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中国医药导报 2014年第28期11卷 157-160页

作者：薄纯锐胡雪玲孙丽华哈尔滨医科大学基础医学院黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学药学院药理教研室黑龙江哈尔滨150081

MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA分子,其可以在转录后水平调节基因表达。miR-125是在不同种属生物中高度保守的miRNA。miR-125家族的成员已经被证实能够在多种不同类型的疾病中表达改变,并调控疾病的发生。此外,miR-125在免疫宿... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA分子,其可以在转录后水平调节基因表达。miR-125是在不同种属生物中高度保守的miRNA。miR-125家族的成员已经被证实能够在多种不同类型的疾病中表达改变,并调控疾病的发生。此外,miR-125在免疫宿主防御,尤其是在对细菌或病毒的感染中起到至关重要的作用。本文着重总结了miR-125家族的生理功能以及其在肿瘤以及免疫系统疾病、造血系统恶性疾病、心血管疾病中的作用,也讨论了miRNA家族在未来作为生物标志物和治疗靶点的发展前景。

关键词： miR-125 肿瘤自身免疫病造血系统恶性疾病心血管疾病

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姜黄素衍生物C085与Hsp90及其不同片段相互作用以及对Hsp90 ATPase活性的影响

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中国药理学通报 2014年第10期30卷 1408-1413页

作者：范莹娟张连茹刘洋许建华福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室福建福州350004 厦门大学生命科学学院福建厦门361005

目的：研究姜黄素衍生物C085与Hsp90的结合作用,及其对Hsp90-ATPase 活性抑制作用。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C085与Hsp90、NHsp90、MHsp90、CHsp90的相互作用以及293K、303K和310K下,C085与Hsp90的相互作用；实验选取280nm为激... 详细信息

目的：研究姜黄素衍生物C085与Hsp90的结合作用,及其对Hsp90-ATPase 活性抑制作用。方法采用荧光光谱法,研究不同浓度C085与Hsp90、NHsp90、MHsp90、CHsp90的相互作用以及293K、303K和310K下,C085与Hsp90的相互作用；实验选取280nm为激发波长,290-510 nm的波长范围内进行荧光光谱扫描。采用孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,研究 C085对 Hsp90-ATPase 活性的抑制。结果C085解离常数为（11．163±0．316）μmol · L-1；C085与Hsp90之间的主要作用力为静电作用力；C085与Hsp90的C端片段结合能力最强。当ATP为1 mmol · L-1时, C085作用于Hsp90的IC50值为6．04μmol · L-1。结论经过荧光光谱分析,可以确定C085与Hsp90的结合机制,且C085能抑制Hsp90-ATPase活性。

关键词： C085 Hsp90 ATPase活性荧光光谱法相互作用抑制作用

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丹参酮ⅡA调节microRNA-1保护缺氧心肌细胞的作用研究

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现代生物医学进展 2014年第28期14卷 5463-5467页

作者：李雪连关会林王璐郭瑞赵丹丹郭振丰张佳琳单宏丽哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江哈尔滨150081 心血管药物研究教育部重点实验室黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081 牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011

目的:研究丹参酮Ⅱ A(TanshinoneⅡA)通过调节microRNA-1抗心肌细胞缺氧损伤的作用。方法:原代培养新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型。MTT法检测心肌细胞存活率(%);TUNEL、流式细胞术测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦检测心肌细胞内... 详细信息

目的:研究丹参酮Ⅱ A(TanshinoneⅡA)通过调节microRNA-1抗心肌细胞缺氧损伤的作用。方法:原代培养新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型。MTT法检测心肌细胞存活率(%);TUNEL、流式细胞术测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦检测心肌细胞内钙离子[Ca2+]i浓度的变化情况。结果:MTT结果显示丹参酮ⅡA对缺氧心肌细胞及过表达miR-1引起心肌细胞损伤具有保护作用。丹参酮ⅡA增加了缺氧心肌细胞的存活率(P<0.05),同时给予丹参酮ⅡA和miR-1组与单独miR-1损伤组相比较,存活率也明显升高,呈现剂量依赖性。TUNEL结果显示丹参酮ⅡA可以抑制缺氧诱导的细胞凋亡,丹参酮ⅡA可以明显降低由缺氧导致的细胞凋亡率(P<0.05)。共聚焦检测结果显示,缺氧损伤的心肌细胞内[Ca2+]i显著升高1322.72±5.16(vs正常对照组,P<0.05),丹参酮ⅡA则有效抑制由缺氧引起过高的[Ca2+]i。miR-1诱导的细胞内[Ca2+]i升高至1349.33±62.63,约为正常对照组的1.96倍,而丹参酮ⅡA则有效抑制胞内过高的[Ca2+]i,从而发挥心肌保护作用。结论:丹参酮ⅡA可能是通过抑制胞内miR-1的表达,参与对钙离子浓度的调控,发挥其对心肌细胞的保护作用。

关键词：丹参酮ⅡA 缺氧心肌细胞 miR-1 细胞内钙细胞凋亡

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铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响

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环境与健康杂志 2014年第3期31卷 193-196,F0003页

作者：林琳廖英俊赵凤红王艳唐漫许亚婷王达金亚平中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室细胞生物学卫生部重点实验室中国医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室中国医科大学药学院临床药理学教研室

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol... 详细信息

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol／L乙酸铅染毒，染毒时间为72h。倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像；以AlamarBlue法检测细胞活力；以Westernblot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达；以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能。结果50和100μmol／L铅暴露组的细胞形态与对照组相比，未见明显改变；200μmol／L铅暴露72h后，少量细胞开始脱壁，细胞间隙增大；400μmol／L铅暴露组细胞变大，突起变短或消失，脱壁细胞数量明显增多。与对照组相比，各浓度铅暴露组的AS活力均降低（P〈0．05），100、200和400μmol／L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降（P〈0．05），但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变。100、200和400μmol／L铅暴露组的3FI—Glu放射性低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达，并导致AS的Glu转运体功能下降。

关键词：星形胶质细胞铅谷氨酸谷氨酸转运体-1

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HERG钾通道在细胞容量调节中的作用

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现代生物医学进展 2014年第32期14卷 6253-6256,6241页

作者：梁晶刘惠彬李哲刘冬敏孙向菊吴禹蒙张鑫吴玉波哈尔滨医科大学附属第四医院药学部黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第二医院药理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学机能学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:研究HERG钾通道在细胞容量调节中的作用,并探讨其作用机制。方法:全部试验应用稳定转染HERG-HEK293细胞和HEK293细胞。应用全细胞膜片钳技术记录HERG钾电流。结果:1当HERG-HEK293细胞处于低渗状态,指令电压为0 mV时,Istep增加60%(n... 详细信息

目的:研究HERG钾通道在细胞容量调节中的作用,并探讨其作用机制。方法:全部试验应用稳定转染HERG-HEK293细胞和HEK293细胞。应用全细胞膜片钳技术记录HERG钾电流。结果:1当HERG-HEK293细胞处于低渗状态,指令电压为0 mV时,Istep增加60%(n=12,P<0.05);如指令电压为+30 mV,Itail增加72.1%(n=11,P<0.01),增大的HERG电流可被特异性HERG钾电流阻断剂Cisapride(100nM)抑制,Istep被抑制97.2%(n=6,P<0.01),Itail被抑制174.1%(n=6,P<0.01)。2在低渗状态,指令电压为0 mV时,容量调节性氯通道阻断剂尼氟灭酸(NFA,10 nmol/L)使Istep抑制46.2%(n=12,P<0.01),Itail抑制48.5%(n=11,P<0.01);给以容量调节性氯通道阻断剂DIDS 100μmol/L时,Istep抑制45.9%(n=12,P<0.01),Itail抑制51.1%(n=11,P<0.01)。结论:HERG通道部分参与调节性细胞容量下降过程。其参与的细胞容量调节与容量调节性氯通道的激活相伴随。

关键词： HERG钾通道膜片钳细胞容量调节性细胞容量下降

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臭灵丹抗甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的药效学研究

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广州中医药大学学报 2015年第2期32卷 282-284,289,385页

作者：王玉涛李菁夏晓玲孙强明于浩飞杨子峰潘锡平张荣平王新华广州中医药大学热带医学研究所广东广州510405 广州医科大学附属第一医院呼吸疾病国家重点实验室广东广州510230 昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650031 广州医科大学广东广州510182

【目的】观察臭灵丹抑制甲1型流感病毒FM1株感染的体内药效。【方法】采用小鼠流感病毒性肺炎模型,通过检测小鼠体质量变化和肺指数、肺组织病理变化确认药物的体内抗病毒药效。【结果】病毒对照组的肺指数较正常对照组显著升高(P0.05)... 详细信息

【目的】观察臭灵丹抑制甲1型流感病毒FM1株感染的体内药效。【方法】采用小鼠流感病毒性肺炎模型,通过检测小鼠体质量变化和肺指数、肺组织病理变化确认药物的体内抗病毒药效。【结果】病毒对照组的肺指数较正常对照组显著升高(P<0.001),表明该模型复制成功;臭灵丹高、中、低剂量组均未能有效缓解流感病毒感染小鼠的体质量下降(P>0.05);臭灵丹高、中、低剂量组可显著降低流感病毒感染小鼠的肺指数(P<0.05)。小鼠肺组织病理检查结果显示:臭灵丹低剂量组可以缓解肺组织病理性炎症。【结论】臭灵丹对甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的病毒性肺炎具有一定的抑制作用。

关键词：臭灵丹/药理学流感/中药疗法肺/病理学疾病模型,动物小鼠

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纳米佐剂增强弓形虫SRS9基因核酸疫苗的免疫效能研究

纳米佐剂增强弓形虫SRS9基因核酸疫苗的免疫效能研究

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：林皑叶翀黄科星赵爽刁雪崇陈晓光吴焜广东省新发传染病防治重点实验室南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系

为研制高效弓形虫核酸疫苗,预防弓形虫感染,本研究选取弓形虫缓殖子含量最丰富的表膜蛋白SRS9基因为疫苗候选基因。为提高其免疫原性,选取纳米材料entranster-invivo作为佐剂,探究其提高核酸疫苗免疫原性的效果。通过构建重组质粒pVAX1-... 详细信息

为研制高效弓形虫核酸疫苗,预防弓形虫感染,本研究选取弓形虫缓殖子含量最丰富的表膜蛋白SRS9基因为疫苗候选基因。为提高其免疫原性,选取纳米材料entranster-invivo作为佐剂,探究其提高核酸疫苗免疫原性的效果。通过构建重组质粒pVAX1-SRS9制备核酸疫苗,将BALB/c小鼠随机分为5组进行免疫试验。A组为空白对照组,B组为纳米佐剂对照组,C组为空质粒对照组,D组为重组质粒免疫组,E组为重组质粒和纳米佐剂共同免疫组。通过检测血清中IgG抗体、淋巴细胞增殖试验等评价免疫接种产生的特异性体液及细胞免疫,同时通过弓形虫RH株及PRU株攻击感染试验探究其免疫保护性。结果显示,重组质粒免疫组及重组质粒和纳米佐剂共同免疫组血清中抗SRS9蛋白IgG抗体水平随免疫次数增加而增高,其中重组质粒和纳米佐剂共同免疫组增高最为明显,且显著高于各对照组。淋巴细胞增殖试验显示重组质粒免疫组及重组质粒和纳米佐剂共同免疫组SI指数均增高。弓形虫RH株攻击感染试验结果显示各组死亡时间无显著性差异。PRU株慢性感染试验结果显示,重组质粒和纳米佐剂共同免疫组小鼠脑内包囊数量显著低于其他组别。研究结果说明纳米佐剂entranster-in vivo能够增强弓形虫SRS9基因核酸疫苗免疫效能,减少慢性感染弓形虫脑内包囊数量。纳米佐剂的运用为弓形虫核酸疫苗的研制开阔了思路。

关键词：弓形虫核酸疫苗包囊缓殖子纳米佐剂 SRS9基因

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三七二醇型皂苷元磺酰胺类衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

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天然产物研究与开发 2014年第11期26卷 1739-1744页

作者：蒲洪董成梅邹澄赵庆张莲卿陈艳梅赵沛基胡建林昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南中医学院中药学院昆明650500 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室昆明650204

本研究以三七二醇型皂苷为原料,通过琼斯氧化得到化合物1,再将化合物1的3位羰基经还原胺化反应转化为氨基得到化合物2,再用化合物2与磺酰氯类试剂反应得到化合物3-12,合成了11个未见文献报道的目标化合物,其结构均经过核磁共振、质谱确... 详细信息

本研究以三七二醇型皂苷为原料,通过琼斯氧化得到化合物1,再将化合物1的3位羰基经还原胺化反应转化为氨基得到化合物2,再用化合物2与磺酰氯类试剂反应得到化合物3-12,合成了11个未见文献报道的目标化合物,其结构均经过核磁共振、质谱确证。采用MTS法评价这些化合物对人白血病细胞株HL-60、肝癌细胞株SMMC-7721、肺癌细胞株A-549、乳腺癌细胞株MCF-7、结肠癌细胞株SW480等肿瘤细胞株的抗肿瘤活性。药理活性评价结果显示,化合物9有一定的抗肿瘤活性,值得进一步研究。

关键词：三七二醇型皂苷皂苷元磺酰胺抗肿瘤活性

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铜、铁、锌-氟尿嘧啶配合物合成及其对肿瘤细胞增殖的抑制

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中国组织工程研究 2014年第39期18卷 6309-6315页

作者：周轶平陈元晓周云石中正罗敏钟文远陈英杰昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南省昆明市650500 昆明医科大学生物学教研室云南省昆明市650500 云南省广播电视大学化学系云南省昆明市650000 昆明医科大学解剖学教研室云南省昆明市650500 昆明学院化学系云南省昆明市650031

背景:有机抗癌药与金属盐形成配合物后会形成新的结构或改变离子浓度,因此改变二者的毒性与活性而产生协同作用。目的:寻求高效低毒的新型金属-氟尿嘧啶配合物抗肿瘤药物。方法:以铜、铁、锌盐和氟尿嘧啶为原料,合成了4种配合物,分别为[... 详细信息

背景:有机抗癌药与金属盐形成配合物后会形成新的结构或改变离子浓度,因此改变二者的毒性与活性而产生协同作用。目的:寻求高效低毒的新型金属-氟尿嘧啶配合物抗肿瘤药物。方法:以铜、铁、锌盐和氟尿嘧啶为原料,合成了4种配合物,分别为[Cu(5-Fu)2Cl2],[Cu(5-Fu)2(NO3)2],[Fe(5-Fu)3]SO4和[Zn(5-Fu)2Cl2]。用元素分析和质谱法分析配合物的化学结构。分别以4种配合物溶液、4种盐溶液、顺铂、氟尿嘧啶培养人白血病细胞株K562与人结肠癌细胞株HCT-116,改良MTT法测试细胞增殖。结果与结论:配合物的元素分析及摩尔电导数据初步确定了配合物的化学式,质谱结果进一步证明氟尿嘧啶确实与金属离子Cu2+、Fe2+、Zn2+配位。在0.1-100 mg/L质量浓度范围内,4种配合物对K562和HCT-116细胞增殖均有不同程度的抑制作用,4种配合物对K562和HCT-116细胞增殖的IC50值均低于氟尿嘧啶组,其细胞毒活性是氟尿嘧啶的1.5-7.8倍。表明铜盐、锌盐、铁盐与氟尿嘧啶形成配合物后有协同抑制肿瘤组织细胞增殖的作用。

关键词：生物材料材料相容性铜铁锌-氟尿嘧啶配合物合成肿瘤细胞增殖抑制国家自然科学基金

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马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建

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中国预防兽医学报 2014年第5期36卷 346-349页

作者：朱春辉汤艳东那雷付丽华王雪峰林跃智杜承周建华徐方宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001

Viperin是一种细胞内抗病毒蛋白,可以被I型干扰素、多聚I:C、脂多糖及多种病毒诱导表达,在细胞内主要定位在内质网和脂滴,具有广谱的抗病毒功能。为研究马Viperin(eViperin)在抗病毒感染中的作用,本研究应用RT-PCR从马巨噬细胞中扩增eVi... 详细信息

Viperin是一种细胞内抗病毒蛋白,可以被I型干扰素、多聚I:C、脂多糖及多种病毒诱导表达,在细胞内主要定位在内质网和脂滴,具有广谱的抗病毒功能。为研究马Viperin(eViperin)在抗病毒感染中的作用,本研究应用RT-PCR从马巨噬细胞中扩增eViperin基因,并将其克隆于真核表达载体pDC315中构建重组质粒pDC-eViperin-Flag,将重组质粒转染293T细胞,western blot检测结果表明eViperin在293T细胞中正确表达。将该重组表达质粒与表达马传染性贫血病毒(EIAV)Gag前体蛋白(Gag precursor,Pr55gag)的表达质粒共转染293T细胞,转染48 h后western blot检测,结果显示实验组细胞培养上清中的Pr55gag含量显著低于空白对照组,表明eViperin具有抑制EIAV释放的作用。此外,将该重组表达质粒与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,进一步构建拯救出表达eViperin的重组腺病毒,为研究eViperin的抗病毒功能研究奠定了基础。

关键词： Viperin 马马传染性贫血病毒重组腺病毒

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