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第十三届国际络病学大会

作者： Ming-Li Liu Ying-Hui Duan Yun-Long Hou Chang Li Hao Gao Yi Dai Xin-Sheng Yao 暨南大学中药及天然药物研究所中药药效物质基础及创新药物研究广东省高等学校重点实验室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室哈尔滨医科大学药理学系沈阳药科大学中药学院

Nardoaristolones A和B是由马兜铃型倍半萜烯衍生的两个新型萜类化合物,从甘松的地下部分分离得到。Nardoaristolones A是首个报导的马兜铃烷-查尔酮衍生物,Nardoaristolones B具有一个去甲马兜铃烷倍半萜烯骨架,含有一个不同寻常的3/5/... 详细信息

Nardoaristolones A和B是由马兜铃型倍半萜烯衍生的两个新型萜类化合物,从甘松的地下部分分离得到。Nardoaristolones A是首个报导的马兜铃烷-查尔酮衍生物,Nardoaristolones B具有一个去甲马兜铃烷倍半萜烯骨架,含有一个不同寻常的3/5/6三环体系。其结构经光谱学确证,绝对构型经X射线单晶衍射确认。

关键词：甘松骨骼异常 3/5/6三环体系

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神经肽优洛可定对丘脑底核神经元自发放电影响与CRF-2R关系研究

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中国药理学通报 2017年第10期33卷 1425-1430页

作者：田飞刘春娜刘新宇陈秋元丁宇豪汕头大学医学院第二附属医院神经外科广东汕头515041 锦州医科大学药理学教研室辽宁锦州121000

目的研究神经内分泌生物活性肽优洛可定(urocortin,UCN)对丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)神经元放电及STN中多巴胺(dopamine,DA)能、谷氨酸(glutamic acid,GLU)能神经传递的影响,研究UCN在STN中是否与GLU及DA存在汇聚作用,探讨UCN在帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)发生中可能发挥的作用。方法取40只SD大鼠,采用神经电生理实验方法中的微电泳技术,在微电泳UCN过程中,观察STN神经元放电的波形及频率变化,同时,微电泳Astressin(AST)及蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂,观察促皮质素释放因子2型受体(corticotropin releasing factor 2 receptor,CRF-2R)是否参与UCN对STN神经元放电的影响。另外,在微电泳DA和GLU过程中,给予UCN及AST,观察STN神经元放电的变化,明确是否存在DA能及GLU能与UCN的交汇作用。结果微电泳UCN过程中,82%(27/33)STN神经元频率减慢。STN平均放电频率由(3.65±0.27)Hz减少到(2.05±0.33)Hz,微电泳UCN前、后STN放电频率明显降低(P<0.01)。另外,UCN抑制作用可被AST明显拮抗(P<0.01),UCN抑制作用也可被PKA阻断剂部分阻断。在微电泳抑制性神经递质DA和兴奋性GLU过程中,UCN能进一步协同DA的抑制效应,并明显拮抗GLU的兴奋作用(P<0.01)。结论 UCN与DA能及GLU能在STN神经元中存在汇聚作用,UCN可能是通过与CRF-2R结合,进而通过PKA信号通路,影响DA能、GLU能神经递质活动,抑制STN神经元放电。

关键词：丘脑底核多巴胺谷氨酸帕金森疾病优洛可定微电泳

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聚腺苷二磷酸核糖聚合酶在酒精性脂肪肝中的研究进展

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中国医药导报 2017年第22期14卷 51-54页

作者：黄时顺刘洋张冰李欣包志伟王志刚哈尔滨医科大学(大庆)医学检验与技术学院生物化学教研室黑龙江大庆163319

酒精性脂肪肝(AFLD)是长期饮酒导致的肝脏疾病,长期的酒精摄入导致肝脏脂肪合成代谢增加和脂解作用减少,肝脏脂肪沉积增加,进而发生脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,其相关的病理机制尚未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是细胞内重要... 详细信息

酒精性脂肪肝(AFLD)是长期饮酒导致的肝脏疾病,长期的酒精摄入导致肝脏脂肪合成代谢增加和脂解作用减少,肝脏脂肪沉积增加,进而发生脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,其相关的病理机制尚未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是细胞内重要的DNA修复酶,主要参与细胞的基因转录、DNA修复、基因组的稳定和细胞的凋亡、坏死。PARP是细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的消耗酶,PARP的活性改变对细胞内NAD+水平的调控发挥重要作用。长期的酒精摄入导致PARP蛋白活化,在AFLD的发生、发展中发挥重要作用。PARP蛋白的基因缺失或活性抑制,对改善长期饮酒导致的肝脏脂肪沉积、炎性反应、氧化应激和肝细胞的凋亡、坏死发挥重要作用,本文对PARP蛋白在AFLD中的研究进展进行综述。

关键词：酒精性脂肪肝聚腺苷二磷酸核糖聚合酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸肝脂肪沉积

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人类免疫缺陷病毒-反式转录激活因子蛋白在心血管疾病中的作用研究现状

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中国临床药理学杂志 2016年第18期32卷 1729-1732页

作者：孙桂元蒋雅楠张良栓许颖冯强白云龙哈尔滨医科大学药理教研室

人免疫缺陷病毒(HIV)-反式转录激活因子(Tat)蛋白是人类免疫缺陷病毒I型(HIV)基因所编码的一种反式转录激活因子,在HIV复制和HIV感染相关的扩张型心肌病、动脉粥样硬化、冠心病和长QT间期综合征等心血管系统疾病的发生发展中起重要调控... 详细信息

人免疫缺陷病毒(HIV)-反式转录激活因子(Tat)蛋白是人类免疫缺陷病毒I型(HIV)基因所编码的一种反式转录激活因子,在HIV复制和HIV感染相关的扩张型心肌病、动脉粥样硬化、冠心病和长QT间期综合征等心血管系统疾病的发生发展中起重要调控作用。HIV-Tat蛋白的蛋白转导域具有穿膜特性,可将外源性生物学分子携带进入多种哺乳动物细胞,且不具有细胞毒性。为此HIV-Tat蛋白的这一功能可应用到药物转运及疾病治疗等领域,这为生物学研究开辟了一条新途径。本文对HIV-Tat蛋白在HIV相关的心血管系统疾病中的作用和机制以及在医学相关领域中的研究现状进行了综述。

关键词：人类免疫缺陷病人免疫缺陷病毒-反式转录激活因子蛋白心血管系统疾病

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禽腺病毒血清4型的分离鉴定及遗传演化分析

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中国兽医科学 2017年第6期47卷 755-761页

作者：王娟刘亮亮李慧昕韩宗玺刘胜旺东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

本研究从辽宁发病鸡群采集的病料经SPF鸡胚接种传代分离病毒,并其进行了PCR和测序分析鉴定。结果,从病料中经SPF鸡胚接种传代分离出一株禽腺病毒,经PCR和测序分析鉴定确定该分离株为禽腺病毒C种、血清4型,命名为LN160130;通过对52 k和he... 详细信息

本研究从辽宁发病鸡群采集的病料经SPF鸡胚接种传代分离病毒,并其进行了PCR和测序分析鉴定。结果,从病料中经SPF鸡胚接种传代分离出一株禽腺病毒,经PCR和测序分析鉴定确定该分离株为禽腺病毒C种、血清4型,命名为LN160130;通过对52 k和hexon基因同源性比对,LN160130与我国近年报道的禽腺病毒血清4型同源性最高,52 k和hexon基因的同源性均为100%;与国外流行的血清4型毒株相比,LN160130的52k基因同源性99.3%~100%,hexon基因同源性98.7%~99.8%。遗传演化分析结果表明,LN160130分离株与我国禽腺病毒血清4型流行毒株在同一分支内,而与国外禽腺病毒血清4型毒株不在同一分支,存在遗传差异,说明中国流行的血清4型禽腺病毒有自身地域特点。

关键词：禽腺病毒血清4型病毒分离鉴定分子特征遗传演化分析

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短乳杆菌DM9218核苷酸代谢过程中的蛋白组学分析

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中国微生态学杂志 2017年第1期29卷 6-9页

作者：邓英唐艳何春阳李明袁杰利大连医科大学微生态学教研室辽宁大连116044 哈尔滨商业大学药学院黑龙江哈尔滨150076

目的探讨短乳杆菌DM9218在核苷酸代谢过程中的蛋白表达差异。方法分别提取DM9218菌株与底物(肌苷+鸟苷)反应前后的菌体蛋白,利用蛋白双向凝胶电泳(2-DE)技术,找出该菌株与底物反应前后的差异蛋白质点,选取其中差异变化较大的蛋白点进一... 详细信息

目的探讨短乳杆菌DM9218在核苷酸代谢过程中的蛋白表达差异。方法分别提取DM9218菌株与底物(肌苷+鸟苷)反应前后的菌体蛋白,利用蛋白双向凝胶电泳(2-DE)技术,找出该菌株与底物反应前后的差异蛋白质点,选取其中差异变化较大的蛋白点进一步做蛋白质谱分析。结果 2-DE分析显示两样品蛋白点主要分布在等电点4~9和分子量11~90 kD范围内,将所得的蛋白点结合其蛋白得率、浓度、储存蛋白含量进行比较,得到匹配的蛋白点数为732个。从中选取14个差异显著的蛋白点进行质谱分析,质谱结果显示所选取蛋白质点主要与物质代谢、能量转换及基因水平转录和翻译等生物学功能密切相关。结论本研究为后期分析研究短乳杆菌DM9218在核苷酸代谢过程中蛋白的表达奠定了基础。

关键词：短乳杆菌核苷代谢差异蛋白点质谱分析

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猪传染性胃肠炎病毒间接免疫荧光检测方法的建立

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中国兽医科学 2017年第1期47卷 109-113页

作者：朱蕴暖张鑫朱向东陈建飞时洪艳石达王鑫季朝阳冯力黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪消化道团队黑龙江哈尔滨150069 东北农业大学生命科技学院黑龙江哈尔滨150030

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)直观、特异和快速的检测方法,将TGEV接种PK-15细胞后,以抗TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,荧光素FITC标记的山羊抗小鼠Ig G为二抗,建立了TGEV的间接免疫荧光(IFA)检测方法。结果显示,TGEV的最佳接种效价为... 详细信息

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)直观、特异和快速的检测方法,将TGEV接种PK-15细胞后,以抗TGEV N蛋白的单克隆抗体为一抗,荧光素FITC标记的山羊抗小鼠Ig G为二抗,建立了TGEV的间接免疫荧光(IFA)检测方法。结果显示,TGEV的最佳接种效价为1×102TCID50,培养时间为24 h,细胞最佳固定液为40 m L/L多聚甲醛,最佳封闭条件为10 g/L BSA 37℃封闭30 min,一抗的最佳使用浓度为1 ng/L,二抗的最佳稀释度为1∶100。对常见的猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪圆环病毒2型等猪病病原检测均为阴性。结果表明,建立的检测方法对TGEV具有良好的特异性。本研究建立的方法为TGEV的实验室诊断及TGEV在感染细胞中的定位和动态分布提供了有效的检测手段。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒间接免疫荧光方法抗TGEVN蛋白单克隆抗体

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HN蛋白携带TC标签的重组新城疫病毒的构建及鉴定

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中国兽医科学 2017年第6期47卷 671-679页

作者：齐甜铭赵文钧陈玉秋孙军峰马得莹东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽呼吸道病研究团队黑龙江哈尔滨150069

新城疫病毒(NDV)是在世界范围内引发家禽发病和死亡的主要病因。HN作为重要的囊膜蛋白,在NDV吸附入侵过程中发挥重要作用。本研究利用反向遗传技术,在HN编码区的N端插入由6个氨基酸组成的TC标签(tetracysteine),成功转染细胞拯救获得TC... 详细信息

新城疫病毒(NDV)是在世界范围内引发家禽发病和死亡的主要病因。HN作为重要的囊膜蛋白,在NDV吸附入侵过程中发挥重要作用。本研究利用反向遗传技术,在HN编码区的N端插入由6个氨基酸组成的TC标签(tetracysteine),成功转染细胞拯救获得TC标记的重组病毒La Sota-HN-NTC,经鉴定La Sota-HN-NTC能够在鸡胚中有效复制,生长曲线与亲本病毒La Sota相似。Western-blot结果显示,La Sota-HN-NTC中HN蛋白的表达量与La Sota相比无明显变化。La Sota-HN-NTC的毒力稍低于La Sota,并且TC标签能够在重组病毒中稳定存在。La Sota-HN-NTC感染的细胞中能够观察到明显的绿色荧光,表明TC标记的HN蛋白能够正常表达并被双砷染料特异性染色。NDV吸附试验表明,La Sota-HN-NTC吸附细胞受体的能力没有因为TC标签发生改变。激光共聚焦监测到了La Sota-HN-NTC感染细胞中HN蛋白的动态分布。本研究为监测HN蛋白在NDV感染过程中的动态分布,阐明HN蛋白在NDV感染中的作用机制提供了工具和基础。

关键词：新城疫病毒 TC标签 HN蛋白

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转录因子核因子-κB p65通过miR-17调控血管平滑肌细胞增殖的机制研究

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中国血管外科杂志（电子版） 2017年第2期9卷 129-132页

作者：段力仁杨栋张晶林姝赵琳王仑吕俊远辛世杰中国医科大学附属第一医院血管外科沈阳110001 中国医科大学药学院药理教研室沈阳110122

目的研究miR-17在血管平滑肌细胞(VSCM)增殖中的作用,以及转录因子核因子(NF)-κB调控miR-17的作用机制。方法将miR-17mimics转染人VSCM,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期。生物信息学预测NF-κB p65与miR-17启动子区存在结... 详细信息

目的研究miR-17在血管平滑肌细胞(VSCM)增殖中的作用,以及转录因子核因子(NF)-κB调控miR-17的作用机制。方法将miR-17mimics转染人VSCM,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期。生物信息学预测NF-κB p65与miR-17启动子区存在结合位点,将pcDNA3.1-p65与报告基因载体p GL3-miR-17启动子区共转染至293T细胞中,通过检测荧光素酶报告基因Luc活性分析NF-κB p65对miR-17启动子区的影响。脂多糖(LPS)刺激细胞后,检测NF-κB p65、miR-17的表达水平。结果与miR-NC组相比,转染miR-17 mimics后,VSMC增殖能力增强,差异具有统计学意义(P<0.05),细胞周期G0/G1期明显减少,S与G2/M明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与miR-17启动子区结合位点突变型(Mutant)组相比,转染miR-17启动子区野生型(Wild)组荧光素酶Luc活性增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,LPS刺激细胞后,NF-κB p65、miR-17表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NF-κB通过直接结合miR-17启动子区,促进miR-17的表达从而促进VSMC的增殖。

关键词：血管平滑肌细胞核因子-κB p65 Micro RNA

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MiR-17/RB通路调节血管平滑肌细胞增殖

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中国血管外科杂志（电子版） 2017年第2期9卷 133-137页

作者：林若然杨栋张晶林姝赵琳王仑吕俊远辛世杰中国医科大学附属第一医院血管外科沈阳110001 中国医科大学药学院药理教研室沈阳110122

目的探索miR-17在血管平滑肌细胞(VSMCs)中对视网膜母细胞瘤(RB)基因和蛋白水平的调控作用,以及对增殖效应的影响。方法培养HA-VSMCs并诱导其增殖,应用芯片技术筛选出差异表达水平最显著的微小RNA(miR)。在293T细胞应用荧光素酶报告基... 详细信息

目的探索miR-17在血管平滑肌细胞(VSMCs)中对视网膜母细胞瘤(RB)基因和蛋白水平的调控作用,以及对增殖效应的影响。方法培养HA-VSMCs并诱导其增殖,应用芯片技术筛选出差异表达水平最显著的微小RNA(miR)。在293T细胞应用荧光素酶报告基因验证生物信息学软件预测的miR-17与RB的靶向结合作用。分别向VSMC转染miR-17 mimic和miR-17 inhibitor并建立阴性对照,检测RB水平及细胞增殖相关指标PCNA表达水平。结果荧光素酶报告分析证实miR-17与RB mRNA-3’UTR具有靶向结合效应。转染miR-17 mimic促进VSMC增殖相关指标PCNA表达上调,并且可以下调RB蛋白及mRNA水平,转染miR-17 inhibitor后下调PCNA表达且可上调RB表达(P<0.05)。结论miR-17通过靶向结合RB mRNA-3’UTR调控RB表达从而调控VSMCs增殖。

关键词：血管平滑肌细胞增殖 miR-17 视网膜母细胞瘤

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