检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1351-1354页

作者：骆鹏马霄侯启明中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

百日咳组分纯化疫苗相对于共纯化疫苗,成分明确,更安全有效,更利于质量监管。我国的百日咳组分纯化疫苗已研制成功并开始应用,旧的共纯化苗质量标准已不适用,国际上尚无统一的组分苗质量标准。本文借鉴国内外研究,从疫苗有效成分(组分抗... 详细信息

百日咳组分纯化疫苗相对于共纯化疫苗,成分明确,更安全有效,更利于质量监管。我国的百日咳组分纯化疫苗已研制成功并开始应用,旧的共纯化苗质量标准已不适用,国际上尚无统一的组分苗质量标准。本文借鉴国内外研究,从疫苗有效成分(组分抗原)、安全性和有效性检测方面,对建立我国百日咳组分纯化疫苗的质量标准进行探讨。

关键词：百日咳组分疫苗质量标准

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百日咳细胞免疫的研究进展

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中国生物制品学杂志 2013年第7期26卷 1029-1033,1039页

作者：张平徐颖华侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

近年来,随着研究的深入,特异性细胞免疫在百日咳感染和疫苗诱导的免疫保护等方面的作用越来越引起人们的重视。本文就百日咳杆菌主要毒力因子在诱导细胞免疫及免疫调节中的作用、百日咳感染及疫苗免疫接种后诱导产生的细胞免疫应答等方... 详细信息

近年来,随着研究的深入,特异性细胞免疫在百日咳感染和疫苗诱导的免疫保护等方面的作用越来越引起人们的重视。本文就百日咳杆菌主要毒力因子在诱导细胞免疫及免疫调节中的作用、百日咳感染及疫苗免疫接种后诱导产生的细胞免疫应答等方面的研究进展作一综述。

关键词：百日咳细胞免疫免疫调节

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百日咳鲍特菌分子进化与分型的研究进展

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中华预防医学杂志 2013年第4期47卷 375-377页

作者：徐颖华侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

随着基因测序技术的迅猛发展，数千种微生物已经完成了全基因组测定，人类从而能够更加深入地认识和了解各种微生物，尤其是百日咳鲍特菌这种基因组高度保守的单形病原菌。

关键词：百日咳鲍特菌分子进化分型基因测序技术全基因组微生物病原菌

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狂犬病病毒aG株糖蛋白遗传稳定性及生物信息学分析

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中国生物制品学杂志 2013年第6期26卷 760-765,770页

作者：李加曹守春石磊泰王云鹏吴小红刘景华唐建蓉俞永新董关木中国食品药品检定研究院虫媒病毒疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的研究狂犬病病毒(rabies virus,RV)aG株糖蛋白(glycoprotein,GP)的遗传稳定性,并对GP基因组进行序列测定及生物信息学分析。方法采用RT-PCR法扩增6代次aG株RV(4aGV4、4aGV5、4aGV7、4aGV11、4a-GV15、4aGV18)G区基因,分别将产物克隆入pGEM-T载体中,测定序列并进行拼接;测定6代次aG株RV的滴度、荧光滴度和毒力;应用DNAStar和Mega4.0软件包中的相应软件对基因组序列进行分析,并与我国近期分离且具有地域代表性的RV街毒株进行基因同源性分析。结果 6代次aG株RV GP基因保持高度稳定,未出现核苷酸突变位点;6代次aG株RV的滴度有所不同,但其毒力指标基本一致;RV aG株与我国街毒流行株GP抗原区具有较高的同源性,且膜外区同源性远高于跨膜区及膜内区;aG株RV第147位关键位点氨基酸与街毒流行株该位点不同,其余各关键抗原位点在各毒株间均高度同源;6代次aG株RV关键毒力位点均未出现氨基酸突变,传代稳定,aG株RV与各街毒流行株关键毒力位点均高度同源;aG株病毒信号肽结构与我国多株流行株高度同源,而其GP则与法国巴斯德原株PV2061株及分离自美国的HEP-Flury株高度同源,与我国流行街毒株亦具有较高的同源性。结论 RV aG株GP遗传稳定,且与我国近期分离的街毒株高度同源,本研究为完善该毒株的质量控制及全面评价其在我国的适用性提供了实验依据。

关键词：狂犬病病毒 aG株糖蛋白遗传稳定性生物信息学

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无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法的建立

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中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1322-1324页

作者：马霄卫辰谭亚军徐颖华侯启明中国食品药品检定研究院百白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果该方法的最低... 详细信息

目的建立无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法。方法依据活性PT的ADP核糖基化酶活性,设计并合成一段荧光标记的合成肽Gαi3C20,以其为底物,采用柱前衍生-HPLC法检测无细胞百日咳疫苗的毒性,并对建立的方法进行验证。结果该方法的最低检测限为1ng;最低定量检测限为8ng,线性范围为8～400ng/ml,区间内线性系数为0.999;用建立的方法对同一份样品平行测定10次,变异系数小于10%;该方法的回收率为94.9%;联合疫苗中的其他主要成分,如丝状血凝素（filamentous hemagglutinin,FHA）、黏附素（pertactin,PRN）、白喉类毒素（diphtheria toxoid,DT）、破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）对检测结果无明显干扰。结论建立了无细胞百日咳疫苗毒性体外检测方法,该方法有望替代现行的动物检查法,可加强我国百白破联合疫苗的质量控制,提高疫苗的质量。

关键词：无细胞百日咳疫苗毒性检测高效液相色谱法

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稳定表达狂犬病病毒CTN-1V株糖蛋白细胞系的建立

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中华实验和临床病毒学杂志 2013年第6期27卷 483-485页

作者：曹守春李玉华李加唐建蓉石磊泰刘景华王云鹏俞永新董关木中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的构建能稳定表达狂犬病病毒糖蛋白的CHO细胞系。方法用RT—PCR法扩增和分离CTN-1V株狂犬病毒糖蛋白基因，测序后克隆入pCDNA5．0FRT载体，构建重组质粒pCDNA5．0FRT—G，之后与POG44质粒共转染CHO细胞，采用潮霉素B抗性筛选，挑选阳... 详细信息

目的构建能稳定表达狂犬病病毒糖蛋白的CHO细胞系。方法用RT—PCR法扩增和分离CTN-1V株狂犬病毒糖蛋白基因，测序后克隆入pCDNA5．0FRT载体，构建重组质粒pCDNA5．0FRT—G，之后与POG44质粒共转染CHO细胞，采用潮霉素B抗性筛选，挑选阳性克隆，间接免疫荧光和WesternBlot进行稳定表达细胞系的鉴定。结果经酶切和测序鉴定，获得重组表达质粒pCDNA5．0FRT—G，共转染CHO细胞后，获得肉眼可见阳性细胞克隆，刮取阳性克隆进行传代扩大培养并定义为第2代，经过10代后免疫荧光和WesternBlot结果依然阳性。结论成功建立稳定表达狂犬病病毒糖蛋白的CHO细胞系，为深入研究糖蛋白的功能奠定基础。

关键词：狂犬病病毒糖蛋白类细胞系

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高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法测定四价脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量

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中国生物制品学杂志 2013年第9期26卷 1313-1317页

作者：唐静贺鹏飞李茂光李红李亚南梁丽陈翠萍叶强中国食品药品检定研究院呼吸道细菌疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的采用高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法（high performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detector,HPAEC-PAD）测定四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A、C、Y、W135群多糖含量,并对该方法进行验证。方法用... 详细信息

目的采用高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法（high performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detector,HPAEC-PAD）测定四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A、C、Y、W135群多糖含量,并对该方法进行验证。方法用三氟乙酸对四价脑膜炎球菌结合疫苗进行水解,得到各群多糖的水解产物：唾液酸、葡萄糖、半乳糖、6-磷酸葡萄糖胺（ManN-6-P）,采用HPAEC-PAD法,CarboPac PA10分离柱分别测定缓冲提取液中的总唾液酸、葡萄糖、半乳糖、ManN-6-P的含量,利用归一化的峰面积计算相应唾液酸系数,再计算C群脑膜炎球菌唾液酸含量。对HPAEC-PAD法进行验证,并与传统火箭电泳法检测结果进行比较。结果四价脑膜炎球菌结合疫苗水解后得到的4群单糖均呈良好线性,分离度和峰形均良好;HPAEC-PAD法检测4群糖的日内和中间精密性的RSD均小于5%;各群多糖峰面积的回收率均在80%～120%之间;3批四价脑膜炎球菌多糖疫苗水解后,经HPAEC-PAD法测定的各群多糖含量与传统火箭电泳法测定结果相当。结论 HPAEC-PAD法检测四价脑膜炎球菌多糖疫苗中的A、C、Y、W135群多糖含量准确、简便、快速、可靠,对控制该疫苗的质量具有重要意义。

关键词：离子色谱积分脉冲安培检测脑膜炎球菌多糖疫苗多糖

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百日咳鲍特菌黏附分子的研究进展

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中国生物制品学杂志 2013年第11期26卷 1692-1696页

作者：柯兵兵徐颖华侯启明马霄中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

随着生物技术的发展,研究人员对百日咳鲍特菌致病机理进行了大量研究并取得一定的突破,尤其是黏附分子在细菌致病过程中所起的作用。本文就近年来在百日咳鲍特菌黏附分子的研究进展作一简要综述。

关键词：百日咳黏附分子黏附素丝状血凝素菌毛蛋白

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百日咳疫苗免疫接种策略及相关研究进展

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中华预防医学杂志 2013年第1期47卷 70-73页

作者：王丽婵马霄孟丽徐颖华骆鹏卫辰张庶民侯启明中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 成都生物制品研究所有限责任公司

百日咳是由百日咳杆菌引起的细菌性呼吸系统传染病，其典型的特征是发作性咳嗽，可持续几个星期甚至更久。所有年龄段人群均对其易感，但婴幼儿及儿童感染后病情较成年人严重。近年来，基础免疫的实行，使疫苗接种覆盖率大大提高，在很... 详细信息

百日咳是由百日咳杆菌引起的细菌性呼吸系统传染病，其典型的特征是发作性咳嗽，可持续几个星期甚至更久。所有年龄段人群均对其易感，但婴幼儿及儿童感染后病情较成年人严重。近年来，基础免疫的实行，使疫苗接种覆盖率大大提高，在很大程度上降低了百日咳的发病，

关键词：百日咳杆菌疫苗免疫接种呼吸系统传染病接种覆盖率基础免疫细菌性发作性成年人

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狂犬病病毒减毒株CTN-181毒力减弱的分子基础研究

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中国病原生物学杂志 2013年第1期8卷 19-22页

作者：石磊泰张晓焕俞永新刘景华曹守春李加吴小红董关木中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京生物制品研究所北京100024

目的了解CTN-181弱毒株的全长基因结构及其毒力减弱的分子基础。方法将CTN-181的全长基因进行测序并与4株减毒疫苗株和5株街毒株进行全序列基因比对,与CTN-181株的母株CTN-1进行不同区段蛋白基因中的替换位点比较。结果全长基因比较显示... 详细信息

目的了解CTN-181弱毒株的全长基因结构及其毒力减弱的分子基础。方法将CTN-181的全长基因进行测序并与4株减毒疫苗株和5株街毒株进行全序列基因比对,与CTN-181株的母株CTN-1进行不同区段蛋白基因中的替换位点比较。结果全长基因比较显示,CTN-181株与其他9株狂犬病病毒的核苷酸和氨基酸同源性为81.4%～93.3%和86%～97%。与CTN-1母株比较,CTN-181株存在12处核苷酸和7处氨基酸突变,氨基酸突变位点发生在N157(N→S),M187(Q→P),G276(L→V),G333(R→Q),G336(N→D),G389(E→K)和L1061(S→N)。结论 CTN-181存在7处氨基酸突变,可以认为是其毒力减弱的分子基础,其中在G蛋白内的4个位点的氨基酸突变最为重要。

关键词： CTN-181狂犬病弱毒株全基因组序列基因同源性毒力相关基因

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