检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2014年第5期48卷 351-352页

作者：傅松滨哈尔滨医科大学哈尔滨医科大学医学遗传学研究室

李璞先生，1928年4月13日出生于天津市武清县亭上村。1939年，在武清县县立小学毕业后赴北京，考入教会育英中学（后更名为北京市立第八中学）。1943年由第八中学转入私立弘达中学，继而考入中南海内私立成达中学高中三年级学习。1945... 详细信息

李璞先生，1928年4月13日出生于天津市武清县亭上村。1939年，在武清县县立小学毕业后赴北京，考入教会育英中学（后更名为北京市立第八中学）。1943年由第八中学转入私立弘达中学，继而考入中南海内私立成达中学高中三年级学习。1945年秋考入了北京大学生物学系，1946年直接转入清华大学生物学系二年级继续深造，在校期间因出色的体育天赋，被选为清华大学篮球代表队队员，并加入清华大学黑桃体育会。1948年担任清华大学篮球代表队队长，黑桃体育会女子篮球队教练。1949年7月，完成了在清华大学的学业之后留校任助教，随即响应国家的号召参加了东北干部队，一个月后被分配到中国医科大学兴山市（现黑龙江省鹤岗市）预科学院生物系任助教。1950年5月，转调到哈尔滨医科大学任教。

关键词：遗传学家哈尔滨医科大学清华大学人类医学耕耘中国医科大学高中三年级

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简述量子点与抗体的偶联方法

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中国微生态学杂志 2014年第5期26卷 595-597页

作者：于鑫吴静宋武琦张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室黑龙江哈尔滨150006

量子点是一种具有独特光学性质的半导体纳米材料,表面带有功能基团的水溶性量子点可与抗体偶联,作为荧光探针用于多种生物学研究。根据量子点表面所修饰的物质不同,偶联方法可分为共价偶联与非公价偶联两大类。本研究主要对量子点与抗... 详细信息

量子点是一种具有独特光学性质的半导体纳米材料,表面带有功能基团的水溶性量子点可与抗体偶联,作为荧光探针用于多种生物学研究。根据量子点表面所修饰的物质不同,偶联方法可分为共价偶联与非公价偶联两大类。本研究主要对量子点与抗体的偶联方法进行简单介绍。

关键词：量子点抗体偶联方法

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牛副流感病毒3型TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2014年第6期44卷 617-623页

作者：董秀梅朱远茂蔡虹王姝吕闯马磊薛飞东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

根据牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)膜蛋白M基因设计引物及探针,以体外转录法制备的cDNA标准品为模板,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性、重复性进行了测定,并对人工感染BPIV3的牛群... 详细信息

根据牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)膜蛋白M基因设计引物及探针,以体外转录法制备的cDNA标准品为模板,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性、重复性进行了测定,并对人工感染BPIV3的牛群临床样本进行了检测。结果显示,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR的最低检测限为17.6copies/μL,同时进行批内、批间5次重复性试验,变异系数均小于2.5%。应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛腺病毒3型、牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒1型,结果均为阴性,说明建立的方法特异性较强。用建立的方法检测人工感染BPIV3的犊牛鼻拭子样本,检测结果与样本TCID50的测定结果相符合,但比其更敏感。结果表明,本试验中建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR可以作为BPIV3早期诊断及定量分析的有效技术手段。

关键词：实时荧光定量RT-PCR TaqMan探针牛副流感病毒3型

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犬瘟热病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2014年第6期44卷 589-592页

作者：全传松李博韬姜骞李连峰于作曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对犬瘟热病... 详细信息

为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对犬瘟热病毒最低检出量为80copies/μL,是常规RT-PCR的100倍;与其他犬类病毒不发生交叉反应;组内、组间变异系数均小于5%。对收集的67份临床样品进行检测,阳性检出率为64.2%,而常规RT-PCR的阳性检出率为44.8%。研究结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR具有良好的敏感性、特异性和稳定性,为犬瘟热的早期诊断提供了技术手段。

关键词：犬瘟热病毒 TaqMan 实时荧光定量RT-PCR

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抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国兽医科学 2014年第8期44卷 833-837页

作者：白小飞刘红玉陈玉环殷秀辰刘明张云中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克... 详细信息

为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9。Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合。经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中。结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体。鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。

关键词：鸭坦布苏病毒 E蛋白原核表达单克隆抗体免疫印迹斑点杂交间接免疫荧光

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猪源多重耐药大肠杆菌通过接合水平传播传递耐药性研究

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中国兽医杂志 2014年第5期50卷 76-78,81页

作者：安微张秀英徐国锋张陆张燕华李春艳吴金迪龙忠臣东北农业大学动物医学学院药理实验室黑龙江哈尔滨150030

为了检测多重耐药大肠埃希菌中可移动元件质粒在耐药性传播中的作用。采用质粒接合试验,筛选接合菌,并用K-B纸片测定接合前后细菌的耐药谱,并测定MIC值和MBC值,比较接合菌在接合前后耐药性变化。其结果70株供体菌中,一共接合成功31株,... 详细信息

为了检测多重耐药大肠埃希菌中可移动元件质粒在耐药性传播中的作用。采用质粒接合试验,筛选接合菌,并用K-B纸片测定接合前后细菌的耐药谱,并测定MIC值和MBC值,比较接合菌在接合前后耐药性变化。其结果70株供体菌中,一共接合成功31株,成功率达44.29%。通过药敏试验以及MIC值和MBC值的测定发现,接合后93.3%细菌的耐药谱型发生变化、76.7%接合菌最小抑菌浓度发生变化,56.7%接合菌的最小杀菌浓度发生变化。表明从菌株的耐药谱及对药物的抗性变化上可以初步判定,可移动元件质粒在传播细菌耐药性方面起到重要作用。

关键词：大肠埃希菌质粒整合子耐药性接合菌

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多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达

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中国兽医科学 2014年第3期44卷 293-297页

作者：李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表... 详细信息

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，经IPTG诱导表达，进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示，这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95．6％～100％，在氨基酸水平上的同源性为98．9％～100％。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45．6ku，与预期的大小一致，以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应，具有良好的反应原性。

关键词：多杀性巴氏杆菌 prfA基因序列分析原核表达

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顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流为非钙激活氯电流

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中国病理生理杂志 2014年第6期30卷 968-974页

作者：阳小雅刘梅伍嘉宝赖周易汪源范爱辉朱林燕毛建文王立伟陈丽新广州医科大学卫生职业技术学院生理学教研室广东广州510180 暨南大学医学院药理学系广东广州510632 暨南大学医学院生理学系广东广州510632 广东医学院生理学教研室广东东莞523808 广东药学院生物学教研室广东广州510006

目的:探讨顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道电流是否为钙激活的氯电流。方法:采用膜片钳全细胞记录技术记录细胞内/外无Ca2+及钙通道阻断剂对顺铂激活氯电流的影响,并用高渗灌流液观察顺铂激活氯电流的容积敏感性。结果:去除... 详细信息

目的:探讨顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道电流是否为钙激活的氯电流。方法:采用膜片钳全细胞记录技术记录细胞内/外无Ca2+及钙通道阻断剂对顺铂激活氯电流的影响,并用高渗灌流液观察顺铂激活氯电流的容积敏感性。结果:去除细胞外液的Ca2+后,5μmol/L顺铂能诱发氯电流,且电流大小与细胞外有Ca2+时无明显差异,但潜伏期与达峰时间延长。细胞内外均无Ca2+对顺铂激活氯电流未产生影响。钙通道阻断剂nifedipine未能抑制顺铂诱发的氯电流。但细胞外灌流高渗液几乎可完全抑制顺铂激活的氯电流。结论:顺铂激活的氯通道开放不依赖于细胞内/外的Ca2+,该通道不是钙激活氯通道而很可能是容积敏感性氯通道。

关键词：顺铂鼻咽肿瘤氯通道钙

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急性心肌梗死后血浆中升高的microRNA-1与QT离散度的相关性研究

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中国药理学通报 2013年第2期29卷 253-256页

作者：张荣徐毅王晓丹牛慧芳张涛何美娇孙荣哈尔滨医科大学药理学教研室省-部共建生物医药国家重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学统计学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一临床医院心内科黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二临床医院心内科黑龙江哈尔滨150081

目的研究急性心肌梗死后血浆中升高的microRNA-1(miR-1)与QT离散度(QTd)的相关性及临床意义。方法选取急性心肌梗死(AMI)患者53例[无室性心律失常(VA)者40例、有VA者13例],健康对照人群49例,对血浆中miR-1的表达含量进行绝对定量,并测... 详细信息

目的研究急性心肌梗死后血浆中升高的microRNA-1(miR-1)与QT离散度(QTd)的相关性及临床意义。方法选取急性心肌梗死(AMI)患者53例[无室性心律失常(VA)者40例、有VA者13例],健康对照人群49例,对血浆中miR-1的表达含量进行绝对定量,并测定心电图QT间期计算出QTd及校正的QTcd,再进行相关性分析。结果AMI患者血浆中miR-1的实际表达量和QTd及QTcd值均高于正常对照人群,而且有VA者的QTd及QTcd值均大于无VA者,QTd的延长与VA的发生密切相关,血浆中的miR-1表达水平与QTd呈正相关性。结论 AMI患者血浆中miR-1与QTd具有良好的正相关性,二者联合对AMI患者预警恶性心律失常的发生、近期预后评估具有重要的临床参考价值。

关键词：急性心肌梗死 microRNA-1 血浆 QT离散度室性心律失常预警

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转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调节作用

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中国医科大学学报 2014年第7期43卷 585-588页

作者：熊建军龚帧周小鸥王庭刘建云李卫东九江学院基础医学院药理学教研室江西九江332000 江西省系统生物医学重点实验室江西九江332000

目的研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用。方法基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+134上RUNX2结合位点(-497^-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic。重组质粒分别转染Saos-2与H... 详细信息

目的研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用。方法基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+134上RUNX2结合位点(-497^-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic。重组质粒分别转染Saos-2与He La细胞,检测报告基因荧光素酶活性。应用染色质免疫共沉淀(Ch IP)证实RUNX2与IPO8启动子在Saos-2细胞内结合。慢病毒介导RUNX2在Saos-2细胞的靶向沉默,定量PCR检测相应组别中IPO8 m RNA的表达。结果成功突变和剔除IPO8启动子上RUNX2结合位点,破坏RUNX2结合位点导致IPO8启动子活性在Saos-2细胞中显著下降(P<0.05)。转录因子RUNX2在Saos-2细胞与IPO8启动子有效结合,下调RUNX2的表达导致IPO8转录水平下降(P<0.05)。结论转录因子RUNX2正性调控IPO8基因的转录。

关键词： IPO8 RUNX2 启动子荧光素酶

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