检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈星儒王小婷郝美琪周永辉崔文强邢晓旭徐长赓白靖文李艳华黑龙江省动物疫病控制与药物开发重点实验室(东北农业大学)东北农业大学动物医学学院

[目的]咪唑甘油磷酸酯脱水酶(IGPD)是除草剂的治疗靶点,也是木糖葡萄球菌治疗奶牛乳房炎的可能靶点。IGPD的三维结构对于虚拟筛选抑制剂的发现是至关重要的。然而,迄今为止还没有报道木糖葡萄球菌IGPD的三维结构。[方法]测本研究应用同... 详细信息

[目的]咪唑甘油磷酸酯脱水酶(IGPD)是除草剂的治疗靶点,也是木糖葡萄球菌治疗奶牛乳房炎的可能靶点。IGPD的三维结构对于虚拟筛选抑制剂的发现是至关重要的。然而,迄今为止还没有报道木糖葡萄球菌IGPD的三维结构。[方法]测本研究应用同源模建、Ramachandran Plot和Verify 3D等计算机辅助药物设计(CADD)技术构建合适的木糖葡萄球菌IGPD三维模型。随后通过分子对接对化合物进行筛选,并通过结晶紫染色法测定筛选的几种化合物干预木糖葡萄球菌生物被膜的形成能力,最后利用扫描电子显微镜法(SEM)对干预木糖葡萄球菌生物被膜的形成能力好的一种化合物进行形态学验证。[结果]测通过CADD技术成功构建木糖葡萄球菌IGPD三维模型,通过分子对接从2500种化合物中筛选出药效好的9种化合物,通过结晶紫染色法测定这9种化合物干预木糖葡萄球菌生物被膜的形成能力,其中黄芩苷对木糖葡萄球菌生物被膜干预能力更强,通过SEM从形态学进一步验证了黄芩苷对木糖葡萄球菌有较好的抑制作用。[结论]因此,利用CADD对木糖葡萄球菌IGPD结构预测,通过虚拟筛选发现该蛋白能与黄芩苷结合并靶向抑制木糖葡萄球菌生物被膜形成,为进一步开发治疗奶牛乳房炎的新型IGPD抑制剂具有指导意义。

关键词：咪唑甘油磷酸酯脱水酶木糖葡萄球菌同源模建虚拟筛选生物被膜

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响应面法优化诺丽果总木脂素提取工艺的研究

响应面法优化诺丽果总木脂素提取工艺的研究

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：张鹏霞宋琳琳佳木斯大学药学院药物化学教研室

针对药食同源开发领域中对于有效成分提取方法的不断更新,我们做了以下的工作。诺丽全身皆可入药,果实中含有多种药用成分[1]。可用于治疗咽喉炎、肠道传染病、月经失调、细菌性全身反应综合征等病症[2],对预防癌症也有一定的效果。首先... 详细信息

针对药食同源开发领域中对于有效成分提取方法的不断更新,我们做了以下的工作。诺丽全身皆可入药,果实中含有多种药用成分[1]。可用于治疗咽喉炎、肠道传染病、月经失调、细菌性全身反应综合征等病症[2],对预防癌症也有一定的效果。首先,以细辛脂素为对照品,以单因素实验为基础,选取乙醇浓度、超声提取时间和提取温度为变量,木脂素提取率为响应值,采用响应面法对诺丽果总木脂素超声提取工艺进行优化。通过单因素实验考察了乙醇浓度、提取时间、提取温度三个因素对诺丽果总木脂素提取率的影响并用软件进行优化,通过数学方法将已有数据代入数值公式,建立了超声波提取诺丽果木脂素的数学模型。获得了提取诺丽果总木脂素的最佳条件:乙醇的浓度为79.91%、时间为39.58 min、提取温度为58.63℃,经验证该模型可靠(表1,图1)。在研究方法中,多采用正交设计方法。但是由于该方法的限制,所获得的提取工艺参数的准确性不好[3]。响应面法可以将不明确的函数关系表达出来,计算过程不繁琐,对解决实际问题很有效率,响应面法具有不断分析实验各层次的优点[4]。因此,对诺丽果中木脂素的开发利用具有较高的药用价值和广阔的应用前景[5]。人们应该从多种方面入手,深刻研究诺丽果的成分及药理作用,积极地响应国家的政策,促进科研成果的转化,人们还需要在研发上多做努力。

关键词：诺丽果总木脂素超声提取响应面法

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芜菁多糖的分离纯化、化学结构及其抗疲劳动物试验研究

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中国食品学报 2018年第12期18卷 22-31页

作者：唐伟敏金露谢亮华黄菊青楚秉泉戴旭林王锐张英浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江省农产品加工技术研究重点实验室浙江省食品加工技术与装备工程研究中心杭州310058 西藏宏发盛桃食品股份有限公司拉萨850000 宁夏医科大学药理学系和教育部生育力保持重点实验室银川750004

目的:解析芜菁多糖的化学结构,证明其体内抗疲劳功效。方法:采用水提醇沉法提取,经葡聚糖凝胶柱分离纯化得到芜菁多糖试样(纯度94.61%,得率0.94%,均以干基计)。用HPGPC、红外光谱、甲基化、GC-MS和NMR等分析手段对芜菁多糖的化学结构进... 详细信息

目的:解析芜菁多糖的化学结构,证明其体内抗疲劳功效。方法:采用水提醇沉法提取,经葡聚糖凝胶柱分离纯化得到芜菁多糖试样(纯度94.61%,得率0.94%,均以干基计)。用HPGPC、红外光谱、甲基化、GC-MS和NMR等分析手段对芜菁多糖的化学结构进行系统研究,采用小鼠负重游泳试验模型研究其抗疲劳功效。结果:芜菁多糖是一种富含半乳糖醛酸的酸性多糖(重均分子质量Mw为193.18 ku),糖基组成分析表明其含有7种单糖,物质的量百分比(mol,%)为半乳糖醛酸(D-GalA)∶甘露糖(D-Man)∶阿拉伯糖(L-Ara)∶半乳糖(D-Gal)∶葡萄糖(D-Glc)∶鼠李糖(L-Rha)∶葡萄糖醛酸(D-GlcA)=67.73∶17.19∶10.20∶3.19∶1.11∶0.34∶0.23;甲基化、GC-MS以及NMR等分析结果表明,β-1,3,6-GalpA与β-1,3-Galp(A)以1,3连接方式形成芜菁多糖的核心骨架。芜菁多糖在抗疲劳活性方面,与空白对照组相比,芜菁多糖[100 mg/(kg bw·d)]能显著延长小鼠负重游泳的时间(P<0.05),并提高小鼠前5 min的平均游泳速率(P<0.05);同时,显著提高小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)(P<0.05)的活力,降低乳酸脱氢酶(LDH)活力(P<0.01),并显著降低其代谢产物血清尿素氮(BUN)、乳酸(LA)和丙二醛(MDA)的水平(P<0.05)。结论:芜菁多糖是一种富含半乳糖醛酸的酸性多糖,是芜菁发挥抗疲劳作用的主要功效成分。

关键词：芜菁多糖化学结构小鼠抗疲劳试验

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丹蛭降糖胶囊治疗肥胖引起的慢性肾病的机制研究

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中国药理学通报 2018年第8期34卷 1163-1169页

作者：吴斌张一陈勇刘权李瑞胡冰峰方朝晖鲁云霞安徽医科大学生物化学教研室安徽合肥230032 安徽卫生健康职业学院安徽池州247099 安徽医科大学附属第一医院内分泌科安徽合肥230022 安徽医科大学药学院临床药学专业2014级安徽合肥230032 安徽中医药大学附属第一医院内分泌科安徽合肥230031

目的探究丹蛭降糖胶囊(DJC)改善肥胖引起的大鼠慢性肾病的初步机制。方法♂SD大鼠随机分为基础饲料组(CON)、高脂饲料组(HFD)、高脂饲料+丹蛭降糖胶囊低剂量组(HFD+DJCL,500 mg·kg^(-1)·d^(-1))、高脂饲料+丹蛭降糖胶囊高剂量... 详细信息

目的探究丹蛭降糖胶囊(DJC)改善肥胖引起的大鼠慢性肾病的初步机制。方法♂SD大鼠随机分为基础饲料组(CON)、高脂饲料组(HFD)、高脂饲料+丹蛭降糖胶囊低剂量组(HFD+DJCL,500 mg·kg^(-1)·d^(-1))、高脂饲料+丹蛭降糖胶囊高剂量组(HFD+DJCH,1 000 mg·kg^(-1)·d^(-1)),除CON组外,均给予高脂饮食12周,治疗组再灌胃治疗8周。检测血清血脂和肾代谢指标,HE、油红O、PAS染色观察肾脏的病理学变化,10%肾匀浆测定肾组织TG、TSOD、Cu Zn-SOD、CAT、GSH-Px、TNOS、MDA含量,免疫组化法检测CD36的表达变化,RT-PCR分析SREBP1c及FASN的表达,Western blot分析DJC对AMPK、磷酸化AMPK、PPARα、PPARγ表达的影响。结果对比CON组,HFD组大鼠体质量增加,血清TC、TG、UA、BUN、Scr升高,HDL-C下降,肾小球出现明显的损伤及脂质沉积,GSH-Px、MDA升高,TSOD、CAT、Cu Zn-SOD、TNOS水平降低,CD36、SREBP1c、FASN、PPARγ的表达上升,PPARα、AMPK、磷酸化AMPK表达下降;对比HFD组,HFD+DJCL和HFD+DJCH组均明显逆转上述指标,且有一定的剂量效应。结论 DJC可有效降低高脂饮食引起的肾内脂质沉积和氧化应激水平,其机制可能是通过激活AMPK-PPARα通路,抑制CD36和脂肪生成基因PPARγ、SREBP1c、FASN的表达,并有一定的剂量效应。

关键词：丹蛭降糖胶囊高脂血症慢性肾病氧化应激 AMPK 脂代谢

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碱性成纤维细胞生长因子团聚体对糖尿病大鼠外周神经病变的治疗作用

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第4期31卷 295-302页

作者：李锐邹双高征征刘彦隆张宏宇肖健温州医科大学药学院浙江省生物技术制药工程重点实验室浙江温州325035

目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯(PEAD)、肝素和bFGF按50∶10∶1(m/m/m)的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚... 详细信息

目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯(PEAD)、肝素和bFGF按50∶10∶1(m/m/m)的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚体中bFGF含量,ELISA法检测团聚体中bFGF释放速率。雄性SD大鼠ip给予链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,继续饲养8周使之发生外周神经病变,随机分为空载体组、bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组。bFGF治疗组每天im给予bFGF 200μg·kg^(-1),连续3 d;bFGF团聚体治疗组一次性im给予含等量bFGF的团聚体12.2 mg·kg^(-1);空载体组给予等体积的空载体(PEAD+肝素)。每周测量后肢足步印迹进行坐骨神经功能指数(SFI)的行为学评分。给药后第30天处死大鼠,收集两侧坐骨神经,HE染色进行病理学观察,DAPI荧光染色检测神经组织内细胞凋亡,Western蛋白印迹法检测细胞增殖标志物Ki67和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平。结果 PEAD、肝素和bFGF按50∶10∶1配比制备的bFGF团聚体结合bFGF良好;ELISA释放曲线结果表明,该团聚体可缓释bFGF。大鼠行为学评价和病理指标检测结果显示,与正常对照组比较,空载体组大鼠SFI显著减小(P<0.01),神经纤维排列紊乱且内部脱髓鞘情况严重,而且组织内部细胞凋亡明显,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。与空载体组比较,bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组SFI升高(P<0.05,P<0.01),神经纤维排列紊乱和内部脱髓鞘现象改善,组织内部细胞凋亡减少,且Ki67和PCNA蛋白表达显著增加(P<0.01)。与bFGF治疗组相比,bFGF团聚体治疗组SFI在治疗后第28天升高更加明显(P<0.05),神经纤维排列规整,脱髓鞘现象基本消失,组织内部细胞核的荧光强度与形态基本接近正常,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论新型生物材料PEAD能有效地结合bFGF并缓控其释放。该团聚体治疗糖尿病大鼠坐骨神经病变效果可能优于单纯bFGF给药。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子糖尿病外周神经病变团聚体肝素

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HIV转录激活复制过程中差异表达LncRNA和mRNA筛选及初步分析

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中国病毒病杂志 2018年第5期8卷 353-358页

作者：邵冰邵弘杜娟宋波台志艳林元龙迟宗杨颜泽王福祥吉林医药学院公共卫生学院流行病与卫生统计教研室吉林吉林132013 吉林医药学院药学院基础化学教研室吉林吉林132013 哈尔滨医科大学附属第四医院感染科黑龙江哈尔滨150081 吉林医药学院生物医学工程学院数学教研室吉林吉林132013

目的探讨长链非编码LncRNA和mRNA在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)转录激活过程中的表达情况。方法从公共数据平台Gene Expression Omnibus(GEO)下载HIV相关LncRNA+mRNA基因芯片数据集GSE74818。对其中感染时间在18h和30h的芯片探针进行重新分析,筛选出HIV从整合到基因组中到转录形成成熟病毒这一过程中差异表达的LncRNA和mRNA。采用R软件Limma包分析LncRNA和mRNA基因表达谱。结果从经过归一化、过滤和去除重复探针后筛选出1 366个差异表达基因,其中LncRNA 297个,mRNA 1 069个。LncRNA中表达上调的有188个,表达下调的有109个。mRNA表达上调的有530个,有539个表达下调。对差异表达的mRNA进行GO基因富集分析发现,在生物学过程中:主要富集在核小体、染色质组装、核小体组织、负性正性基因表达调控、表观遗传、染色质沉默等条目中;在细胞组分过程中:主要富集在核染色质、蛋白-DNA复合物、核小体、DNA包装复合物等条目中;在分子功能过程中:主要富集在蛋白异二聚体激活、核小体DNA结合条目中。KEGG pathway富集分析结果显示:差异表达的mRNA主要富集在系统性红斑狼疮、类固醇生物合成、酒精中毒、病毒致肿瘤、P53信号通路等中。结论 HIV从整合到基因组到形成成熟病毒这一过程中存在LncRNA和mRNA的差异表达,差异表达的RNA主要涉及到基因的转录调控过程和免疫通路调控过程。

关键词：人类免疫缺陷病毒(HIV) 基因表达谱转录复制 LncRNA mRNA

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基于尿液代谢组学的六味地黄丸对大鼠生长发育的影响

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药学学报 2018年第10期53卷 1713-1720页

作者：康舒宇张佳琪张艾嘉王萍王喜军黑龙江中医药大学中医方证代谢组学研究中心国家中医药管理局中药血清药物化学重点实验室中美中医方证代谢组学技术合作中心黑龙江哈尔滨150040 中国中医科学院中药研究所北京100700

构建以传统的生理研究为基础,以尿液代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标的六味地黄丸(LW)调控大鼠生长发育的综合药效评价体系。将27日龄SD大鼠60只随机分为对照组、六味地黄丸低、中、高剂量组, 28日龄开始连续灌胃给予不同剂... 详细信息

构建以传统的生理研究为基础,以尿液代谢组学的整体代谢轮廓和生物标记物为指标的六味地黄丸(LW)调控大鼠生长发育的综合药效评价体系。将27日龄SD大鼠60只随机分为对照组、六味地黄丸低、中、高剂量组, 28日龄开始连续灌胃给予不同剂量的六味地黄丸提取液16天。在行为学、体重、脏器指数及股骨长度的基础上,应用UPLC-HDMS联用技术建立尿液代谢组学研究方法,表征六味地黄丸干预前后的尿液代谢轮廓,分析鉴定与药物作用相关的差异代谢标记物,研究六味地黄丸对大鼠生长发育的影响。结果表明,六味地黄丸能够提升大鼠的整体行为能力,促进体重增长及脏器和骨骼生长,确定了六味地黄丸干预下的尿液差异代谢标记物36个及靶标代谢通路13个,圈定了8个代谢标记物作为六味地黄丸影响大鼠生长发育的关键标记物。研究阐明了六味地黄丸对大鼠生长发育过程中尿液代谢网络具有显著的调控作用,诠释了"滋补肾阴"对大鼠生长发育影响的科学内涵。

关键词：六味地黄丸生长发育代谢组学

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鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的截短表达及其兔抗血清制备

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江苏农业科学 2018年第17期46卷 175-177页

作者：孙芬芬高玉龙潘伟王笑梅徐州医科大学形态学实验教学中心江苏徐州221004 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室/江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004

通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAV M9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd129),经EcoRⅠ/SalⅠ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的p ET28a... 详细信息

通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAV M9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd129),经EcoRⅠ/SalⅠ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的p ET28a(+)载体连接,获得阳性重组子p ET-28a-VP1Nd129,将其转化入*** BL21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达出VP1Nd129蛋白;后者通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,用间接免疫荧光试验和Western blot试验检测该血清的特异性,用酶联免疫吸附试验(ELISA)滴定其效价。结果显示,CAV VP1Nd129基因在大肠杆菌中正确表达,并主要以包涵体形式存在;纯化后免疫兔获得的抗血清可与真核细胞表达的全长VP1蛋白特异性反应。表明本试验成功对VP1蛋白进行截短表达,制备的兔抗血清反应性好,为深入开展CIAV的生物学功能奠定基础。

关键词：鸡传染性贫血病毒 VP1蛋白原核表达纯化兔抗血清

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天麻素在甲基苯丙胺诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用及机制研究

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中国药理学通报 2018年第4期34卷 577-583页

作者：杨根梦李娟洪仕君薛凤麟何永旺周一卿曾晓锋李利华昆明医科大学法医学院云南昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的研究天麻素(gastrodin)在甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用,并探讨其作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,不同浓度的METH(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mmol·L^(-1))处理SY5Y细胞... 详细信息

目的研究天麻素(gastrodin)在甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)诱导SH-SY5Y细胞自噬中的作用,并探讨其作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,不同浓度的METH(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mmol·L^(-1))处理SY5Y细胞,并在6、12、24、48 h观察SY5Y细胞自噬的情况,确定自噬的最佳浓度和时间点。提前1 h给予1mmol·L^(-1)天麻素进行干预,用显微镜观察细胞形态变化,采用激光共聚焦显微镜观察LC3-Ⅱ的改变,Western blot检测天麻素干预前后LC3-Ⅱ、Beclin-1以及Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达情况。结果随着METH浓度(0~3.0 mmol·L^(-1))的增加,SY5Y细胞逐渐变圆、突起逐渐变短、消失,同时部分细胞质内可见大小不等的空泡结构形成,细胞间隙逐渐增宽,最终细胞呈漂浮状态。随着METH浓度的增加,SY5Y细胞LC3-Ⅱ表达水平逐渐增强。激光共聚焦显微镜结果显示,天麻素+METH组LC3-Ⅱ的表达水平比METH组降低。与对照组相比,METH组LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显增强(P<0.01),mTOR和Akt差异无显著性,p-mTOR、p-Akt表达水平明显降低(P<0.01);给予天麻素干预后,与METH组相比,LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平降低,而mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt表达水平升高。结论 METH可诱导SY5Y细胞自噬,天麻素可减弱METH诱导的SY5Y细胞自噬,这一作用与天麻素调控Akt和mTOR信号通路密切相关。

关键词：甲基苯丙胺 SH-SY5Y细胞天麻素自噬神经毒性信号通路

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基于功率谱的睡眠中癫痫发作预测

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生物医学工程学杂志 2018年第3期35卷 329-336页

作者：刘伟楠刘燕佟宝同赵凌霄杨莹雪王玉平戴亚康中国科学院苏州生物医学工程技术研究所江苏苏州215163 中国科学院大学北京100049 哈尔滨理工大学哈尔滨150080 首都医科大学宣武医院北京100053 脑功能疾病调控治疗北京市重点实验室北京100053

睡眠中如果癫痫发作会增加患者并发症发作和猝死的概率,有效预测患者睡眠中的癫痫发作可让医患及时采取措施,降低上述概率。现有癫痫发作预测方法多是基于脑电信号设计的,但并未在睡眠时期进行针对性研究,而该时期脑电信号相比其他时期... 详细信息

睡眠中如果癫痫发作会增加患者并发症发作和猝死的概率,有效预测患者睡眠中的癫痫发作可让医患及时采取措施,降低上述概率。现有癫痫发作预测方法多是基于脑电信号设计的,但并未在睡眠时期进行针对性研究,而该时期脑电信号相比其他时期有其特殊性,因此为提高灵敏度、降低错误报警率,本文将挖掘睡眠脑电信号的特点,研究睡眠中癫痫发作的预测方法。本文提出的方法中首先构建特征向量,包括不同波段的绝对功率谱、相对功率谱和功率谱比值;其次应用分离性判据和分支定界法进行特征选择;最后训练支持向量机分类器并实现预测。相比于不针对睡眠脑电信号特点的癫痫预测方法(灵敏度91.67%,错误报警率9.19%),本文方法的灵敏度(100%)有所提高,而错误报警率(2.11%)则有所降低。本文方法是对现有癫痫预测方法的补充,具有一定的临床价值。

关键词：癫痫预测脑电信号功率谱支持向量机

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