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首届东方药理论坛暨2018年全国心脑血管药理学术会议、上海市药理学会第十九届学术年会

作者：余春晓张玉瑶吴夏阳汤海霞梁雪琦薛周铭薛亚东李静朱辉霍蓉班涛中国黑龙江省哈尔滨医科大学药学院药理教研室(国家生物医药省重点实验室教育部心血管研究重点实验室) 中国黑龙江省哈尔滨市黑龙江中医药大学基础医学院解剖学与组织、胚胎学教研室中国福省厦门市建复旦大学儿童医院厦门分院(厦门儿童医院) 中国黑龙江省哈尔滨医科大学基础医学院生理学教研室

背景及目的:本研究探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对血管内皮细胞损伤的影响,并说明TRPM4通道(Transient receptor potential melastatin4)在ATO诱导的内皮损伤过程中所发挥的作用。方法:采用qRT-PCR技术检测ATO诱导的人脐静脉... 详细信息

背景及目的:本研究探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对血管内皮细胞损伤的影响,并说明TRPM4通道(Transient receptor potential melastatin4)在ATO诱导的内皮损伤过程中所发挥的作用。方法:采用qRT-PCR技术检测ATO诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中TRPM4的mRNA表达;采用Western blot技术和免疫荧光技术检测TRPM4在ATO诱导的HUVECs细胞中蛋白表达的变化;采用MTT法,TUNEL染色,Transwell小室分别检测TRPM4对HUVECs的细胞活力、

关键词：内皮损伤 siRNA HUVECs 三氧化二砷 TRPM4

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姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系

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中国药理学通报 2018年第3期34卷 393-400页

作者：范莹娟周义湘张连茹许建华福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室福建福州350108 厦门市仙岳医院药学部福建厦门361012 厦门大学生命科学学院福建厦门361005

目的研究姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C1209与Hsp90、其N端片段(NHsp90)、M端片段(MHsp90)、C端片段(CHsp90)的相互作用,以及不同温度(293 K、303 K、310... 详细信息

目的研究姜黄素衍生物C1209抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖与阻断Hsp90伴侣功能的关系。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C1209与Hsp90、其N端片段(NHsp90)、M端片段(MHsp90)、C端片段(CHsp90)的相互作用,以及不同温度(293 K、303 K、310 K)下,C1209与Hsp90的相互作用;实验选取280 nm为激发波长,290~510 nm的波长范围内进行荧光光谱扫描。采用孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,研究C1209对Hsp90-ATPase活性的抑制。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)染色法体外检测C1209对白血病细胞K562及耐伊马替尼(IM)的白血病细胞K562/G01细胞的增殖抑制作用;应用蛋白免疫印迹法检测Hsp90客户蛋白及其下游蛋白、Hsp90分子伴侣的表达。结果C1209解离常数为(14.733±0.713)μmol·L^(-1);C1209与Hsp90之间的主要作用力为静电作用力;C1209与Hsp90的C端片段结合能力最强。当ATP为1 mmol·L^(-1)时,C1209作用于Hsp90的IC50值为11.4μmol·L^(-1)。C1209呈剂量依赖性地抑制K562和K562/G01细胞的增殖,作用24 h的IC50为1.14μmol·L^(-1)和0.56μmol·L^(-1);C1209影响Hsp90的分子伴侣功能,且下调K562和K562/G01细胞中Bcr-Abl、Akt、MEK、ERK、c-Raf及其相应磷酸化蛋白p-Akt、p-MEK、p-ERK等Hsp90客户蛋白及其下游蛋白的表达。结论姜黄素衍生物C1209是Hsp90抑制剂,对K562和耐IM的白血病细胞K562/G01具有明显的增殖抑制作用,可能与其抑制Hsp90的分子伴侣功能、下调Hsp90客户蛋白有关。

关键词： C1209 Hsp90 ATPase活性荧光光谱法相互作用抑制作用

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基于整合药理学的中药质量标志物发现与应用

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中国实验方剂学杂志 2019年第6期25卷 1-8页

作者：许海玉侯文彬李珂申业唐仕欢郭非非张晶晶吴宏伟王萍苏瑾周荣荣李亚卓王岚王磊贡磊磊杨洪军刘昌孝中国中医科学院中药研究所北京100700 天津药物研究院新药评价研究中心释药技术与药物代谢动力学国家重点实验室天津300193 齐鲁工业大学(山东省科学院)自动化研究所山东省科学院超宽带与太赫兹技术培育性重点实验室济南250014 中国中医科学院中药资源中心北京100700 山西中医药大学基础医学院山西晋中030600

中药质量标志物是中药质量控制的新概念、新模式,将引领中药质量发展新方向。其中,如何表征中药整体质量属性及其生物学效应,是质量标志物研究的关键科学问题。针对此关键科学问题,本文提出基于整合药理学的中药质量标志物发现与确证的... 详细信息

中药质量标志物是中药质量控制的新概念、新模式,将引领中药质量发展新方向。其中,如何表征中药整体质量属性及其生物学效应,是质量标志物研究的关键科学问题。针对此关键科学问题,本文提出基于整合药理学的中药质量标志物发现与确证的研究思路,即通过"化学指纹-代谢指纹-网络靶标-生物效应-中医功效"多维关联系统筛选候选中药质量标志物,在此基础上,基于"肠吸收-活性评价-数据挖掘"体系建立中药质量标志物与生物活性之间精确定量模型并明确其贡献度。以元胡止痛片和心速宁胶囊为案例,介绍基于整合药理学的中药质量标志物的研究进展。

关键词：整合药理学中药质量标志物体外药理学精确定量关联成分敲除技术生物效应元胡止痛片

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中国医学生寒假期间心理状况的调查

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中国现代医生 2020年第36期58卷 141-146页

作者：蒋萍俞伟珍关陆阳庄楠楠曹佳琪侯文龙殷旭圆朱振华尹晓莉贾秋放惠李苏州大学附属广济医院生物精神医学研究中心江苏苏州215137 哈尔滨市第一专科医院精神科黑龙江哈尔滨150056 温州医科大学精神医学学院浙江温州325035 浙江省温州康宁医院科教处浙江温州325007

目的调查寒假期间中国医学生的心理状态。方法运用横断面调查方法,于2020年1月1日~2月29日对2201名来自于江苏、浙江、安徽、黑龙江等地区的医学生进行心理状况调查。运用焦虑自评量表、抑郁自评量表、压力知觉量表和一般资料问卷进行评... 详细信息

目的调查寒假期间中国医学生的心理状态。方法运用横断面调查方法,于2020年1月1日~2月29日对2201名来自于江苏、浙江、安徽、黑龙江等地区的医学生进行心理状况调查。运用焦虑自评量表、抑郁自评量表、压力知觉量表和一般资料问卷进行评估,采用SPSS进行数据分析。结果(1)寒假期间中国医学生焦虑、抑郁和压力的发生率分别为10.9%、26.2%和44.2%。(2)多因素Logistic回归分析,家庭年收入、家庭关系是焦虑症状的影响因素(P<0.05),性别、家庭年收入、家庭关系是抑郁症状的影响因素(P<0.05),性别、目前学业阶段、家庭年收入、压力源、家庭关系是压力症状的影响因素(P<0.05)。结论寒假期间中国医学生主要存在心理问题包括焦虑、抑郁和压力症状,进一步研究揭示性别、目前学业阶段、家庭年收入、压力源、家庭关系在中国医学生的心理问题出现中发挥关键作用。

关键词：医学生焦虑抑郁压力

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国产卡培他滨片剂在恶性肿瘤患者中的生物等效性研究

国产卡培他滨片剂在恶性肿瘤患者中的生物等效性研究

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2020中国药学会药物临床评价研究专业委员会学术年会

作者：刘青李劲彤李利亚王清张清媛孙涛宋振川王明霞王居峰刘中国贾军梅贾立群中日友好医院中西医结合肿瘤内科北京 100029 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科黑龙江哈尔滨 150081 辽宁省肿瘤医院内科辽宁沈阳 110042 河北医科大学第四医院乳腺中心河北石家庄 050035 河北医科大学第四医院临床药理研究部河北石家庄 050035 河南省肿瘤医院、郑州大学附属肿瘤医院内科河南郑州 450008 山西医科大学第一医院Ⅰ期临床研究室山西太原 030001 山西医科大学第一医院肿瘤科山西太原 030001

目的评价国产(成都苑东)卡培他滨片与原研卡培他滨片在恶性肿瘤患者体内的生物等效性.方法采用多中心、随机、开放、两周期、双交叉的餐后试验设计,84例可适用含卡培他滨片化疗方案的实体瘤患者随机分别口服国产与原研卡培他滨片剂,... 详细信息

目的评价国产(成都苑东)卡培他滨片与原研卡培他滨片在恶性肿瘤患者体内的生物等效性.方法采用多中心、随机、开放、两周期、双交叉的餐后试验设计,84例可适用含卡培他滨片化疗方案的实体瘤患者随机分别口服国产与原研卡培他滨片剂,每周期服药1次,单次给药1250 mg·m-2,按照体表面积计算向下调整至0.5 g的整倍片剂,给药两周期间清洗期为12 h.用液相色谱-质谱(LC-MS/MS)检测方法测定血浆中卡培他滨浓度,进行生物等效性研究.结果实体瘤患者餐后服用卡培他滨片受试制剂和参比制剂后的药代动力学参数如下：Cmax分别为(3940±2300),(4040±2900)ng·mL-1;AUC0-t分别为(4820±1620),(4750±1700)h·ng·mL-1;AUC0-∞分别为(4870±1680),(4970±1750)h·ng·mL-1.2种药物的Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的几何均数比相对应的90%置信区间均在80.00％～125.00％.结论恶性肿瘤患者餐后口服卡培他滨片受试制剂和参比制剂具有生物等效性,且受试制剂和参比制剂不良事件发生情况相似.

关键词：卡培他滨片剂恶性肿瘤患者生物等效性药代动力学

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绿原酸对小鼠急性肺损伤的保护作用研究

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天然产物研究与开发 2018年第7期30卷 1214-1218,1251页

作者：郭静李敏杨毅张霖孙黔云贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室药理与生物活性研究中心贵州省人民医院干医科贵阳550014

本文探讨了绿原酸对补体旁路激活致小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。将32只KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、白藜芦醇组、绿原酸组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)尾静脉注射复制小鼠急性肺损... 详细信息

本文探讨了绿原酸对补体旁路激活致小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。将32只KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、白藜芦醇组、绿原酸组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)尾静脉注射复制小鼠急性肺损伤模型。测定肺含水量、肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数目和蛋白含量,ELISA法检测BALF和血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、P选择素(P-selectin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,HE染色法观察肺组织病理形态学变化,免疫组化法测定肺组织中NF-κB p65的磷酸化水平。研究发现,绿原酸可以降低小鼠BALF中蛋白含量、炎性细胞数目、IL-6和TNF-α含量以及肺组织匀浆中MPO活性,并可显著降低血清中IL-6、TNF-α及P-selectin、ICAM-1水平;病理形态学显示绿原酸可以显著抑制炎性细胞浸润,免疫组化结果显示绿原酸可显著抑制小鼠NF-κB p65的磷酸化水平。以上结果说明绿原酸可明显减轻补体旁路激活诱导的小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB p65的磷酸化及降低炎症反应程度有关。

关键词：绿原酸白藜芦醇补体旁路急性肺损伤眼镜蛇毒因子 NF-κB p65

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玛咖皂苷对H_2O_2诱导的神经细胞氧化损伤的防护作用

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中国食品学报 2018年第7期18卷 28-36页

作者：唐伟敏谢亮华王楠王锐金露楚秉泉张英浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江省农产品加工技术研究重点实验室浙江省食品加工技术与装备工程研究中心杭州310058 宁夏医科大学药理学系和教育部生育力保持重点实验室银川750004

目的:探究玛咖皂苷对PC12神经细胞氧化损伤的防护作用。方法:采用超声波辅助提取、正丁醇液-液萃取从玛咖醇提物中得到总皂苷部位,再经D101大孔吸附树脂分离得到F1和F2两个分级组分。采用比色法测定F1和F2的总皂苷、总黄酮和总酚含量,用... 详细信息

目的:探究玛咖皂苷对PC12神经细胞氧化损伤的防护作用。方法:采用超声波辅助提取、正丁醇液-液萃取从玛咖醇提物中得到总皂苷部位,再经D101大孔吸附树脂分离得到F1和F2两个分级组分。采用比色法测定F1和F2的总皂苷、总黄酮和总酚含量,用UPLC-PDA法检测人参型皂苷含量,并采用体外化学法评价其抗氧化活性,同时采用MTT法考察其对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。结果:F1组分含有皂苷(人参型皂苷含量为19.5 mg/g)、多酚和黄酮类化合物,F2的总皂苷含量显著高于F1组分,其中人参型皂苷为270 mg/g;两者在体外均表现出一定的抗氧化活性,对PC12细胞活力影响的评价结果表明,F2(EC50为0.213μg/mL)对PC12细胞的保护作用显著强于F1(EC50为0.995μg/mL)。结论:玛咖总皂苷部位富含三萜皂苷、黄酮等酚类化合物,且所含的三萜皂苷以人参型皂苷为主,能有效防御PC12神经细胞的氧化损伤,表明玛咖皂苷具有用于预防神经退行性疾病的保健食品或特殊医学用途食品研发的潜力。

关键词：玛咖三萜皂苷神经细胞氧化损伤防护作用

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O-GlcNAc修饰介导子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

O-GlcNAc修饰介导子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭的机制研究

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：李晓雪齐佳廖杨优李真孔英大连医科大学基础医学院生物化学教研室

O-GlcNAc修饰是单个N-乙酰葡萄糖胺在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧原子上连接的一种单糖修饰,其基团的添加和去除分别是由OGT和OGA完成的。子宫内膜容受性指子宫内膜允许胚胎着床的接受状态。胚胎着床是胚泡与子宫内膜上皮细胞... 详细信息

O-GlcNAc修饰是单个N-乙酰葡萄糖胺在蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧原子上连接的一种单糖修饰,其基团的添加和去除分别是由OGT和OGA完成的。子宫内膜容受性指子宫内膜允许胚胎着床的接受状态。胚胎着床是胚泡与子宫内膜上皮细胞的识别、定位、黏附,进而植入子宫内膜。本研究拟分析O-GlcNAc修饰介导子宫内膜细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。实验结果:一、使用OGT抑制剂Alloxan处理RL95-2细胞、OGA抑制剂PUGNAC处理HEC-1A细胞分别下调和上调细胞O-G1cNAc修饰水平,CCK-8、Transwell小室实验分析O-GlcNAc修饰水平增加促进HEC-1A细胞增殖、迁移和侵袭能力,增加HEC-1A与JAR细胞黏附率。而O-GlcNAc修饰水平下降则会抑制RL95-2细胞增殖、迁移和侵袭能力,黏附能力下降。二、Western blot检测OGT抑制剂处理的RL95-2细胞,增殖相关因子Bcl-2、FoxM1表达降低,Bax、Casepase3表达升高,侵袭分子MMP2、MMP9表达降低,以及抑制EMT相关分子N-cadherin表达,促进E-cadherin表达,而OGA抑制剂处理的HEC-1A细胞分子的表达趋势与RL95-2细胞相反。三、Western blot检测检测不同O糖基化修饰水平对Wnt/β-catenin信号通路的调控:OGT抑制剂处理的RL95-2细胞下调O-GlcNAc修饰水平后抑制Wnt3a、β-catenin及β-catenin下游分子CylinD1的表达,而OGA抑制剂处理的HEC-1A细胞分子的表达趋势与其相反。以上结果初步显示O-GlcNAc修饰对子宫内膜容受性建立起重要作用。

关键词： O-GlcNAc 增殖迁移侵袭子宫内膜容受性

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O-GlcNAc修饰增加子宫内膜癌细胞干性和恶性能力

O-GlcNAc修饰增加子宫内膜癌细胞干性和恶性能力

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：李真张宏硕齐佳郭金秋孔英大连医科大学基础医学院生物化学教研室

子宫内膜癌是妇科癌症中常见的恶性肿瘤,世界范围内发病率呈逐年上升。O连接N-乙酰葡糖胺修饰(O-GlcNAcylation)是以来自机体糖代谢己糖胺合成途径(HBP)的N-乙酰氨基葡萄糖胺(UDP-GlcNAc)为底物,将O-GlcNAc基团连接到蛋白质的丝氨酸或... 详细信息

子宫内膜癌是妇科癌症中常见的恶性肿瘤,世界范围内发病率呈逐年上升。O连接N-乙酰葡糖胺修饰(O-GlcNAcylation)是以来自机体糖代谢己糖胺合成途径(HBP)的N-乙酰氨基葡萄糖胺(UDP-GlcNAc)为底物,将O-GlcNAc基团连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸上的一种蛋白质翻译后修饰方式。在哺乳动物O-GlcNAc转移酶(OGT)催化O-GlcNAc的添加、O-GlcNA水解酶(OGA)使O-GlcNAc水解去除。O-GlcNAcylation调节多种细胞过程,例如营养感应、细胞周期进程、转录、翻译、表观遗传学调控和蛋白质-蛋白质相互作用等。肿瘤细胞具有维持增殖信号、逃避生长抑制因子、逃避免疫监视、诱导血管生成等干细胞样潜能。我们的研究显示:OGT在子宫内膜组织腺上皮细胞基底侧表达。选取子宫内膜癌细胞Ishikawa和RL95-2细胞,下调OGA的表达,检测子宫内膜癌细胞Ishikawa和RL95-2细胞的干性标志因子OCT4、SOX2表达均增高,细胞功能研究显示细胞的迁移、侵袭能力增强;而下调OGT的表达,干性标志因子OCT4、SOX2表达降低,细胞的迁移、侵袭能力降低。有研究表明与正常组织相比,SOX2和OCT4在子宫内膜癌症组织中均过表达。我们研究旨在探讨O-GlcNAc修饰对子宫内膜癌细胞干性样潜能和恶性能力的影响机制,以求寻找治疗子宫内膜癌的新思路。

关键词：子宫内膜癌 O-GlcNAc修饰肿瘤干性迁移侵袭

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GATA6参与调节内皮细胞功能及其分子机制

GATA6参与调节内皮细胞功能及其分子机制

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：刘欢李晓雪廖杨优李真隋琳琳孔英大连医科大学基础医学院生物化学教研室

转录因子GATA是一个高度保守的锌指蛋白家族,介导组织特异性基因的表达,GATA6在胚胎发育过程中对心血管系统、消化系统和其他组织的增殖、分化和发育至关重要。肿瘤发生与胚胎期的基因激活密切相关,GATA6的过表达增强了肿瘤的成瘤性;血... 详细信息

转录因子GATA是一个高度保守的锌指蛋白家族,介导组织特异性基因的表达,GATA6在胚胎发育过程中对心血管系统、消化系统和其他组织的增殖、分化和发育至关重要。肿瘤发生与胚胎期的基因激活密切相关,GATA6的过表达增强了肿瘤的成瘤性;血管生成是胚胎发育、组织生长和伤口愈合的关键过程,异常血管生成可促进炎症、创伤愈合异常、血管疾病、复发性流产等妊娠相关疾病和肿瘤的发生发展;妇产科常见妊娠相关疾病子痫前期是一种由于血管生成和抗血管生成失衡引起的疾病,其发病机制可能涉及胎盘功能异常及其引起的内皮功能障碍,血管生成因子生成减少,抗血管生成因子生成增多是其特征之一。本研究结果表明:GATA6在子痫前期胎盘中的表达量随着子痫前期的进展而逐渐下降;对HUVEC细胞瞬时转染过表达GATA6质粒及GATA6 siRNA,通过Transwell小室、细胞划痕实验、CCK8实验、集落形成实验等实验发现,过表达GATA6可增强HUVEC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。干扰GATA6,抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及侵袭。表明GATA 6对内皮细胞的功能和存活起着至关重要的作用。提取细胞总蛋白,通过Western blotting发现GATA6主要通过PI3K-AKT、ERK信号通路调控内皮细胞功能。细胞增殖相关标志分子CyclinD1、Bcl2、FOXM1等随着GATA6的瞬时上调或下调,表达相应增加或减少;侵袭相关标志分子MMP2、MMP9等随着GATA6的瞬时上调或下调,表达量相应增加或减少;在HUVEC细胞中过表达GATA6,血管生成因子VEGF表达增多,干扰GATA6,VEGF表达量减少,表明GATA6可能参与调节血管生成的生理过程。

关键词： GATA6 血管生成 VEGF 子痫前期

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