检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2013年第1期8卷 19-22页

作者：石磊泰张晓焕俞永新刘景华曹守春李加吴小红董关木中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京生物制品研究所北京100024

目的了解CTN-181弱毒株的全长基因结构及其毒力减弱的分子基础。方法将CTN-181的全长基因进行测序并与4株减毒疫苗株和5株街毒株进行全序列基因比对,与CTN-181株的母株CTN-1进行不同区段蛋白基因中的替换位点比较。结果全长基因比较显示... 详细信息

目的了解CTN-181弱毒株的全长基因结构及其毒力减弱的分子基础。方法将CTN-181的全长基因进行测序并与4株减毒疫苗株和5株街毒株进行全序列基因比对,与CTN-181株的母株CTN-1进行不同区段蛋白基因中的替换位点比较。结果全长基因比较显示,CTN-181株与其他9株狂犬病病毒的核苷酸和氨基酸同源性为81.4%～93.3%和86%～97%。与CTN-1母株比较,CTN-181株存在12处核苷酸和7处氨基酸突变,氨基酸突变位点发生在N157(N→S),M187(Q→P),G276(L→V),G333(R→Q),G336(N→D),G389(E→K)和L1061(S→N)。结论 CTN-181存在7处氨基酸突变,可以认为是其毒力减弱的分子基础,其中在G蛋白内的4个位点的氨基酸突变最为重要。

关键词： CTN-181狂犬病弱毒株全基因组序列基因同源性毒力相关基因

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DNA疫苗的不同构象在体内外表达差异研究

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药物分析杂志 2013年第8期33卷 1275-1279页

作者：赵晨燕黄维金刘强王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 吉林大学生命科学学院长春130012

目的:研究DNA疫苗构象对体内和体外表达的影响。方法:分别构建绿色荧光蛋白表达质粒(pcDNA3.1-EGFP)和萤火虫荧光素酶表达质粒(pDRVISV1.0-Fluc),对其存在的3种拓扑形式(包括超螺旋、线性、闭环切刻等)和反复冻融状态对表达效率的影响... 详细信息

目的:研究DNA疫苗构象对体内和体外表达的影响。方法:分别构建绿色荧光蛋白表达质粒(pcDNA3.1-EGFP)和萤火虫荧光素酶表达质粒(pDRVISV1.0-Fluc),对其存在的3种拓扑形式(包括超螺旋、线性、闭环切刻等)和反复冻融状态对表达效率的影响进行分析,前者用脂质体介导转染293FT细胞,用流式细胞仪检测EGFP的表达情况;后者通过接种BALB/c小鼠,用活体成像技术监测荧光素酶的表达情况。结果:对pcDNA3.1-EGFP质粒,流式细胞仪检测其转染293FT细胞48 h后显示,4种处理组的质粒表达EGFP的效率和荧光强度有所差异,依次为新鲜制备质粒(89.76%,2682.68)>反复冻融处理质粒(76.35%,2313.48)>闭环切刻质粒(68.45%,1245.95)>线性质粒(38.28%,929.5)。对pDRVISV1.0-Fluc质粒,采用小鼠活体成像技术持续观察接种后28 d的体内荧光素酶的荧光信号强度情况,结果显示:接种后0.2 d观察到荧光,之后强度持续开始增强,至第5 d达到平台期,维持至18 d。质粒各处理组的荧光强度组间有显著差异,依次为新鲜制备质粒(108.6)>反复冻融处理质粒(108.4)>线性质粒(108.3)>切刻质粒(108.0)。2种质粒不同构象的体内体外表达中,均是新鲜制备质粒的表达量最高,因其中超螺旋为其主要构象。结论:质粒中超螺旋比例高时其转染效率及表达量最高,提高超螺旋比例是DNA疫苗质量控制的关键。

关键词：拓扑形式构象超螺旋荧光素酶活体成像技术疫苗质量控制

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I03A-00723菌株发酵产物95-3的分离纯化及其体外活性

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中国新药杂志 2013年第16期22卷 1882-1885页

作者：董国霞马宵张玉琴贺晓波余利岩田霖谭亚军侯启明张月琴中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

目的:研究游动放线菌I03A-00723发酵产物95-3的分离纯化与体外生物学活性。方法:发酵I03A-00723菌株,收集菌丝体,用丙酮浸泡、乙酸乙酯萃取,通过硅胶柱色谱、半制备HPLC进行纯化。采用微稀释法和高通量荧光检测法分别测定化合物95-3的... 详细信息

目的:研究游动放线菌I03A-00723发酵产物95-3的分离纯化与体外生物学活性。方法:发酵I03A-00723菌株,收集菌丝体,用丙酮浸泡、乙酸乙酯萃取,通过硅胶柱色谱、半制备HPLC进行纯化。采用微稀释法和高通量荧光检测法分别测定化合物95-3的抗菌活性和对PDF酶的抑制活性。结果:确定了化合物95-3的分离纯化条件,HPLC显示其纯度达100%。体外活性实验结果表明:化合物95-3对粪肠球菌、屎肠球菌的敏感菌株和万古霉素耐药菌株均有较好的抗菌活性,对耐万古霉素屎肠球菌ATCC700221的MIC达到了3μ***-1;化合物95-3对PDF酶有较好的抑制活性。结论:化合物95-3具有较好的抗VRE活性和PDF酶抑制活性,有深入研究价值。

关键词： I03A-00723菌株发酵产物化合物95-3 分离纯化活性研究

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肝癌肿瘤干细胞的分离鉴定及差异性小分子RNA筛选

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中国生物工程杂志 2013年第1期33卷 1-7页

作者：许英晨管利东周军年曾泉袁红丰李思霆管兆轩何丽娟南雪陈琳岳文裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

旨在分离并鉴定肝癌肿瘤干细胞,并对其异常表达的microRNA进行了初步筛选。首先利用流式细胞术及免疫荧光技术分别在肝癌细胞系及肝癌组织标本中确认了CD90+细胞的存在;随后利用免疫磁珠分选技术从肝癌细胞系MHCC97-H中分离出了CD90+细... 详细信息

旨在分离并鉴定肝癌肿瘤干细胞,并对其异常表达的microRNA进行了初步筛选。首先利用流式细胞术及免疫荧光技术分别在肝癌细胞系及肝癌组织标本中确认了CD90+细胞的存在;随后利用免疫磁珠分选技术从肝癌细胞系MHCC97-H中分离出了CD90+细胞,化疗药物耐药性实验表明,CD90+细胞具有明显的化疗药物耐受能力;两次裸鼠皮下成瘤性实验也表明CD90+细胞具有较强的成瘤能力,而CD90-细胞不具备成瘤能力。上述实验充分说明:CD90+细胞具有肝癌肿瘤干细胞特性。因此利用该细胞模型进行了肝癌肿瘤干细胞CD90+细胞和非肝癌肿瘤干细胞CD90-细胞之间差异表达的microRNA的检测,结果表明,CD90+细胞与CD90-细胞之间共有92个microRNAs的表达存在差异性,其中在CD90+细胞中高表达的microRNAs有52个;在CD90-细胞中高表达的microRNAs有40个。

关键词：肝癌肿瘤干细胞 CD90 小分子RNA

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肠道病毒71型疫苗的中和抗体应答研究

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药物分析杂志 2013年第8期33卷 1280-1284页

作者：邵杰毛群颖姚昕李秀玲王一平邵强刘刚梁争论李凤祥王军志河南师范大学新乡453007 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京生物制品研究所北京100024

目的:比较我国不同企业研发的肠道病毒71型(EV71)疫苗原液和成品疫苗的小鼠中和抗体应答,为疫苗临床试验提供依据。方法:应用来源于3家疫苗研发企业的EV71疫苗原液(Y1、Y2、Y3),以及相应原液制备的3批成品疫苗(临床申报剂量:M1、M2、M3... 详细信息

目的:比较我国不同企业研发的肠道病毒71型(EV71)疫苗原液和成品疫苗的小鼠中和抗体应答,为疫苗临床试验提供依据。方法:应用来源于3家疫苗研发企业的EV71疫苗原液(Y1、Y2、Y3),以及相应原液制备的3批成品疫苗(临床申报剂量:M1、M2、M3;相同抗原含量:M1-1、M2-1、M3-1),分别采取2针程序免疫小鼠,检测免疫1针和2针后血清中和抗体效价。结果:分别来自不同生产企业的3个EV71疫苗原液免疫原性相近,免疫剂量均为430 U/0.5 mL/只时,1针后中和抗体阳性率为83.3%～90.0%,2针均为100%,中和抗体效价分别为1∶34.9～1∶45.9和1∶139.4～1∶285.7;与Al(OH)3吸附后,3批成品疫苗的免疫原性均出现明显增强,162 U/0.5 mL/只的剂量即均可得到与430 U/0.5 mL/只原液相近的抗体阳转率和效价,2针免疫后M3-1抗体效价显著高于M1-1和M2-1(1∶357.3、1∶111.3和1∶97.9,P分别为0.004和0.001)。当3批疫苗均采用临床申报剂量免疫时(162,493,506 U/0.5 mL/只),1针免疫后中和抗体阳性率(80%～100%)和抗体效价(1∶46.8～1∶115.4)均无显著性差异(P值均>0.05),2针后中和抗体阳性率均为100%,M3批抗体效价显著高于M1批(1∶958.2、1∶316.8,P值为0.017)。结论:3家企业EV71原液的免疫原性接近,成品疫苗2针免疫后均可诱导高效价中和抗体产生,但不同企业的中和抗体升高水平呈现差别,提示临床试验中需重点比较含佐剂疫苗加免后的免疫原性。

关键词：手足口病(HFMD) 肠道病毒71型(EV71) 中和抗体免疫原性疫苗

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狂犬病病毒减毒株CTN-181的免疫原性

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中国生物制品学杂志 2013年第3期26卷 297-299,308页

作者：石磊泰张晓焕俞永新刘景华曹守春李加吴小红唐建蓉董关木中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京生物制品研究所有限责任公司第七研究室北京100024

目的评价狂犬病病毒减毒株CTN-181的免疫原性。方法用不同病毒滴度的CTN-181株病毒对小鼠分别进行口腔或肌肉免疫,14 d后,分别用狂犬病病毒CVS株进行脑内或肌内攻毒,14 d后,计算小鼠的免疫保护力;同时于免疫后14、21和30 d,采用RFFIT法... 详细信息

目的评价狂犬病病毒减毒株CTN-181的免疫原性。方法用不同病毒滴度的CTN-181株病毒对小鼠分别进行口腔或肌肉免疫,14 d后,分别用狂犬病病毒CVS株进行脑内或肌内攻毒,14 d后,计算小鼠的免疫保护力;同时于免疫后14、21和30 d,采用RFFIT法检测小鼠血清抗狂犬病病毒中和抗体水平。结果两种途径免疫的小鼠均产生了较强的保护作用和较高的中和抗体水平。口腔免疫后脑内和肌内攻毒的50%保护剂量分别为1.4×105和1.4×104PFU/ml;肌肉免疫后脑内和肌内攻毒的50%保护剂量分别为1.4×106和1.4×105PFU/ml。小鼠口腔免疫CTN-181病毒量≥1.4×105PFU/ml 14 d后,即可产生有效的保护,至30 d时,1.4×106和1.4×107PFU/ml剂量组中和抗体水平达20 IU/ml以上;肌内免疫产生的中和抗体水平较低。结论 CTN-181减毒株具有良好的免疫原性,以较低病毒量免疫小鼠即可产生高水平的中和抗体和保护作用。

关键词：狂犬病病毒 CTN-181株保护效果中和抗体

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EB病毒Zta抗体检测的鼻咽癌诊断准确性的系统评价

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中国病毒病杂志 2013年第1期3卷 21-26页

作者：石大伟沈舒王菲菲张春涛中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的系统评价EB病毒Zta抗体检测用于鼻咽癌诊断的准确性。方法全文检索中国期刊全文数据库(CNKI,1979-2012)、万方数据知识平台(1990-2012)、维普出版平台(1989-2012)和PubMed(1966-2012),结合手动检索,按照纳入和排除标准筛选文献,提... 详细信息

目的系统评价EB病毒Zta抗体检测用于鼻咽癌诊断的准确性。方法全文检索中国期刊全文数据库(CNKI,1979-2012)、万方数据知识平台(1990-2012)、维普出版平台(1989-2012)和PubMed(1966-2012),结合手动检索,按照纳入和排除标准筛选文献,提取纳入文献的诊断准确性指标的数据。按QUADAS量表对纳入研究进行质量评价,采用MetaDisc 1.4软件检验研究间的异质性,并对诊断准确性指标进行Meta分析,绘制综合受试者工作特征曲线。结果从202篇中文文献和31篇英文文献中筛选出17篇符合标准的文献,总计鼻咽癌病例1 645例,对照组10 177例。研究间各诊断准确性指标均存在高度异质性,采用随机效应模型合并计算各诊断准确性评价指标。合并灵敏度为0.87(95%CI:0.86～0.89),合并特异度为0.94(95%CI:0.93～0.94),合并阳性似然比为8.05(95%CI:5.59～11.59),合并阴性似然比为0.16(95%CI:0.12～0.21),合并诊断优势比为52.93(95%CI:29.95～93.56),综合受试者工作曲线下面积为0.935 2。亚组分析显示在对照为其他EB相关疾病的研究中,诊断特异度为0.71(95%CI:0.66～0.76),低于对照为一般人群的研究。结论 EB病毒Zta IgG抗体检测用于鼻咽癌诊断的准确性较高,特别是在鼻咽癌筛查中具有很高的特异度,该检测具有良好的应用前景,应加强研制开发该种检测的体外诊断试剂盒。

关键词： EB病毒 Zta Zebra 鼻咽癌 Meta分析

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多糖蛋白结合疫苗中载体蛋白的研究与应用

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中国疫苗和免疫 2013年第4期19卷 355-360页

作者：谭亚军张庶民侯启明中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

多糖蛋白结合疫苗能弥补多糖疫苗的局限性,有效预防和控制脑膜炎球菌、肺炎球菌、b型流行性感冒嗜血杆菌等侵袭性细菌引起的婴幼儿和高危人群感染。目前,多糖蛋白结合疫苗的研制范围日趋广泛,但可供选择的载体蛋白种类有限,载体蛋白的... 详细信息

多糖蛋白结合疫苗能弥补多糖疫苗的局限性,有效预防和控制脑膜炎球菌、肺炎球菌、b型流行性感冒嗜血杆菌等侵袭性细菌引起的婴幼儿和高危人群感染。目前,多糖蛋白结合疫苗的研制范围日趋广泛,但可供选择的载体蛋白种类有限,载体蛋白的重复使用可能会引起免疫干扰等现象。为满足结合疫苗发展的需要,解决载体蛋白单一的现状,各种新型载体蛋白正在不断开发,现就多糖蛋白结合疫苗中载体蛋白的研究、应用和发展前景进行综述。

关键词：多糖蛋白结合疫苗载体蛋白

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应用Meta分析筛选疫苗免疫人体诱导的获得性免疫基因和通路

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中国病毒病杂志 2013年第5期3卷 343-348页

作者：张军楠吴星石大伟毛群颖姚昕高帆王一平徐苗梁争论中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的探讨接种疫苗诱导免疫应答的机制,为疫苗的研发和应用提供理论基础。方法运用整合分析(Meta分析),分析自美国生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)的基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO... 详细信息

目的探讨接种疫苗诱导免疫应答的机制,为疫苗的研发和应用提供理论基础。方法运用整合分析(Meta分析),分析自美国生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)的基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中下载的3套疫苗免疫基因芯片表达谱数据,初步筛选出疫苗免疫机体后获得性免疫在转录水平上的关键基因及通路。结果应用Meta分析得到疫苗免疫3套数据集的共同差异基因1 403个,其中表达水平上调基因709个,主要包括人类真核翻译延伸因子(EEF1A1)、白细胞介素18(IL-18)和核糖体蛋白大亚基P2(RPLP2)等,富集出自然杀伤细胞(natural killer,NK)介导的细胞毒作用和B细胞受体信号通路等26条通路;表达水平下调的基因694个,主要包括核糖体蛋白L41(RPL41)、核糖体蛋白L32(RPL32)、核糖体蛋白L34(RPL34)和胞浆多聚A结合蛋白3(PABPC3)等,富集出氧化磷酸化和T细胞受体信号通路等11条通路。结论应用Meta分析方法获得多个疫苗免疫机体后诱导获得性免疫的关键基因及通路,对了解疫苗的免疫机制具有重要意义。

关键词：疫苗获得性免疫 Meta分析基因通路

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弓形虫IgG亲和力诊断方法的验证与评价

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国际医学寄生虫病杂志 2013年第5期40卷 257-261页

作者：杨英超张瑾薄淑英张影王国柱辛晓芳中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的对弓形虫IgG亲和力诊断试剂盒进行考核和验证。方法采用化学发光微粒子免疫检测法，用10份弓形虫IgG阳性血清及弓形虫IgG抗体检测血清国家参考品对三批弓形虫IgG亲和力测定试剂盒及质控品进行考核，计算符合率、精密度及加速稳定性... 详细信息

目的对弓形虫IgG亲和力诊断试剂盒进行考核和验证。方法采用化学发光微粒子免疫检测法，用10份弓形虫IgG阳性血清及弓形虫IgG抗体检测血清国家参考品对三批弓形虫IgG亲和力测定试剂盒及质控品进行考核，计算符合率、精密度及加速稳定性等。结果试剂盒的符合率为100％，精密度变异系数（coefficient variation,CV）值均≤14％：经温度加速稳定性试验，其符合率与精密度无变化。结论经由化学发光微粒子免疫检测法制备的弓形虫IgG亲和力诊断试剂盒具有良好的符合率、精密度及稳定性．可用于临床检测。

关键词：刚地弓形虫亲和力化学发光微粒子

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