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20（R）-人参皂苷Rg3对缺糖缺氧/复糖复氧致SH-SY5Y细胞凋亡的影响

中国药理学通报 2015年第B11期31卷 122-122页

作者：何波陈鹏谢宇杨仁华张小超李树德沈志强昆明医科大学云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500 昆明医科大学药学院药理系云南昆明650500 昆明医科大学基础医学院生物化学教研室云南昆明650500

目的研究20（R）-人参皂苷Rg3对缺氧缺糖/复氧复糖（OGD/R）所致SHSY5Y细胞凋亡的影响,探讨其神经保护作用可能性机制.方法复制OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,利用MTT法和LDH试剂盒分别检测存活率和漏出率,Hoechest33342/PI双染检测... 详细信息

目的研究20（R）-人参皂苷Rg3对缺氧缺糖/复氧复糖（OGD/R）所致SHSY5Y细胞凋亡的影响,探讨其神经保护作用可能性机制.方法复制OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,利用MTT法和LDH试剂盒分别检测存活率和漏出率,Hoechest33342/PI双染检测细胞凋亡情况,Westernblot及实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2蛋白及mRNA的表达水平.结果经OGD处理10h细胞存活率为50%,OGD/R时间为0、12、24、48h4个时间点.随着OGD/R时间延长,细胞存活率明显下降,LDH漏出率明显增多,凋亡及坏死细胞增多,同时,Bax蛋白及mRNA表达增加,Bcl-2蛋白及mRNA表达减少.与模型组比较,20（R）-人参皂苷Rg3可增加细胞存活率,降低LDH漏出率,减少凋亡及坏死细胞,呈一定浓度依赖性降低Bax/Bcl-2比值.结论20（R）-人参皂苷Rg3减少OGD/R所致SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与其下调Bax蛋白及mRNA表达、上调Bcl-2蛋白及mRNA表达有关.

关键词： 20(R)-人参皂苷Rg3 SH-SY5Y OGD/R 细胞凋亡 Bax Bcl-2

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结核分枝杆菌rv3295基因的原核表达及单克隆抗体的制备

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中国兽医科学 2015年第2期45卷 172-176页

作者：崔莹莹宋宁宁党光辉曹俊李华芳于申业刘思国吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板,通过PCR扩增了rv3295基因;将其克隆至表达载体pET-22b中,构建了重组质粒pET-22b-Rv3295;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达出了Rv3295蛋白。通过亲和层析纯化,以该重组蛋... 详细信息

以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板,通过PCR扩增了rv3295基因;将其克隆至表达载体pET-22b中,构建了重组质粒pET-22b-Rv3295;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达出了Rv3295蛋白。通过亲和层析纯化,以该重组蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合筛选制备抗该重组蛋白的单克隆抗体;采用Western-blot验证单克隆抗体的特异性;通过亚型鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体的亚型。结果显示,Rv3295蛋白以可溶形式表达,蛋白质的分子质量大小为25ku。获得1株抗该重组蛋白的单克隆抗体1F7,其亚型为IgG1/κ;Western-blot结果显示,该抗体具有较好的特异性。本研究制备的Rv3295蛋白的单克隆抗体对于研究Rv3295蛋白的功能及其与DNA之间的互作奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 rv3295基因原核表达单克隆抗体

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地黄加工炮制研究新进展及展望

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中药材 2016年第5期39卷 1184-1190页

作者：周丽徐金娣毛茜汤亚李松林南京中医药大学附属中西医结合医院中药质量研究室江苏南京210028 江苏省中医药研究院/中国中医科学院江苏分院中药代谢组研究室江苏南京210028

加工炮制可致地黄主要化学成分环烯醚萜苷类、苯乙醇苷类、糖类及呋喃醛衍生物发生质和量的改变;不同炮制品地黄在血液系统、免疫系统及糖代谢调节等方面的作用有差异。该文总结了有关加工炮制对地黄化学成分以及药理活性影响的研究进展... 详细信息

加工炮制可致地黄主要化学成分环烯醚萜苷类、苯乙醇苷类、糖类及呋喃醛衍生物发生质和量的改变;不同炮制品地黄在血液系统、免疫系统及糖代谢调节等方面的作用有差异。该文总结了有关加工炮制对地黄化学成分以及药理活性影响的研究进展,为系统深入研究加工炮制对地黄化学成分和药理活性的影响规律提供参考,也为诠释地黄加工炮制的科学内涵提供了科学依据。

关键词：地黄加工炮制化学成分药理活性

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主编简介

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中国高等医学教育 2016年第4期 5-6页

作者：周茹姚婉霞杜娟李燕李南杨文莉乔海琦余建强宁夏医科大学药学院宁夏银川750004 宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学教务处宁夏银川750004

罗建红,现任浙江大学副校长,求是特聘教授,浙江省科协副主席。1982年毕业于浙江医科大学医学本科,1987年获中国预防医院科学院微生物与免疫学硕士,1997年获浙江医科大学医学博士;1993-1996年及2009-2011年两度在美国乔治城大学医学院做... 详细信息

罗建红,现任浙江大学副校长,求是特聘教授,浙江省科协副主席。1982年毕业于浙江医科大学医学本科,1987年获中国预防医院科学院微生物与免疫学硕士,1997年获浙江医科大学医学博士;1993-1996年及2009-2011年两度在美国乔治城大学医学院做神经生物学研究。2003年被评为教育部跨世纪优秀人才,

关键词：浙江医科大学跨世纪优秀人才浙江省科协医学本科乔治城大学神经生物学研究副校长医学教育课程免疫学副主席

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猪细小病毒基因组特性的研究

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猪业科学 2015年第4期32卷 100-101页

作者：王正阳罗亚坤吕世明崔尚金贵州大学动物科技学院药理实验室贵州贵阳550025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪细小病毒（PPV）属于细小病毒科细小病毒属的成员。猪细小病毒病是由PPV引起的以胚胎和胎儿感染及死亡而母体本身无明显症状的一种母猪繁殖障碍性传染病。1967年，Carteright等对猪的不孕、流产、死产等进行病原学研究时首次报道了本... 详细信息

猪细小病毒（PPV）属于细小病毒科细小病毒属的成员。猪细小病毒病是由PPV引起的以胚胎和胎儿感染及死亡而母体本身无明显症状的一种母猪繁殖障碍性传染病。1967年，Carteright等对猪的不孕、流产、死产等进行病原学研究时首次报道了本病，并从猪的流产胎儿中分离到PPV。目前，此病在世界范围内广泛流行，是造成母猪繁殖障碍的主要病因之一。

关键词：猪细小病毒病基因组特性母猪繁殖障碍流产胎儿世界范围 PPV 传染病病原学

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基于denovo测序分析Bt菌株S3299-1基因组特征

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基因组学与应用生物学 2015年第6期34卷 1232-1238页

作者：黄飞燕李莉周燕魏艳军刘盼盼李有志张岩方宣钧亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学生命科学与技术学院南宁530004 海南省海德热带农业资源研究所三亚572025 哈尔滨医科大学生物信息科学与技术学院哈尔滨150081 浙江农林大学暨阳学院生命科学研究所诸暨311800

分离菌株S3299-1是从海南省吊罗山热带雨林自然保护区土壤中分离保存的对小菜蛾具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌,但目前尚未明确该菌株的杀虫蛋白基因。本研究主要采用Illumina Hiseq2000二代测序平台对分离菌株S3299-1基因组进行Survey... 详细信息

分离菌株S3299-1是从海南省吊罗山热带雨林自然保护区土壤中分离保存的对小菜蛾具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌,但目前尚未明确该菌株的杀虫蛋白基因。本研究主要采用Illumina Hiseq2000二代测序平台对分离菌株S3299-1基因组进行Survey测序以挖掘该菌株的杀虫蛋白基因。研究结果表明:S3299-1基因组的大小为5 498 939 bp,GC含量为34.94%,Scaffold 176个,ORF 5 755个,将Scaffold进行拼接得到4个复制子,即一个大小为4 338 kb的拟核和3个不同的质粒(S3299-1p01,S3299-1p02,S3299-1p03),并预测可能含有的毒蛋白编码基因有25个。通过草图测序以及生物信息学分析手段获得S3299-1的框架图,预测该菌株可能含有的杀虫蛋白基因以及为今后研究该菌株的杀虫蛋白功能提供基础。

关键词：苏云金芽孢杆菌 de novo测序基因组毒蛋白生物信息学分析

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猪传染性胃肠炎病毒NSP8蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定

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中国畜牧兽医 2015年第2期42卷 358-364页

作者：董慧张鑫陈建飞时洪艳石达常铁城谷凤丽徐天王智琴刘明春冯力沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 首都医科大学基础医学院北京100069

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经... 详细信息

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经3次亚克隆后制备了1株稳定分泌抗NSP8蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。分泌的单克隆抗体亚类鉴定其重链为IgG1型,轻链为κ链;杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶3 200。Western blotting试验结果表明该单克隆抗体能识别原核及真核表达的NSP8重组蛋白。利用截短表达的方法对NSP8蛋白进行抗原表位的鉴定,初步确定了单克隆抗体针对的抗原表位序列为31SPQILKQLTKAFNIAKSDFEREASV55。本研究制备的单克隆抗体及对抗原表位的鉴定,为TGEV NSP8蛋白相关功能的研究奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 NSP8基因单克隆抗体抗原表位

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金纳米-石墨烯复合纳米材料修饰电极的DNA传感器检测产KPC肺炎克雷伯菌

金纳米-石墨烯复合纳米材料修饰电极的DNA传感器检测产KPC肺炎克...

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第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：常东潘洪志哈尔滨医科大学附属第一医院检验科哈尔滨医科大学营养与食品卫生学教研室

目的建立一种新型的可准确、快速检测产KPC肺炎克雷伯菌的电化学DNA传感器。方法在玻碳电极表面修饰金纳米-石墨烯复合纳米材料,然后在修饰电极表面固定ssDNA探针,制备了一种电化学DNA生物传感器。利用制成的电化学DNA传感器,以亚甲基... 详细信息

目的建立一种新型的可准确、快速检测产KPC肺炎克雷伯菌的电化学DNA传感器。方法在玻碳电极表面修饰金纳米-石墨烯复合纳米材料,然后在修饰电极表面固定ssDNA探针,制备了一种电化学DNA生物传感器。利用制成的电化学DNA传感器,以亚甲基蓝为杂交指示剂,利用差分脉冲伏安法,对产KPC肺炎克雷伯耐药菌特异DNA序列进行检测。结果在最优条件下,该传感器对待测菌靶基因检测的线性范围为1.0×10mol/L.0×10mol/L,相关系数r=0.9976;检出限为2.0×10mol/L。结论利用该方法制备的电化学DNA生物感器灵敏度高、线性范围宽、选择性良好,可以用于KPC肺炎克雷伯耐药菌的快速检测。

关键词：石墨烯复合纳米材料电化学DNA传感器碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌检测

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人参三醇酸酐酯化衍生物的制备

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云南中医学院学报 2015年第1期38卷 5-9,13页

作者：张莲卿段文越邹澄陈艳梅赵庆赵沛基胡建林昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500 云南中医学院中药学院云南昆明650500 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部资源持续利用国家重点实验室云南昆明650204

目的设计合成人参三醇衍生物。方法对人参三醇皂苷羟基基团进行结构改造,通过一系列的酯化反应制备其衍生物,并通过核磁对其结构进行鉴定。结果制备了5个人参三醇衍生物,其中4个为新化合物。结论这些化合物简便易得,因而为得到大量同类... 详细信息

目的设计合成人参三醇衍生物。方法对人参三醇皂苷羟基基团进行结构改造,通过一系列的酯化反应制备其衍生物,并通过核磁对其结构进行鉴定。结果制备了5个人参三醇衍生物,其中4个为新化合物。结论这些化合物简便易得,因而为得到大量同类衍生物供活性筛选奠定了基础,由此为三七的深入研究与开发提供了新途径。

关键词：人参三醇人参三醇衍生物酯化反应合成

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乳腺浸润性导管癌中HER-2和Survivin蛋白表达相关性研究

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哈尔滨医科大学学报 2015年第1期49卷 41-44页

作者：张红林哲洙毛晓韵陈浩王旭郭扬房月金锋辽宁医学院附属第三医院肿瘤外科辽宁锦州121000 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科普通外科教研室乳腺外科中国医科大学药学院药理学教研室辽宁沈阳110001

目的研究乳腺癌组织中HER-2蛋白和Survivin蛋白表达的相关性及其机制。方法采用免疫组化技术和图像分析技术检测24例乳腺浸润性导管癌组织中HER-2、ERK1/2、p-ERK1/2、AKT、pAKT、Survivin蛋白的表达情况,对蛋白表达的相关性进行统计学... 详细信息

目的研究乳腺癌组织中HER-2蛋白和Survivin蛋白表达的相关性及其机制。方法采用免疫组化技术和图像分析技术检测24例乳腺浸润性导管癌组织中HER-2、ERK1/2、p-ERK1/2、AKT、pAKT、Survivin蛋白的表达情况,对蛋白表达的相关性进行统计学分析。结果乳腺浸润性导管癌组织中HER-2蛋白和p-AKT、Survivin蛋白表达之间具有正相关性(P<0.01)。结论乳腺浸润性导管癌组织中HER-2蛋白和Survivin蛋白之间可能具有正向调节关系,且其关系可能通过细胞信号转导蛋白pAKT参与完成。

关键词：乳腺癌 HER-2 Survivin p-AKT

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