检索结果-内蒙古大学图书馆

国际检验医学杂志 2012年第21期33卷 2561-2562,2564页

作者：徐颖华骆鹏王丽婵卫辰侯启明张庶民中国食品药品检定研究院百白破疫苗和毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的应用改良小鼠脑腔攻击试验(MICA)检测评价低抗原含量百日咳疫苗效力。方法通过中检院和国外实验室平行应用改良小鼠脑腔攻击试验进行不同稀释度相同批次低抗原含量百日咳疫苗的效力,并应用统计软件分析。结果中检院与国外实验室所... 详细信息

目的应用改良小鼠脑腔攻击试验(MICA)检测评价低抗原含量百日咳疫苗效力。方法通过中检院和国外实验室平行应用改良小鼠脑腔攻击试验进行不同稀释度相同批次低抗原含量百日咳疫苗的效力,并应用统计软件分析。结果中检院与国外实验室所获得低抗原含量百日咳疫苗的MICA试验效力结果数据均较低(<1.1IU/mL),中检院计算出的效价均在国外实验室分析得出效价的95%可信区间内。结论 MICA方法可应用于低抗原含量百日咳疫苗效力检测分析,该研究为进一步确定中国低抗原含量百日咳疫苗的MICA试验检定标准奠定了基础。

关键词：百日咳菌苗效力改良小鼠脑腔攻击试验

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基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究

基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究

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2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会

作者：聂建辉王文波宋爱京王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室细胞室

目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白... 详细信息

目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白CKS-4EP;将合成的4E10表位多肽通过Sulfo-SMCC连接至P64K载体蛋白构建结合型免疫原PKEP。用SDS-PAGE电泳的方法检测各种免疫原的分子量和纯度。用假病毒中和试验评价豚鼠体内中和抗体水平。结果蛋白电泳显示所有免疫原的分子量大小正确,纯度在95%以上。GST-3EP能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体,3次免疫后5只豚鼠4只阳转,阳转的豚鼠中2只中和抗体水平IC50>200,另外两只抗体水平在100左右。对各组血清50倍稀释后中和抑制率进行统计分析,3EP组与佐剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的融合蛋白GST-3EP 3次免疫后能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体。

关键词：人类免疫缺陷病毒中和抗体融合蛋白偶联蛋白 4E10

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百日咳疫苗毒性试验方法研究进展

百日咳疫苗毒性试验方法研究进展

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：卫辰徐颖华骆鹏王丽婵侯启明中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

百日咳是一种急性呼吸道传染病,传染性较强。而人类是百日咳鲍特氏杆菌的唯一宿主,人群普遍一干,尤其以婴幼儿多见,是严重威胁人类健康的传染病之一。尽管现在世界上绝大数国家实施百日咳疫苗的免疫接种,使百日咳感染率和病死率大大下... 详细信息

百日咳是一种急性呼吸道传染病,传染性较强。而人类是百日咳鲍特氏杆菌的唯一宿主,人群普遍一干,尤其以婴幼儿多见,是严重威胁人类健康的传染病之一。尽管现在世界上绝大数国家实施百日咳疫苗的免疫接种,使百日咳感染率和病死率大大下降。但是值得注意的是,已接种疫苗的青少年和成人患百日咳的人数逐渐增多,血清学检测证实有持续性咳嗽的门诊成年人约12～26%感染过百

关键词：百日咳疫苗百日咳杆菌 APV 毒性试验

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碱性成纤维细胞生长因子与肿瘤生长关系概述

碱性成纤维细胞生长因子与肿瘤生长关系概述

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：王丽婵侯启明张庶民中国食品药品检定研究院血清室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的成员之一,是第一个被分离的血管形成促进因子[1]。人bFGF的基因位于染色体4q26-27。由于bFGF mRNA翻译起始点和剪接点的不同,单拷贝的bFGFz基因能够编码产生18～34kD多种... 详细信息

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的成员之一,是第一个被分离的血管形成促进因子[1]。人bFGF的基因位于染色体4q26-27。由于bFGF mRNA翻译起始点和剪接点的不同,单拷贝的bFGFz基因能够编码产生18～34kD多种形式的bFGF。目前研究较多的是18kD的亚型,也是bFGF活性的主要形式,由146个氨基酸组成,等电点为9.6[2]。bFGF在体

关键词：成纤维细胞生长因子肿瘤生长

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PPD皮肤试验方法最佳观察时间的探讨

PPD皮肤试验方法最佳观察时间的探讨

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：都伟欣徐苗卢锦标杨蕾苏城沈小兵王国治陈保文中国食品药品检定研究院细菌一室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的研究不同观察时间结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)皮试结果对健康志愿者和结核病患者的诊断情况,探讨其临床应用的最佳观察时间。方法随机选取506例健康志愿者和491例结核病患者,以上实验对象均皮内注射0.1mLPPD试剂,注射结束后分别于24... 详细信息

目的研究不同观察时间结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)皮试结果对健康志愿者和结核病患者的诊断情况,探讨其临床应用的最佳观察时间。方法随机选取506例健康志愿者和491例结核病患者,以上实验对象均皮内注射0.1mLPPD试剂,注射结束后分别于24、48h和72h观察并记录局部皮肤反应。结果在506例健康志愿者PPD皮试结果中,24、48h和72h的阴性人数分别为291例、258例和266例。在491例结核病患者PPD皮试结果中,24、48h和72h的阳性例数分别为380例、417例和424例。应用Bonferroni法进行两两检验,其中24h和48h之间的差异有统计学意义,48h的灵敏度显著大于24h;24h和72h之间的差异有统计学意义,72h时的灵敏度显著大于24h;48h和72h之间的差异无统计学意义。结论 48h和72h不同观察时间的PPD皮试结果在健康志愿者和结核病患者中具有相同的诊断效果,因此PPD皮肤试验的最佳观察时间可以扩大为48～72h。

关键词： PPD 健康志愿者结核病患者皮肤试验方法统计学意义

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我国卡介苗保护力评价参考体系建立的探讨

我国卡介苗保护力评价参考体系建立的探讨

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：陈保文沈小兵都伟欣苏城杨蕾卢锦标王国治中国食品药品检定研究院细菌一室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的探讨我国结核病新疫苗评价用卡介苗参考体系对豚鼠的保护力。方法采用我国卡介苗(D2PB302)菌株制备的疫苗,以1/10人用剂量(0.005mg/0.2ml)经皮下注射免疫豚鼠,对照组等体积注射生理盐水。共进行4个实验,免疫与感染间隔分别为:实验... 详细信息

目的探讨我国结核病新疫苗评价用卡介苗参考体系对豚鼠的保护力。方法采用我国卡介苗(D2PB302)菌株制备的疫苗,以1/10人用剂量(0.005mg/0.2ml)经皮下注射免疫豚鼠,对照组等体积注射生理盐水。共进行4个实验,免疫与感染间隔分别为:实验Ⅰ与Ⅱ免疫后进行Mtb感染的时间间隔为5周(其中实验Ⅱ为实验Ⅰ的重复实验,实验Ⅰ中BCG组和对照组均入组8只豚鼠;实验Ⅱ中BCG组入组6只豚鼠,对照组入组8只豚鼠),实验Ⅲ为28周(BCG组入组5只豚鼠,对照组入组6只豚鼠),实验Ⅳ为60周(BCG组和对照组均入组8只豚鼠),感染剂量为每只豚鼠2×(102～103)CFU Mtb/ml,注射0.5ml,感染途径为皮下注射,感染后6周,进行豚鼠解剖,观察豚鼠肝脾肺的病变程度并进行脾脏Mtb的分离,计算脾脏Mtb分离数和对数值。结果 (1)BCG免疫5周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为10.0±3.8,较对照组(46.9±4.8)差异有显著统计学意义(t=-0.63,P<0.01);脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为0.49±0.49,较对照组(5.41±0.18)差异有显著统计学意义(t=-9.43,P<0.01)。(2)BCG免疫5周重复实验组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为6.7±2.1,较对照组(36.3±6.0)差异有显著统计学意义(t=-4.63,P<0.01);脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为0.38±0.38,较对照组(5.11±0.19)差异有显著统计学意义(t=-11.22,P<0.01)。(3)BCG免疫28周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为10.0±4.5,较对照组(57.5±6.2)差异有显著统计学意义(t=-6.24,P<0.01);脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为2.16±0.93,较对照组(5.44±0.27)差异有统计学意义(t=-3.39,P<0.05)。(4)BCG免疫60周组,豚鼠的肝脾肺综合病变指数为14.4±4.8,较对照组(56.9±5.0)差异有显著统计学意义(t=-6.16,P<0.01);脾脏Mtb分离数的对数值(lg)为1.46±0.69,较对照组(5.43±0.20)差异有显著统计学意义(t=-5.55,P<0.01)。结论卡介苗保护力评价参考体系可靠稳定,我国临床应用卡介苗在该体系呈现优良保护效果。

关键词：卡介苗 BCG 保护力

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不同稀释液及培养基中氯化钠浓度对炭疽疫苗活菌计数的影响

不同稀释液及培养基中氯化钠浓度对炭疽疫苗活菌计数的影响

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：魏东李恪梅王国治中国食品药品检定研究院细菌一室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的研究不同稀释液及培养基中不同氯化钠浓度对炭疽活疫苗活菌数测定的影响。方法分别以氯化钠注射液、磷酸盐缓冲液及注射用水作为稀释液测定3批炭疽疫苗活菌数。将疫苗分别用氯化钠注射液和注射用水作适当稀释,孵育1h后进行活菌数测...

目的研究不同稀释液及培养基中不同氯化钠浓度对炭疽活疫苗活菌数测定的影响。方法分别以氯化钠注射液、磷酸盐缓冲液及注射用水作为稀释液测定3批炭疽疫苗活菌数。将疫苗分别用氯化钠注射液和注射用水作适当稀释,孵育1h后进行活菌数测定。将疫苗以注射用水稀释后接种含不同氯化钠浓度的厚氏琼脂培养基,测定炭疽疫苗活菌数。结果保存3个月疫苗以注射用水作稀释液的活菌数结果比氯化钠注射液高67%,比磷酸盐缓冲液高53%;保存12个月疫苗以注射用水作稀释液的活菌数结果比氯化钠注射液高63%。经氯化钠注射液孵育后的活菌数结果较注射用水孵育后明显降低。以注射用水稀释后菌液接种含不同氯化钠浓度的琼脂培养基,活菌数无明显差异。结论注射用水是炭疽活疫苗活菌数测定的合适稀释液,培养基中氯化钠对活菌数测定无明显影响。

关键词：

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流式细胞术在疟疾疫苗研发和评价中的应用

流式细胞术在疟疾疫苗研发和评价中的应用

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：杨英超辛晓芳中国食品药品检定研究院寄生虫疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

疟原虫基因组的破译,极大的促进了分子生物学技术在疟疾研究中的应用。流式细胞仪作为一种分子生物学研究中常用的仪器,与无细胞蛋白表达及细胞固定等其它技术一起,于近些年逐渐被用于疟疾疫苗候选抗原的筛选及体液和细胞免疫机理的研究... 详细信息

疟原虫基因组的破译,极大的促进了分子生物学技术在疟疾研究中的应用。流式细胞仪作为一种分子生物学研究中常用的仪器,与无细胞蛋白表达及细胞固定等其它技术一起,于近些年逐渐被用于疟疾疫苗候选抗原的筛选及体液和细胞免疫机理的研究,因而受到关注。为此,本文就上述新进展加以概述。

关键词：流式细胞术疟疾疫苗抗原免疫机理

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吸附破伤风疫苗效价测定方法概述

吸附破伤风疫苗效价测定方法概述

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：董国霞马霄田霖谭亚军侯启明中国食品药品检定研究院白白破疫苗与毒素室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的介绍目前吸附破伤风疫苗效价测定所采用的方法。方法主要以我国、欧盟、日本等国家的药典及美国NIH曾推荐的方法为依据,对吸附破伤风疫苗效价测定方法进行分析、归纳和总结。结果与结论吸附破伤风疫苗效价测定所采用的检测方法从总... 详细信息

目的介绍目前吸附破伤风疫苗效价测定所采用的方法。方法主要以我国、欧盟、日本等国家的药典及美国NIH曾推荐的方法为依据,对吸附破伤风疫苗效价测定方法进行分析、归纳和总结。结果与结论吸附破伤风疫苗效价测定所采用的检测方法从总体上来说可分为攻毒法和血清分析法。攻毒法包括豚鼠或小鼠攻毒法,其是将破伤风类毒素标准品和待检样品稀释成几个合适的稀释度,用每一个稀释度的破伤风类毒素标准品和待检样品分别免疫豚鼠或小鼠,免疫4～6周后于每只豚鼠或小鼠皮下注射破伤风类毒素,最后根据5天内每组动物的存活数或没有出现麻痹现象的动物数,用统计学方法计算待检样品的效价。血清分析法包括ELISA法、ToBI法和NIH分析法。ELISA法和ToBI法是用破伤风类毒素标准品和待检样品免疫豚鼠,NIH分析法只用待检破伤风类毒素免疫豚鼠,然后三者都通过采血、血液处理等步骤获取血清。之后ELISA法通过包被、封闭、加入血清、加酶标结合物、加底物、终止反应等步骤,测定405nmOD值,用统计学方法计算待检样品的效价;ToBI法是先将血清与破伤风毒素或类毒素混合,然后把混合液转入已包被和封闭好的酶标板中,再加入酶标结合物和底物,终止反应,测定450nmOD值,用统计学方法计算待检样品的效价;NIH分析法是将分离的血清与破伤风毒素在室温混合均匀,然后用混合液注射豚鼠或小鼠,根据注射后5天内动物的死亡数判定被检吸附破伤风类毒素样品所产生的抗体。目前我国采用的方法是豚鼠或小鼠攻毒法。

关键词：吸附破伤风疫苗标准品 NIH 效价测定破伤风类毒素

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XTT法检测鼠疫疫苗活菌含量

XTT法检测鼠疫疫苗活菌含量

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：魏东汪洁英王国治中国食品药品检定研究院结核病疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室

目的通过XTT方法检测鼠疫疫苗中的活菌含量,并与传统培养法的菌落形成单位计数结果进行比较,探讨在应急使用情况下以XTT方法快速检测鼠疫疫苗活菌含量的可行性。方法利用已知活菌含量的鼠疫疫苗参考品制备活菌含量与XTT有色产物吸光度... 详细信息

目的通过XTT方法检测鼠疫疫苗中的活菌含量,并与传统培养法的菌落形成单位计数结果进行比较,探讨在应急使用情况下以XTT方法快速检测鼠疫疫苗活菌含量的可行性。方法利用已知活菌含量的鼠疫疫苗参考品制备活菌含量与XTT有色产物吸光度值之间的参比曲线,根据未知样品的吸光度值,在线性方程中求出未知样品的活菌含量。同时将该检测方法的结果与传统培养法活菌含量结果进行比较分析。结果 XTT法能反应鼠疫疫苗制品中的活菌含量,在一定的浓度范围内,活菌含量与有色产物吸光度值之间有较好的线性关系,相关系数达到0.9999,应用该方法对3批鼠疫疫苗样品活菌含量进行检测,其结果与培养法菌落形成单位(CFU)结果无统计学差异(P>0.05),该实验可在2h左右完成。结论 XTT法能够反应鼠疫疫苗中的活菌含量,实验耗时短,为鼠疫疫苗活菌含量提供一种新的检测方法。

关键词：鼠疫疫苗培养法吸光度值 XTT

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