长度约10.8×10^3 bp的单条正链核糖核酸（ribonucleic acid,RNA）,包含2个分别位于... 详细信息

寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）是一种主要通过蚊虫进行传播的蚊媒病毒,属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属（Flavivirus）[1]。寨卡病毒基因组为长度约10.8×10^3 bp的单条正链核糖核酸（ribonucleic acid,RNA）,包含2个分别位于5′和3′端的侧翼非编码区（flanking noncoding regions,NCR）以及一个长开放读码框,

关键词：寨卡病毒发展史血清学检测病毒学检测

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液质联用进行干扰素理化对照品的一级结构鉴定及比对研究

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药学学报 2015年第1期50卷 75-80页

作者：陶磊裴德宁韩春梅陈伟饶春明王军志中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

应用UPLC与质谱联用技术对5个厂家生产的重组人干扰素理化对照品进行一级结构鉴定及比对研究。通过测定质谱分子量及胰蛋白酶酶解肽图,对其氨基酸序列进行验证,并对二硫键连接方式等翻译后修饰进行分析鉴定。结果 5份对照品的实测分子... 详细信息

应用UPLC与质谱联用技术对5个厂家生产的重组人干扰素理化对照品进行一级结构鉴定及比对研究。通过测定质谱分子量及胰蛋白酶酶解肽图,对其氨基酸序列进行验证,并对二硫键连接方式等翻译后修饰进行分析鉴定。结果 5份对照品的实测分子量均与理论一致;液质肽图结果显示各样品的氨基酸序列均与理论一致;4批样品的二硫键连接方式为Cys1-Cys98、Cys29-Cys138,1批为Cys29-Cys139、Cys86-Cys99;部分样品存在N-末端"+Met"、乙酰化及蛋氨酸氧化等翻译后修饰。液质联用技术可用于干扰素理化对照品的一级结构鉴定及不同厂家产品的比对研究。

关键词：液质联用干扰素一级结构鉴定比对研究

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应用串联质谱技术分析几种重组蛋白药物的翻译后修饰

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中国药学杂志 2015年第19期50卷 1726-1730页

作者：陶磊丁有学刘兰李永红范文红饶春明王军志中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的应用串联质谱技术对几种重组蛋白药物的翻译后修饰进行分析。方法首先将这几种蛋白分别进行蛋白酶切形成多肽片段,然后液相色谱-质谱联用测定其液质肽图,最后应用串联质谱技术分析几种蛋白的翻译后修饰信息。结果分别对这些蛋白中... 详细信息

目的应用串联质谱技术对几种重组蛋白药物的翻译后修饰进行分析。方法首先将这几种蛋白分别进行蛋白酶切形成多肽片段,然后液相色谱-质谱联用测定其液质肽图,最后应用串联质谱技术分析几种蛋白的翻译后修饰信息。结果分别对这些蛋白中存在的二硫键、相对分子质量相似肽段、O-糖基化位点以及N-糖基类型等翻译后修饰进行了分析确证。结论串联质谱技术可在一定程度上弥补蛋白酶切的不足,为重组蛋白药物翻译后修饰的分析提供更加充分的证据。

关键词：串联质谱重组蛋白翻译后修饰糖基化二硫键

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抗白介素-1β单克隆抗体生物学活性检测方法的建立

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中国新药杂志 2015年第17期24卷 1959-1962页

作者：刘春雨徐刚领于传飞张峰王文波李萌陈伟王兰高凯中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的:建立抗白介素-1β单克隆抗体（抗IL-1β单抗）的生物学活性检测方法。方法:利用HEK293-NF-κb-luc细胞系,通过荧光素酶检测系统（Steady-GloLuciferase Assay System）进行抗IL-1β单抗的生物学活性检测,以抗IL-1β单抗参比品通... 详细信息

目的:建立抗白介素-1β单克隆抗体（抗IL-1β单抗）的生物学活性检测方法。方法:利用HEK293-NF-κb-luc细胞系,通过荧光素酶检测系统（Steady-GloLuciferase Assay System）进行抗IL-1β单抗的生物学活性检测,以抗IL-1β单抗参比品通过平行线分析的方法计算供试品相对效价,并对该方法进行精密性和准确性验证。结果:抗IL-1β单抗供试品及参比品该方法中均存在量效关系,在半对数坐标纸上呈平行的直线分布。5批抗IL-1β单抗成品经3次测定,相对效价平均值在（84.57±3.46）%;%之间,变异系数均小于10%。2批回收率样品经3次测定,回收率分别为（113.00±15.32）%和（108.53±23.51）%。结论:已成功建立抗IL-1β单抗生物学活性检测方法,该方法重复性好,准确性高,可作为抗IL-1β单抗生物学活性的常规检测方法。

关键词：抗IL-1β单克隆抗体生物学活性荧光素酶检测系统

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PCSK9单抗生物学活性测定方法的建立

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中国新药杂志 2015年第15期24卷 1715-1719页

作者：刘春雨朱磊张峰于传飞王文波李萌陈伟王兰高凯中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的:建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）单抗的生物学活性检测方法。方法:利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,增加低密度脂蛋白（LDL）在Hep G2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染料... 详细信息

目的:建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）单抗的生物学活性检测方法。方法:利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,增加低密度脂蛋白（LDL）在Hep G2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染料标记低密度脂蛋白（BODIPY-LDL）检测胞内荧光强度来反映PCSK9单抗的生物学活性,并用PCSK9单抗参比品计算供试品相对百分效价。结果:PCSK9、PCSK9单抗参比品及供试品在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式:Y=（A-D）/[1+（X/C）B]+D。利用该法对4批PCSK9单抗供试品进行检测,每批供试品重复试验3次,PCSK9单抗的相对百分效价的平均值在94.25%;10.77%之间,变异系数均小于15%。结论:该方法灵敏度高、重复性好、结果准确,可作为PCSK9单抗生物学活性测定的常规检测方法。

关键词：单克隆抗体前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9) 低密度脂蛋白(LDL) 低密度脂蛋白受体(LDLR) 生物学活性荧光染色

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